微小 RNA-15a-5p靶向蛋白质二硫键异构酶 A6前体蛋白抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的 探讨微小RNA-15a-5p(miR-15a-5p)是否可通过靶向蛋白质二硫键异构酶A6前体蛋白(PDIA6)而抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭.方法 选取2018年2月至2019年3月江南大学附属医院接受治疗的前列腺癌病人50例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白印迹法(Western blotting)分别检测前列腺癌组织、癌旁组织中miR-15a-5p、PDIA6的表达量;体外培养人前列腺癌DU145细胞,将细胞分为miR-NC组、miR-15a-5p组、si-NC组、si-PDIA6组、miR-15a-5p+pcDNA组、miR-15a-5p+pcDNA-PDIA6组;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证miR-15a-5p、PDIA6的靶向关系.结果 与癌旁组织相比,前列腺癌组织中miR-15a-5p的表达水平降低[(1.00±0.17)比(0.68±0.11)],PDIA6 mRNA[(0.99±0.09)比(1.64±0.18)]和蛋白[(0.44±0.07)比(0.76±0.17)]表达水平升高;转染miR-15a-5p mimics或转染si-PDIA6可降低细胞存活率(P<0.05),减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-15a-5p可靶向结合PDIA6;PDIA6过表达可降低miR-15a-5p过表达对DU145细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.结论 过表达miR-15a-5p通过降低PDIA6的表达对列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力有抑制作用.     

金丝桃苷抑制鼻咽癌细胞生物学行为的分子机制研究

目的 探讨金丝桃苷对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响和机制。方法 采用10、20及40 mg/L金丝桃苷的培养液孵育SUNE1细胞，依次记为低、中、高剂量组；将长链非编码RNA(lncRNA)配对盒基因8反义RNA 1(PAX8-AS1)过表达或敲低质粒、miR-494-3p模拟物及其阴性对照分别转染至40 mg/L金丝桃苷处理的SUNE1细胞，采用CCK-8实验、平板克隆实验、Transwell实验检测SUNE1细胞活力、克隆形成以及迁移和侵袭。蛋白质印记法分析基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9蛋白表达。实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测lncRNA PAX8-AS1和miR-494-3p表达。双荧光素酶报告实验分析lncRNA PAX8-AS1和miR-494-3p靶向关系。结果低、中、高剂量金丝桃苷降低SUNE1细胞活力、迁移数和侵袭数，下调MMP-2蛋白、MMP-9蛋白以及miR-494-3p表达水平，上调lncRNA PAX8-AS1表达水平（P<0.05）。lncRNA PAX8-AS1靶向负调控miR-494-3p表达。过表达lncRN...     

长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5反向转录序列1靶向调控微RNA-128-3p对结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移的影响

目的 探究长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5反向转录序列1(lncRNA OIP5-AS1)在结直肠癌中的表达情况及靶向调控微RNA-128-3p(miR-128-3p)对结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)定量分析2017年1月至2018年12月在郑州大学人民医院住院并进行手术治疗的38例结直肠癌病人癌组织及相应癌旁组织、结直肠癌细胞系（SW480、SW620、HT-29和LoVo）及人正常结直肠黏膜细胞FHC中lncRNA OIP5-AS1和miR-128-3p的表达。将SW620细胞设为si-OIP5-AS1组、si-NC组、miR-128-3p mimic组、mimic-NC组、miR-128-3p inhibitor+si-OIP5-AS1组和inhibitor-NC+siOIP5-AS1组,采用细胞计数试剂盒（CCK-8）实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用划痕实验和transwell实验检测细胞侵袭与迁移能力,采用蛋白质印迹法检测E2F1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白（N...     

