缺氧诱导因子-1α及其下游分子在大鼠肝纤维化组织中的表达

目的观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其下游分子在大鼠肝纤维化组织中的表达情况，分析HIF-1α及其下游分子与肝纤维化程度的关系。方法 用CCl4诱发大鼠肝纤维化模型，建模结束后（实验8周末）根据纤维化程度将模型组分为S2、S3、S4亚组，然后分别应用免疫组织化学和逆转录酶PCR方法检测HIF-1α、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白和HIF-1α、MMP-2 mRNA在大鼠肝纤维化组织中的表达变化。结果 与对照组（S0组）比较。模型组（S3、S3、S4亚组）HIF-1α、MMP-2、VEGF蛋白和HIF-1α、MMP-2 mRNA表达均明显增强（P〈0．01）；HIF-1α、MMP-2、VEGF的表达与肝纤维化程度呈正相关（r值分别为0．923、0．848、0．878，均P〈0．001）；MMP-2、VEGF的表达与HIF-1α也呈正相关（r值分别为0．862、0．993、0．892，均P〈0．001）。结论 HIF-1α可能通过调节MMP-2及VEGF的表达促进了肝纤维化的发展。     

HIF-1α和VEGF在大肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:免疫组化法检测61例大肠癌组织中H IF-1α及VEGF蛋白表达,并与15例正常大肠组织比较。结果:大肠癌组织中H IF-1α和VEGF的阳性表达率分别为54.10%(33/61)和62.30%(38/61),均明显高于正常对照组(P<0.05);两者呈正相关(r=0.505,P<0.05);Dukes分期中的表达存在显著差异(P<0.05);组织学分级中的表达则无差异性(P>0.05)。结论:H IF-1α及VEGF在肿瘤血管生成和转移中起重要作用,联合检测H IF-1α和VEGF可作为判断大肠癌转移潜能和预后的重要指标。     

c-myc通过提高结肠癌细胞LoVo的HIF-1α表达促进血管生成

目的 研究癌基因c-myc对人结肠癌细胞LoVo中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其对血管生成的作用.方法 构建高表达c-myc的质粒pcDNA3.1-c-myc;将构建好的pcDNA3.1-c-myc质粒转染入LoVo细胞系中,通过Western blot检测c-myc在LoVo细胞中的表达情况.应用real-time PCR和Western blot检测常氧和乏氧状态下LoVo细胞系中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA水平及HIF-1α的蛋白水平.应用条件培养液培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察其形成血管的能力.结果 成功构建pcDNA3.1-c-myc质粒;常氧、乏氧状态下转染pcD-NA3.1-c-myc质粒后,LoVo细胞系中HIF-1α的mRNA水平无变化,VEGF的mRNA水平明显升高,HIF-1α蛋白水平明显增高.高表达c-myc的LoVo细胞上清液培养HUVECs细胞后能增强其成管能力.结论 在LoVo细胞系中高表达c-myc,可以促进细胞HIF-1α和其下游的VEGF表达,从而促进血管生成.     

结肠癌患者 HIF-1αVEGF 和 MMP-9表达及临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α）、血管内皮生长因子（ VEGF ）及基质蛋白酶-9（ MMP-9）在结肠癌患者的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学方法检测56例结肠癌组织及40例癌旁组织HIF-1α、VEGF和MMP-9,比较两组阳性率的差别及HIF-1α、VEGF和MMP-9与结肠癌临床病理特征之间有关系。结果：结肠癌组织HIF-1α、VEGF和MMP-9表达阳性率显著高于癌旁组织（P＜0．05）;HIF-1α和MMP-9与淋巴转移、组织学分化及Duke分期显著相关（P＜0．05）;VEGF与淋巴转移、Duke分期相关（P＜0．05）;HIF-1α、VEGF和MMP-9与年龄、性别及肿瘤大小无关（P＞0．05）。结论：HIF-1α、VEGF和MMP-9与结肠癌的发生、发展关系密切,三者参与了结肠癌的淋巴道转移。     

