干燥保存角膜行部分穿透角膜移植的动物实验研究

目前角膜移植材料的主要保存方法有:1.短期保存法(4℃冰箱内湿房保存法),MK液保存法;2.中期保存即器官培养法,KSol液保存法;3.长期保存法,为脱水或冻干保存法(用于板层角膜移植)和超低温冷藏保存法。上述保存法各有利弊。为找出方便易行、既适于板层角膜移植又可行穿透角膜移植的角膜材料保存法,我们在应用干燥、脱     

深低温角膜保存的研究进展

深低温冷冻保存法是目前保存供体角膜时间最长的保存方法，其保存效果与新鲜组织无异，故越来越受到研究的关注。本旨在对该保存法的研究进展作一综述。     

K-液角膜保存法

近20多年来,随着穿透性角膜移植术的开展,各种角膜保存法应运而生,并在世界范围内得到不同程度的使用。最初,人们将摘除下来的整个眼球放入湿房4℃保存。这种方法简单易行,但最多只能保存角膜48小时。确切地说,这并不是一种真正的角膜保存法,而只是一种眼球贮存法。1965年,Capella、Kaufman和Robbins发明了角膜冷冻保存法,这使角膜组织的长期保存首次得以实现。虽然它解决了一些角膜保存方面的重要问题,但因操作步骤复杂,需要高级技术人员和昂贵的仪器设施,故实际上仅在一些大的研究机构获得了成功。Lindstrom     

角膜中期保存液成分的研究进展

自ＭＫ液问世以来，角膜中期保存法一直为美国眼库最常用的角膜活性保存方法。随着保存液成分的改进，对角膜内皮细胞活性的保存效果逐渐提高。对有关角膜保存液的组成成分的研究进行综述，重点介绍基础液、高分子物质、抗生素、抗氧化剂等在保存液中的意义和研究进展。     

简化一步深低温保存法保存羊膜的实验研究

目的　观察简化一步深低温保存法保存不同的时间对羊膜活性的影响。方法　取健康剖宫产产妇胎盘 ,剥离其羊膜 ,分成 2 .5cm× 2 .5cm小块 ,用简化一步深低温保存法保存 1、3个月后取羊膜行光镜、电镜、酶组织化学 [乳酸脱氢酶 (LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH) ]及免疫组织化学 [碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF) ]观察 ,并与新鲜羊膜对比。结果　 (1 )光镜下 ,简化一步深低温保存法保存 1、3个月时羊膜上皮形态完好 ;(2 )电镜下 ,简化一步深低温保存法保存 1、3个月部分线粒体肿胀 ,细胞核变化不明显 ;(3 )简化一步深低温保存法保存 1、3个月时 2种酶活性与对照组相比差异无显著性 (P>0 .0 5) ;(4)b FGF分布于羊膜上皮和基质层。简化一步深低温保存法保存 1、3个月 b FGF表达与在新鲜羊膜中的表达差异无显著性 (P>0 .0 5)。结论　简化一步深低温保存法能长期保存羊膜的某些活性成分     

干燥脱水法长期保存角膜及角巩膜植片的组织活性研究

目的 研究干燥脱水法保存角膜及角巩膜植片的组织活性。方法 应用无水氯化钙－硅胶干燥脱水法保存角膜及角巩膜植片，根据现有保存资料统计共1287例，保存时间半年至15年，对不同保存时间的植片进行了组织结构，细胞活性和超微结构的研究。结果 干燥保存角膜片5，10，15年的组织切片报告其胶原纤维束清昕可见，各层纤维排列呈一定角度，成纤维细胞减少，细胞器存在，内皮细胞的核存在。保存后植片合格率分别为：半年98．8％，1年98．4％，5年98．9％，10年93．3％，15年96．7％。保存合格植片临床应用，术后植片透明率平均94．9％。结论 无水氯化钙－硅胶干燥脱水法长期保存的角膜及角巩膜植片，具有一定的组织活性，临床应用效果好，操作简便，费用低廉，值得推广。     

应用蜂蜜脱水低温保存板层角膜片进行板层角膜移植的实验研究

目前临床上长期保存板层角膜材料的方法有:甘油脱水法,氯化钙—分子筛,甘油—分子筛脱水法以及硅胶脱水法。在祖国医药中,为了达到保存药物之目的,有炼蜜为丸之法。有鉴于此,我们应用蜂蜜脱水低温保存     

人羊膜材料的深低温（-196℃）保存方法可行性研究

目的：探讨用液氮进行人羊膜深低温保存的可行性方法采用液氮深低温保存法及纯甘油4℃保存法保存人。羊膜30 d、60 d和90 d,分别进行LDH活性及bFGF表达量的检测,并与新鲜人羊膜进行比较。结果用液氮深低温保存的人羊膜,在保存90 d后,其LDH活性及bFGF表达量均明显高于用纯甘油4℃保存的人羊膜,差异具有统计学意义（P<0.05）,并且与新鲜羊膜LDH活性及bFGF表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。结论液氮深低温保存法对羊膜进行保存的方法是安全可行的。     

