PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较5

目的：探讨PCR与ELISA2种方法检测丙型肝炎病毒和惭型肝炎病毒的差异和临床意义。方法：随机抽取无偿献血者标本300份，分为ALT升高组和ALT正常组，用ELISA法检测抗－HCV和HbsAg，用RT－PCR检测HCV－RNA和HBV－DNA。结果：抗－HCV阳性标本26例阳性率为8．7％，经RT－PCR检测，HCV－RNA均为阳性，抗HCV阴性的标本中有2例HCV－RNA为阳性。HCV－RNA的阳性率为16％，2种方法检测结果差异有统计学意义（P＜0．01）；300份标本中HBsAg阳性和HBV－DNA阳性比率分别为11．3％和12．7％，两者无明显差异（P＞0．05）。结论：ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象，应用RT－PCR检测HCV－DNA利于早期诊断，也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法。     

临床妊娠失败微生物感染的检测方法研究

目的：通过分析妊娠失败病人（妊娠失败组）,妊娠情况正常但要求人工流产者（正常人流组）和足月分娩且胎儿正常产妇（正常分娩组）三种妊娠状况时腺病毒（ADV）,人类微小病毒BIP（B19V）,巨细胞病毒（CMV）,爱泼思坦－巴尔病毒（EBV）,单纯疱疹病毒（HSV）,风疹病毒（RV）,柯萨奇病毒（COX）,弓形虫（TOX）,解脲支原体（UU）等微生物的检测结果,探索临床实用的妊娠失败微生物病因学检测方法。方法：妊娠失败组106人,正常人流组55人,正常分娩组55人,对同一对象,采集静脉血液和流产组织或静脉血液和胎盘组织为检测标本,应用聚合酶链反应（PCR）方法检测血液和组织标本中 各种微生物,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血液标本中相应的IgM抗体。结果：上述微生物感染的妊娠失败组中均有阳性发现,其中以PCR检测组织标本的阳性检出率最高;两个正常组也有较低的阳性发现,PCR法检测B19V,CMV,HSV,RV,TOX核酸和应用ELISA检测CMVIgM结果在妊娠失败组和两个正常组之间的差别具有显著性（P＜0．5）。结论：在妊娠失败病人中,微生物的感染率高于正常人工流产者和正常分娩产妇,提示微生物的感染是导致妊娠失败的重要原因之一,PCR和ELISA方法是妊失败临床微生物病因学论断的较实用的方法。PCR检测流产组织标本可以做确证诊断,ELISA和PCR检测血液标本可以做动态监测。     

乙脑患者血清和睡液抗乙脑病毒-IgM的检测及意义

用IgM抗体捕捉法ELISA检测试剂盒测抗乙脑病毒（抗JEV）－IgM，测血清标本169例，唾液标本13例。其中血清抗JEV－IgM阳性115例（77．3％）。唾液标本均为血清抗JEV－IgM阳性患者提供。唾液抗JEV－IgM阳性12例（92．7％）。检测结果提示，检测唾液中抗JEV－IgM，对临床早期诊断和流行病学调查有重要意义。为乙脑抗体检测开辟了新途径。     

应用脑脊液细胞沉淀器提高CSF抗酸菌检出率的研究

目的：评价应用CSF细胞离心沉淀器方法在检测CSF标本抗酸杆菌（AFB）诊断结核性脑膜炎（结脑）中的应用价值。方法：应用CSF细胞离心沉淀器，将CSF中的有形成份直接离心涂布于载波片上，然后进行抗酸染色，在显微镜下检测AFB。结果：应用此方法，112份结脑患CSF标本AFB的检出率为67．8％（76／112），显性高于常规方法的AFB检出率（P＜0．001）。32例对照组的CSF标本均未检查出AFB阳性结果。结论：CSF细胞离心沉淀器法检测CSF标本AFB的敏感性远高于常规方法，有较高的应用价值。     

单纯疱疹病毒性脑炎脑脊液基因诊断

目的：采用聚合酶链反应（PCR）扩增检测脑脊液（CSF）中单纯疱疹病毒（HSV）特异性DNA，观察其临床诊断应用价值。方法：36例临床确诊病毒性脑炎用PCR扩增检测脑脊液、血液HSV，并行病毒分型。同时与38例非脑炎组对照。结果：病毒性脑炎组36例脑脊液中，HSV－DNA阳性19例（19／36，52．78％），血液HSV－DNA阳性13例（13／36，36．11％），低于脑脊液阳性率。结论：本检测为临床提供了一个早期、快速诊断、HSE简便方法。     

