大鼠创伤性脑损伤后细胞凋亡及NOS阳性细胞的变化

目的：探讨大鼠创伤性脑损伤后不同时相皮质、海马、隔区细胞凋亡及NOS、ChAT阳性细胞的变化。方法：采用大鼠自由落体脑损伤模型，伤后1、2、3、4、5、7、10d取脑切片，经Nissl染色，用TUNEL法检测细胞凋亡，NADPH—d组化染色观察NOS阳性细胞，ChAT免疫组化染色观察隔区ChAT阳性细胞。结果：Nissl染色可见损伤侧海马CA2、CA3区锥体细胞层细胞消失或紊乱。损伤区周围皮质凋亡细胞伤后3d达到高峰；损伤侧海马凋亡细胞伤后5d达到高峰；损伤侧隔区凋亡细胞7d达到高峰。正常侧上述脑区各时相点均未见到凋亡细胞。损伤区周围皮质、损伤侧海马和隔区iNOS阳性细胞数量明显增加。损伤侧隔区ChAT阳性神经元也明显减少。结论：大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围皮质和损伤侧海马、隔区细胞凋亡数量的变化与伤后时程有关。伤后细胞iNOS表达增加是导致细胞凋亡的因素。     

脑震荡大鼠大脑乙酰胆碱脂酶的变化

目的:观察脑震荡大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)的变化规律.方法:用自制单摆闭合性脑损伤机械打击装置复制脑震荡大鼠模型,随机分为伤后1、 2、 4、 8、 16、 24d和正常对照组.用免疫组织化学法和图像分析对大脑前额叶皮质(PFC)、尾壳核(CPu)、伏核,核心部(AcbC)、斜角带垂直臂核(VDB)、斜角带水平臂核(HDB)、梨形皮质(Pir)、顶叶皮质、海马CA1-3区(CA1-3)、丘脑背内侧核(MD)、丘脑背外侧核(LD)、下丘脑外侧区(LH)和杏仁核脑区AChE阳性表达物进行光密度测量.结果:与正常对照组相比,大鼠脑震荡后ACHE的阳性表达在上述脑区呈不同程度的下降.其中在VDB AChE表达于伤后第1天达低谷.在PFC、 CPu、 AcbC、 CA1、 CA3、杏仁核、顶叶皮质、Pir和HDB AChE表达于伤后第4天达低谷.在CA2、 MD、 LD部位ACHE表达于伤后第8天达低谷.在LH部位AChE表达于伤后第16天达低谷.各脑区ACHE变化恢复时间不相同,至24d均恢复接近正常或低于正常.结论:AChE可分布在大脑皮质各层神经元,海马、丘脑、尾壳核、基底前脑神经元;脑震荡鼠顶叶皮质、PFC、 CA1-3、 MD、 LD、 LH、 CPU、 VDB和HDB等多个功能脑区AChE伤后出现下调性病理变化;脑震荡鼠的认知行为障碍可能与相关脑区胆碱能神经的变化有一定联系.     

一重和多重脑震荡大鼠前额叶髓鞘脂蛋白(PLP)的变化

目的:为探索一重(pure cerebral concussion,PCC)和多重脑震荡(multiple cerebral concussion,MCC)后大鼠前额叶中隔断面髓鞘脂蛋白(myelin protein lipoprotein,PLP)分布与表达变化规律。方法:采用自制单摆式机械打击装置复制PCC和MCC大鼠模型,伤后随机分为PCC中1、2、4、8、16和24 d组(n=6),MCC中1、2、4、8、16和24 d组(n=6),另设正常对照组(n=6)。用小鼠抗-PLP单克隆抗体免疫组织化学SP法染色,观察致伤后大鼠中隔断面区PLP表达的动态变化。结果:正常状态下,PLP主要表达于皮质分子层和颗粒层的白质纤维;中隔区核团包括前脑内侧束(Mfb)、斜角带垂直支(VDB)、外侧隔核中间部(LSI)和杏仁核(amygdaloid nucle-us,AN);胼胝体(cc)、纹状体(CPu)和前联合(an)。PCC后多数脑区PLP表达变化无差异;MCC后皮质前额叶分子层、斜角带垂直臂核和纹状体脑区的PLP表达明显下调(P<0.05)。结论:结果提示MCC可能存在损伤累积效应,加重了中隔断面区神经纤维的损伤。     