长期低温保存角膜方法的建立和临床应用

目的探索简易安全的长期保存供体角膜方法,为临床提供优质角膜材料.方法建立简易深低温冻贮技术保存活性角膜材料和全眼球冷冻法、4℃甘油脱水法保存板层角膜移植材料.采用透射电镜和临床角膜移植术后随访观察对3种方法保存的角膜材料进行了评价.结果电镜检查所见深低温保存的角膜片,内皮细胞完整,仅见线粒体肿大.在维持支架完整方面,深低温冻法效果最佳,全眼球冷冻法优于4℃甘油脱水法.板层角膜移植术后1～6年随访,全眼球冷冻法保存的植片(n=40)透明率为67.5%,新生血管化为32.5%;4℃甘油脱水法(n=110)透明率61.8%,新生血管化37.3%.穿透性角膜移植和眼前节重建术后1～3年随访情况分别为,深低温保存的植片增视率75.4%、75%;透明率75.4%、75%;角膜厚度(mm)0.54±0.05、0.61±0.06;内皮细胞密度(细胞/mm2)1,035±245,949±312.结论简易深低温长期保存的角膜材料可用于穿透性角膜移植术.全眼球冷冻法可代替4℃甘油脱水法长期保存板层角膜移植材料,且方法更简便.     

器官培养角膜保存的现状及展望

器官培养角膜保存法经过不断改进和发展,临床应用取得了满意的效果,故越来越受到研究者的关注,现就该保存法近年来的发展作一综述,并对目前仍需解决的问题及其前景进行分析和展望。     

两种方法保存羊膜联合自体角膜缘移植治疗复发性翼状胬肉

目的：评价不同方法保存羊膜联合自体角膜缘移植治疗复发性翼状胬肉的疗效。方法：采用两种方法保存的羊膜联合自体角膜缘移植术后治疗复发性翼状胬肉30例（31只眼）。A保存法15例（16只眼），B保存法15例（15只眼）。随访5-19月，平均12月。结果：羊膜植片及自体角膜缘植片全部存活，无排斥反应发生。随访期内，A组无复发，B组复发一眼。无角膜缘并发症发生。结论：保存羊膜联合自体角膜缘移植可有效治疗复发性翼状胬肉。但不同方法保存羊膜间的差异还有等进一步研究。     

改良器官培养法保存人角膜的临床研究

目的探讨应用改良的器官培养法保存角膜供体的临床应用效果。方法自行设计角膜培养瓶保存人供体角膜13个。供体植片在保存25天内分别应用于穿透性角膜移植术,对照组是在同期应用甘油保存的供体角膜进行角膜移植术的16例患眼。分别在术后第3m,第6m和第12m检测试验组和对照组的角膜内皮细胞质量、角膜透明度和术后并发症情况,并对比试验组于对照组之间的差异。结果1.试验组角膜内皮细胞术前与术后3m差异有统计意义（t=2.12,P〈0.05）,术后6m的内皮细胞数与术后3m的差异无统计意义（t=1.774,P〉0.05）。术后12m的内皮细胞数与术后6m的差异有统计意义（t=2.65,P〈0.05）;2.试验组角膜植片透明度好于对照组（Wilcoxon频数表资料的两样本比较法）,术后并发症比对照组少。结论1.器官培养法保存角膜植片效果好于甘油保存法;2.器官培养法是一种有效的长期保存角膜的方法,应用新型角膜培养瓶保存角膜经济适用,适合在各级医院进行推广。     

以干燥脱水法保存的异种角膜基质为载体构建人工生物角膜上皮组织

目的:观察以干燥脱水法保存的鸵鸟角膜基质为载体构建人工生物角膜上皮组织的生物学特性。方法:采用组织块培养法获得新西兰大白兔角膜缘干细胞,经胰蛋白酶消化法获得细胞,种植于干燥脱水法保存的鸵鸟角膜板层基质上,采用气液界面培养法进行培养,通过倒置显微镜、透射电子显微镜、荧光显微镜观察其形态学、生长特点,超微结构及免疫学特征。结果:在干燥脱水法保存的鸵鸟角膜基质上种植兔角膜缘干细胞,接种72h后,细胞形成单层,移置气液交界面后继续培养7～10d,逐渐形成复层。经光镜、透射电镜、及免疫学检测显示其具有角膜上皮组织的生物学特性。结论:兔角膜缘干细胞能够在干燥脱水法保存的鸵鸟角膜基质载体上生长,并可形成复层,基本具有正常角膜上皮细胞的形态、超微结构和生物学特性。     

干燥保存角膜穿透移植实验与排斥反应

干燥保存角膜穿透移植实验与排斥反应第四军医大学西京医院眼科张廷铖，马吉献，于纯智传统认为、干燥保存的角膜是无活性的组织，仅限于板层角膜移植应用．见于目前供穿过角膜移档应用的中、短期角膜保存液保存法。均受时间短的严格限制而不能满足临床而要，定水江化钙干...     

