鼠尾藻多糖的制备及其抗凝血活性的初步研究

目的在对鼠尾藻(Sargassum thunbergiiKuntze)多糖进行脱色精制及氧化降解的基础上,研究其抗凝血活性。方法采用硅藻土脱色、次氯酸钠降解制备鼠尾藻多糖(PST)及其3种降解物,采用剪尾法和毛细管法对其进行抗凝血活性初步研究。结果4种鼠尾藻多糖均能显著延长小鼠的出血时间和凝血时间,3种降解物还能使小鼠的出血量显著增加。结论鼠尾藻多糖具有较强的抗凝血作用,且其抗凝血作用与其相对分子质量有关。     

丹参注射液生物活性限度测定方法适用性研究

目的探讨丹参注射液生物活性测定方法的适用性。方法采用小鼠体内血栓形成试验、兔体外血小板聚集试验和兔体外血浆活化部分凝血活酶时间（APTT）试验,观察3个厂家,每厂各1批丹参注射液的药理作用,作为生物活性测定方法和限值确定依据。结果3批样品可明显增加血栓形成试验偏瘫恢复数,明显延长急性脑缺血试验小鼠存活时间;3批样品对二磷酸腺苷（ADP）诱导兔体外血小板聚集率有明显抑制作用,可明显延长兔血浆的活化部分凝血活酶时间（APTT）,体内体外的结果作用趋势相近。结论小鼠体内血栓形成试验、兔体外血小板聚集试验和兔体外血浆活化部分凝血活酶时间（APTT）试验均可作为丹参注射液生物活性测定方法,建议限值剂量为5g生药·kg-1。选用其中1种方法测定结果阳性即可判断为合格。若结果为阴性,需加做另2种试验,结果必须均为阳性后才能判断为合格。采用生物活性测定方法可对产品进行质量内部控制,积累数据,为制定正式标准提供依据。     

纳豆激酶抗凝血作用的研究

目的研究纳豆激酶 (NK)的活性和抗凝血作用。方法采用纤维蛋白平板法测定NK的活性 ;采用试管法测定家兔全血凝固时间、血浆复钙时间、凝血酶时间、大鼠凝血活酶时间、凝血酶引起的纤维蛋白凝固时间 ;采用Quick法测定大鼠凝血酶原时间。结果固体粉末NK的活性为 5 6 5 5 10U/g ,是尿激酶的 3.13倍 ;液体NK的活性为 15 2 34U/ml;NK能显著延长家兔全血凝固时间、血浆复钙时间、凝血酶时间、大鼠凝血活酶时间、凝血酶引起的纤维蛋白凝固时间、大鼠凝血酶原时间。结论NK对凝血过程的三阶段都有影响。     

桂郁金多糖抗凝血及纤溶活性研究

目的研究桂郁金多糖体内抗凝血作用和含药血清体外纤溶活性。方法小鼠连续3 d灌胃给予高、中、低剂量桂郁金多糖,分别检测全凝血时间(CT)、凝血因子Ⅱ(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和凝血因子Ⅰ(Fbg),并将含药血清用纤维蛋白平板法进行体外纤溶试验。结果桂郁金多糖能明显延长CT、APTT和TT(P<0.05),对PT和Fbg无明显影响;含药血清体外无纤溶活性。结论桂郁金多糖具有显著的体内抗凝血活性,该药通过内源性凝血途径和共同凝血途径发挥抗凝血作用。     

竹叶提取物的抗血栓作用

目的从抗血小板聚集,抗凝血,及纤溶3个方面研究竹叶提取物的抗血栓作用。方法采用小鼠肺血栓模型、家兔颈总动脉血栓模型,测定家兔体外血浆凝血酶时间、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间、血浆复钙时间和小鼠优球蛋白溶解时间及小鼠全血凝块质量等指标,考察竹叶提取物的抗血栓作用。结果竹叶提取物静脉给药可显著提高胶原蛋白肾上腺素混合诱导剂所致肺血栓小鼠的存活率;明显抑制家兔颈总动脉血栓形成;显著降低小鼠优球蛋白溶解时间,减轻小鼠全血凝块重量;其体外给药能显著延长家兔凝血酶、凝血酶原、部分凝血活酶时间,延长血浆复钙时间。结论竹叶提取物具有明显的抗血栓形成作用。     