虫草素通过调控miR-524-5p表达抑制口腔鳞癌HSC3细胞的增殖、迁移及侵袭

摘要：目的:探讨虫草素通过调控微小RNA-524-5p（miR-524-5p）表达对口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法:体外培养口腔鳞癌细胞HSC3,分别使用不同浓度(10,20,40μmol·L-1)的虫草素处理;采用甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞增殖; Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-524-5p的表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白1（Cyclin D1）、p21、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）的表达量;分别将miR-524-5p mimics或anti-miR-524-5p转染至HSC3细胞后,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭。结果:与对照组比较,虫草素各浓度组细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,迁移细胞数及侵袭细胞数显著减少（P<0.05）,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低（P<0.05）,p21、E-cadherin蛋白水平及miR-524-5p的表达水平显著升高（P<0.05）,且虫草素浓度组间的上述指标比较差异均有统计学意义（P<0.05）; miR-524-5p过表达可抑制HSC3细胞增殖、迁移及侵袭,而抑制miR-524-5p表达可减弱虫草素对HSC3细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:虫草素可能通过上调miR-524-5p的表达从而抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭。     

lncRNA OIP5-AS1调节miR-942-5p/CHEK1轴对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)OPA相互作用蛋白5反义转录本1(OIP5-AS1)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响机制。方法 收集33例胶质瘤患者（低级别胶质瘤14例、高级别胶质瘤19例）和33例颅脑损伤患者的组织标本。实时荧光定量PCR(qPCR)检测组织和细胞中OIP5-AS1、微小RNA-942-5p(miR-942-5p)和检查点激酶1(CHEK1)mRNA表达,分析胶质瘤组织中OIP5-AS1、miR-942-5p和CHEK1 mRNA表达水平的相关性。体外培养人脑胶质瘤细胞系U87、SHG-44、U251、H4和正常人星形胶质细胞NHA,Western blot检测细胞中CHEK1蛋白表达。将U87细胞分为对照（NC）组、siRNA阴性对照（si-NC）组、OIP5-AS1 siRNA(si-OIP5-AS1)组、siOIP5-AS1+inhibitor阴性对照（si-OIP5-AS1+anti-NC）组、si-OIP5-AS1+miR-942-5p抑制剂（si-OIP5-AS1+anti-miR-942-5p）组,采用Lipofectamine 30...     

长链非编码 RNA FOXD2相邻相反链 RNA 1靶向调控微小 RNA-760对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨 FOXD2相邻相反链 RNA 1(FOXD2-AS1)对前列腺癌细胞的增殖和凋亡的影响以及作用机制。方法验于 2019年 1—11月进行,根据 DU145细胞转染情况分为空载体质粒( pcDNA)组、 FOXD2-AS1过表达质粒( pcDNA-FOXD2实AS1)组、小干扰 RNA阴性对照( si-NC)组、 FOXD2-AS1小干扰 RNA(si-FOXD2-AS1)组、微小 RNA(miR)-760组、 miR-760阴性对照( miR-NC)组及 si-FOXD2-AS1+抗 miR-760阴性对照( anti-miR-NC)组、 si-FOXD2-AS1+抗 miR-760(anti-miR-760)组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测 miR-760和 FOXD2-AS1表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测荧光活性;蛋白质印迹法检测蛋白表达; MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果与正常前列腺上皮细胞 RWPE-1相比,前列腺癌细胞 DU145、LNCaP、22Rv1中 miR-760表达水平显著降低［( 0.34±0.03)、(0.56±0.05)、(0.42±0.04)比( 1.01±0.08)］(P<     

FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探究FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌(RCC)ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 选取本院2017年1月—2019年12月RCC手术切除癌组织和癌旁组织60份,RT-qPCR检测组织和细胞中FOXD3-AS1和miR-135a-5p表达水平;ACHN细胞分别或联合转染si-NC、si-FOXD3-AS1-1、si-FOXD3-AS1-2、miR-NC、miR-135a-5p mimic、pcDNA3.1-FOXD3-AS1和miR-135a-5p inhibitor;行Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;行划痕闭合实验检测各组细胞迁移能力;行双荧光素酶实验检测靶向关系。建立裸鼠RCC移植瘤模型,分为si-FOXD3-AS1组和si-NC组,每组6只,建模后30 d处死测定移植瘤质量,采用免疫组织化学法检测Ki-67和E-cadherin阳性表达率。结果 与癌旁组织比较,癌组织中FOXD3-AS1表达显著上升,miR-135a-5p表达显著下降(P<0.01)。FOXD3-AS1干扰显著降低细胞活力、侵袭数目和划痕闭合率(P<...     

