不同神经移植体修复神经缺损的形态和电生理研究

目的:研究移植体结构对周围神经再生的影响。方法:新西兰兔12只,随机分为3组。双侧耳大神经各切下1.2cm长一段神经,A组将其原位缝合桥接缺损,B组用隐神经移植体桥接,C组用股外侧皮神经移植体桥接,修复方法采用外膜缝合。术后12周采用电生理检测方法测量神经最大动作电位和传导速度,采用美兰染色方法观察神经结构,ImageProPlus图像分析软件对图片进行分析。结果:术后12周,B组在远侧段动作电位幅值和动作电位幅值恢复率均大于A组和C组,A组大于C组;B组在远侧段神经传导速度大于C组;B组远侧段有髓神经纤维密度和面积大于A组和C组,A组大于C组;B组髓鞘平均厚度大于A组和C组,P<0.05。结论:神经移植体结构对自体神经移植再生效果有影响作用,神经束面积大、轴突密度大且神经截面积小的神经移植体再生效果较好。     

低能量氦氖激光对周围神经再生的电生理研究

目的：探讨低能量氦－氖激光对周围神经再生的影响。方法：用44只体质量2．5kg左右的家兔随机分为4,8,12及16周4个观察组,照射组各用兔6只,对照组各用5只。麻醉后,均切断左侧腓总神经,用9／0尼龙单丝对端吻合神经外膜。照射组在术后1d开始用8313－B型低能量氦－氖激光仪经皮肤照射L5,6脊髓节段,每天照射15min,共照射4d。对照 组不照射,均按期观察。结果：术后4周,可在照射组看到细小而稀少的再生轴突,对照组直到术后8周才能看到（P＜0．01）。照射组的腓总神经潜伏速率均优于对照组（P＜0．01）,动作电位波幅照射组也优于对照组。胫前肌肌纤维横纹,照射组16周时很清楚,对照组不甚清楚。展趾功能到术后16周时,照射组与健侧相同,对照组才恢复到照射组12周的水平。结论：低能量氦－氖激光促进了脊髓运动神经细胞功能,加速了轴突再生。     

神经预变性促进周围神经桥接后神经再生的初步研究

目的探讨经过体内预变性的神经用于周围神经缺损桥接修复的效果。方法 SD大鼠20只,制作右侧坐骨神经压榨伤动物模型,3 d后,取坐骨神经用于对侧行神经桥接,在桥接后0 d、3 d、7 d、14 d取材,应用ED1和NF200染色比较双侧神经再生速度及神经纤维内巨噬细胞浸入情况。结果压榨伤后3 d,远端神经纤维内见大量ED1染色阳性巨噬细胞侵入,NF200阳性染色成棒状或碎片状;神经桥接后3 d、7 d、14 d,预变性组与对照组桥接远端均可见大量ED1染色阳性巨噬细胞侵入,经过预变性的神经内神经再生速度明显提高。结论 经过体内预变性的神经用于周围神经缺损桥接修复可明显促进神经再生,其机制可能是巨噬细胞的早期侵入,有利于神经生长抑制物的清除。     

经颅磁刺激及局部直流电刺激对受损周围神经再生的影响

目的 分别从电生理学、组织学方面观察经颅磁刺激及局部直流电刺激对周围神经再生的影响，探讨其促进受损神经功能恢复的相关机制。方法共选取20只SD大鼠，将其制成周围神经损伤模型并随机分为经颅磁刺激组及局部直流电刺激组，分别采用电生理学及组织学方法观察磁刺激对周围神经潜伏期、波幅、神经传导速度及周围神经髓鞘结构、数量的影响，并与局部直流电刺激组进行比较。结果2组大鼠分别经20d相应处理后，发现经颅磁刺激组大鼠受损坐骨神经的波幅明显增高，与局部直流电刺激组间的差异有统计学意义；在组织学方面，可观察到经颅磁刺激组有大量新生神经髓鞘出现，其数量显著多于局部直流电刺激组，差异亦有统计学意义；另外经颅磁刺激组的髓鞘结构也较局部直流电刺激组清晰、完整。结论通过电生理学及组织学观察，发现经颅磁刺激在促进受损周围神经再生、修复方面，其疗效可能优于局部直流电刺激。     

