体外不同动物及人血浆中羧酸酯酶与梭曼结合特点比较

羧酸酯酶 (ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ ,ＣａＥ)是一组能催化水解羧酸酯生成羧酸和乙醇的同工酶 .血浆中ＣａＥ含量存在种属差异 .啮齿类动物血浆中ＣａＥ含量最高 ,灵长类血浆中ＣａＥ含量最低 .目前国外认为动物对梭曼解毒能力的高低 ,在很大程度上与血液中ＣａＥ活性的高低密切相关 .然而 ,ＣａＥ能否充分发挥其解毒作用 ,除与酶自身活性高低有关外 ,还取决于ＣａＥ与梭曼亲和力的强弱 .为了解种属间ＣａＥ在结合梭曼时 ,是否存在不同的作用特点 ,本文在体外研究了梭曼与各种属血浆中ＣａＥ抑制的量 效关系 ,并首次发现人 ,犬血…     

Distribution of the scavenger esterases against organophosphorus compounds in human tissues

测定了人体各种组织中与有机磷化合物代谢有关的二异丙基氟磷酸酯酶（ＤＦＰａｓｅ），对氧磷酶，乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ），丁酰胆碱酯酶（ＢＣｈＥ）及羧基酯酶（ＣａＥ）的活性水平．结果表明：在肾脏，脾脏和肝脏中含有丰富的ＤＦＰａｓｅ，可催化水解梭曼．其他组织该酶活性均很低．除人血清外，其他组织均未测到对氧磷酶活性．ＡＣｈＥ和ＢＣｈＥ主要分布于中脑，桥脑，延脑，纹状体及丘脑等脑干区域，另外肝脏中ＢＣｈＥ的比活性也较高．ＣａＥ主要分布于肝脏组织中，肺脏中也有较高的ＣａＥ活性．以上结果对了解有机磷化合物在人体中的中毒及代谢提供了一定的理论基础     

微量电鳐乙酰胆碱酯酶抑制法测定低剂量梭曼浓度

微量电鳐乙酰胆碱酯酶抑制法测定低剂量梭曼浓度刘星，陈起展梭曼是一种能对机体内乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）强烈抑制而产生毒性的有机磷化合物。我们在Ｈａｍ－ｍｏｎｄ［１］等建立的微量ＡＣｈＥ抑制法测定微量有机磷毒剂浓度基础上改进，建立了一种新型的测定方法，其...     

血浆中游离梭曼的电鳐乙酰胆碱酯酶抑制测定法

梭曼是一种对体内乙酰胆碱酯酶 (ＡＣｈＥ)有强烈抑制作用的有机磷化合物。由于梭曼毒性强且在体内降解迅速 ,国外目前主要通过大进样量气相色谱或气 质联用方法来检测[1,2 ] ,其优点是 :(1)灵敏度较高 ,如检测下限可达1 5 ｐｇ/ｍｌ血浆 ;(2 )可以将梭曼的 4个异构体分开 ,以便研究各异构体在体内的动力学过程。不足之处是 :检测设备价格昂贵 ,样本的预处理过程比较繁琐 ,检测时间较长 ,不适合临床上对毒剂浓度的快速检测。基于ＡＣｈＥ活性抑制测定有机磷毒剂浓度的文献也有报道 ,优点是灵敏、简便[3 ] 。然而 ,该法在检测血浆中残留梭曼…     

胺甲硫磷对大鼠毒作用机理初探：胺甲硫磷性染毒后血,脑,肝等组织…

本实验研究了胺甲硫磷在急性染毒时对大鼠血，脑乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ），脑组织Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶，Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶肝脏微粒体细胞色素Ｐ４５０，苯胺羟比酶及谷胱甘肽转移酶等方面的影响，实验表明，胺甲硫磷在所给剂量范围，不仅抑制血，脑ＡｃｈＥ，而且明显抑制脑Ｎａ＾＋，Ｋ－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶；对肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶也有抑制作用，证明胺甲硫磷在体内毒作用是多途径。     

