白藜芦醇对人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO生长抑制和凋亡的影响

目的观察白藜芦醇（Res）对人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO生长抑制和凋亡的影响,探讨其在抑制乳腺癌骨转移中的应用价值。方法将0、12.5、50、100、200μmo/L的Res分别与MDA-MB-231BO细胞作用24、48、72 h;用CCK-8法检测MDA-MB-231BO细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期并检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞形态。结果随Res浓度的增加及作用时间的延长,MDA-MB-231BO细胞的生长抑制率逐渐升高,S期细胞逐渐增多。Res浓度为200μmol/L、作用48 h,MDA-MB-231BO生长抑制率为82.17%±5.37%、早期凋亡率为4.48%±1.23%、晚期凋亡率为9.48%±2.30%,荧光显微镜下观察用药组随着Res浓度的增加,凋亡细胞逐渐增多。结论Res能抑制人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO细胞增殖,使MDA-MB-231BO细胞阻滞于S期,并可诱导该细胞凋亡。     

丹皮酚对人乳腺导管癌细胞MDA-MB-435增殖的影响

目的 观察丹皮酚对人乳腺癌细胞MDA-MB-435增殖的影响及其抑制机制.方法 应用MTT法观察丹皮酚对MDA-MB-435细胞的细胞毒作用；应用苏木精-伊红(HE)染色观察丹皮酚对细胞形态学的影响；流式细胞仪检测丹皮酚处理MDA-MB-435细胞后细胞周期的变化.结果 丹皮酚作用于MDA-MB-435细胞的IC50为60 mg/L;60 mg/L的丹皮酚作用于MDA-MB-435细胞24、48 h后,细胞生长受到不同程度的抑制,出现细胞变圆,体积缩小,胞浆起泡,部分细胞浮起,胞膜皱缩,核深染等形态学改变.肿瘤细胞周期在G0/G1期百分数增加,S期和G2/M期百分数减少,出现Sub-G1期凋亡峰,百分率分别为12.4％和23.7％.结论 丹皮酚通过影响MDA-MB-435细胞周期和诱导凋亡而抑制MDA-MB-435增殖.     

pEgr1-AIF△1～480质粒联合电离辐射对人乳腺癌MDA-MB-231细胞周期及凋亡的作用

目的通过检测转染pEgr1-AIF△1～480质粒的人乳腺癌MDA-MB-231细胞经电离辐射后细胞周期及凋亡变化,探讨辐射诱导细胞周期进程及凋亡变化间的关系。方法实验分为正常对照组、pcDNA3.1组、pEgr1-AIF△1～480组、5 Gy组和pEgr1-AIF△1～480+5 Gy组。质粒转染MDA-MB-231细胞后行5 Gy照射,分别利用PI单染和AnnexinⅤ/PI双染细胞,流式细胞仪检测各期细胞百分比和凋亡百分比变化。结果 MDA-MB-231细胞经质粒转染和5 Gy X射线照射后,与正常对照组比较,pcDNA3.1组和pEgr1-AIF△1～480组G0/G1期、S期、G2/M期、早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡细胞百分比均无显著变化;5 Gy组和pEgr1-AIF△1～480+5 Gy组G0/G1期细胞百分比显著降低(P<0.01),S期和G2/M期细胞百分比显著升高(P<0.01),早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡细胞百分比也均显著升高(P<0.01);且与5 Gy组比较,pEgr1-AIF△1～480+5 Gy组S期、早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡细胞百分比均显著升高(P<0.01)。结论电离辐射能诱导MDA-MB-231细胞发生S相延迟、G2/M期阻滞和凋亡增加,且pEgr1-AIF△1～480质粒对S相延迟和凋亡具有增强作用。     

姜黄素对乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖、侵袭的影响及其机制探讨

目的观察姜黄素对雌激素受体阳性（ER＋）乳腺癌细胞MCF-7和ER-乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7/MDA-MB-231随机分为四组,姜黄素高、中、低剂量组（姜黄素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组）分别加入5、10、20μg/ml的姜黄素,对照组不加。MTT法检测细胞的增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,通过Boyden小室观察细胞侵袭力,RT-PCR法检测细胞中的MMP-9 mRNA。结果与对照组相比,姜黄素各剂量组细胞增殖下降,G0/G1期及S期细胞比例减少,而G2/M期细胞比例显著增加,细胞侵袭指数降低,细胞中的MMP-9 mRNA表达下降,P均〈0.05。结论姜黄素能抑制MCF-7/MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭作用,与其降低MMP-9基因表达有关。     