脑震荡鼠大脑多巴胺转运体变化研究

为了进一步探讨脑震荡(cerebral concussion,CC)大鼠认知行为障碍的神经生物学基础,本实验观察了CC大鼠多巴胺转运体(dopamine transporters,DAT)的变化规律。用自制金属单摆式闭合性脑损伤打击装置复制脑震荡大鼠模型48只,随机分为伤后1、2、4、8、16、24d六个实验组,另设一正常对照组(n=8)。运用抗DAT抗体SP法行免疫组化染色,并测定大脑前额叶皮质(PFC)、尾壳核(CPu)、伏隔核(Acbc)、内侧隔核(MS)、斜角带垂直臂核(VDB)、斜角带水平臂核(HDB)、梨形皮质(Pir)、顶叶皮质(CPL)、海马CA1-3、丘脑中央背内侧核(MD)、丘脑背外侧核(LD)、下丘脑腹内侧核(VMH)和杏仁核等16个脑区DAT阳性表达物的光密度值。结果表明,与正常对照组相比脑震荡后大鼠多个脑区DAT阳性表达物呈下调变化。PFC、CPu-2、MS、LD、MD的DAT阳性表达物在伤后第2d表达最低;CPu-1、VDB、HDB、CPL、CA1、CA2、CA3、VMH和杏仁核的DAT阳性表达物在伤后第4d表达最低;Pir的DAT阳性表达物在伤后第8d表达最低;Acbc的DAT阳性表达物在伤后第16d表达最低。各脑区恢复时间各不相同,至24d基本恢复正常。以上结果提示DAT可在大鼠不同脑区广泛表达;脑震荡后其在多个脑区呈下调性改变,提示多巴胺转运体的伤后变化可能参与了脑震荡后的认知障碍。     

多重脑震荡大鼠脑干中缝核团内5-羟色胺免疫阳性表达变化的研究

为了探讨多重脑震荡(multiple cerebral concussion,MCC)后大鼠中缝核团内5-羟色胺(5-HT)能神经元的变化规律,本实验采用自制单摆式机械打击装置复制MCC大鼠模型,研究伤后大鼠脑干中缝核团内5-HT及5-HT合成过程中的限速酶-色胺酸羟化酶(TPH)的表达。将56只大鼠随机分为7组:对照组、伤后1、2、4、8、16和24d组(n=8)。用免疫组织化学染色技术及图像分析法定量分析伤后大鼠脑干中缝核团内5-HT和TPH的表达变化。结果显示:(1)TPH免疫反应阳性产物在中缝背核、正中中缝核的表达在伤后2d时达到高峰,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05);中缝大核和中缝苍白核分别以伤后1d组和4d组阳性反应最强;(2)5-HT免疫反应阳性产物在中缝背核、正中中缝核的表达也在伤后2d时达到高峰,16、24d组基本恢复至正常水平;而中缝大核和中缝苍白核内5-HT的免疫反应性在各损伤组与正常对照组之间均无显著性差异(P>0.05)。以上结果表明,多重脑震荡后中缝核团内TPH和5-HT的表达增高,这为研究5-HT对MCC后认知障碍的影响提供了形态学依据。     

毒蕈碱M2受体在脑震荡大鼠脑内的表达变化

为了探讨脑震荡(brain concussion,BC)后认知功能障碍的大鼠中枢毒蕈碱M2受体的表达变化,本实验应用金属单摆式机械打击装置复制单纯性脑震荡大鼠模型,采用免疫组织化学结合图像分析的方法,观察BC后大脑前额叶皮质(PFC)、海马CA1-CA4区、丘脑、尾壳核(CPU)、Broca斜角带垂直支(VDB)和内侧隔核(MSN)区M2受体蛋白的表达情况。结果显示:在损伤后M2受体蛋白的表达在海马CA1-CA4区出现轻微下降(P>0.05),在PFC、VDB、CPU和MSN区即刻呈轻度上升,随后又下降,但与正常组相比无显著性差异(P>0.05);在伤后1、8、24d组大鼠丘脑M2受体的表达呈明显下降,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。以上结果提示M2受体的表达在丘脑出现明显下调的改变可能与BC认知功能的改变有关。     