柳珊瑚酸对乙酰胆碱酯酶的抑制作用

目的：研究柳珊瑚酸（ｓｕｂｅｒｏｇｏｒｇｉｎ，Ｓｕｂ）抗乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）作用的选择性，可逆性和动力学。方法：制备大鼠和人红细胞膜，大鼠脑和蚯蚓背肌提取液作为ＡＣｈＥ组织样品，人血浆为丁酰胆碱酯酶（ＢｕＣｈＥ）样品；比色法测酶活力，结果：Ｓｕｂ明显抑制上述样品的ＡＣｈＥ活力，其Ｐ／５０各为４．０３，４．９２，３．８２和４．６７，对ＢｕＣｈＥ无抑制作用，Ｓｕｂ与ＡＣｈＥ一起孵温后，酶活力性，３     

模拟高原梭曼中毒大鼠脑M-AChR的变化

梭曼,抑制胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）,造成体内乙酰胆碱蓄积,是其主要的中毒机制。高原条件下梭曼毒性较平原明显升高,其胆碱能机制却未见报道。作者利用ＤＴＮＢ及放射性配基结合法,系统分析了模拟高原缺氧大鼠皮层、海马及纹状体在不同时相点（８,２４,７２ｈ）胆碱酯酶和毒蕈碱样乙酰胆碱受体（ＭＡＣｈＲ）的变化,并在此基础上研究了模拟高原梭曼中毒脑组织ＡＣｈＥ和ＭＡＣｈＲ的变化,指在探讨ＭＡＣｈＲ在高原缺氧脑损伤中的作用及高原条件下神经性毒剂毒性升高的机制,为缺氧相关疾病和高原神经毒中毒的预防及救治提供理论…     

体外大鼠血液对梭曼的解毒作用

梭曼,作为难防难治的神经性毒剂,其解毒机理一直作为防化界的研究热点而倍受关注。梭曼主要经呼吸道中毒,也可以通过皮肤中毒,但都必须经过血液循环和肺循环才能运送到脑、膈肌等重要靶器官,而在此运送过程中绝大部分梭曼已经被降解成为无毒性的代谢产物,真正能够到达靶器官并与功能性ＡＣｈＥ结合的梭曼量仅有极小一部分。那么,血液作为梭曼的首过解毒器官,为了解它在梭曼首过解毒过程中（是指梭曼在进入机体之后并在到达靶器官之前机体对其解毒作用的大小）到底有多大的解毒能力,以及血液中主要解毒酶如ＣａＥ、ＢｕＣｈＥ、ＡＣ…     

胺甲硫磷对大鼠毒作用机理初探──胺甲硫磷急性染毒后血，脑，肝等组织生化改变

本实验研究了胺甲硫磷在急性染毒时对大鼠血，脑乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ），脑组织Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶，Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶肝脏微粒体细胞色素Ｐ４５０，苯胺羟化酶及谷胱甘肽转移酶等方面的影响，实验表明，胺甲硫磷在所给剂量范围，不仅抑制血，脑ＡｃｈＥ，而且明显抑制脑Ｎａ＋，Ｋ－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶；对肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶也有抑制作用，证明胺甲硫磷在体内毒作用是多途径。     

抗电鳐乙酰胆碱酯酶单克隆抗体2E6的交叉免疫反应性

用乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）偶联的ＡＨＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ免疫亲和层折法提纯了抗丁氏汉结电线ＡＣｈＥ单克隆抗体２Ｅ６（ＩｇＧ１）．用配基亲和层忻法纯化了人脑，人红细胞，牛脑．牛红细胞，比目鱼肌肉及石纹电线电器官的ＡＣｈＥ．用酶抗原免疫测定法及固相免疫测定法观察了２Ｅ６与这些脊椎动物ＡＣｈＥ的交叉免疫反应性．结果显示２Ｅ６与石纹电鳐，人脑．牛脑及比目鱼肌肉ＡＣｈＥ有明显的交叉免疫反应性．说明２Ｅ６针对的抗原决定簇在进化中高度保守．２Ｅ６与人和牛红细胞ＡＣｈＥ及人血清丁酰胆碱酯酶无交叉免疫反应性．２Ｅ６与电鳐ＡＣｈＥ结合后严重地抑制酶对硫代乙酰担碱的催化作用．但２Ｅ６对哺乳类ＡＣｈＥ无抑制作用．推测２Ｅ６针对的抗原决定簇在电鳐ＡＣｈＥ分子上靠近其活性中心．而在其它几个酶分子上则远离活性中心．     