牛磺酸对离体肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的　观察牛磺酸对肝星状细胞增殖及凋亡的影响 ,并探讨其作用的可能机制。方法　用噻唑蓝 (MTT)法检测细胞增殖 ,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡 ,丫啶噔活体染色观察细胞凋亡形态 ,免疫细胞化学结合计算机图像分析系统检测c jun、c fos表达。 结果　在 5～ 5 0mmol/L浓度范围内 ,牛磺酸能剂量依赖性地抑制肝星状细胞增殖 ,可使G0 /G1期细胞增多 ,S期细胞减少 ,并能明显抑制c jun、c fos的表达 (P <0 .0 1)。此外 ,牛磺酸尚可抑制血小板源生长因子BB对肝星状细胞的促增殖作用 ,而牛磺酸对肝星状细胞凋亡无诱导作用。结论　牛磺酸可显著抑制肝星状细胞增殖 ,使肝星状细胞阻滞于G0 ～G1期 ;牛磺酸对肝星状细胞增殖的抑制作用与其抑制c jun、c fos的表达有关 ;牛磺酸不能诱导肝星状细胞凋亡。     

苦参碱对白血病KG1a细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察苦参碱对人急性髓白血病细胞株KG1a体外增殖抑制和凋亡的影响.方法 CCK-8法和台盼蓝拒染色法检测苦参碱对KG1a细胞增殖抑制作用和细胞存活率;甲基纤维素培养体系分析细胞克隆形成能力;流式细胞仪法检测作用前后KG1a细胞的凋亡率及细胞周期变化.结果 苦参碱能够抑制KG1a细胞增殖,随着药物浓度增大和作用时间延长,抑制率逐渐升高、存活率逐渐下降;作用后细胞克隆形成率明显低于对照组(P＜0.05);各浓度药物组均能诱导KG1a细胞凋亡;苦参碱作用后细胞大部分被阻于Go/G1期.结论 苦参碱能抑制KG1a细胞的增殖,改变其周期,诱导其凋亡.     

丹皮酚对人大肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制

目的:探讨丹皮酚(paeonol, Pae)对人大肠癌HT-29细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用及可能的作用机制. 方法:应用MTT法、荧光显微镜及透射电镜技术、TUNEL法和流式细胞仪技术观察不同浓度的Pae对HT-29细胞增殖的抑制及凋亡的诱导作用; 应用免疫细胞化学技术检测用药前后凋亡相关基因Bcl-2, Bax及P53表达的变化. 结果: HT-29细胞经Pae(浓度范围7.81-250 mg/L)作用后细胞生长明显受到抑制, 呈明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系; 荧光显微镜及透射电镜观察到Pae作用后HT-29细胞出现典型的细胞凋亡形态; Pae在15.63, 62.5, 250 mg/L 3种浓度下作用48 h均可诱导HT-29细胞凋亡, TUNEL法显示凋亡指数与Pae浓度呈正相依赖关系; 流式细胞仪技术检测其凋亡率分别为7.6%, 16.2%和34.5%, 也有明显的剂量效应关系, 同时Pae使细胞周期分布发生明显变化, 表现为S期细胞比例上升, G0/G1期和G2/M期细胞比例下降; 免疫细胞化学结果显示Pae作用后HT-29细胞Bcl-2及P53蛋白表达显著降低, Bax蛋白表达无显著改变. 结论:Pae能抑制HT-29细胞增殖并诱导其凋亡, 呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系. 其作用可能与影响癌细胞的细胞周期、下调Bcl-2/Bax的比例及P53蛋白的表达有关.     