雷公藤甲素通过miR-320bAR轴对前列腺癌细胞的抑制作用

目的 观察雷公藤甲素(triptolide, TPL)对前列腺癌细胞恶性生物学行为的作用,探究其作用机制。方法 用实时荧光PCR(real-time fluorescence PCR,RT-PCR)检测LNCaP、PC-3、DU145前列腺癌细胞、RWPE-1人正常前列腺上皮细胞中miR-320b和雄激素受体(androgen receptor, AR)mRNA的表达水平。用不同剂量的TPL处理PC-3细胞,用MTT法检测细胞的增殖活力。用RT-PCR检测miR-320b和AR的表达水平。用6.25 nmol·L^(-1) TPL处理细胞,在TPL处理的基础上转染miR-320b NC/mimics,用Transwell和平板克隆形成实验检测细胞的侵袭和克隆能力。用Western blot检测AR及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)过程中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平。用荧光素酶实验验证miR-320b与AR的靶向关系。结果 与RWPE-1人正常前列腺上皮细胞比较,miR-320b和AR分别在前列腺癌细胞中呈低表达和高表达状态(P<0.01)。与Control组比较,TPL可上调PC-3细胞miR-320b的表达水平、下调AR的表达水平,抑制细胞的增殖、侵袭能力,抑制AR、N-cadherin和vimentin的表达、上调E-cadherin的表达水平(P<0.05)。与TPL组比较,miR-320b可提高TPL对PC-3细胞侵袭和增殖能力的抑制作用,抑制AR、N-cadherin和vimentin的表达、上调E-cadherin的表达(P<0.05)。荧光素酶实验显示,AR是miR-320b的潜在靶基因,miR-320b对AR存在显著调控作用(P<0.01)。结论 TPL可能通过miR-320b/AR轴抑制前列腺癌细胞的恶性生物学行为。     

lncRNA PVT1通过miR-1207-5p靶向调控Wnt6/β-catenin2信号通路对高级别浆液性卵巢癌的影响

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）PTV1对高级别浆液性卵巢癌增殖和迁移能力的影响。方法 收集61例高级别浆液性卵巢癌患者的癌组织及相应癌旁正常组织,qRT-PCR检测miR-1207-5p、lncRNA PVT1在高级别浆液性卵巢癌组织、癌旁正常组织及不同细胞系中的表达情况。构建lncRNA PVT1沉默细胞系,分为Ovcar3-siPVT1组、Ovcar3-siNC组、NC组。采用MTT和平板克隆实验、Transwell和划痕实验检测细胞增殖、侵袭和迁移;双荧光素酶报告基因检测验证miR-1207-5p与lncRNA PVT1、Wnt6的靶向关系,StarBase和TargetScan网站预测相应miRNA可靶向结合的基因;Western blotting检测Wnt6/β-catenin2信号通路相关蛋白的表达。构建siPVT1+过表达miR-1207-5p、siPVT1+过表达Wnt6细胞系,以siPVT1+siNC为对照,验证lncRNA PVT1的调控作用。结果 qRT-PCR结果显示,高级别浆液性卵巢癌组织中lncRNA PVT1的表达水平显著高于正常癌旁组织（P<0.05）。与NC组和Ovcar3-siNC组相比,Ovcar3-siPVT1组中lncRNA PVT1的表达显著下调,细胞克隆数、侵袭数减少,细胞迁移率降低,Wnt6、β-catenin2蛋白表达水平明显下降,差异均具有统计学意义（P<0.05）。双荧光素酶报告基因检测结果证明miR-1207-5p与lncRNA PVT1、Wnt6具有靶向关系。经StartBase和TargetScan网站预测分析,miR-1207-5p分别与lncRNA PVT1、Wnt6存在靶向结合位点。与siPVT1+NC组相比,siPVT1+过表达miR-1207-5p组和siPVT1+过表达Wnt6组细胞克隆数和迁移数明显增加（P<0.05）。结论 lncRNA PVT1在高级别浆液性卵巢癌中高表达。高表达lncRNA PVT1可能通过上调miR-1207-5p表达增强Wnt6/β-catenin2信号通路的活性,从而促进高级别浆液性卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移。     