电磁场促进周围神经再生作用机制探讨

目的 探讨电磁场对周围神经损伤后再生作用的机制。方法 以60只Wistar大鼠左侧坐骨神经重度钳夹伤为模型,应用随机数表进行随机化,将大鼠均分为治疗组和对照组,治疗组给予电磁场治疗。术后不同时期测定大鼠坐骨神经的电生理指标并进行组织学检查。结果 电磁场治疗加速了损伤神经远段Wallerian变性进程,促进雪旺氏细胞增殖,促进轴索及髓鞘再生,加速运动神经传导速度的恢复。结论 电磁场可能是通过对周围神经再生过程中多环节的调控和促进,通过多种协同机制,促进周围神经再生和功能恢复的。     

穴位电针刺激对面神经再生过程中表情肌组织神经生长因子mRNA表达的影响

目的 观察穴位电针刺激对面神经再生过程中表情肌组织神经生长因子（ＮＧＦ）表达的影响。方法 日本大耳白兔面神经压榨伤后,电针刺激翳风、颧冢、地仓、颊车、四白、阳白、合谷穴,每天３０ｍｉｎ,２周为１疗程。经１、２、３疗程治疗后,在电生理学及病理形态学证实穴位电针刺激能促进面神经再生基础上,应用原位杂交及ＲＴ－ＰＣＲ技术检测地刺组及对照组作表情肌组织中ＮＧＦ ｍＲＮＡ表达水平的变化。结果 两组动物的保情     

经颅磁刺激促进周围神经再生的实验研究

目的 观察经颅磁刺激促进周围神经再生的电生理学和组织学变化，探讨其对促进神经损伤后功能恢复作用。方法 用电生理学和组织学方法分别观察磁刺激对损伤周围神经的潜伏期、波幅及神经传导速度和周围神经髓鞘结构和数目的影响，并与对照组进行比较。结果 磁刺激组受损坐骨神经的潜伏期较对照组缩短，组织学观察可见大量新生髓鞘，其数目较对照组多，差异有显著性意义。磁刺激组髓鞘的结构也较对照组清晰完整。结论 经颅磁刺激可能具有促进受损周围神经再生修复的作用。     

Motor function recovery during peripheral nerve multiple regeneration

Neuronal functional compensation and multiple regenerating axon sprouting occur during peripheral nerve regeneration. Sprouting nerve buds were quantitatively maintained and had matured when multiple injured distal nerves were anastomosed to smaller number of proximal nerve stumps; this has positive clinical significance for proximal stump damage. This study investigated whether sprouting axon buds would reinnervate the distal neuromuscular junction and maintain the function of the target organ under compensation conditions. The results showed that the sprouting axon buds maintained the numbers and morphology of motor end plates repaired by a smaller number of proximal nerve stumps, and recovered 80.0% tetanic muscle force compared with the normal side. Meanwhile, nerve conduction velocity, compound muscle action potential and diameter of muscular fibres declined 72.7%, 73.2% and 61.8%, respectively, compared with normal. This observation indicates the potential functional reserve of neurons and that it is feasible to repair nerve fibre injury through anastomosis of multiple distal nerve stumps with a smaller number of proximal nerve stumps, within the limits of compensation. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

周围神经损伤后修复再生的研究进展

周围神经损伤是手显微外科的常见病,其治疗及功能恢复一直都是手显微外科的难题。周围神经缺损后如何促进再生修复,提高神经缺损的治疗效果,使患者功能恢复较好,一直是临床研究的重点、热点、难点。近年来随着基础研究的不断深入,人们对周围神经解剖及其再生微环境的认识,周围神经损伤治疗方法已经由药物治疗、手术治疗发展到基因工程等,为周围神经损伤患者的治疗提供了更好的治疗思路。本文就周围神经缺损后周围神经修复的方法作一综述。     

