脐血造血干细胞短期冻存效果的评价

为了探讨脐血造血干细胞在液氮中短期冻存复苏后的效果，分别将各自为8例冻存6个月、1年、2年的脐血千细胞进行复苏，观察造血干细胞活性。有核细胞(NC)计数采用自动血细胞分析仪测定，CD34^ 细胞采用流式细胞技术测定，用体外造血细胞培养技术分析粒一巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)产率，台盼蓝染色法判断造血细胞存活率。结果表明：脐血造血干细胞在液氮中冻存6个月、1年、2年后解冻，其有核细胞、CD34^ 细胞、细胞活率、CFU-GM产率在3个不同冻存时间的差异无显著性。结论：脐血干细胞于液氯中短期冻存，其干细胞数量和细胞活性没有明显的变化，冻存效果较好。     

脐血间充质干细胞鉴定及其生物学特性研究

脐血来源丰富 ,其造血干细胞增殖能力强 ,是造血干细胞的来源之一。但是到目前为止 ,国内外对脐血中间充质干细胞 (MSC)的争议较大[1 5] 。从骨髓中分离培养的MSC ,CD34表达阴性 ,对造血有促进作用。研究MSC与脐血造血干细胞共移植促进脐血移植后造血植入等方法成为临床脐血移植的热点课题。因此 ,我们从脐血单个核细胞 (MNC)中分离培养MSC ,研究其生物学特性及从表达细胞因子角度阐明其促进造血的潜在作用。材料和方法1　脐血MNC制备　脐血标本 37份 ,每份 78～ 14 0ml,取自健康妊娠产妇分娩的胎儿脐带血。脐血采集后在 4～ 12h内…     

人脐带和骨髓源间充质干细胞对脐血单个核细胞增殖能力的影响

目的：探讨人脐带间充质干细胞（UCMSCs）与骨髓间充质干细胞（BMMSCs）在体外对造血干细胞的支持作用。方法分别从人脐带和骨髓中分离、培养间充质干细胞,通过免疫细胞化学染色等方法对其进行表型鉴定;采用流式细胞仪测定脐血单个核细胞的周期分布,采用甲基纤维素法测定脐血单个核细胞混合集落形成单位（CFU-Mix）,比较 UCMSCs和BMMSCs对脐血单个核细胞细胞周期、CFU-Mix形成能力的影响。结果成功培养获得 UCMSCs和BMMSCs,鉴定结果符合预期;与非共培养组细胞相比,UCMSCs和 BMMSCs共培养均能促进脐血单个核细胞进入增殖周期,并增加其形成CFU-Mix的能力（P＜0．05）,但UCMSCs和BMMSCs共培养组之间比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论成功从人脐带和骨髓组织中培养获得间充质干细胞,两种来源的间充质干细胞均能提高脐血单个核细胞的体外增殖能力及 CFU-Mix形成能力,均具有造血支持作用。     

人类脐血CD34^＋细胞的研究进展

本文综述了近年来对脐血ＣＤ３４＾＋细胞（即造血干／祖细胞）的研究进展，表明虽脐血ＣＤ３４＾＋细胞水平低于正常成人骨髓，但其干细胞比例较高且造血功能较强，有利于移植后长期造血的重建。     

非亲缘性脐血移植患者并发症的护理1O例

造血干细胞移植是治疗恶性血液病、非恶性难治性血液病的重要手段。由于脐血含有丰富的造血干细胞，而且来源广泛，因此，脐血移植的临床应用越来越广泛。但是脐血中的造血干细胞较外周血和骨髓中的干细胞更原始，免疫性弱，有核细胞数量有限，造血重建较缓慢，因此，脐血移植较骨髓和外周血移植护理的难度更大。2001年5月～2002年     