侵袭性垂体腺瘤患者瘤组织中HIF-1α、VEGF和MMP-9表达水平及临床意义

目的 检测侵袭性垂体腺瘤患者瘤组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平,探讨这些因子对临床治疗的意义,旨在为临床治疗提供理论依据。 方法 选取宁波市鄞州人民医院于2013年2月-2016年2月收集的经手术切除的垂体腺瘤组织标本58例,根据病理检测结果将标本分成侵袭组(34例)与非侵袭组(24例)。采用免疫组化Envision二步法检测所有标本中HIF-1α、VEGF和MMP-9蛋白表达情况,并采用SPSS软件对数据进行统计学处理。 结果 侵袭组患者HIF-1α的强阳性表达率及总阳性表达率[47.1%(16/34)、91.2%(31/34)]明显高于非侵袭组[12.5%(3/24)、45.8%(11/24)],P<0.05;侵袭组患者VEGF的强阳性表达率及总阳性表达率[58.8%(20/34)、94.1%(32/34)]明显高于非侵袭组[16.7%(4/24)、58.3%(14/24)](P<0.05);侵袭组患者MMP-9的强阳性表达率及总阳性表达率[55.9%(19/34)、85.3%(29/34)]明显高于非侵袭组[8.3%(2/34)、41.7%(10/24)],P<0.05;经Pearson相关性分析,侵袭组患者HIF-1α与VEGF呈正相关(r=0.940,P<0.05);HIF-1α与MMP-9呈正相关(r=0.412,P<0.05);VEGF与MMP-9呈正相关(r=0.783,P<0.05);非侵袭组患者中三者之间无相关性。 结论 在侵袭性垂体腺癌患者体内HIF-1α、VEGF和MMP-9蛋白表达水平明显升高,其表达可反应患者肿瘤的发生、发展情况,为临床诊断提供相应的依据,并且研究结果提示3种蛋白之间还存在相互促进关系。      

低压缺氧对兔动脉粥样硬化斑块中HIF-1α、VEGF及MMP-9表达的影响

目的观察低压缺氧对兔动脉粥样硬化斑块低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法将日本大耳兔随机分为常氧对照组和低压缺氧组,高胆固醇饮食12周建立兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病变模型后,取主动脉内膜组织分别采用免疫组织化学方法和real-time PCR检测斑块组织中HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白和mRNA表达。结果低压缺氧组高斑块中HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白和mRNA的表达明显升高,与常氧对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低压缺氧能明显升高斑块中HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白和mRNA表达,可降低兔动脉粥样硬化斑块的稳定性。     

缺氧应激对HepG-2增殖活性和HIF-1α、MMP-2表达的影响

目的研究缺氧应激对人肝癌细胞HepG-2增殖和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白-2(MMP-2)表达的影响。方法将缺氧(5%O2、5%CO2、90%N2)和常氧环境中培养的HepG-2细胞,在相差显微镜下观察细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活性;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定常氧组和缺氧4、12、24h组HepG-2细胞HIF-1αmRNA和MMP-2mRNA的表达量;用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定常氧和缺氧12、24h组细胞培养上清MMP-2蛋白含量。结果同时相缺氧组HepG-2细胞增殖活性与常氧组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。常氧下HepG-2细胞不表达HIF-1αmRNA,缺氧4h时HIF-1αmRNA表达量最高,随后下降(P<0.01),但仍高于常氧组;缺氧4h时MMP-2mRNA表达量最高,随后下降,但仍高于常氧组(P<0.01);缺氧组HIF-1αmRNA和MMP-2mRNA呈高度正相关关系。缺氧24h组HepG-2细胞培养上清液中的MMP-2蛋白含量与常氧24h组含量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧应激(5%O2)促进人肝癌细胞HepG-2的增殖作用并上调HIF-1α和MMP-2的表达量。     