长叶蜈蚣藻多糖抗凝血活性的研究

目的 通过口服和尾静脉注射两种给药方式给药考察长叶蜈蚣藻多糖(GLP)的抗凝血作用.方法 采用毛细管法测定GLP尾静脉注射和口服给药对凝血时间(CT)的影响;并对该多糖对凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响进行考察.结果 GLP两种给药方式对CT、PT和APTT均有延长作用.结论 GLP静脉注射和口服均具有较好的抗凝血活性,作为抗凝药物开发具有较好的前景.     

龙胆多糖的抗凝血作用的研究

目的:研究龙胆多糖的抗凝血作用.方法:采用体外实验的方法,考查龙胆多糖对大鼠部分凝血活酶时间(PTT)、大鼠凝血酶原时间(PT)以及对凝血酶的作用.结果:浓度为12.5、25、50、100mg/ml的龙胆多糖对大鼠部分凝血活酶时间(PTT)大鼠凝血酶原时间(PT)有抑制作用,血浆凝固时问显著延长,同时对凝血酶也有抑制作用,使纤维蛋白凝固时间显著延长.结论:龙胆多糖具有抗凝血作用.     

补体旁路过度激活影响体内凝血功能

目的研究补体旁路的过度激活对体内纤溶、凝血及血小板的影响。方法采用尾静脉注射眼镜蛇毒因子(CVF)造成大鼠体内补体旁路的过度激活。检测大鼠给药前和给药后多个时间点血样的补体活性、t-PA、PAI-1、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、P-selectin、PF-4、β-TG、血小板数量及聚集活性的变化,并检测小鼠静脉给予CVF后其尾部出血时间的变化。结果大鼠注射CVF后,血清补体活性在1h内基本消失。t-PA和PAI-1含量在1h内有明显增加,在48 h时间点t-PA/PAI-1比值有明显下降(P<0.01);PT、APTT、TT均略有变化,而血浆FIB含量明显下降;补体旁路的过度激活导致血中P-selectin、PF-4、β-TG明显上调,血小板数量明显减少,凝血酶和花生四烯酸诱导的血小板聚集被明显抑制,而ADP诱导的血小板聚集只受到轻微影响。小鼠尾部出血时间在1 h时明显缩短。结论补体旁路的过度激活能明显影响体内凝血功能,导致血液的高凝状态。     

圆型脐叶藻多糖的结构特征及其抗凝血活性的研究

目的对圆型脐叶藻(Aeodes orbitosa)中多糖组分的结构及其抗凝血活性进行研究。方法采用单糖组成分析、甲基化分析和IR方法对圆型脐叶藻多糖的结构进行研究;采用割尾法和毛细管法考察圆型脐叶藻多糖对小鼠出血时间和凝血时间的影响。结果圆型脐叶藻多糖由3,6-脱水半乳糖、6-甲基-半乳糖、2-甲基-半乳糖、半乳糖、木糖和葡萄糖以摩尔比6.4∶0.9∶5.8∶1.6∶84.1∶1.2组成。硫酸基含量为37.5%。该多糖的主要连接方式为1,3和1,4连接;分支点位于半乳糖残基的2位和6位。硫酸基位于1,4连接的半乳糖残基的2,6位,和1,3连接的半乳糖残基的2位。圆型脐叶藻多糖能够明显延长小鼠出血时间和凝血时间。结论圆型脐叶藻多糖为硫酸化1,3和1,4连接的半乳聚糖,具有明显的抗凝血活性。     

