IKK/NF-κB通路在肝纤维化中的作用及相关药物研究进展

肝纤维化是慢性肝病患者中最常见的病理特征.慢性肝损伤可以引发炎症和伤口愈合反应,IKK/NF-κB 是炎症中一个至关重要的信号通路,在很大程度上影响肝纤维化的发生发展,可以成为预防或治疗肝纤维化的靶标.本文综述了 IKK/NF-κB 通路在肝纤维化中的作用机制和相关的药物研究进展.     

IKK/NF-κB通路在类风湿性关节炎中的作用及相关药物研究进展

在类风湿性关节炎的病理过程中,炎症反应扮演着关键性角色。IKK／NF －κB 作为炎症中一个至关重要的信号通路,在很大程度上影响了类风湿性关节炎的发展过程。本文综述了 IKK／NF －κB 通路在类风湿性关节炎中的作用,机制和相关药物的研究。     

IKK/NF-κB通路在类风湿性关节炎中的作用及相关药物研究进展

在类风湿性关节炎的病理过程中,炎症反应扮演着关键性角色。IKK/NF-κB作为炎症中一个至关重要的信号通路,在很大程度上影响了类风湿性关节炎的发展过程。本文综述了IKK/NF-κB通路在类风湿性关节炎中的作用,机制和相关药物的研究。     

丹酚酸A通过调节NF-κB/IκBα信号通路抑制肝纤维化

目的探索丹酚酸A抗四氯化碳(CCl_4)诱导的大鼠肝纤维化的防治及作用机制。方法将48只SD大鼠随机分为空白对照组、CCl_4模型组、丹酚酸A低剂量给药组和丹酚酸A高剂量给药组。除空白对照组外,其他3组每周2次给予50%CCl_4/花生油溶液(1 m L·kg-1)灌胃诱导建立肝纤维化模型,丹酚酸A低剂量和高剂量给药组大鼠同时每日1次给予腹腔注射丹酚酸A(分别为5 mg·kg-1与15 mg·kg-1)。6周后处死大鼠,HE和Masson染色法进行肝组织病理学观察;全自动生化分析仪检测血清肝功能指标(谷丙转氨酶及谷草转氨酶);放射免疫法测定血清肝纤维化指标(透明质酸、Ⅳ型胶原、层黏蛋白和Ⅲ型前胶原肽);Western blot检测肝脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达;Q-PCR检测炎症因子以及肝星状细胞激活因子基因水平的表达。结果与CCl_4模型组相比,丹酚酸A给药组能够显著改善大鼠肝功能,降低大鼠肝纤维化程度(P<0.05)。与此同时,丹酚酸A给药组能够提高肝细胞浆中NF-κB、IκBα蛋白的表达,并降低细胞核NF-κB蛋白的表达,且能够抑制炎症因子与肝星状细胞激活因子基因水平的表达。结论丹酚酸A可通过调节NF-κB/IκBα信号通路发挥抗肝纤维化作用。     

商陆皂苷甲抑制TLR4/NF-κB信号通路改善大鼠动脉粥样硬化的作用研究

目的 研究商陆皂苷甲（EsA）对动脉粥样硬化（AS）大鼠的作用及机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、辛伐他汀片（SIMT,10mg·kg^-1,阳性对照）组和EsA高、低剂量（10、2.5mg·kg^-1）组,每组6只。对照组给予普通饲料,其余各组以高脂饲料联合ip7×10⁵U·kg^-1维生素D₃（在第3天注射）制备AS模型。造模的同时ip给药,每天1次。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平;HE染色法观察胸主动脉病理变化;Western blotting法检测胸主动脉Toll样受体4（TLR4）和髓样分化因子88（MyD88）蛋白表达;免疫组化法检测胸主动脉核因子κB（NF-κB） p65阳性细胞表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著升高（P＜0.01）,HDL-C水平显著降低（P＜0.01）;胸主动脉血管内皮损伤严重,可见明显蓝色钙状斑块;胸主动脉TLR4和MyD88蛋白表达以及NF-κB p65阳性细胞表达显著升高（P＜0.01）。与模型组比较,EsA高、低剂量组大鼠血清血脂和炎性因子水平明显改善（P＜0.05、0.01）;胸主动脉血管内皮大致恢复正常,蓝色钙状斑块减少;胸主动脉TLR4和MyD88蛋白表达以及NF-κB p65阳性细胞表达显著降低（P＜0.05、0.01）。结论 EsA可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对大鼠AS发挥改善作用。     