改良C3F8保存法中期保存兔角膜植片的实验研究

目的采用改良的C3F8保存法中期保存新西兰白兔的角膜植片。方法将新西兰白兔眼的角膜植片采用C3F8保存于无菌小房,观察保存不同时间后角膜内皮细胞的数量、形态以及角膜厚度,并用同一保存时间的新西兰白兔角膜植片进行同种异体的穿透性角膜移植手术,观察术后第5天角膜植片中央部的角膜厚度以及内皮细胞密度。结果经C3F8中期保存3、5天后的角膜植片,其内皮细胞数量、大小与0天相比无明显的统计学差异,7、9天后的角膜植片,其内皮细胞数量减少,内皮细胞面积增大,而角膜厚度与0天相比有统计学差异。保存5天的角膜内皮细胞界限清晰,上皮细胞微绒毛结构形态正常。保存7、9天的角膜内皮细胞的边界不清晰。将保存后第3、5天的角膜植片行同种异体角膜移植术,术后第5天,保存3天及5天移植组与保存0天角膜植片相比,角膜内皮细胞计数及角膜厚度无显著性差异。结论采用改良的C3F8保存法中期保存角膜植片是可行的。     

冷冻保存角膜行板层角膜移植的超微结构观察

利用普通冰箱（－２４℃）保存的兔角膜行同种异体板层角膜移植，对其术后的修复进行连续的超微结构观察，并与无水氯化钙干燥保存法比较，结果，冷冻保丰植片术后在超微结构上可以完全达到正常，与干燥保存无明显差别，提示：利用普通冰箱保存角膜完全可用于板层角膜移植。     

四种方法保存羊膜的组织形态学研究

目的观察4种常用的保存羊膜在不同保存期组织形态和超微结构的改变,为临床应用提供依据。方法取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,随机分成4组保存：DMEM/甘油深低温组、纯甘油4℃组、无水酒精组、真空干燥组。于保存后1个月、3个月、12个月（DMEM/甘油组和纯甘油组）,行HE染色光镜及透射电镜检查,观察其组织形态结构变化,以新鲜羊膜作为对照。结果（1）DMEM/甘油深低温保存组：光镜示保存1个月、3个月时羊膜组织结构基本完整,12个月时上皮细胞轻度破坏;透射电镜示在保存的各个时段羊膜上皮细胞完整,胞核局部溶解,线粒体肿胀,基底膜正常;（2）纯甘油4℃保存组：光镜观察保存1个月、3个月、12个月羊膜上皮细胞结构破坏,12个月基质层结构轻度破坏;透射电镜示保存各时段羊膜上皮细胞破坏明显,但基底膜基本正常;（3）无水酒精保存组：光镜示保存1个月、3个月时羊膜组织结构较完整;透射电镜示羊膜上皮细胞胞膜破坏,胞质、胞核溶解,基底膜变薄;（4）真空干燥保存组：光镜示保存1个月、3个月羊膜上皮细胞和部分基质层结构破坏明显;透射电镜示1个月、3个月时羊膜上皮细胞胞膜完整,核均质化与溶解并存,基底膜变薄。结论4种方法中,就组织形态和超微结构而言,以DMEM/甘油深低温保存法保存效果最好,纯甘油保存法次之,无水酒精和干燥保存法差。     

异体硬脑膜干冻保存法及临床应用的研究

我们探索用干冻保存技术制作同种异体硬脑膜，获得成功。再将干冻硬脑膜经动物实验后，应用于临床修复眼睑缺损、上睑下垂、上睑退缩，脸缘皮肤内卷和巩膜坏死等，取得满意效果。同种异体硬脑膜干冻保存方法是一种有效的保存法。干冻保存的异体硬脑膜在临床可用于多种眼科矫形手术，是一种有效的组织替代物。     

DX保存液与甘油保存液对人角膜基质透镜保存效果的比较

目的:比较DX保存液与甘油保存液对人角膜基质透镜的保存效果。方法:收集2019年2—5月于山东第一医科大学附属青岛眼科医院在飞秒激光小切口角膜基质透镜取出术中取出的中高度近视患者30例60眼的完整角膜基质透镜标本,采用随机数表法将标本分为正常对照组、DX保存液保存1 d组、DX保存液保存1周组、甘油保存1 d组、甘油保...     

不同保存方法对角膜内皮细胞活性的影响

目的:探索简易安全的中长期保存供体角膜方法,评价不同保存方法保存后角膜内皮细胞活性,为临床提供优质角膜材料。方法:建立简易中期保存液,深低温保存法保存大鼠角膜。将30只鼠眼随即分为3组。分别为湿房保存,中期保存液和深低温保存。采用活性染色对角膜内皮细胞进行评价。判定3种方法保存的角膜内皮细胞的活性状态。结果:使用中期保存液和深低温保存后复温的角膜植片内皮细胞密度和活性率与湿房保存组比较差异无显著性(湿房组细胞密度个/mm2为2729.5±158.0,ESR%为88.9±3.5;中期保存组分别为2646.8±217.2和86.9±2.7;深低温组分别为2706.2±184和287.3±3.3,P>0.05)。结论:简易中期保存液和深低温保存后角膜具有较好的内皮细胞活性和临床应用价值。