蛇尾草醇提取物镇痛及凝血作用的实验研究

目的探讨蛇尾草醇提取液镇痛及凝血作用。方法采用热板法测定小鼠痛阈值,醋酸扭体法测定小鼠的扭体次数。采用毛细管法测定小鼠凝血时间（CT）,剪尾法测定小鼠出血时间（BT）。结果蛇尾草醇提取物可明显延长热板引起小鼠疼痛反应的痛阀值,同时明显抑制醋酸致小鼠扭体反应,可明显的缩短小鼠的凝血时间和出血时间。结论蛇尾草醇提取液有一定镇痛、促凝血作用。     

纤维素硫酸酯体内抗凝血活性的实验研究

目的:研究纤维素硫酸酯对动物体内的抗凝血活性。方法:用试管法测凝血时间(CT),用凝固法测定活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT),以肝素和硫酸化右旋糖酐为阳性对照,考察其抗凝血活性的量效性和时效性。结果:纤维素硫酸酯能显著延长CT,APTT和TT,且呈剂量依赖性,但在所试剂量范围内对PT无明显影响;其抗凝血活性在给药2h时达到最大。结论:纤维素硫酸酯具有明显抗凝血作用,强于现有同类抗凝血药硫酸化右旋糖酐,略低于150IU·mg-1的肝素。     

口服重组水蛭素抗凝、抗血栓作用的实验研究

目的:探讨口服重组水蛭素的抗凝、抗血栓的作用.方法:将24只Beagle犬,随机分为水蛭素大、中、小剂量组剂量分别为(600,300,150 AUT/kg)和空白对照组,每组6只.各试验组动物均经口给药,分别于给药前、达稳态前和达稳态后取血1～4 mL,测定凝血时间(CT)、血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶凝固时间(TT)、纤维蛋白原(FBG)、活化部分凝血活酶时间(APTT);同时采用下腔静脉结扎法制作血栓模型,计算深静脉血栓形成百分率和血栓重量.结果:各用药组CT,PT,TT,APTT值与空白对照组均有差异或显著差异(P＜0.05或P＜0.01),给药对FBG没有明显影响;深静脉血栓形成百分率和血栓重量也有差异或显著差异.结论:口服重组水蛭素具有很强的特异性凝血酶抑制作用,同时具有抗凝、抗血栓作用,可用于防治实验性深静脉血栓形成.     

低分子肝素的抗凝与抗血栓作用

目的研究低分子肝素的抗凝特点及抗栓作用。方法分别测定其抗Xa因子与抗IIa因子的比率(FXa/FIIa);全凝血时间（CT）、复钙时间（RT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化的部分凝血活酶时间（APTT）;制备体内、体外血栓。结果低分子肝素FXa/FIIa<1,对RT、TT的延长作用明显低于肝素,对CT、PT、ATPP无影响;在两种血栓模型中,低分子肝素组的血栓重均低于肝素组。结论低分子肝素对凝血系统的作用低于肝素;而其抗栓作用大于肝素。     

少棘蜈蚣纤溶活性蛋白的抗血栓作用

目的研究少棘蜈蚣(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch)纤溶活性蛋白的抗血栓作用。方法采用离子交换层析和分子筛等制备法从少棘蜈蚣中纯化到蜈蚣纤溶酶(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch fibrinolyti cenzyme,SSFE),用纤维蛋白平板检测酶活力,常规方法检测了SSFE溶血性和出血性,进行了SSFE体外溶栓和体内溶栓实验,并检测了凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)3个标准化指标。结果PAGE显示SSFE为单一组分,具有纤溶活性;证明SSFE无致出血性且无致溶血活性,低、中、高剂量SSFE使小鼠APTT和TT均明显延长,中剂量SSFE对PT有延长作用,而高剂量作用不明显。结论蜈蚣纤溶酶具有抗血栓作用。     

In vitro studies on a novel micelle-forming peptide with anticoagulant activity

A novel peptide, tert-butyloxycarbonyl-L-arginine-L-proline lauryl ester laurate, synthesised by a solution-phase method, formed micelles in aqueous solutions and was observed to exhibit anticoagulant activity as shown by clotting assays such as the thrombin time (TT) test, the prothrombin time (PT) test and the activated partial thromboplastin time (APTT) test. TT and PT were found to be normal up to a particular concentration of peptide, and above that level they increased with increasing concentration of peptide, while APTT did not exhibit much significance. Conductometric and potentiometric studies showed that the peptide formed a stable micelle, and the anticoagulant activity of this peptide was also compared with a non-arginine-containing peptide (control) known to form micelles. The anticoagulant action in the micellar form could be due to the inhibition of thrombin, as seen from the decrease in amidolytic activity. The inhibitory activity of the peptide was explained in the light of micelle formation.     