脊椎动物乙酰胆碱酯酶的多糖抗原决定簇及其抑制性单克隆抗体

抗丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的抑制性单克隆抗体ＩＨ１１（ＩｇＭ），丁氏双鳍电鳐，石纹电线电器官，比目鱼肌肉，大鼠脑，牛脑，人脑，牛红细胞及人红细胞ＡＣｂＥ均以不同的亲和层析法提纯。用酶抗原免疫测定法及酶联免疫吸附测定法检测了１Ｈ１１与上述脊椎动物的ＡＣｈＥ的交叉免疫反应性．结果表明，１Ｈ１１可与石纹电绥，比目鱼肌肉，大鼠脑、牛脑及人脑ＡＣｈＥ有交叉免疫反应。显示了１Ｈ１１所针对的抗原决定簇在进化中的高度保守性。１Ｈ１１与人，牛红细胞ＡＣｈＥ及人丁酰胆碱酯酶（ＢＣｈＥ）无交叉免疫反应性。提示哺乳类脑ＡＣｈＥ与红细胞ＡＣｈＥ及人ＢＣｈＥ有不同的抗原决定簇。１Ｈ１１对电鳐及电鳗ＡＣｈＥ活性产生明显抑制。但对其它几个脊椎动物的ＡＣｈＥ活性无抑制．表明１Ｈ１１所针对的抗原决定簇在电鳐ＡＣｈＥ的三级结构中靠近其活性中心，而在其它脊椎动物的ＡＣｈＥ中刚远离其活性中心．ＡＣｈＥ阴离子部位抑制剂依酚氟铵不影响抗原抗体反应，表明１Ｈ１１不结合在阴离子部位。Ｎ－糖苷酶Ｆ处理使ＡＣｂＥ去糖基化后。１Ｈ１１不再能与ＡＣｈＥ结合，表明至少１Ｈ１１所识别的抗原决定簇的主要部分是Ｎ－多醣．抑制性单克隆抗体１Ｈ１１对脑ＡＣｈ?     

模拟高原梭曼中毒大鼠脑脂肪酸的变化

脑是梭曼攻击的重要靶器官,高原缺氧可导致脑水肿,二者对脑组织的复合效应尚不清楚。研究模拟高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠脑组织游离脂肪酸（ＦＦＡ）浓度和脑含水量变化规律。方法：于低压氧仓内复制大鼠梭曼中毒模型,于冰上分离左右两脑半球,一侧脑组织取脑湿重,烘干后称取干重,计算脑含水量。另一侧脑组织制备匀浆,以生化法分别测定ＡＣｈＥ活性和ＦＦＡ。结果：高原缺氧条件下,０８和１０９ＬＤ５０梭曼中毒大鼠脑组织ＡＣｈＥ活性呈持续严重抑制,中毒后３０ｍｉｎ,两组动物脑ＡＣｈＥ活性分别为对照组的４０％和３０％。…     

肟类化合物在急性有机磷中毒治疗中解毒作用的研究进展

50年代肟类化合物的出现给急性有机磷中毒(ａｃｕｔｅｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｐｏｉｓｏｎｉｎｇ ,ＡＯＰＰ)的治疗提供了重要手段 ,形成乙酰胆碱酯酶 (ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ ,ＡＣｈＥ)复能剂 (肟类 )、抗毒蕈碱样受体药 (阿托品 )和抗痉挛药 (安定 )联合用药的常规ＡＯＰＰ治疗方案 ,也取得良好的治疗效果。其中选择合适的肟类化合物是取得良好临床治疗效果的重要方面。几十年来 ,为了寻找广谱、高效、低毒的ＡＣｈＥ复能剂 ,研究者从体内 (体外 )实验研究到临床观察对肟类化合物在ＡＯＰＰ中的治疗作用进行…     