密度梯度离心法分离脐血干细胞：分离介质的筛选

背景：应用脐血分离干细胞的目的是获得以干细胞为主要群体的单个核细胞群,密度梯度离心法是最简单有效的方法之一。密度梯度离心法使用的分离介质以聚蔗糖泛影葡胺最为常用,但哪种浓度获得干细胞最多,目前尚未深入研究。目的：探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的最佳浓度,建立临床级干细胞分离应用方案。方法：采用两步法分离脐血流程,先用羟乙基淀粉沉淀脐血红细胞,再使用质量浓度分别为（1．073O±0．0001）,（1．0750±0．0001）,（1．077O±0．0001）g／mL的分离液,分离沉淀脐血红细胞后的上清液,得到单个核细胞,分别计数细胞获得率及细胞存活率。采用流式细胞仪测定单个核细胞表面标志物,将各亚组分绘制成直方图或散点图,分析所得脐血单个核细胞中所含单个核细胞亚组分的比例和绝对数量。结果与结论：应用质量浓度（1．0730＋0．0001）g／mL的分离液可得到最大比例间充质干细胞群,是分离间充质干细胞的最佳质量浓度。使用质量浓度（1．0750±0．0001）g／mL的分离液可得到较高比例的造血干细胞群,是分离造血干细胞的最佳质量浓度。使用质量浓度（1．0770±0．0001）g／mL的分离液得到细胞总数最高,但获得的间充质干细胞、造血干细胞比例最低。采用两步法分离干细胞流程,建立严格的实验室条件和标准,可获得密度梯度离心法分离人脐血干细胞的最佳分离方案。     

蛛网膜下腔阻滞不影响脐血单个核细胞向神经细胞的分化

背景：有学者认为麻醉状态可提高脐血采集分离质量,目前尚无蛛网膜下腔阻滞对脐血单个核细胞向神经干细胞及星形胶质细胞分化影响的研究。 目的：观察蛛网膜下腔阻滞对新生儿脐血单个核细胞向神经干细胞及星形胶质细胞方向分化的影响。 方法：选择顺产新生儿及蛛网膜下腔阻滞剖宫产新生儿脐血标本各20份,分别列为对照组及研究组,在胎儿娩出后抽取脐血分离接种脐血单个核细胞,并进行体外培养,每份标本常规培养3 d后分别进行非诱导分化培养和向神经细胞方向诱导分化培养。对培养前后细胞进行神经干细胞、星形胶质细胞标志性Nestin、GFAP抗原免疫组化鉴定。 结果与结论：蛛网膜下腔阻滞剖宫产新生儿脐血单个核细胞诱导分化培养后表达 Nestin、GFAP 抗原阳性细胞,与顺产新生儿比较差异无显著性意义（P 〉0.05）。结果显示蛛网膜下腔阻滞对新生儿脐血单个核细胞向神经干细胞及星形胶质细胞方向分化没有影响。     

脐血造血干/祖细胞研究现状及临床应用

８０年代以来，脐血作为造血干／祖细胞来源治疗血液病患者的有效方法受人们关注，由于临床血液疾病治疗的迫切需要，近年来较多的临床血液病和实验血液学工作者为此付出了各自艰巨的努力，在脐血的采集、造血干／祖细胞的分离、鉴定、体外扩增及临床应用方面均取得了显著成就，本文将这些研究成果作一概要文献学习。１　脐血造血干／祖细胞的含量和特性脐血中含有较丰富的更原始、能重建长期造血的干／祖细胞，具有较强的自我增殖、多向分化的能力，是造血干／祖细胞又一丰富来源。脐血中约有１％左右的有核细胞表达高水平的ＣＤ３４抗原的…     