大鼠神经系统内5-羟色胺_(1A)受体亚型的定位分布(英文)

应用免疫组织化学技术观察了大鼠神经系统内 5 -羟色胺 1A受体亚型 ( 5 -HT1 AR)免疫阳性结构的分布。结果显示 :5 -HT1 AR免疫阳性结构主要分布于梨状皮质、隔核、丘脑腹后核、丘脑网状核、杏仁基外侧核、Purkinje细胞层、红核、面神经核、斜方体核等 ;在海马、额叶皮质、丘脑背内侧核、脚间核、三叉神经中脑核、中缝背核、三叉神经脊束核、脊髓背角浅层、背根神经节和三叉神经等结构内有中等强度的分布 ;在嗅球、尾壳核、苍白球、斜角带核、终纹床核、缰核、黑质、上橄榄等部位有弱的分布。本文的结果提示 5 -HT1 AR阳性结构广泛地分布在大鼠神经系统 ,它们可能介导 5 -HT在神经系统中的多种生理功能     

大白鼠扣带回3区向杏仁体及其他核群的纤维投射——菜豆白细胞凝集素顺行示踪研究

本文用菜豆自细胞凝集素免疫组织化学顺行示踪技术,观察大白鼠扣带回3区(Cg3)向皮质下核团的纤维投射。其投射区自前向后主要有:伏核、尾壳核内侧1/3、终纹床核、外侧视前区、带旁核、丘脑前内侧核、背内侧核、前室旁核、网状核、外侧缰核、后室旁核、束旁核及丘脑筛状核等。在丘脑下方,标记纤维密集于未定带、内囊的内侧边缘区和乳头丘脑束的周围。自这些区域,有纤维投射至下丘脑外侧区。本文着重分析了标记纤维在杏仁体的分布情况,标记纤维密集于基底外侧前核和外侧核的腹内侧亚核。从而证实Cg3皮质的纤维投射参与基底外侧核一边缘系环路,即所谓记忆环路。而杏仁体中央核仅偶见极稀疏的标记纤维。所以我们认为,Cg3皮质未参与“内脏环路”。标记纤维自注射侧经胼胝体膝至对侧半球,其投射区与注射侧的投射区一致,但标记纤维比较稀疏。     

大白鼠外侧隔核的传入性神经纤维联系—HRP、荧光素法研究

本文应用HRP和荧光素标记法对大白鼠外侧隔核的传入性神经纤维联系进行了研究。实验结果表明,外侧隔核的传入神经纤维来源于端脑海马的CA_(1-4)区、杏仁皮质核、内嗅区皮质、斜角带核、视前内侧核、视前外侧核;丘脑的室周核和带旁核;底丘脑的Forel's H_2区和未定带;下丘脑的前核、外侧核、后核以及乳头体上核;中脑的腹侧被盖区。     

大鼠下丘脑腹内侧核与海马神经纤维联系研究

目的:探讨大鼠下丘脑腹内侧核与海马的传入、传出神经纤维联系,为摄食和能量代谢等内脏活动的神经调节机制的深入研究提供形态学依据。方法:参考大鼠脑立体定位图谱,借助脑立体定位仪将逆行示踪剂伊文思蓝(EB)分别注入SD大鼠左侧下丘脑腹内侧核(A组,18只)或海马CA2区(B组,18只),大鼠存活3 d后,4%多聚甲醛心脏灌注,冰冻切片,荧光显微镜下观察。结果:A组双侧海马的CA2,CA3处均显示有荧光标记细胞,且对侧荧光强于同侧;B组下丘脑腹内侧核处未见荧光标记细胞。结论:下丘脑腹内侧核与海马有广泛的纤维联系,可接受来自双侧海马CA2,CA3区的神经纤维投射,两者可能在内脏活动调节中发挥重要作用。     