新型冠状病毒非结构蛋白NSP13通过调控IκBα蛋白降解抑制NF-κB信号通路

目的 研究新型冠状病毒非结构蛋白13(NSP13)调控NF-κB信号通路的作用机制。方法 利用GV367-NSP13-FLAG慢病毒感染的方法制备高表达NSP13的A549细胞（A549-NSP13）和A549对照组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测NF-κB下游细胞因子白细胞介素6(IL-6)和趋化因子5(CCL-5)表达水平;Western印迹法检测NF-κB信号通路P65、磷酸化P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达。放线菌酮10 mg·L-1处理细胞0,15,30,45,90和120 min,Western印迹法检测IκBα蛋白半衰期。结果 与A549对照组相比,A549-NSP13细胞检测到FLAG标签蛋白条带,且NSP13 mRNA表达显著上调（P<0.01）,表明A549-NSP13细胞系构建成功。与A549对照组相比,A549-NSP13细胞IL-6 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）及CCL-5 mRNA和蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）均显著降低;磷酸化P65蛋白表达下降（P<0.01）,而...     

黄芪多糖抑制NF-κB/MAPK信号通路和改善哮喘大鼠气道炎症的作用

目的观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对哮喘大鼠气道炎症及NF-κB/MAPK信号通路的影响。方法采用卵蛋白(ovalbumin,OVA)致敏法制备哮喘模型并予以药物治疗。观察支气管灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎症细胞分类计数、肺组织病理变化、肺泡Ⅰ型上皮超微结构变化;测定肺组织NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、磷酸化IκBα(p-IκBα)、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)、p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、IL-1β、IL-4、IL-5、IL-6及IL-13含量的变化。结果与正常组比较,OVA致敏明显升高哮喘组炎症细胞数量、增强NF-κB/MAPK信号通路活性。APS可改善哮喘大鼠气道炎症、肺Ⅰ型上皮损伤,并明显抑制NF-κB/MAPK信号通路活性。结论 APS改善哮喘大鼠气道炎症、细胞损伤的机制可能与抑制NF-κB/MAPK信号通路有关。     

穿心莲内酯对人肺腺癌A549细胞NF-κB通路的调控作用

目的探讨穿心莲内酯对肿瘤细胞生长的作用及机制。方法人肺腺癌A549细胞分别与穿心莲内酯1.5～30μmol·L-1作用24h,以及穿心莲内酯30μmol·L-1作用4～24h。用MTT法检测A549细胞存活率;Western印迹法检测在肿瘤坏死因子α(TNF-α)10μg·L-1刺激下,穿心莲内酯30μmol·L-1对NF-κB信号通路中的相关蛋白NF-κB抑制因子α(IκBα)、磷酸化IκBα、IκB激酶β(IKKβ)和磷酸化IKKβ表达的影响;ELISA法检测穿心莲内酯对A549细胞核内NF-κBDNA结合活性的影响。结果穿心莲内酯的浓度和作用时间与A549细胞的存活率密切相关,穿心莲内酯30μmo·lL-1作用24h,A549细胞的存活率下降到(22.0±1.2)%,而穿心莲内酯1.5μmol·L-1作用24h或者穿心莲内酯30μmol·L-1作用4h对A549细胞的存活率几乎无影响。Western印迹法显示,穿心莲内酯能够抑制TNF-α诱导的NF-κB信号通路中IKKβ的磷酸化,抑制IκBα的磷酸化,推迟IκBα的降解,对IKKβ的表达无影响。穿心莲内酯还能够抑制TNF-α诱导的A549细胞核内NF-κBp65蛋白的DNA结合活性,抑制率达32%。结论穿心莲内酯通过影响NF-κB信号通路抑制A549细胞的生长。     