HIF-1α、MMP-1和 VEGF-C 在喉鳞癌组织中的表达及其与颈转移的相关性研究

目的：比较声门上型喉鳞状细胞癌与癌旁正常组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达,探讨其与临床病理参数、颈淋巴转移之间的关系以及三者之间的相关性。方法免疫组化 SP 法检测30例声门上型喉鳞状细胞癌及其癌旁正常组织中 HIF-1α、MMP-1和VEGF-C 的表达情况,并对喉癌组织按年龄、T 分期、病理分级、淋巴转移进行分组,探讨三者与各临床病理参数、颈淋巴转移之间的关系。结果喉鳞状细胞癌组织中 HIF-1α、MMP-1、VEGF-C 高表达明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义（P 〈0.05）,在癌组织中,三者表达均与病理分级、TNM 分期有关（ P 〈0.05）,与年龄无关（ P ＆gt;0.05）,三者在淋巴结转移组中的高表达率明显高于未转移组,HIF-1α和 VEGF-C、HIF-1α和 MMP-1、MMP-1和VEGF-C 均呈正相关。结论喉鳞癌中 HIF-1α、MMP-1、VEGF-C 的高表达与颈淋巴转移密切相关,三者可能成为预测喉鳞癌转移和预后的生物学指标。     

HIF-1α、VEGF和MMP-9在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1 α)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床病理关系.方法 应用免疫组织化学PV-9000二步法检测60例子宫内膜样腺癌和30例良性子宫内膜对照组标本中HIF-1α、VEGF和MMP-9的表达,采用x2检验进行分析,用Spearman相关性检验分析3个指标的关联性.结果 HIF-1α、VEGF和MMP-9在子宫内膜样腺癌中的阳性率高于良性子宫内膜对照组(P＜0.05);在淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组:三者表达在子宫内膜样腺癌中呈正相关(P＜0.05).结论 HIF-1α、VEGF和MMP-9均在子宫内膜样腺癌中表达增高且呈正相关,并与肿瘤发展转移联系密切.     

HIF-1α516对人肝癌HepG2细胞侵袭转移能力的影响

目的观察HIF-1α516对人肝癌HepG2细胞侵袭转移能力的影响。方法人肝癌HepG2细胞分为空白组(同步培养,不做任何处理)、对照组(转染siRNA)和siRNA干扰组(转染HIF-1α516 siRNA)。siRNA和HIF-1α516 siRNA通过脂质体转染HepG2,转染18h后Western blot检测HepG2细胞中HIF-1β核蛋白和全细胞蛋白的表达、ELISA法检测细胞培养上清中MMP-2、MMP-9的含量,Transwell小室观察HepG2的转移侵袭能力。结果 HIF-1α516 siRNA能显著降低HepG2细胞HIF-1α516mRNA的表达(降低70.0%)(P<0.01);增强HepG2细胞的侵袭转移能力(增强71.10%)(P<0.01)。HIF-1α516siRNA对全细胞HIF-1β蛋白的表达无影响,但能促进HIF-1β蛋白的核转移(增强64.1%)(P<0.01)。HIF-1α516 siRNA能明显升高HepG2细胞培养上清中MMP-2、MMP-9蛋白表达,分别升高37.72%、55.46%(P<0.01)。结论 HIF-1α516能抑制HepG2的转移侵袭,其机制可能与抑制HIF-1β的核转移有关。     

HIF-1α、MMP-2的表达与膀胱移行细胞癌临床生物学行为的关系

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF—1α）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在膀胱移行细胞癌（BTCC）组织中的表达及其与临床生物学行为之间的关系。方法应用免疫组织化学检测BTCC组织中HIF-1α和MMP-2的蛋白表达，分析其表达与肿瘤部分临床病理特点的关系，并分析二者表达的相关性。结果正常膀胱组织中均未见HIF—1α和MMP-2蛋白表达，膀胱移行细胞癌组织中HIF—lα和MMP-2蛋白的阳性表达率分别为52．63％（30／57）和49．12％（29／57）；HIF—lα阳性表达与肿瘤的临床分期及复发明显相关；MMP-2的阳性表达与肿瘤的病理分级、临床分期显著相关；HIF—lα的表达与MMP-2的表达密切相关。结论H1F—lα及MMP-2在BTCC的侵袭等生物学过程中具有重要的作用，HIF—lα和MMP-2也许可用于临床监控BTCC的进展。     