杏仁内侧核的纤维投射与功能

杏仁内侧核属于杏仁复合体内侧核群 ,内侧紧靠梨状皮质 ,外侧与屏状核相邻 ,背侧部分被豆状核覆盖 ,嘴侧毗邻前穿质 ,尾侧与尾状核相连 ,与嗅脑、大脑新皮质、隔核、丘脑和下丘脑有丰富的纤维联系 ,已经在该部位检测到多种物质的表达 ,提示该核团参与了对中枢神经系统多种重要功能的调节 ,如学习记忆、情绪、癫痫等     

大鼠间脑和皮质下端脑到前额叶皮质的传入投射——WGA-HRP法研究

本研究将 WGA-HRP 注射于25只大鼠前额叶皮质的前扣带回背部、前边缘区及岛叶无颗粒皮质背部,观察其间脑和皮质下端脑的传入联系。间脑的传入主要来自丘脑背内侧核,并有一定的局部定位。此外,丘脑的板内核群(中央外侧核、旁中央核、中央内侧核及束旁核)、腹侧核群(腹外侧核、腹内侧核、腹前核及腹后核)、中线核群(菱形核、连合核、带旁核及室旁核)、前内侧核、外侧缰核、后核及外侧核亦有到前额叶皮质的传入投射,且投射到前额叶皮质不同部位的数量不同。丘脑下部的传入主要来自外侧区、外侧视前区、尾侧大细胞核及乳头体上核,少量传入也可见于丘脑下部后区、背内侧核、腹内侧核及未定带。皮质下端脑的传入主要来自苍白球,其次为斜角带核、隔核、杏仁核及屏状核。在隔核中,除内侧隔核外还观察到外侧隔核,繖隔核及三角隔核亦投射到前额叶皮质。杏仁核中除杏仁外侧核、杏仁基底核外侧部及内侧部外,还观察到杏仁内侧核及杏仁皮质核亦有少量到前额叶皮质的传入。     

Efferent connections of the nucleus reuniens and the rhomboid nucleus in the rat: an anterograde PHA-L tracing study

Direct projections from the nucleus reuniens (Re) and the rhomboid nucleus (Rh) in the midline of the thalamus were examined in the rat by utilizing anterograde axonal transport of Phaseolus vulgaris leukoagglutinin (PHA-L). The Re projected axon terminals densely to the anterior cingulate cortex, infralimbic area of the medial frontal cortex, agranular insular cortex, entorhinal cortex, and parasubiculum. Labeled terminals in these cerebral cortices were distributed mainly in layer I, except for the entorhinal cortex where labeled terminals were distributed in layers I-IV. On the other hand, labeled terminals of projection fibers from the Rh to the cerebral cortex were distributed in layers II-VI of the anterior cingulate cortex, frontal cortex, parietal cortex, and agranular insular cortex. In the nucleus accumbens, caudate putamen, and basolateral amygdaloid nucleus, labeled terminals from the Rh were more dense than those from the Re. In the hypothalamus, labeled terminals from the Re were more dense than those from the Rh. The septal nuclei and field CA1 of Ammon's horn received labeled axon terminals from the rostral portion of the Re, but not from the caudal portion of the Re or the Rh. The patterns of distribution of axon terminals from the Re and Rh were similar in other subcortical target regions. To confirm the PHA-L results, wheat germ agglutinin conjugated to horseradish peroxidase (WGA-HRP) was injected into two projection sites of PHA-L-labeled axons. After injection into the agranular insular cortex, WGA-HRP-labeled neurons were found in the Re, but only a few were present in the Rh. In contrast to this, after WGA-HRP injection into the nucleus accumbens, WGA-HRP-labeled neurons were found in the Rh, but only a few were seen in the Re.     