孕妇血清风疹病毒抗体IgM的检测与分析

目的：了解孕妇风疹病毒感染情况。方法：应用ELISA间接法检测120例孕妇血清中风疹病毒抗体IgM(RV-IgM)。结果：120例中,RV－IgM阳性15例,阳性率为12．5％;RV－IgM阳性检出率在＜25a,25-30a和＞30a年龄组分别为13．11％、12．20％、11．11％。多次妊娠者RV－IgM阳性检出率明显高于初次妊娠者（P＜0．05）。结论孕妇风疹病毒感染与孕次有一定的关系,与孕龄无关。     

绵阳地区轮状病毒感染性腹泻的血清学分型研究

目的：了解绵阳地区轮状病毒感染的流行情况、血清型情况。方法：采用双抗夹心ELISA技术检测RV抗原，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）对RV病毒株进行血清学鉴定。结果：对222例标本进行ELISA法检测．RV阳性121例，阳性率54．5％；血清型检测共测得G1 36例（29．75％），G2 15例（12．37％），G3 45例（37．19％），G4 19例（15．70％），G9 3例（2．47％）。另有3例未能用现有引物分型。结论：轮状病毒是引起绵阳地区婴幼儿病毒性腹泻的主要原因，绵阳地区流行的RV以G1型为主，其次为G3型。     

柯萨奇B组病毒感染与妇女自然流产的关系探讨

目的;探讨柯萨奇B组病毒与妇女妊娠早期自然流产的关系。方法：本采用RT－PCR检测40例人工流产和40例自然流产妇女胎盘绒毛组织中特异的CVB－RNA,采用细胞培养的方法该两组妇女中CVB－RNA阳性进行培养。结果：自然流产组妇女胎盘绒毛组织CVB－RNA检出率为40％（16／40）,人工流产组检出率为17．5％（7／40）（P＜0．05）,经组织培养,自然流产组妇女胎盘绒毛组织CVB培养阳性率为30．9％（5／16）,人工流产组培养阳性率为28．7％（2／7）,两无显性差异（P＞0．05）。结论：CVB感染在妇女自然流产中的作用尚待进一步研究。     

聚合酶链反应在临床巨细胞病毒感染检测中的应用和研究

本文用聚合酶链反应(PCR)技术检测76份患儿尿标本中巨细胞病毒(CMV)DNA,其中32份尿标本做了病毒分离,另44例同时做血清CMV IgM抗体检测。结果PCR和病毒分离阳性符合率为100％,与CMV IgM抗体检出率无显著差异(P>0.05)。证明PCR方法具有特异性高、敏感性好、操作简便、检测周期短等优点,适用于临床进行CMV感染的快速诊断。     

先天性心脏病心肌组织中HPVB19,RV基因的检测

目的：探讨HPVB19和RV等病原感染与先心病的发病关系。方法：采用PCR，RT－PCR及ISH等分子生物技术，对79例先心病和46例非先心病的先心病心肌组织中HSVB19，RV，TOX等病原基因进行检测及B19病毒在心肌细胞内定位研究。结果：①在先心病心肌组织中B19，TOX，RV，HSV病原基因的检测阳性率分别为18％（12／66），13％（10／79），23％（7／30）和4％（3／79），前三与对照组间比较有显性差异（P＜0．05），而HSV在两组间无统计学意义（P＞0．05），提示B19，TOX，RV为先心病发病的重要危险因子。②对活检心肌组检测上述病原基因的阳性病例，同时作血清中B19，TOX，RV的特异性IgM检测均阴性。③通过原位杂交显示B19病毒DNA主要分布在心肌细胞核内，光学显微镜下心肌细胞无炎性浸润。结论：先心病心肌组织中可检测到HPVB19，TOX，RV基因，并有较高的阳性率，提示它们可能是先心病发病的重要感染病原。     