Annexin a2对人乳腺癌MDA-MB-231增殖的影响及分子机制

目的研究Annexin a2的表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、细胞周期分布和克隆形成能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法采用小干扰RNA（siRNA）技术下调人乳腺癌细胞中Annexin a2基因的表达,利用MTT比色法、流式细胞术、平板克隆形成实验观察Annexin a2表达水平下降后乳腺癌细胞增殖、周期分布和克隆形成能力的变化;利用免疫共沉淀和免疫荧光分析在MDA-MB-231细胞中与Annexin a2相互作用的蛋白。结果 Western blot证实siRNA干扰后MDA-MB-231细胞中Annexin a2蛋白表达水平明显下降;同时细胞增殖和克隆形成能力显著下降,细胞G0/G1期比例增高,G2/M和S期比例下降;免疫共沉淀发现Annexin a2与信号转导和转录激活因子3（STAT3）存在相互作用。结论 Annexin a2蛋白水平下降可以明显抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和克隆形成能力,Annexin a2与STAT3相互作用有可能参与乳腺癌细胞的增殖调节。     

丁酸钠对人胃癌MKN-28细胞增殖的抑制作用及其机制

目的 观察脱乙酰化酶抑制剂丁酸钠对人胃癌MKN-28细胞增殖的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 MTT法观察丁酸钠对人胃癌MKN-28细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;RT-PCR检测丁酸钠作用前后p21WAF1 mRNA的表达.结果 1.0、2.5、5.0 mmol/L丁酸钠作用24、48、72 h均可抑制 MKN-28细胞增殖,其效果具有时间、剂量依赖性(P＜0.05);丁酸钠1.0、2.5、5.0 mmol/L处理72 h后,MKN-28细胞G0/G1期细胞数量显著增加,S期细胞数量显著降低(P＜0.05);细胞凋亡率分别为13.7%±0.8%、20.8%±2.4%、33.6%±2.6%,与对照组2.8%±0.4%相比P均＜0.05;与对照组比较,丁酸钠处理后p21WAF1 转录水平上调.结论 丁酸钠可显著抑制人胃癌MKN-28细胞的生长,其可能的机制是通过上调p21WAF1基因的表达,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期.     

阿奇霉素诱导淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡作用的研究

目的：研究阿奇霉素诱导淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡作用,及其相关的凋亡蛋白和细胞周期的变化,为临床治疗淋巴细胞白血病提供新的研究思路。方法：应用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡并用流式细胞术进行细胞周期分析,MTT法检测阿奇霉素对Jurkat细胞的增殖抑制作用,利用West-ern-blotting检测凋亡途径相关蛋白的表达。结果：用阿奇霉素处理Jurkat细胞48h后300mg/L剂量组早期凋亡率显著增高达到（88.0&#177;3.3）%,而25mg/L剂量组为（11.5&#177;2.7）%,与对照组（10.6%&#177;1.8）%无明显差异。MTT法检测结果IC50值为88.4mg/L,200mg/L抑制率达到89.27%。细胞周期显示150mg/L时G1期细胞增加,G2期和S期细胞下降。Western-blotting结果表明Bcl-2蛋白高表达,处理前后无明显变化,而Bax蛋白表达随药物浓度提高而上升,活化的Caspase3在100mg/L表达最高。结论：阿奇霉素可以有效的诱导Jurkat细胞凋亡并呈明显的浓度依赖性,其凋亡途径可能是通过Bax蛋白表达上升诱导下游效应分子Caspase3活化实现。细胞增殖抑制试验表明200mg/L以上时细胞增殖明显受抑制,细胞周期分析提示细胞增殖阻滞在了G1期。     

锦灯笼体外抗肺癌作用

目的探讨锦灯笼对人肺腺癌细胞株(SPC-A-1)的增殖抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法应用MTT法、流式细胞术检测不同浓度的锦灯笼对SPC-A-1细胞周期增殖及凋亡的影响。结果锦灯笼对SPC-A-1有明显的生长抑制作用,且呈剂量-时间依赖性,最大抑制率可达79.9%。锦灯笼可阻滞SPC-A-1细胞的细胞周期,使G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导SPC-A-1细胞的凋亡,凋亡率最高可达35.5%。结论锦灯笼抑制SPC-A-1细胞生长,其抑制作用可能是通过锦灯笼使细胞周期抑制于G1/G0期和诱导细胞凋亡而实现的。     