蒙花苷对TNF-α诱导的血管内皮细胞炎症损伤及TLR4/IκBα/NF-κB信号通路的影响

目的 以肿瘤坏死因子(TNF-a)刺激人脐静脉内皮细胞(EA.hy926),体外模拟血管内皮细胞炎症损伤模型,探讨蒙花苷(Buddleoside,BUD)对血管内皮细胞的保护作用和机制。方法 MTT法检测TNF-a和蒙花苷对EA.hy926细胞活性的影响;采用TNF-a(50 ng.mL_-1)刺激EA.hy926细胞,加入不同浓度(5、15和25 mmol.L_-1)蒙花苷处理,DAPI染色法测定EA.hy926细胞与单核细胞(THP-1)的黏附能力;Western Blot法检测细胞中Toll样受体(TLR4)、核因子-kB抑制蛋白(IκB-α)、核因子-kB(NF-kB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)等蛋白表达;RT-PCR法检测ICAM-1、VCAM-1等基因mRNA的表达;ELISA法检测细胞上清液中白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的含量。结果 蒙花苷可显著抑制TNF-a刺激EA.hy926细胞与THP-1细胞间黏附作用,降低EA.hy926细胞分泌的炎症因子IL-1、IL-6和IL-8水平。Western blot和RT-PCR结果表明蒙花苷能减少EA.hy926细胞中TLR4、NF-kB、ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达量及ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表达量,同时能升高细胞中IκB-α的蛋白表达量。结论 蒙花苷能缓解血管内皮细胞炎症损伤,其作用机制可能主要是通过抑制TLR4/IΚBα/NF-κB信号通路发挥效用。     

罗格列酮对糖尿病大鼠大血管中磷酸化IKK和IκBα表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠大血管组织中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IKK)及其下游作用物NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病组(B)和罗格列酮治疗组(C),C组给予5mg·kg-1·d-1罗格列酮生理盐水混悬液灌胃,A组和B组给予等体积生理盐水灌胃,用免疫组织化学检测8周和12周后颈动脉中磷酸化IKK和磷酸化IκBα表达的改变,光镜、电镜观察各组颈动脉形态的改变。使用图像分析系统分析颈动脉内中膜厚度(IMT),分离血清测血糖、血脂以及C肽。结果与正常对照组相比,糖尿病组及罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达增加,IMT增加(P<0.05);而罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达低于糖尿病组,IMT下降(P<0.05)。结论罗格列酮可通过抑制IKK活化,进而抑制IκBα降解,降低NF-κB活化水平,从而减轻大血管病变。     

Toll样受体4/NF-κB信号通路参与黄芪多糖对肿瘤坏死因子α诱导的乳大鼠心肌细胞肥大的抑制作用

目的探讨黄芪多糖(APS)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的乳大鼠心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法 原代培养乳大鼠心肌细胞分别加入APS 25,50和100 mg.L-1作用30 min后再加入TNF-α50μg.L-1作用48 h。考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量;消化分离法及计算机图像分析系统检测细胞体积;RT-PCR检测心肌心钠素(ANP)和Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达;Western印迹法检测心肌细胞p65和IκBα的蛋白表达;ELISA法检测细胞外液白细胞介素1β(IL-1β)的含量。结果 与正常对照组相比,TNF-α组心肌细胞蛋白含量增加了52.8%,细胞体积增大了66.7%,ANP和TLR4 mRNA分别增加了60.3%和68.7%,p65蛋白表达增加了50.5%,IκBα蛋白表达减少了43.1%,IL-1β表达增加了59.0%,差异均有统计学意义(P<0.01)。与TNF-α模型组相比,APS 50,100 mg.L-1和IκBα阻断BAY11-7082 5μmo.l L-1组蛋白含量、细胞体积、ANP mRNA、TLR4 mRNA、IL-1β和p65蛋白表达显著降低(P<0.05),IκBα蛋白表达明显增高(P<0.05);APS 25 mg.L-1组蛋白含量、细胞体积和ANP mRNA表达显著性降低(P<0.05)。结论 APS对TNF-α诱导的乳大鼠心肌细胞肥大有保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。     

