基质金属蛋白酶在涎腺良、恶性多形性腺瘤中的表达

目的:检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN),在人正常涎腺组织和涎腺良、恶性多形性腺瘤中的表达,探讨其表达的生物学意义。方法:通过免疫组织化学技术SP法检测人66例正常涎腺组织、45例涎腺多形性腺瘤及42例涎腺恶性多形性腺瘤中,MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN的表达,采用χ2检验比较3种组织中MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN表达的差异。结果:MMP-2在人正常涎腺组织,涎腺良、恶性多形性腺瘤中的阳性表达率分别为9.09%、46.67%、85.71%;MT1-MMP在以上3种组织中的阳性表达率分别9.09%、53.33%、78.57%;TIMP-2在以上3种组织中的阳性表达率分别为10.61%、44.44%、59.52%;EMMPRIN在以上3种组织中的阳性表达率分别为13.64%、48.89%、83.33%。MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN在涎腺多形性腺瘤中的表达显著高于人正常涎腺组织,且MMP-2、MT1-MMP及EMMPRIN在涎腺良、恶性多形性腺瘤中表达的差异有统计学意义。结论:在涎腺多形性腺瘤中,MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN的表达与MMP-2的活化有关,且MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN有可能作为判断多形性腺瘤侵袭性的有效指标。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达失衡与涎腺恶性肿瘤浸润生长的关系

目的　探讨基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、9),膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)及基质金属蛋白酶组织抑 制剂1、2(TIMP-1、2)与涎腺恶性肿瘤浸润生长的关系。方法　应用免疫组化SP法和明胶酶谱法检测28例涎腺良 性肿瘤、26例涎腺恶性肿瘤中MMP-2、9,MT1-MMP及TIMP-1、2的表达及细胞定位,分析其中酶原与活性酶的含量 比例。结果　涎腺恶性肿瘤中MMP-2、9的表达强于良性肿瘤(P<0·05),TIMP-1、2的表达低于良性肿瘤 (P<0·05)。MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的表达有相关性。MMP-9酶原及活性MMP-9在恶性肿瘤中的表达均高于良 性肿瘤(P<0·05)。结论　MMP-2、9在涎腺恶性肿瘤浸润性生长中扮演了重要角色。涎腺恶性肿瘤中,TIMP-1、2 抑制作用的降低导致了MMP-2、9合成、激活的增多,令MMP-2、9与其天然组织抑制剂TIMP-1、2之间的平衡失调, 从而基底膜加速降解。     

涎腺多形性腺瘤253例临床分析

目的分析涎腺多形性腺瘤的发病概况、手术治疗及复发等情况。方法对253例经病理证实,资料完整的涎腺多形性腺瘤住院手术患者进行5~15年随访观察总结。结果男87例,女166例。20~50岁142例,发病率最高。根据不同部位采取不同的手术方式,复发9例,占3.56%。结论该病多发于青壮年。女性多于男性,好发部位为腮腺、颌下腺。恰当的手术可减少或避免肿瘤的复发。     

人涎腺多形性腺瘤细胞体外培养及其生物学特性

目的 建立人涎腺多形性腺瘤细胞系。方法 取自腮腺多形性腺瘤患者的原发肿瘤进行体外培养。对培养的细胞进行活细胞观察和组织学染色。观察细胞生长状况，绘制生长曲线。采用免疫细胞化学检测细胞内特异性抗原标记物对细胞进行鏊定，并对肿瘤的致瘤性进行裸鼠异种移植实验。结果 多形性腺瘤体外培养细胞呈多边形或梭形，有的细胞围成腺腔结构，胞浆内富含粘液，形成空泡。有的成片排列，细胞外有粘液样物质。细胞的生长曲线较平缓，无明显快速生长期。肿瘤性腺上皮细胞角蛋白阳性，肿瘤性肌上皮细胞肌动蛋白阳性。结论 建立的涎腺多形性腺瘤有限细胞系(SPA-02)，保留了原代细胞的特点，并与原发肿瘤的组织学特征相似。     

涎腺多形性腺瘤118例报告

涎腺多形性腺瘤是涎腺肿瘤中最常见的一种疾病。我院自１９８１－０１～１９９７－０１共收治涎腺肿瘤１７２例，经病理确诊为多形性腺瘤的１３６例。现将资料完整的１１８例病例分析讨论如下：１临床资料１．１年龄与性别１１８例中，男６２例，女５６例。年龄最大者７０...     