丹参素对胃癌MGC803细胞周期的影响及凋亡诱导作用

目的研究丹参素的体外抗肿瘤细胞增殖作用及其分子机制。方法 MTT法检测丹参素对人肿瘤细胞的抗增殖作用,流式细胞术检测细胞周期分布的改变及细胞凋亡,Western blot检测细胞周期素CyclinB1蛋白的表达,比色法测定Caspase-3和Caspase-6的活性。结果丹参素可诱导MGC803细胞出现G2/M期阻滞并诱导细胞凋亡。细胞中CyclinB1蛋白表达下调,Caspase-3和Caspase-6的活性显著升高。结论丹参素具有抗肿瘤细胞增殖作用,通过抑制细胞周期素CyclinB1表达诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。     

维生素C和维生素K3联合诱导肝癌细胞Autoschizis的探讨

目的:探讨维生素C和维生素K3联合对诱导人肝癌细胞的Autoschizis现象.方法:采用体外培养技术,MTT法观察细胞生长抑制作用;普通光学显微镜、透射电镜及激光扫描共焦显微镜下分别观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布.结果:当维生索C(100、250、400、500 μmol/L),维生素K3(2、5、8、10μmol/L)单独作用时,对肝癌细胞的生长影响并不明显(P＞0.05),而维生采C和维生素K3以生理剂量联合后,能显著抑制肝癌细胞Hep G2的生长.维生素C和维生素K3作用于细胞后,可看到较为典型细胞凋亡的形态学变化:细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片断化,空泡形成和凋亡小体等.流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰",表现为细胞周期特异性,作用72 h后,与对照组比较,C0/G1期细胞上升,S期细胞下降,细胞周期阻滞于C0/G1期.结论:维生素C和维生素K3抑制肝癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用明显,而从形态中未观察到Autoschizis特殊形式.维生素C和维生素K3可通过诱导肝癌细胞凋亡,而具有治疗肝癌的潜在价值.     

硒蛋氨酸诱导食管癌细胞株凋亡的实验研究

目的：探讨硒蛋氨酸对食管癌细胞系EC 9706凋亡的影响。方法：采用MTT比色法，细胞生长曲线描绘观察硒蛋氨酸对食管癌细胞系EC 9706增殖的影响。采用流式细胞仪观察硒蛋氨酸对EC 9706细胞诱导其凋亡的作用及对细胞周期的影响。琼脂糖凝胶电泳法检测DNA ladder。结果：硒蛋氨酸呈时间、剂量依赖性方式抑制EC 9706细胞增殖，改变细胞周期分布，增加G0／G1期细胞比例，诱导细胞凋亡。结论：硒蛋氨酸可能通过影响细胞周期分布和诱导细胞凋亡，从而抑制EC 9706细胞增殖。硒蛋氨酸可能是预防和治疗食管癌的一种新制剂。     

靶向survivin的RNAi联合X线照射对肺腺癌A549细胞周期、凋亡及增殖的影响

目的 构建靶向生存素(survivin)基因的RNA干扰(RNAi)载体,观察其联合X射线照射对肺腺癌A549细胞周期、凋亡及增殖影响.方法 根据GenBank中survivin的cDNA序列设计干扰序列,构建干扰survivin的重组干扰质粒pGenesil2-survivin.酶切、测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,联合5 Gy射线照射,应用PI单染、流式细胞仪检测细胞周期与凋亡变化,MTT检测细胞增殖的变化.结果 酶切和测序结果显示,载体构建正确;转染空载体pGenesil2对细胞G0/G1期、S期及凋亡,增殖能力影响不大,降低了G2/M期(P＜0.05);而干扰质粒pGenesil2-survivin能延长G0/G1期,缩短S期,诱导细胞凋亡增加,降低细胞增殖能力(P＜0.05);5 Gy照射对细胞周期影响不大,增加细胞凋亡,降低增殖能力(P＜0.05);转染pGenesil2-survivin后,进行5 Gy X射线照射,延长G0/G1期,缩短S期,诱导细胞凋亡增加,降低细胞增殖能力(P＜0.05,P＜0.01).结论 靶向survivin的RNAi可延长G0/G1期,缩短S期,增加细胞凋亡,降低细胞增殖能力,X射线照射能够增强该质粒的作用.     