基质金属蛋白酶和缺氧诱导因子-1与结直肠癌的关系

基质金属蛋白酶（Matrix metallo proteinases，MMPS）是一类结构中含Zn^2＋和Ca^2＋的蛋白水解酶类，主要参与细胞外基质的代谢。缺氧诱导因子-1（Hypoxia inducible factor-1，HIF-1）是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子。MMPs和HlF-1在大肠癌组织中均高表达，且与肿瘤的多种生物学行为有相关性，说明MMPs和HIF-1在大肠癌的发病机制扮演着一个相当重要的角色。现就MMPs和HIF-1的结构与功能，在大肠癌中的表达及促癌机制作一综述。     

胆囊癌血管生成拟态,缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达及其与临床预后的关系(英文)

目的探讨人胆囊癌是否存在血管生成拟态(VM)以及VM、缺氧诱导因子-1α(HIF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)与胆囊癌预后的关系。方法应用HE和CD31-PAS染色观察胆囊癌VM,应用免疫组织化学、计算机图像、接收机操作特性曲线和高低免疫组化反应截止评分定量分析胆囊癌HIF-1α、VEGF表达;同时评估HIF-1α、VEGF表达与胆囊癌VM和无VM组病人临床病理学特征与预后的关系。结果 21.35%的胆囊癌存在VM,VM与胆囊腺癌和肝转移相关(P<0.01)。VM阳性胆囊癌病人存在HIF-1α高表达和VEGF低表达(P<0.01)。HIF-1α与胆囊癌VM病人的浆膜浸润、分化程度(P<0.01)和VM亚组病人的Nevin分期、阴性肝转移和浆膜浸润、阴性和阳性淋巴结转移(P<0.05)相关。VEGF则与胆囊癌VM病人的肝转移、分化程度(P<0.01)和VM亚组病人Nevin分期、阴性肝转移和中分化程度(P<0.01)相关。多因素分析证实,VM、Nevin分期和HIF-1α是胆囊癌病人的独立因素。结论人胆囊癌存在VM;HIF-1α和VEGF表达与胆囊癌病人的VM和疾病进展明显相关;VM和IF-1α是胆囊癌病人预后判断的独立因素。     

巨噬细胞金属弹力酶 缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其意义

目的：探讨巨噬细胞金属弹力酶( HME)、缺氧诱导因子-1α( HIF-1α)及血管内皮生长因子( VEGF)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测胃癌及癌旁组织各30个标本中HME、HIF-1α及VEGF的表达情况。结果①HME、HIF-1α和VEGF在胃癌组织中表达高于癌旁组织,差异有统计学意义( P<0．05)。②HME的表达与胃癌的血管浸润和分化程度有相关性, HIF-1α的表达与肿瘤的组织学类型、淋巴结转移及TNM分期有相关性,VEGF的表达与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有相关性。③VEGF分别与HME和HIF-1α在胃癌组织中的表达存在密切的相关性。结论胃癌中 HME、HIF-1α及VEGF的高表达可能为肿瘤侵袭转移的机制之一,且这些指标的检测对于胃癌的早期判断、干预治疗及预测肿瘤的转移预后有重要的临床意义。     

HIF-1α、MMP-2在退变腰椎间盘髓核中的表达及相关意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人类退变腰椎间盘髓核组织中的表达变化情况.方法 对照组为取自青壮年腰椎爆裂性骨折患者的正常椎间盘髓核组织;实验组为腰椎间盘突出症患者的退变椎间盘髓核组织,依据术前MRI影像表现分为3组.分别进行免疫组织化学染色,比较4组椎间盘组织中HIF-1α、MMP-2表达.结果 HIF-1α在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(8.92±3.411%、(46.81±3.63)%、(66.88±4.60)%、(89.63±2.27)%;MMP-2在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(9.61±3.03)%、(47.31±4.4)%、(69.54±5.96)%、(90.05±3.16)%.HIF-1α、MMP-2在实验组退变的椎间盘中的表达显著高于对照组(P<0.05),而且不同退变程度的表达也不同(P<0.05),统计学分析均有显著差异,HIF-1α和MMP-2在退变的椎间盘组织中的表达呈正相关关系.结论 HIF-1α、MMP-2均可能参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,且HIF-1α、MMP-2在人类退变腰椎间盘组织中有相同的增高趋势,HIF-1α可能作为MMP-2的一个重要调节因素,与MMP-2相互协调、共同促进椎间盘退变.     

