应用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 比较头孢西丁纸片扩散法与传统的苯唑西林纸片扩散法对耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)检测的效率.方法 收集66株葡萄球菌,分别采用苯唑西林琼脂平板筛选试验、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法来检测MRS,结果以苯唑西林琼脂平板筛选结果为对照,分别比较头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法的特异性和敏感性. 结果 66株葡萄球菌中,37株金黄色葡萄球菌经苯唑西林琼脂平板筛选判定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的有15株,29株凝固酶阴性的葡萄球菌有24株判定为耐甲氧西林凝固酶阴性的葡萄球菌(MRCNS).与苯唑西林琼脂平板筛选法比较,头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,而苯唑西林纸片扩散法其敏感性和特异性分别为93%(14/15)和91%(20/22);头孢西丁纸片扩散法检测MRCNS的敏感性和特异性均为100%,而苯唑西林纸片扩散法其敏感性和特异性分别为96%(23/24)和40%(2/5).结论 头孢西丁纸片扩散法对MRS检出优于苯唑西林纸片扩散法.     

头孢西丁纸片法替代苯唑西林纸片法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁纸片法替代苯唑西林纸片法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的方法。方法采用头孢西丁纸片法（30μg/片）和苯唑西林纸片法（1．0μg／片）检测MRSA,以胶乳凝集试验检测PBP2a为参考方法。结果用胶乳凝集实验检测的106株金黄色葡萄球菌,其中PBP2a阳性为87株,阴性为19株,用头孢西丁纸片法筛查MRSA敏感性为98．9％,特异性为100％。苯唑西林纸片检测MRSA敏感性为95．4％,特异性为94．7％。结论头孢西丁纸片法筛查MRSA与PBP2a的检测具有较好的一致性,该法可在常规工作中推广使用。     

4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌方法的评估

目的 评价4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)方法的临床应用价值.方法 对287株临床分离的凝固酶阴性葡萄球菌采用苯唑西林纸片扩散法,头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS,并采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因作为检测MRCNS的金标准.结果 287株中有218株为MRCNS,头孢西丁纸片扩散法筛选MRCNS敏感性为97.7%,特异性为95.7%;苯唑西林K-B法筛选MRCNS敏感性为99.1%.特异性为66.7%;苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS敏感性为98.6%.特异性为60.9%.结论 头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRCNS的简便又准确的实验方法.     

头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的评价

目的:评价头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的可靠性和临床实用性.方法:将临床分离得到的葡萄球菌310株,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法实验,并以PCR检测葡萄球菌mecA基因为判断标准,比较4种方法的敏感性及特异性.结果:经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为57.1%(113/198),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为62.5%(70/112).头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,检测MRCNS敏感性为98.6%,特异性为100%.结论:头孢西丁纸片扩散法操作简便,结果可靠,可作为临床实验室检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法.     

用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 探讨用头孢西丁纸片扩散法确证耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)在临床实验室的应用.方法 采用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的120株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌(SA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)各60株.并与苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林-NaCl琼脂筛选法进行比较.结果 三种方法检测MRSA结果没有差异;在CNS中有1株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林-NaCl 琼脂筛选法检测耐药,苯唑西林纸片扩散法敏感;6株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法耐药,苯唑西林-NaCl琼脂筛选法敏感.结论 头孢西丁纸片扩散试验可用于多种表型的MRS,尤其对低水平表达、异质性耐药的MRS,是临床实验室确证MRS的一种可靠方法.     

VITEK-32对耐甲氧西林葡萄球菌检测及耐药性研究

目的 调查金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌的耐药现状.方法 对195株金黄色葡萄球菌和286株凝固酶阴性葡萄球菌,用VITEK-32和GPS-107药敏卡、GPI鉴定卡、API-Spath手工条鉴定细菌并测定其对药物的敏感性.应用胶乳凝集试验检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a),同时用NCCLS推荐的纸片扩散法检测耐甲氧西林的葡萄球菌.耐万古霉素的葡萄球菌(VRSA)和异质性耐万古霉素的葡萄球菌(hetro-VRSA).结果 耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌仪器法、PBP2a、纸片扩散法阳性率分别为72%、76%、68%,凝固酶阴性的葡萄球菌耐甲氧西林仪器法、纸片扩散法(CNS)分别是78%、72%,PBP2a全部阴性.未检出VRSA和hetro-VRSA.结论 万古霉素、复方新诺明和四环素对耐甲氧西林的葡萄球菌有较好的抗菌活性,胶乳凝集试验检测PBP2a简便、快速、准确.     

耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的比较

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为金标准，比较头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的优缺点。方法对临床分离的70株葡萄球菌（其中金黄色葡萄球菌40株，凝固酶阴性的葡萄球菌30株）分别用PCR法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌，药敏试验方法按标准KB（Kirby Bauer）法进行。结果经PCR法检测mecA基因，耐甲氧西林的金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的发生率分别为75．0％（30／40）和80．0％（24／30）；头孢西丁纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为93．3％、95．9％；90．0％和100％；苯唑西林纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为90．00%、87．5％；90．0％和83．3％；乳胶凝集法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为100．0%、100．0％；100．0％和100．0％。与PCR结果比较，3种方法所获得的结果经统计学分析，差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法是成批检测的理想方法；乳胶凝集法检测快速，结果可靠，但检测成本高；实验室应选择合适的方法，以提高MRS的检出率。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的 评价 4 种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法的临床应用价值.方法 对94株临床分离的金黄色葡萄球菌采用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法筛选MRSA,并采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA 基因作为检测MRSA的金标准.结果 94株中有63株为MRSA,检出率为67%;其中头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA敏感性为100.0%,特异性100.0%;苯唑西林K-B 法筛选MRSA敏感性为96.8%,特异性为87.1%;苯唑西林微量稀释法筛选MRSA敏感性为98.4%,特异性为96.8%.结论 综合分析头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRSA的简便又准确的实验方法.     

头孢西丁纸片法筛查耐甲氧西林葡萄球菌的评价

目的 评价头孢西丁纸片法筛查耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的方法.方法 采用头孢西丁纸片法和苯唑西林纸片法检测MRS,以胶乳凝集试验检测青霉素结合蛋白PBP2a为参考.结果 106株葡萄球菌用胶乳凝集试验检测,PBP2a阳性87株,阴性为19株;用头孢西丁纸片法筛查,敏感度为100%,特异度为97.4%;用苯唑西林纸片法检测,MRS敏感度为98.9%,特异度为57.9%.两种方法比较,敏感度差异无统计学意义(P＞0.05),特异度差异有统计学意义(P＞0.01).结论 头孢西丁纸片法筛查MRS优于苯唑西林纸片法.     

四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌的评价

目的评价四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的价值。方法收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌51株,分别进行头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂,以PBP2a胶乳凝集作为MRS检测标准,按CLSI2006版标准操作和判读结果。结果对于金黄色葡萄球菌,头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂检测MRS灵敏度和特异性分别为96.3%和100.0%、85.2%和100.0%、77.8%和100.0%、92.6%和94.5%,其中2株苯唑西林-盐琼脂24h未生长但延长至48h生长,48h内敏感性100.0%;对于凝固酶阴性葡萄球菌,四种方法检测MRS灵敏度和特异性分别为97.8%和80.0%、95.6%和80.0%、95.6%和80.0%、100.0%和80.0%(P>0.05)。结论四种方法均能可靠检测MRS,头孢西丁纸片和苯唑西林-盐琼脂具有较高应用价值。     