脑缺血海马CA1区5-HT变化的免疫组织化学研究

目的：观察脑缺血及缺血再灌流海马ＣＡ１区５－ＨＴ的变化，探讨脑缺血海马ＣＡ１区神经元损伤与５－ＨＴ变化的关系。方法：用免疫组织化学ＡＢＣ法及图像分析技术对沙土鼠脑缺血海马ＣＡ１区５－ＨＴ含量变化进行研究。结果：（１）脑缺血１０ｍｉｎ时，沙土鼠海马ＣＡ１区５－ＨＴ免疫反应阳必纤维的平均光密度值（ＯＤ）与对照组比较无显著性差异。而缺血３０ｍｉｎ时，ＯＤ值则下降，４ｈ时下降得更多，Ｐ〈０．０５。（２）脑     

Localization of chick retinal visinin-like immunoreactivity in the rat forebrain and diencephalon

The present study is an examination, using an indirect immunofluorescence method, of the distribution of visinin, a 24,000 dalton peptide, in the rat forebrain and diencephalon. Immunoreactive structures were localized in the neuronal elements showing an uneven distribution. Immunoreactive neurons were found in the olfactory bulb, anterior olfactory nucleus, cerebral cortex, amygdaloid complex, ventral portion of the nucleus caudatus putamen, septal area, nucleus accumbens, nucleus paratenialis, nucleus rhomboideus, nucleus reuniens, nucleus paraventricularis hypothalami, nucleus supraopticus, nucleus anterior hypothalami, preoptic area, hypothalamic periventricular nucleus, nucleus mammillaris medialis, medial habenular nucleus, zona incerta, nucleus lateralis thalami, nucleus tractus optici and gyrus dentatus. Immunoreactive fibers were observed in the above areas, particularly near the labelled cells, forming fiber plexuses of varying density. In addition, dense plexuses were also seen in the globus pallidus, anteroventral nucleus of the thalamus, substantia nigra and hippocampus. In the former three structures, no labelled cells were present and in the latter, a few scattered neurons were found, indicating that these fibers originate from extrinsic sources.     

NF1基因表达产物在大鼠脑的分布-免疫荧光组化法

用免疫荧光组织化学方法观察了 NF1基因表达产物神经纤维素在正常成年大鼠脑中的分布 ,结果如下 :(1)大脑皮质中神经纤维素阳性细胞最为密集 ;其次 ,在海马结构、丘脑前核群、丘脑内侧核群、丘脑板内核群、丘脑中线核群及下丘脑室周核、室旁核中神经纤维素阳性细胞也较密集 ;在杏仁核、下丘脑前区、下丘脑外侧区、下丘脑后区以及隔外侧核、隔内侧核、尾壳核、屏状核、苍白球、三叉神经脊束核等部位 ,也可见到数量不等的神经纤维素阳性细胞稀疏分布。 (2 )神经纤维素免疫阳性反应产物除了分布于神经细胞胞质外 ,在细胞核也有分布。 (3 )结合抗星形胶质细胞特异性酶 (胶质纤维酸性蛋白 )免疫组化反应 ,在星形胶质细胞中未观察到神经纤维素免疫反应阳性信号     

大鼠多重脑震荡后多巴胺能与胆碱能神经元的变化

目的:观察大鼠多重脑震荡(MCC)后中枢神经系统内多巴胺能神经纤维与胆碱能神经元的变化。方法:用金属单摆打击装置复制MCC大鼠模型,随机分为对照组和伤后1、2、4、8、16、24 d多个损伤组,用免疫组织化学双标技术检测大鼠脑内多巴胺能神经纤维中酪氨酸羟化酶(TH)和胆碱能神经元中胆碱乙酰转移酶(ChAT)的表达变化。结果:TH阳性表达在伤后1 d开始上升,8 d达高峰,24 d组基本恢复;ChAT阳性表达在MCC后均呈现下调改变。结论:多重脑震荡后多巴胺能神经纤维和胆碱能神经元的变化可能与中枢神经系统的认知功能障碍有关。