Octreotide inhibits proliferation and invasion of MHCC97-H cells in vitro and in vivo

ObjectiveTo figure out the effect of somatostatin analogue Octreotide on proliferation and invasion of human hepatocellular carcinoma cell MHCC97-H and the underlying mechanism in vitro and in vivo.MethodsMHCC97-H cells were treated with Octreotide at the concentration of 0.2 ug/mL in vitro, proliferation related to time was evaluated. After treated with Octreotide at the concentration of 0.2 ug/mL for 48 h, MHCC97-H cells were observed by transmission electron microscope. Cell proliferation was detected by MTT assay after MHCC97-H cells were treated with Octreotide at different concentrations including 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6 and 0.8 ug/mL for 36 h in vitro. 27 nude mice, in which MHCC97-H tumor mass was planted orthotopically, were divided into 3 groups randomly including control group (intraperitoneal injection with equal volume normal saline; n=8), low dose treated group (intraperitoneal injection with Octreotide at 50 ug/kg·d; n=9) and large dose treated group (intraperitoneal injection with Octreotide at 200 ug/kg·d; n=10). All mice were raised for 35 d and sacrificed. The information about survival time, the weight at death point and the pathology change of liver and lung was collected. The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and matrix metalloproteinases-2 (MMP-2) in mouse HCC tissues were detected by immunohistochemistry finally.ResultsMTT assays showed that Octreotide inhibited the proliferation of MHCC97-H cells significantly. Apoptosis cells were found by transmission electron microscope after treatment with Octreotide at 0.2 ug/mL for 48 h in vitro. The proliferation was inhibited significantly by Octreotide in a dose-dependant manner (r=0.86, P<0.01). Compared with control group, the treated group had the heavier weight at death point and lower intrahepatic metastasis ratio (P<0.05), meanwhile, there was not significant difference in treated groups (P>0.05). The positive expression ratios of VEGF and MMP-2 in treated groups were lower than those in control group (P<0.05), while there was no apparent difference in treated groups (P>0.05).ConclusionOctreotide could inhibit the proliferation of MHCC97-H cells in vitro via inducing apoptosis and the inhibitory function acts in a dose-dependant manner. Octreotide could improve survival of mice with MHCC97-H cells and inhibit the metastasis of MHCC97-H cells in vivo. Regulation of VEGF and MMP-2 expression by Octreotide would be involved in its inhibition in vivo.     

Expression of nerve growth factor and hypoxia inducible factor-1α and its correlation with angiogenesis in non-small cell lung cancer

Summary： In order to investigate the expression of nerve growth factor （NGF） and hypoxia inducible factor-1α （HIF-1α） and its correlation with angiogenesis in non-small cell lung cancer （NSCLC）, paraffin-embedded tissue blocks from 20 patients with NSCLC were examined. Twenty corresponding para-cancerous lung tissue specimens were obtained to serve as a control. The expression of NGF, HIF-1α, and vascular endothelial growth factor （VEGF） in the NSCLC tissues was detected by using immunohistochemistry. The microvascular density （MVD） was determined by CD31 staining. The resuits showed that the expression levels ofNGF, HIF-1α and VEGF in the NSCLC tissues were remarkably higher than those in the para-cancerous lung tissues （P〈0.05）. There was significant difference in the MVD between the NSCLC tissues （9.19±1.43） and para-cancerous lung tissues （2.23±1.19） （P〈0.05）. There were positive correlations between NGF and VEGF, between HIF-1α and VEGF, and between NGF and HIF-1α in NSCLC tissues, with the spearman correlation coefficient being 0.588, 0.519 and 0.588, respectively. In NSCLC tissues, the MVD had a positive correlation with the three factors （P〈0.05）. Theses results suggest that NGF and HIF-1α are synergically involved in the angiogenesis of NSCLC.     