LncRNA CBR3-AS1调节miR-409-3p/hnRNPA2B1轴对肝细胞癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨长链RNA CBR3-AS1(LncRNA CBR3-AS1)靶向微小RNA-409-3p(miR-409-3p)/核不均一核糖核蛋白A2B1(hnRNPA2B1)轴对肝细胞癌(HCC)细胞恶性生物学行为的影响。方法 qRT-PCR法分析肝癌组织中LncRNA CBR3-AS1和miR-409-3p表达水平。双荧光素酶检测LncRNA CBR3-AS1和miR-409-3p及hnRNPA2B1和miR-409-3p的靶向关系。将Hep G2细胞分为si-NC组、si-CBR3-AS1组、si-CBR3-AS1+anti-miR-NC组、si-CBR3-AS1+anti-miR-409-3p组、miR-NC组、miR-409-3p mimics组、miR-409-3p mimics+pcDNA组、miR-409-3p mimics+hnRNPA2B1组。平板克隆检测细胞增殖；Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡；划痕实验检测细胞迁移；Transwell实验检测细胞侵袭；Western blot分析法检测细胞核增殖抗原标记物(Ki67)、细胞周期负调控因子(P21)、...     

LncRNA TPT1-AS1在前列腺癌中的表达及对生物学功能的影响

摘要：目的:研究长链非编码RNA（LncRNA）肿瘤蛋白翻译调节因子1（TPT1）-反义RNA1（AS1）对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法:体外培养人正常前列腺上皮细胞（RWPE-1）和前列腺癌细胞系雄激素非依赖f生前列腺癌（LNCa P）、DU-145、PC-3、22RV1,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各细胞系中LncRNA TPT1-AS1表达水平;选取表达差异最大的细胞系PC-3、DU-145,阳离子脂质体LipofectamineTM2000瞬时转染si-RNATPT1-AS1阴性对照（si-RNA对照）组和siRNA-TPT1-AS1干扰（siRNA-TPT1-AS1干扰）组,不添加任何试剂设为空白对照组。qRT-PCR验证siRNA-TPT1-AS1转染情况; CCK-8检测TPT1-AS1-sh对细胞增殖的影响; Transwell检验TPT1-AS1-sh对细胞侵袭的影响;免疫印记（WB）法检测细胞TPT1蛋白的变化。结果:与正常前列腺细胞系RWPE-1相比,前列腺癌细胞系LNCa P、DU-145、PC-3、22RV1中TPT1-AS1的水平显著升高（P<0.05）。在DU-145、PC-3中,空白对照组与si-RNA对照组中TPT1-AS1表达量、0,6,12,24,36,48 h各时期450 nm处的吸光度(A450)值、侵袭细胞数量、TPT1蛋白表达量差异均无统计学意义（P>0.05）;与空白对照组、si-RNA对照组相比,siRNATPT1-AS1干扰组中TPT1-AS1表达量,24,36,48 h细胞A450值、细胞侵袭数量、TPT1蛋白表达量显著降低（P<0.05）。在DU-145中,与空白对照组、si-RNA对照组相比,siRNA-TPT1-AS1干扰组12 h细胞A450值显著降低（P<0.05）。结论:前列腺癌细胞系中TPT1-AS1表达上调;干扰前列腺癌细胞系DU-145、PC-3中TPT1-AS1可抑制细胞增殖、侵袭。     

miR-105-5p靶向SIRT1调控脂肪酸代谢影响胃癌细胞生物学行为的研究

目的 探讨miR-105-5p对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及脂肪酸代谢的影响,阐明miR-105-5p与沉默信息调节因子1(SIRT1)基因的靶向关系。方法 选取人胃黏膜上皮细胞GES-1、人胃癌HepG2细胞,将不同质粒转染到HepG2细胞,分为miR-105-5p组(转染miR-105-5p mimic)、si-miR-105-5p组(转染miR-105-5p inhibitor)、miR-NC组(转染mimic NC)、NC组(转染inhibitor NC)、Scramble组(转染Scramble)、miR-105-5p+Scramble组(转染miR-105-5p mimic、Scramble)及miR-105-5p+sh-SIRT1组(转染miR-105-5p mimic、sh-SIRT1)。MTT检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,ELISA检测细胞磷脂、三酰甘油含量,实时荧光定量PCR检测细胞中miR-105-5p、SIRT1 mRNA表达水平;Western blot检测细胞SIRT1、FASN、ACC1及FABP5表达水平。生物信息预测...     