Nanofibrous nerve conduit‐enhanced peripheral nerve regeneration

Fibre structures represent a potential class of materials for the formation of synthetic nerve conduits due to their biomimicking architecture. Although the advantages of fibres in enhancing nerve regeneration have been demonstrated, in vivo evaluation of fibre size effect on nerve regeneration remains limited. In this study, we analyzed the effects of fibre diameter of electrospun conduits on peripheral nerve regeneration across a 15‐mm critical defect gap in a rat sciatic nerve injury model. By using an electrospinning technique, fibrous conduits comprised of aligned electrospun poly (ε‐caprolactone) (PCL) microfibers (981 ± 83 nm, Microfiber) or nanofibers (251 ± 32 nm, Nanofiber) were obtained. At three months post implantation, axons regenerated across the defect gap in all animals that received fibrous conduits. In contrast, complete nerve regeneration was not observed in the control group that received empty, non‐porous PCL film conduits (Film). Nanofiber conduits resulted in significantly higher total number of myelinated axons and thicker myelin sheaths compared to Microfiber and Film conduits. Retrograde labeling revealed a significant increase in number of regenerated dorsal root ganglion sensory neurons in the presence of Nanofiber conduits (1.93 ± 0.71 × 10³ vs. 0.98 ± 0.30 × 10³ in Microfiber, p < 0.01). In addition, the compound muscle action potential (CMAP) amplitudes were higher and distal motor latency values were lower in the Nanofiber conduit group compared to the Microfiber group. This study demonstrated the impact of fibre size on peripheral nerve regeneration. These results could provide useful insights for future nerve guide designs. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

大鼠坐骨神经移植术后BDNF在脊髓内表达的实验研究

目的探讨大鼠坐骨神经移植术后BDNF在相应脊髓节段前角运动神经元内的表达变化。方法选用成年雄性Wister大鼠随机分为对照组(假手术组)和实验组(坐骨神经移植组),分别于术后不同时间点取材,应用免疫组化的方法检测相应脊髓节段前角运动神经元内BDNF的表达及其变化,根据图像分析测得的免疫强度进行统计学分析。结果BDNF在对照组脊髓节段运动神经元细胞浆内有少量表达,实验组术后可见BDNF的阳性表达的运动神经元,阳性反应为棕黄色颗粒位于细胞质。术后1周BDNF表达开始升高,2周时达高峰,6-8周后逐渐下降,至8周时仍高于对照组。结论坐骨神经移植术后BDNF在相应脊髓节段前角运动神经元中的表达增强,BDNF可能参与了神经损伤后保护神经元及促进神经再生的过程。     

周围神经损伤后再生的药物调控研究

目的　探讨神康灵对损伤的坐骨神经再生的作用。方法　采用 2 8只成年体重为 2 0 0g的Wistar大鼠 ,随机分成 2组 (实验组和对照组 ) ,分别于术后 4周和 6周 ,通过肌电图检测坐骨神经运动诱发电位的传导速度和波幅 ;组织学检测有髓神经轴突数目、横截面积 ,从而探讨神康灵对坐骨神经损伤后再生的作用。结果　实验组神经传导速度、再生的有髓神经纤维横截面积、数目均优于对照组。结论　神康灵对坐骨神经损伤后的再生有明显的促进作用。     

白细胞介素-1对周围神经再生及功能恢复的实验研究

目的本研究采用神经再生室研究白细胞介素-1(Interlukin-1,IL-1)对周围神经再生功能的影响.方法将57只SD大白鼠随机分为IL-1、白细胞介素-1受体拮抗剂(Interkukin-1ReceptorAntagonist,IL-1ra)和等渗盐水3组.术后3、6周取材作神经电生理检查,术后16周作大鼠趾展宽度测定.结果IL-1组再生周围神经功能明显优于IL-1ra组和等渗盐水组.IL-1ra组和等渗盐水组间没有明显差异.结论IL-1具有促进周围神经再生及神经功能恢复的作用.     