IκBα、IKKα、IKKβ与Tim-3在肿瘤患者中表达及相关性研究

摘要：目的：探讨肿瘤患者的IκBα、IKKα、IKKβ-mRNA与Tim-3 mRNA表达的相关性。方法：采集32例肿瘤患者和34例体检者外周血,提取RNA并反转录成cDNA,运用实时定量PCR方法检测IκBα、IKKα、IKKβ-mRNA及Tim-3 mRNA的表达。结果：肿瘤患者的IκBα、IKKα、IKKβ-mRNA与Tim-3 mRNA具有相关性。其中：IkBα=0.749 Tim-3;Ikkα=0.723 Tim-3;Ikkβ=0.910Tim-3。结论：肿瘤患者NF-κB抑制蛋白IkBα的活性、IκBs激酶（IKK）酶活性都与Tim-3分子具有相关性,其中Ikkβ与Tim-3相关性更密切。研究提示肿瘤病人的免疫功能与IKKβ的活性密切相关。     

基于IKK2/NF-κB信号通路探讨虫草素对大鼠创伤性脑损伤后神经元的保护作用

摘 要 目的：基于IκB激酶2/核因子κB（IKK2/NF-κB）信号通路探讨虫草素对大鼠创伤性脑损伤后神经元的保护作用。 方法: 将120只SD大鼠分为6组：正常对照组、模型组、阳性对照组（盐酸纳美芬,20.0 mg·kg-1）、虫草素低、中、高剂量组（20.0,40.0,80.0 mg·kg-1）,每组20只。除正常对照组外,其余各组建立大鼠创伤性脑损伤模型,盐酸纳美芬组及虫草素各剂量组灌胃给予相应药物,1次/d,持续1周,正常对照组及模型组给与等体积生理盐水。实验结束后,测定大鼠认知功能,制作海马病理切片,测定海马组织IKK2、NF-κB mRNA及蛋白水平,测定白细胞介素 4（IL 4）、白细胞介素 6（IL 6）、肿瘤坏死因子 α（TNF α）水平。 结果: 与正常对照组比较,模型组逃避潜伏期、IKK2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平、IL 4、IL 6、TNF α水平显著升高（P<0.05）,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间显著降低（P<0.05）;正常对照组海马区神经元细胞完整,结构正常,染色清晰,核呈卵圆形位于中央;模型组海马区可见大量坏死神经元,且细胞脱失现象明显,细胞核固缩;虫草素低、中剂量组坏死神经元细胞减少,但神经元疏松紊乱,细胞核固缩,脱失现象明显;盐酸纳美芬组、虫草素高剂量组海马区见少量坏死神经元细胞,且神经元细胞结构较为完整,神经元细胞核呈卵圆形位于中央,分布均匀。与模型组比较,盐酸纳美芬组、虫草素各剂量组逃避潜伏期、IKK2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平、IL 4、IL 6、TNF α水平显著降低（P<0.05）,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间显著升高（P<0.05）,且虫草素各剂量组呈明显的剂量 效应关系（P<0.05）。虫草素低、中剂量各检测指标与盐酸纳美芬组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论: 虫草素能减轻大鼠创伤性脑损伤后海马神经元的损伤,其机制可能与虫草素可通过抑制IKK2、NF-κB mRNA及蛋白的表达进而抑制炎性因子IL 4、IL 6、TNF α的表达有关。     

舒血宁注射液对大鼠肝纤维化的防治作用和NF-κB/IκBα信号通路影响的研究

目的探讨舒血宁注射液对大鼠肝纤维化的防治作用及NF-κB/IκBα信号通路影响的研究。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(简称对照组)、肝纤维化模型组(简称模型组)、舒血宁注射液给药组(简称给药组),每组12只。每周2次50%CCl4花生油溶液(1 m L·kg-1)灌胃6周建立大鼠肝纤维化模型。同时,给药组每日一次腹腔注射舒血宁注射液15 mg·kg-1。观察大鼠的生活状况、肝脏大体形态;HE染色检测大鼠肝脏病理学的变化;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST);放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、IV型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原肽(PⅢP);Western blot检测肝脏组织细胞核中NF-κB和细胞质中NF-κB、IκBα蛋白的表达。结果舒血宁注射液治疗后大鼠肝功能指标有明显下降,血清肝纤维化指标有显著降低,并且大鼠肝脏病理组织学结构有明显改善(P<0.05)。与模型组相比,舒血宁注射液能够上调肝组织细胞质中NF-κB和IκBα蛋白的表达,下调细胞核中NF-κB蛋白的表达(P<0.05)。结论舒血宁注射液可通过抑制NF-κB/IκBα信号通路发挥抗肝纤维化的作用。     