长链非编码RNA DLG相关蛋白1-AS5在乳腺癌组织中的表达及对癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 分析长链非编码RNA(lncRNA)DLG相关蛋白（DLGAP）1-AS5对乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其分子机制。方法 采用癌症基因组图谱（TCGA）数据库分析乳腺癌组织及正常组织中DLGAP1-AS5表达水平,观察DLGAP1-AS5表达水平与乳腺癌患者生存期的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测4种乳腺癌细胞系：永生化乳腺上皮细胞(MCF-10A)、人乳腺癌细胞（MCF-7、HCC-1937）、人乳腺腺癌细胞(SK-BR-3)、人乳腺管癌细胞（BT-549）中DLGAP1-AS5表达水平。将DLGAP1-AS5过表达质粒或阴性对照质粒转染至MCF-7细胞,计为DLGAP1-AS5组和阴性对照组。采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）和Transwell实验检测MCF-7细胞的增殖和侵袭情况。采用starBase v3.0在线软件和双荧光素酶报告实验检测DLGAP1-AS5和miR-362-5p的靶向关系。qRT-PCR检测MCF-7细胞中miR-362-5p表达水平。蛋白质印迹实验检测MCF-7细胞中p38-丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路蛋白表达水平。结果...     

LncRNA TMPO-AS1调节miR-340-5p/RUNX1轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA TMPO反义RNA1(LncRNA TMPO-AS1)调控miR-340-5p/RUNT相关转录因子1(RUNX1)轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、人CRC细胞SW480、HCT116、LOVO、HT-29中TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1表达;将HCT116细胞随机分为：si-ctrl组、si-TMPO-AS1组、mimics NC组、miR-340-5p组、si-TMPO-AS1+anti-miR-ctrl组、si-TMPO-AS1+anti-miR-340-5p组;qRT-PCR检测6组HCT116细胞TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1水平;CCK-8法检测HCT116细胞活力;EDU法检测HCT116细胞增殖;Transwell检测HCT116细胞迁移和侵袭;western blot检测HCT116细胞RUNX1、PCNA、MMP-2表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证TMPO-AS1和miR-340-5p、miR-340-5p和RUNX1的...     

LncRNA OIP5-AS1调节miR-25-3p/SOX4轴对高糖诱导的人肾小管上皮细胞生物学过程的影响

目的 探讨长链非编码RNA Opa相互作用蛋白5-反义转录物1(lncRNA OIP5-AS1)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞增殖、凋亡和氧化应激损伤的影响及分子机制。方法 体外培养人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2,分为正常葡萄糖组（NG组）、高糖组（HG组）、HG+si-NC组、HG+si-OIP5-AS1组、HG+miR-NC组、HG+miR-25-3p组、HG+si-OIP5-AS1+inhibitor-NC组、HG+si-OIP5-AS1+miR-25-3p inhibitor组。转染48 h后,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中lncRNA OIP5-AS1、miR-25-3p和性别决定区Y框蛋白4(SOX4)m RNA水平;CCK-8法检测细胞活力;检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活性;流式细胞术分析细胞凋亡情况;检测细胞中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）的产生;Western blot实验检测细胞中SOX4、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）...     

lncRNA FOXD2-AS1靶向miR-3194-3p对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡影响的体外研究

摘要：目的:探讨lncRNA FOXD2-AS1对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响及分子机制。方法:实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的表达水平;将FOXD2-AS1干扰表达载体、miR-3194-3p模拟物、miR-3194-3p抑制剂+FOXD2-AS1干扰表达载体转染至CAL27细胞中,Western blot法检测蛋白表达; MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的靶向关系。结果:口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-3194-3p表达水平降低（P<0.01）。lncRNA FOXD2-AS1低表达或miR-3194-3p高表达,口腔鳞癌CAL27细胞中细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表达水平和细胞存活率降低,裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved-caspase-3）表达水平和细胞凋亡率升高（P<0.01）;且lncRNA FOXD2-AS1低表达降低了β-连环蛋白（β-catenin）蛋白表达。lncRNA FOXD2-AS1靶向调控miR-3194-3p,低表达miR-3194-3p逆转了FOXD2-AS1低表达对口腔鳞癌细胞CAL27增殖和凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响。结论:下调lncRNA FOXD2-AS1表达可能通过上调miR-3194-3p抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