超短波对大鼠周围神经缺损修复术后神经再生的影响*

目的：通过检测小剂量超短波对脱细胞同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经缺损后再生神经传导速度、患侧胫前肌湿重比率、患侧L4脊髓内脑源性神经营养因子（BDNF）和降钙素基因相关肽（CGRP）的表达,来观察小剂量超短波对周围神经缺损修复术后神经再生的影响。方法：将36只Wistar大鼠随机分成3组：正常组（n=4）,对照组（n=16）及实验组（n=16）,对照组采用脱细胞同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经1cm 缺损,实验组于术后第2天开始给予小剂量超短波治疗,7min/天,1次/天,直至取材,后两组分别于术后第2、4、8、12周时检测患侧L4脊髓内BDNF及CGRP蛋白表达,术后第12周时行患侧胫前肌湿重比率及再生神经电生理检测。结果：①对照组术后第2周时患侧L4脊髓内BDNF表达已开始增高,第4周时达高峰,第8周后逐渐降低,第12周时仍显著高于正常对照组,与对照组相比,实验组只有在第8周时BDNF蛋白表达明显高于对照组（P<0.05）,其余各时间点差异无显著性意义。②对照组患侧L4脊髓内CGRP蛋白表达与BDNF表达趋势基本一致,实验组在术后各时间点脊髓内CGRP蛋白表达均明显高于对照组（P<0.05）。③与对照组相比,术后第12周时实验组再生神经传导速度加快,波幅升高,潜伏时缩短,胫前肌湿重比率明显增加（P<0.05）。结论：小剂量超短波可以促进大鼠周围神经缺损修复术后神经髓鞘及轴索的再生,此作用可能与小剂量超短波上调患侧脊髓内CGRP蛋白的表达,延长BDNF表达的高峰持续时间有关。     

复合物理因子促大鼠周围神经再生的效果

目的：观察复合物理因子促神经再生的应用效果。方法：选用成年健康雄性SD大鼠60只，建立神经再生室模型后随机分成A组（电刺激组）、B组（分米波组）、C组（复合因子组）和D组（对照组），每组15只，进行实验。分别于术后1、2、4、8、12周，进行大体、光镜、电镜、轴突图像分析、免疫组织化学和电生理检测。结果：C组大体、光、电镜观察、轴突图像分析与电生理检测指标明显优于其他各组。结论：分米波及电刺激均能明显地促进周围神经再生，两种物理因子同时使用具有协同作用。     

脉冲电磁场对周围神经再生的作用

目的探索脉冲电磁场对周围神经再生的影响及其作用机制。方法用PEM-1电磁脉冲发生器进行动物和临床试验。动物试验应用SD雄性大鼠24只,在距梨状肌下约1cm处切断坐骨神经后原位吻合,随机分成0.5、1、2月3组,每组分成对照组和实验组,实验组用微电脑电磁脉冲发生器进行治疗,两组均在不同时间,通过肉眼观察,肌电图检测及取材组织学检测。临床选用离断手指再植病例23例,用脉冲电磁场治疗仪进行治疗,12例进行对照。检测参数为皮温、触觉、疼觉、振动觉、温觉、出汗试验。结果实验组较对照组Wallerian变性明显加速,血管增生明显,纤维组织增生轻,神经再生及传导速度加快。治疗组再植手指皮肤触、疼觉、振动觉、温觉、出汗试验等方面均较对照组佳,治疗后局部皮温明显上升,特别出汗试验明显佳于对照组。结论脉冲电磁场治疗能促进周围神经再生。     