抗电鳐乙酰胆碱酯酶单克隆抗体2E6的交叉免疫反应性^1

用乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）偶联的ＡＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ免疫亲和层析法提纯了抗丁氏双鳍电鳐ＡＣｈＥ单克隆抗体２Ｅ６（ＩｇＧ１）。用配基亲和层析法纯化了人脑，人红细胞，牛脑，牛红细胞，比目鱼肌肉及石纹电鳐电器官的ＡＣｈＥ。用酶抗原免疫测定法及固相免疫测定法观察了２Ｅ６与这些脊椎动物ＡＣｈＥ的交叉免疫反应性。结果显示２Ｅ６与石纹电鳐，人脑，牛脑及比目鱼肌肉ＡＣｈＥ有明显的交叉免疫反应性，说明２Ｅ６     

Anionic subsite of active center of Torpedo acetylcholinesterase constructs a part of its conformati

目的：研究电鳐乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）结构功能关系，探讨ＡＣｈＥ负矩部位是否是其构象决定簇的一个组成部分．方法：用ＥＬＩＳＡ及酶抑制实验观察ＡＣｈＥ负矩部位探针２ＰＡＭ对ＡＣｈＥ与其ＭｃＡｂ３Ｆ３之间的免疫反应性的影响．结果：ＭｃＡｂ３Ｆ３不能与２ＰＡＭ及ＡＣｈＥ的复合物反应；２ＰＡＭ浓度依赖性地降低ＭｃＡｂ３Ｆ３对ＡＣｈＥ的抑制率；但不能解离ＡＣｈＥ与３Ｆ３构成的抗原抗体复合物．结论：电鳐ＡＣｈＥ活性中心负矩部位构成其活性中心构象抗原决定簇的一部分．     

模拟高原缺氧复合梭曼中毒脑损伤特点及其救治

梭曼以毒性大、作用快、中毒难防难治而著称,是外军重点装备的化学战剂之一。脑是对梭曼极为敏感的重要靶器官。梭曼进入脑内迅速与胆碱酯酶（ＣｈＥ）结合并抑制其活性,使乙酰胆碱（ＡＣｈ）在突触间隙大量蓄积,从而破坏神经中枢正常功能,导致一系列生理功能的改变［１,２］。脑也是对缺氧极为敏感的器官之一［３］。人员急速进驻高原地区,常因高原缺氧而发生适应不全或高山病,甚至脑水肿,其发生率和严重程度随进驻速度和海拔高度的增加而增加。国内外对高原缺氧复合梭曼中毒研究报道不多。早期结果业已证实,模拟４０００ｍ高原缺…     

电鳐乙酰胆碱酯酶活性中心负矩部位构成其构象决定族的一部分

目的：研究电鳐乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）结构功能关系，探讨ＡＣｈＥ负矩部位是否是其构象决定簇的一个组成部分。方法：用ＥＬＩＳＡ及酶抑制实验观察ＡＣｈＥ负矩部位探针２－ＰＡＭ对ＡＣｈＥ与其ＭｅＡｂ ３Ｆ３之间的免疫反应性的影响。结果：ＭｃＡｂ３Ｆ３不能与２－ＰＡＭ及ＡＣｈＥ的复合物反应；２－ＰＡＭ浓度依赖性地降低ＭｃＡｂ ３Ｆ３对ＡＣｈＥ的抑制率；但不能解离ＡＣｈＥ与３Ｆ３构成的抗原抗体复合物。结论     