1963份脐血造血干细胞的处理与保存

本研究目的是建立脐血造血干细胞库的标准工作程序。采用自然沉降法加离心法制备脐血的造血干细胞 ,经CD34 细胞计数、集落培养、微生物检测、传染病指标检测、HLA分型后 ,将造血干细胞贮存在液氮中保存。结果表明 :贮存脐带血造血干细胞有核细胞数平均值为 (10 .94± 2 .74 )× 10 8,回收率为 (79.82± 17.76 ) % ,CD34 细胞数平均值为 (5 1.6 2± 30 .5 3)× 10 5。 8份脐带血造血干细胞冰冻 2年后复苏 ,其有核细胞、CD34 细胞、CFU GM回收率分别为 (91.4± 6 .0 ) %、(84 .6± 2 0 .0 ) %、(85 .8± 14 .9) %。结论 :本方法和程序能有效地保存脐带血造血干细胞。     

150例新生儿脐血细胞检测分析

大量的基础与临床研究表明新生儿脐血含有丰富的造血干细胞，还含有多种造血刺激因子。在细胞移植和临床输血中，脐血具有重要的应用价值和潜力。而新生儿脐血细胞参数正常参考值调查目前报道较少。为进一步了解新生儿脐血的血液学特点，现将150例健康新生儿脐静脉血细胞参数的检测分析报道如下。     

脐血造血干／祖细胞的密度分离实验研究

目的：为建立脐血造血细胞库,减少脐血储存空间,探讨脐血造血干／祖细胞的密度分离效果。方法：选用五种不同比密的Ficoll分离液（1.084、1.077、1.072、1.064、1.054g/L）分离脐血细胞,采用流式细胞技术（FCM）和全自动血细胞分析仪分析了41例脐血造血干／祖细胞和有核细胞（NC）的回收率并作了对比研究。结果：1.064g/L Ficoll分离脐血有核细胞回收率3.6％,淋巴细胞去除率为86.6％;所分离的单个核细胞(MNC）中CD34^ 细胞平均纯度为10.3％,最高可高达46.6％;所分离的细胞体外易形成CFU－GM及BFU－E。结论：不同比密分离脐血造血干／祖细胞具有不同影响。其中1.064g/L Ficoll分离脐血造血干／祖细胞是一种方便、实用、有效的方法。所分离的细胞体外有较强的增殖能力。     

脐血源干细胞的特性及临床应用

一、脐血干细胞的概念及其主要成分的生物学和免疫学特征 （一）脐血干细胞的概念及其主要成分 脐血是指足月胎儿娩出后,经结扎脐带后引流收集到的残存在胎盘和脐带中的血液。脐血干细胞是脐带血中富含的一类具有自我更新和多向分化潜能的原始祖细胞。在一定条件诱导下可分化为所需的目的细胞或组织。目前发现脐血干细胞中主要是脐血源造血干细胞（CB-HSCs）和脐血源间充质干细胞（CB．MSCs）,另外还有极少量的脐血源无限制成体细胞（USSC）、脐血源内皮祖细胞（CB-EPCs）等具有增殖分化能力的早期干／祖细胞。     

脐血单个核细胞四种细胞因子表达的检测

脐血单个核细胞四种细胞因子表达的检测习杰英韩丽邵文斌李旭陈葳刘娟为探索脐血干细胞移植的免疫和造血重建机制，我们检测了脐血单个核细胞（ＭＮＣ）表达白细胞介素２（ＩＬ－２）、白细胞介素４（ＩＬ－４）、白细胞介素６（ＩＬ－６）及粒－巨噬细胞集落刺激因子（Ｇ...     

脐带血造血干细胞的采集,分离,保存,扩增及其临床应用

脐血移植已显示了广阔的临床应用前景，如何采集脐血，分离和保存脐血单个核细胞，以缩小体积，降低费用；扩增脐血造血干细胞以适用于成人是建立脐血库的基本内容。     

密闭式采血法在脐血造血干细胞移植中的应用护理

在脐血造血干细胞移植过程中,脐血量的多少、单个核细胞(MNC)的多少是决定脐血造血干细胞移植成功的首要因素。而脐血采集的方法和时间对脐带血血量有一定的影响。因此,脐血采集是脐血造血干细胞移植的关键之一。我院采用密闭式采血法成功完成9例脐血造血干细胞移植的脐血采集。现将护理体会报告如下。     

脐血造血干细胞移植与进展

脐血造血干细胞移植与进展５１０１２０中山医科大学孙逸仙纪念医院陈纯，黄绍良自１９７４年Ｋｎｕｄｔｚｏｎ提出胎盘血（下称脐血）是有希望的重建造血系统的于细胞来源以来，随着造血细胞培养和单克隆抗体检验技术的发展，国内外研究均表明脐血可作为一种极有潜力的造...     