应用PCR和RT-PCR检测猪内源性逆转录病毒及其意义

目的 观察猪内源性逆转录病毒（Porcine endogenous retrovirus,PERV)在中国实验小型猪的感染情况。方法 针对PREV gag区的序列，选用特异性引物，采用PCR方法检测猪肝脏、皮肤前病毒序列；以及RT－PCR方法检测血清中PERV－RNA序列。结果 该法在猪肝脏组织中可检测出PERV前病毒序列；此外，在猪血清标本亦检测出病毒序列，而其它2份HBV、HCV阳性血清及2份其它动物血清（大鼠、兔）检测结果均为阴性，说明该方法特异性较高。结论 中国实验小型猪均携带该病毒，并可以释放到血清中；采用该法具有特异、简便的特点，为进一步研究PERV感染及生物安全性奠定了基础。     

单纯疱疹病毒感染诊断方法及标本选择的探讨

目的目的探讨单纯疱疹病毒（HSV）感染诊断方法及标本的选择对诊断结果的意义。方法选择117例疑似HSV感染的皮肤科门诊患者或神经内科脑炎脑膜炎患者血清，其中53例有明显疱疹症状者同时取疱液标本，78例脑炎脑膜炎患者同时采集脑脊液标本。应用ELISA法、免疫印迹法检测血清、脑脊液中HSV—IgM抗体，应用间接免疫荧光法（IIF）检测脑脊液、疱疹液HSV抗原。结果血清、脑脊液标本ELISA法和免疫印迹法检测HSV—IgM抗体阳性率分别为70．94％、6．41％和59．83％、3．85％。脑脊液、疱疹液TIF法检测HSV抗原阳性率分别是15．38％、67．93％。结论ELISA法与免疫印迹法检测HSV—IgM抗体阳性率无显著性差异（γ=0．017，P〉0．5）；脑脊液标本供检测HSV抗原与HSVIgM抗体的阳性率差异显著（γ=13．224，P〈0．05．）；对复发感染患者采用疱疹液抗原检测相对于采用血清检测抗体对诊断HSV感染更具有临床意义。在临床上，对不同病症病程的HSV感染，选择相应适宜的诊断方法及标本种类可取得更准确的检测结果。     

胃癌组织HPV16、EB病毒及HBV感染的检测与分析

目的：探讨肿瘤相关病毒HPV16、EB病毒及HBV感染与胃癌的相关性。方法：选择临床病理确诊的胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织标本各40份，用PCR方法检测标本中HPV16、EB病毒及HBV DNA。结果：胃癌及癌旁正常胃黏膜组织标本中，HPV16DNA阳性检出率分别为25％（10／40）和0（0／40），EB病毒DNA阳性检出率分别为17．5％（7／40）和0（0／40），差异均有显性（P＜0．05）；HPV16、EB病毒DNA同时呈阳性的检出率为5％（2／40）；HBV DNA在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的检出率均为0。结论：HPV16、EB病毒感染可能与胃癌的发生相关。     

ELISA法和荧光定量PCR法在检测儿童肺炎衣原体感染中的比较

目的比较ELISA法与荧光定量PCR法在检测儿童肺炎衣原体感染中的应用。方法对我院213例呼吸道感染患儿的血液标本运用酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行肺炎衣原体抗体检测（CP—IgM）,同时运用荧光定量PCR方法对其深部呼吸道标本进行检测（FQ—CP—DNA）。结果血CP—IgM与深部呼吸道标本CP—DNA两种方法差异无统计学意义（P〉0．05）,但后者对3—6岁的患者检出率更高（P〈0．05）。结论两种检测方法结合可以取长补短,提高衣原体感染的检出率。     

性病门诊生殖器糜烂、溃疡患者HSV-Ⅱ血清学检测分析

目的：了解性病门诊生殖器糜烂或溃疡的患单纯泡疹病毒Ⅱ（HSV－Ⅱ）感染情况。方法：采用ELISA法检测患血清HSV－ⅡIgG、IgM抗体。结果： 452例患HSV－Ⅱ抗体总阳性率为55．53％；男性患与患HSV－Ⅱ抗体总阳性经分别为56．21％、54．32％，两之间无统计学差异（P＞0．05）。结论：性病门诊生殖器糜烂或溃疡患HSV－Ⅱ感染严重，性别之间无显性差异。     