LSCM观察三七总皂甙及其组分对游离钙离子影像变化的影响

用盖玻片或ＭａｔＴｅｋ培养皿培养猪主动脉内皮细胞（ａＥＣ）约１８ｈ后，以荧光探针（ｆｌｕｏ－３／ＡＭ终浓度１０μｍｏｌ·Ｌ－１）负载，当细胞内游离钙离子（Ｃａ２＋）与ｆｌｕｏ－３结合后，通过激光扫描共聚焦显微镜（ＩｎＳＩＧＨＴ－ｐｌｕｓＩＱ型）观察细胞的荧光影像变化。基于三七总皂甙（ｔ－ＰＮＳ）对ａＥＣ所产生的生物活性物质有明显的作用，本拟进一步探索上述药物对ａＥＣ中［Ｃａ２＋］；的影响。实验结果显示：在ＡＴＰ作用后，ｔ－ＰＮＳ可使ａＥＣ内的荧光强度在２０～８０ｓ内急剧升高至峰值。但其组分Ｒｂ１及Ｒｇ１使荧光强度有下降或无明显变化。提示ｔ－ＰＮＳ有使内皮细胞［Ｃａ２＋］；升高的作用。     

强啡肽A（1－17）对大鼠脊髓组织钙调蛋白含量和磷酸二酯酶活性的影响

观察强啡肽Ａ（１－１７）经大鼠蛛网膜下腔注射后对胞内Ｃａ２＋受体钙调蛋白（ＣａＭ）含量及其依赖于Ｃａ２＋／ＣａＭ的磷酸二酯酶（ＰＤＥ）活性的影响。结果表明：强啡肽Ａ（１－１７）１０、２０ｎｍｏｌ给药１０ｍｉｎ可使脊髓组织ＣａＭ含量和ＰＤＥ活性明显下降，呈量效依赖关系，２ｈ后均有不同程度的恢复。选择性ｋ型阿片受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ３０ｎｍｏｌ、兴奋性氨基酸ＮＭＤＡ受体特异性拮抗剂ＡＰＶ１０ｎｍｏｌ可显著对抗强啡肽Ａ（１－１７）２０ｎｍｏｌ降低脊髓组织ＣａＭ含量的作用并完全阻断强啡肽Ａ（１－１７）对ＰＤＥ活性的抑制；Ｌ型Ｃａ２＋通道阻断剂异搏定１００ｎｍｏｌ亦可部分阻断强啡肽Ａ（１－１７）２０ｎｍｏｌ对脊髓组织ＣａＭ含量和ＰＤＥ活性的影响。     

Inhibitory effect of(-),( )clausenamide on acetylcholinesterase in vitro

用Ｅｌｍａｎ比色法测定乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的活性，观察（－），（＋）黄皮酰胺对小鼠脑组织海马，前脑皮层和红细胞膜ＡＣｈＥ活性的影响，以探索药物作用机制并比较左右旋体黄皮酰胺作用的异同．结果表明：（－），（＋）黄皮酰胺对海马和皮层ＡＣｈＥ均有抑制作用，（－）黄皮酰胺对小鼠脑皮层和海马ＡＣｈＥ抑制的ＩＣ５０（９５％可信限）值分别为０．３１（０．２７－０．３６）和０．３３（０．２８－０．３９）ｍｍｏｌ·Ｌ－１；（＋）黄皮酰胺对小鼠脑皮层和海马ＡＣｈＥ抑制的ＩＣ５０（９５％可信限）值分别为０．７１（０．５３－０．９４）和０．７７（０．５５－１．０７）ｍｍｏｌ·Ｌ－１．（－），（＋）黄皮酰胺对红细胞膜ＡＣｈＥ的抑制作用是可逆性的，抑制特点属于竞争与非竞争混合型抑制，（－）黄皮酰胺的Ｋｉ值为０．２６ｍｍｏｌ·Ｌ－１，Ｋｉ′值为１．２０５ｍｍｏｌ·Ｌ－１；（＋）黄皮酰胺Ｋｉ值为０．７２ｍｍｏｌ·Ｌ－１，Ｋｉ′值为１．８５６ｍｍｏｌ·Ｌ－１．提示：（－）黄皮酰胺作用强于（＋）黄皮酰胺．黄皮酰胺的抑制ＡＣｈＥ作用存在手性选择性．