NF-kB/IκB-α信号通路对ATRA诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨NF-kB/IκB-α信号通路对全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞凋亡的影响。方法将HL-60细胞与不同浓度的ATRA共同孵育,MTT法观察ATRA对细胞增殖作用,流式细胞术及电镜分析细胞凋亡,Western-Blot检测NF-κB及IκB-α的变化。结果MTT显示ATRA呈时间-剂量依赖方式抗HL-60细胞增殖,作用72h流式细胞术DNA直方图上出现典型的亚二倍体凋亡峰,透射电镜下见细胞核染色质致密浓缩,凋亡小体形成,Western-Blot产物显示HL-60细胞NF-κBp65下降,而IκB-α上升。结论ATRA能抗HL-60细胞增殖诱导凋亡,该过程可能与抑制IκB-α的降解阻止NF-κB的活化有关。     

CKLF1高表达激活NF-κB信号通路导致小鼠肺部炎症

目的 有报道表明趋化素样因子1(CKLF1)在哮喘病人肺部高表达,但具体情况和机制尚不明确.本研究拟在动物水平考察CKLF1的致炎作用及相关机制.方法 将pCDB-CKLF1质粒或空载体pCDB电转入Balb/C小鼠体内,HE染色观察其肺部病理改变;硝酸酶还原法和ELISA法分别检测小鼠血清中NO和TNF-α的含量;提取小鼠肺部组织的胞质和胞核蛋白,蛋白免疫印迹实验考察胞质和胞核内NF-κB和IκBα表达的改变.结果 病理切片结果显示,转染pCDB-CKLF1质粒后,小鼠肺部出现明显的病理改变;小鼠血清中NO和TNF-α含量明显升高;胞质内NF-κB和IκBα表达明显减少,胞核内NF-κB和IκBα表达明显增加.结论 趋化因子CKLF1高表达能够导致动物肺部炎症的发生,CKLF1可能通过激活NF-κB 信号通路导致炎症.     

金茵清热口服液通过NF-κB/NLRP3信号通路改善小鼠急性肺损伤

目的 探究金茵清热口服液对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法 C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为6组：空白对照组、模型对照组、金茵清热口服液小剂量组、金茵清热口服液中剂量组、金茵清热口服液大剂量组和地塞米松组。除空白对照组,其他各组气管滴注LPS溶液(5 mg·kg^-1)构建小鼠急性肺损伤模型,金茵清热口服液低中高组连续灌胃给药3 d。24 h后,6组分别取小鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar larage fluid, BALF)进行后续检测,HE染色观察各组小鼠肺组织病理损伤;检测肺泡灌洗液总细胞数;BCA法检测BALF的总蛋白含量;ELISA法检测BALF中炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和免疫球蛋白M(IgM)的含量;免疫组化和Western blotting法检测肺组织核因子κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)蛋白的表达情况。结果 与模型对照组比较,金茵清热口服液减轻了肺组织的病理学损伤(P<0.05...     

金合欢素对糖尿病肾病大鼠肾损伤及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨金合欢素对糖尿病肾病（DN）大鼠肾损伤及Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。方法 通过高脂高糖饲料喂养及ip链脲佐菌素（STZ）建立DN大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组,金合欢素低、高剂量（40、80 mg ·kg^-1）组,金合欢素（80 mg ·kg^-1）＋脂多糖（LPS,0.1 mg ·kg^-1）组,缬沙坦（20 mg ·kg^-1）组,每组10只,并以正常喂养且不ip STZ的10只大鼠作为对照组。干预结束后,尾静脉取血,检测大鼠空腹血糖含量;收集大鼠24 h尿液,分析尿蛋白含量;腹部主动脉取血,ELISA法检测血清中血肌酐、血尿素氮水平及肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平;分离双肾组织,透射电镜及HE染色检测肾组织损伤情况;Western blotting检测Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组肾组织严重受损,血糖、尿蛋白、血肌酐、血尿素氮、血清TNF-α和IL-6水平、肾组织TLR4和p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达显著增加（P<0.05）;与模型组比较,缬沙坦和金合欢素低、高剂量组肾组织损伤得到缓解,血糖、尿蛋白、血肌酐、血尿素氮、血清TNF-α和IL-6水平、肾组织TLR4和p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达显著降低（P<0.05）;与金合欢素高剂量组相比,金合欢素＋LPS组肾组织损伤加剧,血糖、尿蛋白、血肌酐、血尿素氮、血清TNF-α和IL-6水平、肾组织TLR4和p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达显著增加（P<0.05）。结论 金合欢素通过抑制TLR4/NF-κB信号通路改善DN大鼠肾损伤。     