LncRNA OIP5-AS1对卵巢上皮IOSE80表型转化的影响

目的 探索lncRNA OIP5-AS1对卵巢上皮细胞IOSE80发生增殖、迁移、凋亡、侵袭和周期的表型的变化及可能的机制。方法 患者临床资料数据收集自TCGA数据库及GEO数据库,R包分析后可视化OIP5-AS1在卵巢癌组织中表达上调,生存率与OIP5-AS1的相关性采用Kaplan-Meier分析。以慢病毒载体构建OIP5-AS1过表达和沉默的IOSE80细胞模型,采用RT-qPCR验证OIP5-AS1的表达,CCK-8检测细胞增殖,Transwell检测侵袭,划痕试验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western blotting检测细胞侵袭相关蛋白E钙黏着蛋白(E-cadherin)和N钙黏着蛋白(N-cadherin)的表达及细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)和细胞周期蛋白G相关激酶(cyclin-G-related kinase,GAK)的表达。结果 RT-qPCR结果显示成功构建OIP5-AS1过表达和沉默的IOSE80细胞株。CCK-8结果显示过表达OIP5-AS1促进IOSE80细胞的增殖。划痕试验结果显示过表达OIP5-AS1促进IOSE80细胞迁移。Transwell结果显示过表达OIP5-AS1会引起IOSE80细胞的侵袭力增强。流式细胞术结果表明OIP5-AS1的过表达使IOSE80细胞凋亡减弱并推动了细胞周期的进展。Western blotting结果显示过表达OIP5-AS1会下调E-cadherin的表达并上调N-cadherin的表达,同时过表达OIP5-AS1可提高CDK及GAK蛋白的表达。结论 lncRNA OIP5-AS1通过上调CDK及GAK的表达进一步干预了IOSE80细胞周期的调控,进而实现对卵巢上皮细胞恶性表型的间接调控作用。     

LncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-515-5p调控胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA ZFPM2反义RNA1(ZFPM2-AS1)对miR-515-5p的靶向调控作用以及对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic和3种胆管癌细胞(RBE、HuCCT1、TFK1)中ZFPM2-AS1和miR-515-5p的...     

miR-619-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响北大核心CSCD

目的探究miR-619-5p在人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7增殖、迁移和侵袭中的作用及机制。方法乳腺癌和正常乳腺组织及细胞中miR-619-5p的表达利用生物信息学分析或经qRT-PCR法检测;分别转染miR-619-5p模拟物或抑制剂后,qRT-PCR法测定miR-619-5p、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子mRNA的表达;CCK-8法用于检测细胞增殖;划痕愈合实验和Transwell TM实验观察细胞迁移和侵袭能力转变;EMT相关分子的蛋白表达由Western blot检测。生物信息学预测miR-619-5p靶基因,并对潜在靶基因CREB1作初步分析。结果miR-619-5p在乳腺癌中低表达。与对照组相比,过表达miR-619-5p后,miR-619-5p表达水平上调,EMT上皮标志物表达上调,促EMT分子及间质标志物表达下调,细胞的增殖、迁移与侵袭能力削弱,CREB1表达下调;低表达miR-619-5p组结果与上述结果相反。结论乳腺癌组织及细胞中miR-619-5p表达更低,miR-619-5p可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT,其效应可能通过靶向CREB1实现。     

5-氮-2'-脱氧胞苷对DU145前列腺癌细胞TIMP-3基因去甲基化作用及侵袭能力的影响

目的观察5-氮-2’-脱氧胞苷（5Aza-dc）对DU145前列腺癌细胞金属蛋白酶组织抑制因子3（TIMP-3）启动子去甲基化作用及侵袭能力的影响。方法用5Aza—dc处理DU145前列腺癌细胞，Transwell检测癌细胞的侵袭及运动能力，反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测TIMP-3mRNA的表达，Westem印迹检测TIMP-3的蛋白表达。结果5Aza-dc作用后的DU145细胞侵袭及运动能力降低；TIMP-3mRNA及蛋白恢复表达；TIMP-3启动子区去甲基化。结论5Aza—dc可以使DU145前列腺癌细胞TIMP-3启动子区去甲基化，使TIMP-3基因重新表达，恢复其抑制肿瘤侵袭和移动的能力。