社区获得性呼吸道感染中肺炎支原体检测方法比较

目的：比较3种检测肺炎支原体（Mp）的方法,寻求更加适合临床检测要求的检测手段。方法：选择148例社区获得性呼吸道感染患者,留取痰或者咽拭子、血清标本,分别经培养、培养－PCR和血清IgM抗体检测,对检测结果进行分析。结果：3种方法检测Mp的阳性率分别为2．70％、6．76％和11．49％,经统计学检验,培养法与血清学阳性率、培养－PCR法与培养法阳性率间差异均有统计学意义（均P〈0．01）,培养－PCR法与血清学阳性率间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：培养－PCR法和血清学检测是肺炎支原体病原学诊断的有效手段,二者联合使用对于提高肺炎支原体感染诊断有重要帮助。     

病毒性脑炎、脑膜炎多病原早期诊断的研究

目的：明确病毒性脑炎、脑膜炎病原，评价其早期诊断方法。方法：采用微量细胞培养法，PCR法、ELISA间接法对86例脑炎、脑膜炎的患儿进行病原学检测。结果：（1）86例患儿中36例用微量细胞培养法分离到了病毒，阳性率41．86％，其中肠道病毒18例、腺病毒8例、呼吸道合胞病毒7例，阳性率分别为29．30％、9．30％、8．14％：（2）86例患儿脑脊液中检出特异性HSV1 DNA23例，Adv-DNA15例，CVB－DNV32例，阳性率分别为26．74％、17．14％和37．21％；（3）用ELISA间接法测定了病人血清及脑脊液中特异性单纯疱疹病毒1（HSV1）－IgM、腺病毒（Adv)-IgM、柯萨奇病毒（CVB）－IgM。血清中阳性数HSV11，Adv10例，CBV25例，阳性率分别为12．79％，11．63％。29．06％。脑脊液中HSV1 8例，Adv9例，CVB15例（其中CVB2 8例，CVB3 10例），阳性率分别为9．30％，10．47％、17．44％。结论：（1）PCR技术阳性率高于传统病毒分离培养法；（2）血清及脑脊液中特异性抗体水平检测可用于早期诊断，（3）本地区病毒性脑炎，脑膜炎的病原以肠道病毒为首位，腺病毒次之，单纯疱疹病毒居第三位。     

ELISA法快速检测脑脊液病毒特异性抗体

目的 探讨ELISA法快速检测脑脊液病毒特异性抗体的临床价值。方法 用ELISA法对脑脊液（CSF）病毒特异性IgM抗体进行检测。结果 对90例有体征且CSF异常者的CSF进行1：1稀释，发现结果特异、敏感、准确性高，方法简便。结论 本法能够快速监测并诊断病毒性脑炎，为预防和治疗提供可靠的依据。     

丽水市抗-HCV阴性献血者丙型肝炎核酸序列分析

目的：为了解ELISA抗－HCV筛查阴性血液HCV－RNA的流行率，对当前HCV的传播风险进行评估。方法：采用PCR－混合样品法对我站部分抗－HCV筛查阴性的标本进行HCV－RNA检测。结果：3109份标本的HCV－RNA阳性率为0．48％，其中无偿献血者的阳必率为0．12％，低于有偿供全血者（0．90％）及有偿供机采血浆者（0．80％）；同时机采血浆不会造成有偿供血者HCV－RNA阳性率升高，结论：HCV－RNA检测对于控制HCV的传播具有重要的意义。     

江门某医院儿童秋冬季腹泻中诺瓦克样病毒感染分子流行病学与临床特征研究

目的了解江门市2005年秋冬季儿童腹泻中诺瓦克样病毒（NLVs）感染情况、病毒基因型别及主要临床表现。方法收集某医院临床诊断为病毒性腹泻患儿的粪便标本用RT-PCR方法检测NLVs，部分阳性标本PCR产物经纯化、测序后进行基因分型。患儿临床症状等情况进行问卷调查，并以NLVs与RV腹泻的主要临床表现进行了比较。结果在收集的324份标本中，RV检出率为55．56％（180／324），NLVs检出率为7．72％（25／324）。NLVs主要感染2岁以下的婴幼儿，占感染患儿的96％，其性别、月份检出率差别无统计学意义。9株NLVs经测序分析7株为GH-4型，2株为GH-3型。NLVs感染的临床症状主要有发烧11（44．0％），呕吐20（80．0％）。脱水3（12．0％）和腹痛4（16．0％）等，其中呕吐、脱水发生率及治疗费用与RV感染者差别有统计学意义。结论江门市儿童NLVs感染存在着不同的基因型别感染，但NLVs感染患儿的临床症状要轻于RV。