HIF-1、MMP-9、VEGF在胶质瘤中的表达及意义

目的探讨低氧诱导因子-1（HIF-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及血管内皮细胞生长因子（VEGF）在胶质瘤中的表达以及与肿瘤组织学分级、血管形成及预后的关系。方法对86例手术切除的胶质瘤标本进行检测,采用免疫组织化学SP法检测HIF-1、MMP-9、VEGF和CD34在肿瘤周围组织及肿瘤组织中的表达,以CD34阳性血管数计算微血管密度（MVD）。结果HIF-1、MMP-9、VEGF在肿瘤细胞中的阳性表达率均明显高于肿瘤周围组织（P〈0.05）,在高级别胶质瘤（WHOⅢ、Ⅳ级）中的阳性表达率明显高于低级别胶质瘤（WHOⅠ、Ⅱ级）（P〈0.05）。HIF-1、MMP-9、VEGF阳性表达组的MVD均显著高于其阴性表达组（P〈0.05）。结论HIF-1、MMP-9、VEGF在胶质瘤的生长进展过程中可能有协同作用,三者均可通过诱导肿瘤血管形成进一步促进肿瘤的发生发展。     

芍药苷对难愈性溃疡大鼠创面愈合及HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号通路的影响

目的:探讨芍药苷(PF)调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)对难愈性溃疡大鼠创面愈合的影响和作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、PF组(30mg/kg, 2次/d)、PX-478组(100mg/kg HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路抑制剂PX-478,1次/d)、PF+PX-478组,每组12只,持续2周。通过一般创面注射肌注氢化可的松制成大鼠难愈性创面模型,用相机结合Image J软件计算各组大鼠创面的愈合率;用ELISA法检测大鼠血清中氧化应激指标;HE染色检测大鼠创面病理变化;TUNEL染色检测创面组织细胞凋亡;RT-qPCR检测大鼠创面组织转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生因子(PDGF)表达情况;Western blotting法检测大鼠创面组织HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路相关蛋白表达。结果:与Sham组相比,Model组大鼠创面成纤维细胞和毛细血管稀疏,愈合率、SOD、GSH-PX水平、TGF-β1、PDGF mRNA水平及H...     

蜂毒素对骨肉瘤Saos-2细胞系HIF-1α及VEGF表达的影响

目的：研究低氧条件下蜂毒素（melittin）对骨肉瘤Saos-2细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨蜂毒素抗骨肉瘤细胞血管生成的机制。方法：分别设空白对照组和低氧对照组,以及加入终浓度为2、4、8μg/ml的蜂毒素组;采用免疫印迹试验（Western—blot）检测细胞HIF-1α蛋白表达,逆转录RT—PCR检测HIF-1α和VEGFmRNA转录水平的变化。结果：与空白对照组比较,低氧对照组细胞中HIF-1α的蛋白表达及VEGF的mRNA表达均明显升高（P〈0．05）;蜂毒素组细胞的HIF-1α蛋白表达明显低于低氧对照组（P〈0．05）,并具有剂量依赖性;蜂毒素组细胞的VEGF mRNA水平明显低于低氧对照组（P〈0．05）,且有剂量依赖性。结论：模拟的低氧条件可以诱导骨肉瘤Saos-2细胞系中HIF-1α通路的激活;蜂毒素通过抑制HIF-1α蛋白水平的表达、影响其通路中下游基因VEGF mRNA水平的表达而抑制骨肉瘤Saos-2细胞中低氧诱导的HIF-1α通路的激活。由此推断蜂毒素可能通过此途径抑制骨肉瘤血管的生成,达到抗肿瘤的效果。