hIGF-1基因转染对周围神经再生作用的实验研究

目的：了解人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）体内基因转染对周围神经再生的作用.方法：30只雄性Wistar大鼠，建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组.hIGF-1治疗组，挤压伤处神经外膜下即刻注射pcDNAhIGF-1和LipfectAmine混合液10μL（hIGF-1 DNA为4 μg）；模型组，注射pcDNA3.1、LipfectAmine和生理盐水混合液10μL；空白对照组，不注射任何物质.术后8周行坐骨神经功能指数检测，再生神经纤维电生理学、组织学、形态学和超微结构观察.结果：术后8周再生神经纤维神经传导速度、复合肌肉活动电位的最大波幅和潜伏期hIGF-1治疗组明显大于模型组和空白对照组（P＜0.01）.再生神经纤维轴突直径、髓鞘厚度和有髓神经纤维计数hIGF-1治疗组明显大于模型组和空白对照组（P＜0.01）.超微结构见hIGF-1治疗组的再生神经纤维成熟度优于其他两组.且能改善功能指数.结论：周围神经损伤后胰岛素样生长因子-1体内基因转染能促进周围神经的再生.     

经皮神经电刺激对周围神经侧侧缝合后神经再生作用的实验研究

目的：研究经皮神经电刺激对周围神经侧侧缝合后神经再生的影响.方法：健康大耳白兔18只,显露坐骨神经及其分叉处,胫神经和腓总神经相邻神经束膜及外膜缝合.将动物肢体分为实验侧与对照侧.实验侧术后第2天,经皮神经电刺激右下肢,刺激参数：方波,波长0.3ms,频率5Hz,电流峰值3-10mA.刺激时间：每日1次,每次30min,持续6周.左后肢不给予电刺激.实验动物分组：A组（术后电刺激3周）,B组（术后电刺激6周）,C组（术后电刺激16周）;每组6只.结果：通过观察电镜、肌电图,实验侧明显优于对照侧.神经侧侧吻合各组在各时间点依次切开原手术切口,检测C组动物腓总神经的运动传导速度,CAMP的振幅及潜伏期,实验侧神经传导速度及CAMP振幅均优于对照侧,两者差异有显著性意义（P＜0.05）.实验侧CAMP的潜伏期慢于对照侧,两者差异无显著性意义（P＞0.05）.切断各组标本,距吻合口处下方5mm,腓总神经中再生有髓纤维数目实验侧再生有髓纤维均多于对照侧,两者差异有显著性意义（P＜0.05）.结论：神经侧侧吻合后有神经侧支发芽生长,可作为修复神经损伤的一种方法;经皮神经电刺激在提高神经侧侧吻合后神经侧支发芽能力有积极作用.     

端侧吻合与自体神经移植神经再生的比较研究

目的比较周围神经端侧吻合与自体神经移植后神经再生的效果,为临床提供实验依据。方法选用Wister大白鼠60只,随机分成3组。A组:切断左侧腓神经1cm,造成神经缺损,取对侧相应的腓神经桥接缺损。B组:切断左侧腓神经,在邻近的胫神经干外膜上开一1mm小窗,将腓神经远端吻合到胫神经干侧方开窗处。C组:方法同B组,但束膜开窗。各组分别于术后8、12周取材并进行大体、组织学、形态定量学和电生理检测。结果自体神经移植体修复神经缺损后,再生神经的数目、有髓神经纤维截面积、运动神经传导速度均优于端侧吻合的外膜、束膜开窗组(P<0.05);外膜开窗组与束膜开窗组之间无显著性差异(P>0.05)。结论自体神经移植修复大鼠周围神经缺损,其再生神经纤维质量优于端侧吻合法。     

骨髓基质细胞诱导为雪旺细胞修复周围神经缺损

骨髓基质细胞(bonemarrowstromacells,BMSCs)是来源于骨髓基质的一种间充质细胞,来源丰富,可以解决雪旺细胞来源不足的缺点。骨髓基质细胞在体外诱导为神经细胞,诱导后进行培养。用特异性抗体检测细胞内蛋白。(1)利用新方法制作组织工程化的神经,为临床解决失神经肌肉的不可逆萎缩提供新的思路。(2)利用细胞诱导的方法,为组织工程化神经的临床应用提供研究基础。