单克隆抗体标志乳胶凝集试验快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的探讨快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的实验方法。方法目标菌株采用SlidexMRSA Detection乳胶快速检测金黄色葡萄球菌(SA)菌株青霉素结合蛋白2 a(PBP2 a),确认MR-SA;设立SA耐苯唑西林筛选试验对照,两组不符合菌株经PCR方法检测M ecA基因确认。结果Sli-dexMRSA Detection乳胶快速检测247株SA的PBP2 a,阳性93株(37.65%);247株SA经苯唑西林筛选试验及PCR测定M ecA基因确定MRSA102株(41.30%),93株PBP2 a阳性菌株都为MRSA;PBP2 a阴性耐苯唑西林22株中,经PCR法检测M ceA基因,9株确认为MRSA,13株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。乳胶凝集法快速检测SA的PBP2 a确定MRSA,敏感性91.2%,特异性100%,阳性预测值为1,阴性预测值0.94。结论单克隆抗体乳胶凝集法快速检测鉴定MRSA具有较高敏感性和特异性。     

汕头地区36株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药情况分析

目的：了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA,36株）的耐药情况。方法：用聚合酶链反应扩增MRSA携带的mecA基因,并结合PBP2′胶乳凝集试验对临床分离的MRSA进行鉴定。微量肉汤稀释法测定16种抗菌药物对MRSA的最低抑菌浓度。结果：36株MRSA对β-内酰胺类抗生素,庆大霉素及氟喹诺酮类抗生素的耐药率均在80.0%以上,而对利福平的耐药率则较低（41.7%）。MRSA对半合成的四环素耐药率较低,对多西环素和米诺环素的耐药率分别为5.6%和0.0%,未检出万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论：汕头地区分离的MRSA耐药情况严重。     

金黄色葡萄球菌肠毒素的检测和耐药性分析

目的了解临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)产肠毒素(SE)的情况及耐药现状。方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,用K-B法对260株SA进行药物敏感性试验,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测分别用检测头孢西丁及乳胶凝集检测PBP2a方法进行。结果260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB和SEC为主,分别为19.4%、16.4%和13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%。用头孢西丁及检测PBP2a的方法检测MRSA,检出率无显著意义(P>0.05);SA对临床常用的抗菌素除万古霉素及替考拉宁较敏感(100.0%敏感),其它的抗菌素存在多重耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强。结论临床分离的SA株大部分都携带肠毒素,MRSA的带毒率及耐药性均高于MSSA;临床应重视SA肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌素。     

婴幼儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染状况和耐药基因的研究

目的了解感染婴幼儿的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性和耐药基因,明确检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和甲氧西林耐药基因(mecA)的临床价值。方法用金黄色葡萄球菌乳胶凝集试验和梅里埃鉴定金黄色葡萄球菌,同时用纸片扩散法完成12种常用抗生素的药敏试验。对头孢西丁的结果,按当年CLSI标准执行,用于判断菌株甲氧西林的耐药性。采用PBP2检测试剂盒检测PBP2a蛋白,PCR检测mecA基因。结果 2007-2009年婴幼儿共检出245株金黄色葡萄球菌,其中MRSA检出率为17.6%(43/245)。MRSA对庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、红霉素、氯霉素的耐药性均显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(P<0.05),其余抗生素的差异无统计学意义(P>0.05),43株MRSA的PBP2a蛋白和mecA基因的检测结果全为阳性,阳性率为100%。结论用头孢西丁(30μg)能有效地筛查MRSA,检测PBP2a蛋白和mecA基因均能正确地确认MRSA。且检测PBP2a蛋白方便快捷,特异性好,值得临床推广。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的：分析耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）检测方法及其耐药性。方法：采用头孢西丁纸片法和PCR两种方法检测临床分离的60株金黄色葡萄球菌中MRSA菌株；纸片扩散法测定金黄色葡萄球菌对15种抗菌药物的敏感性。结果：纸片法及PCR法对MRSA检出率分别为15％、13．3％，两种方法对MRSA检出率差异无统计学意义（P〈0．05）。以PCR法检出mecA、femB基因为判断MRSA的金标准。除了替考拉宁、万古霉素以外，其余抗生素的耐药率MRSA组均明显高于MSSA组（P〈0．01）。结论：头孢西丁纸片法是筛选和确认MRSA菌株的一种可靠、简便的方法；MRSA为多重耐药菌株，临床应加强检测。     