2种地龙饮片不同提取法体外抗凝活性对比研究

目的 研究酒制对地龙体外抗凝活性的影响，为地龙临床应用提供科学依据。方法 分别采用传统水提法和仿生酶解提取法对生品地龙、酒制地龙进行提取，以活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）和抗凝血酶活力为指标进行抗凝活性测定，并采用BCA蛋白测定法测定可溶性蛋白、多肽含量。结果 采用水提取法时，PT和抗凝血酶滴定法均显示酒地龙与生地龙抗凝血活性相当，TT测定结果显示酒地龙抗凝血活性强于生地龙，APTT测定结果则显示地龙具有促凝血活性，且在一定范围内，浓度越高，促凝效果越强，蛋白、多肽含量为酒地龙大于生地龙；采用仿生酶解提取法时，APTT和PT测定结果显示酒地龙的抗凝血活性强于生地龙，并且蛋白、多肽含量测定结果显示酒地龙要多于生地龙，但TT和抗凝血酶滴定法并未比较出生品与酒制品之间的差异。结论 与传统水提法相比，仿生酶解提取法能更多地提取出蛋白多肽类成分，仿生酶解提取液具有更强的抗凝血活性，2种提取法均显示地龙酒制有利于可溶性蛋白、多肽的溶出，能增强体外抗凝血活性。     

蓝贻贝抗凝肽的合成及活性初步研究Δ

目的采用多肽固相合成法合成蓝贻贝抗凝肽MEAP(Blue mussel Mytilus edulis anticoagulant peptide),初步研究其抗凝活性。方法 以2-CTC树脂为载体, Fmoc保护氨基酸为原料,按照蓝贻贝抗凝肽的序列从C端向N端逐步偶联氨基酸,裂解后得到粗肽,经半制备液相纯化后测定精肽的凝血酶时间(TT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)。结果 合成的蓝贻贝抗凝肽粗品的纯度为65.5%,经半制备纯化后的精肽纯度为95.5%;抗凝活性实验显示APTT、TT具有显著的延时作用(P<0.01)。结论 固相合成的蓝贻贝抗凝肽具有抗凝活性。     

萱藻多糖的制备及抗凝血抗血栓活性研究

目的制备萱藻多糖并对家兔体外凝血及小鼠体内血栓形成的抑制作用进行研究。方法采用热水浸提-乙醇沉淀法制备萱藻多糖;检测家兔心脏动脉血活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)。以角叉菜胶诱导小鼠尾部血栓模型,检测萱藻多糖体内抗血栓作用。结果萱藻多糖可显著延长家兔血浆APTT、PT和TT;对角叉菜胶诱导的小鼠尾部血栓具有显著的抑制作用(P<0.01)。结论萱藻多糖具有抗凝和抑制实验性血栓形成的作用。     

中药海藻硫酸喹诺糖甘油酯的凝血活性研究

目的 探讨中药海藻羊栖菜(Sargassum fusiforme)中的硫酸喹诺糖基二酰基甘油酯(SQDG)对凝血作用的影响,初步探讨SQDG促凝血作用途径。方法 采用断尾法评价SQDG对小鼠出血时间的影响,利用玻片法评价SQDG对小鼠凝血时间的影响;血凝仪法检测SQDG对活化部分凝血活酶时间APTT、凝血酶原时间PT、凝血酶时间TT的影响。结果 SQDG的出血时间、凝血时间比空白对照组分别缩短了28.96%、52.92%. SQDG可以显著缩短TT 40.42%,但对APTT和PT没有影响。结论 SQDG具有促凝血作用,可能是在凝血过程的纤维蛋白形成阶段发挥作用的。