青蒿素对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :观察青蒿素 (artemisinin ,Art)对体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞 (VSMC)的增殖、DNA合成及细胞周期的影响 ,探讨作用机制。方法 :体外培养大鼠主动脉VSMC ,分为不同浓度的Art组及对照组。观察细胞生长曲线 ;四甲基偶氮唑盐微量酶反应 (MTT)法检测细胞活性 ;3H 胸腺嘧啶脱氧核苷(3H- TdR)掺入法观察其对DNA合成的影响 ;通过HE染色、DNA梯带检测和流式细胞术观察细胞的凋亡并测定细胞周期。结果 :与对照组相比 ,各浓度Art组VSMC计数不同程度减少 ,3H- TdR掺入率降低 ,细胞增殖受抑制 ,VSMC凋亡增加 ,并呈浓度依赖性 ;Art诱导细胞凋亡 ;使细胞周期阻滞于G0 / G1 期。结论 :Art对体外培养VSMC的增殖有抑制作用 ,可能通过抑制细胞DNA合成 ,诱导细胞凋亡及干扰细胞周期等途径发挥作用     

中药复方“益肾固冲汤”对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖及凋亡的影响

目的探讨益肾固冲汤抑制乳腺癌细胞增殖,促进其凋亡的作用和抗癌分子的机制。方法体外培养人乳腺细胞株(MCF)-7细胞利用MTT法观察益肾固冲汤对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测益肾固冲汤对人乳腺癌MCF-7凋亡及细胞周期的影响。结果益肾固冲汤对人乳腺癌MCF-7细胞增殖具有抑制作用,都具有明显的时-效和量-效关系。人乳腺癌细胞MCF-7细胞经过不同浓度的益肾固冲汤处理24、48、72 h后,各组均呈现不同程度的凋亡,且凋亡率随着计量的增加、时间的延长而逐渐增加。益肾固冲汤在40μg/ml量、作用72 h时具有统计学差异,细胞凋亡率最高,达17.93%,与正常对照组相比,G0/G1期细胞比率随作用时间延长在逐渐减少,G2/M期的细胞比率随作用时间延长在逐渐增加,细胞生长周期较明显停滞在G2/M期,具有明显时间依赖性。结论益肾固冲汤可以抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,具有明显的量效和时效关系。细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用与G2/M期有关。     

奥沙利铂下调survivin表达抑制人结肠癌细胞株HCT116增殖并诱导其凋亡

目的:观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人结肠癌细胞株HCT116增殖及凋亡的影响,探讨其作用机制.方法:试验分空白对照组、不同浓度奥沙利铂(15、30、60或90 μM)处理组;向培养基中加入不同浓度奥沙利铂,分别在24、48、72 h取培养的HCT 116细胞;MTT法检测奥沙利铂对细胞增殖的作用;流式细胞术分析细胞周期的分布及凋亡率;Western blot和Real-time PCR检测survivin表达水平.结果:60或90 μM奥沙利铂作用48 h后引起HCT 116细胞G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞由51.5%增加到65%,细胞增殖减少;90 μM奥沙利铂作用72 h时,正常对照相比凋亡率增加了近8倍;有明显的survivin表达下调伴随细胞凋亡.结论:奥沙利铂抑制HCT 116细胞增殖、诱导其凋亡并且呈剂量依赖性,其机制可能与下调survivin表达有关.     

白藜芦醇对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的 探讨白藜芦醇对白血病K562细胞生长的影响及相关作用机制.方法 用不同浓度白藜芦醇作用于K562细胞,CCK-8法观察白藜芦醇对K562细胞生长增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染法观察白藜芦醇对K562细胞凋亡的影响,PI染色法观察白藜芦醇对K562细胞周期的影响,Western blot法检测K562细胞中的Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Cyclin D1蛋白.结果 白藜芦醇作用后的K562细胞的增殖被抑制并且凋亡增加,呈时间-剂量依赖性;同时,凋亡相关分子Bcl-2、Bcl-xl表达下调,Bax表达上调;白藜芦醇作用K562细胞后,G1期细胞增多,S期细胞减少,细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达下降.结论 白藜芦醇可抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与下调细胞内Bcl-2、Bcl-xl、Cyclin D1表达并上调Bax的表达有关.     

化积汤对肝星状细胞增殖与凋亡的影响

体外培养肝星状细胞株HSC-T6，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡的改变。发现化积扬可呈剂量依赖性抑制肝星状细胞增殖；化积汤培养后。细胞周期分析发现S期细胞减少，G2／M期细胞显著增加。提示化积汤可以显著抑制肝星状细胞增殖并诱导其凋亡。