压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究

目的：探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性。方法：收集临床64株葡萄球菌标本，对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA增后应用压电传感器阵列进行检测，并以PCR电泳检测作参照，与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析。结果：传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致，而此两种方法与常规培养加药敏法比较。结果略有差异。所有64株葡萄球菌中，2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA为阴性，2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA)的mecA为阳性，1株耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌（MRCNS）的mecA为阴性；2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）的mecA为阳性。结论：以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因，既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌，又可判断其耐药类型，能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据。     

耐甲氧西林葡萄球菌的检测及药敏结果分析

目的：研究耐甲氧西林葡萄球菌（ＭＲＳ）的检测及耐药性情况,指导临床应用。方法：通过Ｋ－Ｂ法初筛和ＭＩＣ法精筛,唑４５１株葡萄球菌（金葡菌ＳＡ２４０株,凝固酶阴性葡萄球菌ＣＮＳ２１１株）中选出ＭＲＳ,用ＳＥＮＳＩＴＴＴＲＥ Ａｒｉｓ测定万古霉素等１１种抗菌药物对ＭＲＳ的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）,评价其体外抗菌活性,同时对耐药性进行分析。结果：４５１株葡萄球菌种有１１５株ＳＡ（４７．９％）和９６株ＣＮＳ     

2007～2009年我院金黄色葡萄球菌的耐药性变迁

目的：对我院三年来金黄色葡萄球菌的耐药性变迁进行分析,并对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）的耐药性差异做对比,为临床合理使用抗生素提供依据。方法：采用VITEK-2全自动微生物分析仪和WHONET软件对570株金黄色葡萄球菌的耐药情况进行回顾性分析。结果：金黄色葡萄球菌对利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁具有很高的敏感性;对头孢类素类、苯唑青霉素、红霉素和氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星的耐药率有上升的趋势;MRSA对苯唑西林、头孢西丁、庆大霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、克林霉素、红霉素和米诺环素的耐药率都明显高于MSSA的耐药率,两者间有非常显著性差异（P〈0.01）。结论：金黄色葡萄球菌的耐药性逐渐升高,特别是对MRSA应引起临床的重视,要依据实验室的药敏结果,优化选择抗生素,才能更有效地控制感染。     

mecA、femA基因PCR联合扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 探讨mecA、femA基因PCR联合扩增快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的敏感性及特异性。方法 用纸片扩散法及mecA、femA基因PCR联合扩增检测178株葡萄球菌中的MRSA，并与琼脂稀释法的结果比较。结果 纸片扩散法筛检MRSA(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌，MRCNS)的敏感性、特异性分别为94．4％(89．5％)、92．4％(73．7％)。在金黄色葡萄球菌中若以mecA基因阳性为判定MRSA的指标，则敏感性、特异性分别为91．7％、95.5％。在178株葡萄球菌中若以mecA、femA基因阳性作为判定MRSA的指标，特异性提高到97．9％．结论 PCR mecA、femA基因联合扩增既可用于筛检MRSA，又可免去常规生化鉴定，具快速、特异性强的优点。     

万古霉素联合阿奇霉素对形成生物被膜耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌效果分析

目的  探讨体外万古霉素与阿奇霉素联合应用对形成生物被膜的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的抗菌效果。方法  使用头孢西丁纸片扩散法和MRSA胶乳凝集实验确定MRSA,采用刚果红培养基判断生物被膜的形成,通过肉汤稀释法将万古霉素和阿奇霉素进行棋盘格联合药敏试验,测出不同浓度下的抑菌指数（FIC）,据此判定两药联用后所呈现出的相关效应。结果  万古霉素和阿奇霉素联用组最小抑菌浓度（MIC）明显低于各单药组,两药联用主要表现为相加作用（88.2%）和协同作用（11.8%）,无无关作用和拮抗作用。相加作用时FIC为0.5～1.0;协同作用时FIC≤0.5。结论  万古霉素联用阿奇霉素对生物被膜形成的MRSA具有明显的体外抑菌效果,可以指导临床有效地降低药物使用剂量,减少毒副作用。