LTBP2通过TLR4/NF-κB信号通路抑制糖尿病大鼠海马神经元凋亡

目的 探讨沉默潜在转化生长因子 β 结合蛋白 2（LTBP2）基因对糖尿病大鼠学习记忆功能的影响及 机制。方法 雄性SD大鼠45只一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）55 mg/kg,72 h后采尾静脉血测血糖,将血糖＞ 16.7 mmol/L 的大鼠定为糖尿病模型;模型诱导成功后将大鼠随机分成3组：糖尿病（DM）组、si-LTBP2组（大鼠海马 给予腺病毒包装的针对LTBP2的siRNA 10 μL）、sc-LTBP2组（大鼠海马给予LTBP2对照序列10 μL）,每组15只。另 取15只正常大鼠作为对照（CON）组。12周后,水迷宫检测大鼠学习记忆能力;免疫组织化学染色和实时荧光定量聚 合酶链式反应（qPCR）检测海马LTBP2表达;Western blot检测海马LTBP2、Toll样受体4（TLR4）、核因子（NF）-κB蛋 白相对表达量;TUNEL染色检测海马神经元凋亡。结果 与CON组相比,DM组、si-LTBP2组和sc-LTBP2组LTBP2、 TLR4、NF-κB表达明显增加,海马神经元凋亡明显增多,大鼠学习记忆能力明显下降（均P＜0.05）。与DM组相比, si-LTBP2 组 LTBP2、TLR4、NF-κB 表达明显降低,海马神经元凋亡明显减少,大鼠学习记忆能力明显提升（均 P＜ 0.05）。结论 沉默海马LTBP2的表达可明显改善糖尿病大鼠学习记忆能力,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号 通路有关。     

注射用丹参多酚酸盐通过调节NF-κB/IκB和p38 MAPK信号通路防治胆汁淤积性肝损伤

目的探讨注射用丹参多酚酸盐对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的大鼠胆汁淤积性肝损伤的治疗作用及其机制。方法将40只成年雄性SD大鼠随机均分为4组,即正常组(对照组)、胆汁淤积性肝损伤组(模型组)、注射用丹参多酚酸盐低剂量组(20 mg·kg~(-1),ip,qd)和注射用丹参多酚酸盐高剂量组(40 mg·kg~(-1),ip,qd)。对照组大鼠连续7 d给予等量生理盐水(ip),第5日时给予等量花生油(ig);模型组大鼠连续7 d给予等量生理盐水(ip),第5日时灌胃ANIT(75 mg·kg~(-1),每15 mg ANIT溶于1 mL花生油);低剂量组和高剂量组大鼠连续7 d给予丹参多酚酸盐,第5日灌胃ANIT(75mg·kg~(-1))。第7日给药后禁食24 h处死各组大鼠,称量体重和肝重;检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、总胆红素(TBIL)和总胆汁酸(TBA)。HE染色考察肝组织病理学改变,Western blot检测肝脏组织中NF-κB/IκB和p38 MAPK信号通路相关蛋白的表达;Real-time PCR检测肝脏组织中IL~(-1)β、IL-6、TGF-β和TNF-α基因的表达水平。结果与模型组相比,注射用丹参多酚酸盐能够显著降低胆汁淤积性肝损伤大鼠血清AST、ALT、ALP、γ-GT、TBIL以及TBA水平(P均<0.05),并且显著改善大鼠肝脏组织病理学结构。与此同时,与模型组相比,丹参多酚酸盐给药组的大鼠肝脏中核蛋白NF-κB的表达降低,细胞质中NF-κB和IκBα表达增多,p38蛋白的磷酸化水平降低,炎症因子IL~(-1)β、IL-6、TGF-β和TNF-α的m RNA表达水平也降低(P <0.05)。结论注射用丹参多酚酸盐可改善大鼠胆汁淤积性肝损伤,其机制可能与抑制NF-κB/IκB和p38 MAPK信号通路有关。