两种来源的单个核细胞的培养比较

[目的] 观察体外分离培养的两种来源（脐血与骨髓）的单个核细胞，探讨其培养特点和差异。[方法] 体外分离、纯化和培养脐血与骨髓中单个核细胞（MNC），观察其形态和生长特性。[结果] 分离18份脐血，脐血标本的个体差异非常大，只有12份获得了贴壁细胞，MNC体外培养可以获得贴壁细胞，但形态不均一，主要为破骨样细胞和纤维样细胞，传代不超过二次。分离12份骨髓，均获得了贴壁细胞，MNC体外培养可以获得形态均一的纤维样间充质干细胞（MSC），可多次传代。[结论] 脐血不能获得典型的间充质样干细胞，骨髓中存在典型的间充质干细胞。     

深入开展脐血干细胞的基础与临床研究

毋庸置疑，造血干细胞移植（ＨＳＣＴ）已经成为迄今为止各种恶性血液病、肿瘤、遗传性疾病、重度放射病及重症联合免疫缺陷等症的最有效疗法。但无论是自体或异体ＨＳＣＴ，均还存在着某些尚未克服的缺陷或弊端。脐血干细胞则以其独特的生物学特性、资源优势以及临床适应证的广泛性等可以弥补骨髓及外周血ＨＳＣＴ的不足。因此，脐血替代骨髓及外周血进行ＨＳＣＴ已成为近１０年来ＨＳＣＴ领域的重大进展之一。脐血干细胞及其移植具有如下独特的优势：①脐血不仅富含造血干／祖细胞（ＨＳＣ／ＨＰＣ），且其增殖与分化能力、体外集落形成能…     

脐血单个核细胞与骨髓间充质干细胞滋养层的共培养

背景:骨髓间充质干细胞具有维持骨髓正常造血功能,在造血调控中发挥重要的作用。目的:观察骨髓间充质干细胞的生物学性状和多向分化能力,并检测其在体外支持造血的能力。方法:利用密度梯度培养法分离骨髓单个核细胞进行培养,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表型;接种脐血单个核细胞于骨髓间充质干细胞滋养层培养板上共培养,观察粒-单系祖细胞集落变化。结果与结论:骨髓间充质干细胞呈典型的成纤维样细胞形态,强表达CD44,CD29,不表达CD34和CD106。可促进脐血单个核细胞扩增并形成造血祖细胞集落。提示骨髓间充质干细具有造血支持作用。     

脐血造血干细胞生物学特征与临床应用研究

本文综述了脐血造血干细胞(UCBSC)的生物学特性，具有不同于骨髓造血干细胞的表型特征，增殖潜能强，免疫系统相对不成熟。但存在T、NK前体细胞，可经细胞因子体外扩增产生免疫活性细胞。临床应用表明进行脐血造血干细胞移植(UCBSCT)后，造血植入的成功率稍低于骨髓移植(BMT)。尤其血小板恢复慢。故大部分用于儿童患者，但是尽管进行HLA配型l～3个位点不合的UCBSCT，造血植入后发生移植物抗宿主病(GVHD)轻；UCBSC可经体外CD34^ 细胞扩增或免疫细胞的定向扩增，从而提高其造血植入和移植物抗白血病作用(GVL)，均已试用于临床取得成功。这些研究提示UCRSCT有广阔的临床应用价值和前景。