腮腺多形性腺瘤与自身瘤旁涎腺组织内十八种微量元素含量分析

作者采用等离子光谱法对２４例腮腺多形性腺瘤瘤组织、自身瘤旁涎腺组织内十八种微量元素的含量进行了检测与分析，以初步探讨组织内微量元素含量与腮腺多形性腺瘤之间的关系。     

涎腺多形性腺瘤98例临床分析

多形性腺瘤又名混合瘤。该瘤含有肿瘤上皮组织与粘液样组织或软骨样组织,因而其组织象具有多形性或混合性,故名多形性腺瘤或混合瘤。本文分析１９８５～１９９６年收集的９８例涎腺多形性腺瘤,全部病例均经病理证实。现报告如下：１　临床资料病例：本组病例中男性５２例,女性４６例。发病年龄：最小１８岁,最大６８岁。发病部位：腮腺７３例,颌下腺区１８例,硬腭２例,软硬腭处１例,舌部和唇部各２例。临床表现与诊断：本组９８例均以肿块而就诊,瘤体大小由于部位不同而差异。最小为０６ｃｍ直径（舌部）;最大为６ｃｍ×５ｃｍ…     

涎腺多形性腺瘤的组织发生学研究——用免疫组化法看多形性腺瘤

本文用自制的角蛋白和S-100蛋白抗体、细胞性角蛋白(低分子量)和波形丝蛋白单克隆抗体,对26例涎隙多形性腺瘤进行了PAP法免疫组化研究,结果显示:导管样结构的内层细胞、鳞状化生区、肌上皮片块及粘液样组织的部分细胞以及软骨样陷窝的周边均呈角蛋白阳性,导管样结构的外层细胞、肌上皮片块和粘液样组织及软骨样细胞均呈S-100蛋白阳性,波形丝蛋白在肌上皮片块及粘液软骨样结构的部分细胞呈阳性。本文将这些结果与正常涎腺的免疫组化结果相对比,经分析讨论得出:多形性腺瘤的组织发生主要与导管上皮有关。肿瘤内的肌上皮样细胞可能为固有肌上皮细胞的异常增殖分化,也可能为导管上皮在病变时化生而来,而粘液,软骨样结构主要为导管上皮通过肌上皮细胞的多向分化、形成所致。上皮细胞在发生肿瘤化时,其内的角蛋白抗原可能也同时发生着某种规律性的变化。了解这点,对进一步认识和研究涎腺上皮性肿瘤有重要意义。     

涎腺多形性腺瘤的DNA测定与分析

在正常细胞中 ,染色体的数目和形状是相对稳定的 ,每一体细胞具有 4 6条 (2 3对 )染色体 ,称为二倍体细胞 (2Ｃ ,Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ)。当染色体的数目整组增加 ,超过三倍体者为多倍体。如果染色体非整组性的增减则称为非整倍体。ＤＮＡ的非整倍体即意味着恶性肿瘤 (二倍体或多倍体也不能完全排除恶性 )。ＤＮＡ是细胞染色体的重要组成部分 ,因此正常细胞的ＤＮＡ的质量是恒定的 ,而恶性细胞由于其调节和生长控制系统障碍 ,而获得无限增殖力 ,需要合成大量ＤＮＡ以满足生长的需要。因此 ,ＤＮＡ含量的测定 ,可以作为直接反映肿瘤增殖活力的…     

金属蛋白酶及其组织抑制剂在涎腺腺样囊性癌细胞株表达的 …

为了研究金属蛋白酶（ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ，ＭＭＰ）及其组织抑制剂（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ，ＴＩＭＰ）对涎腺腺样囊性癌细胞（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）转移的影响，本研究应用斑点印迹杂交的分子生物学方法检测ＡＣＣ－２细胞系及高转移细胞株ＡＣＣ－Ｍ中ＭＭＰ－２，ＭＭＰ－９和ＴＩＭＰ－２的表达，结果显示，ＭＭＰ－２，Ｍ     

口腔扁平苔藓中基质金属蛋白酶及其组织抑制剂的表达

目的 分析基质金属蛋白酶（MMP）2，膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP），基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）2在口腔扁平苔藓（OLP）中的表达及意义。方法通过免疫组化检测其在OLP中的表达并与口腔鳞状细胞癌（OSCC）及正常口腔黏膜进行比较。结果从正常口腔黏膜（NOM）、非萎缩型OLP，到萎缩型OLP和OSCC3种酶表达依次增加。萎缩型OLP中MMP-2和MTl．MMP的表达明显高于NOM和非萎缩型OLP，与OSCC表达相似。TIMP-2的表达亦随着MMP的增高而增加，但与MMP-2和MT1-MMP相比，其增加量相对较低。结论MMP表达的高低可能成为判断OLP恶变潜能的检测指标之一。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在牙本质生成性影细胞瘤和牙源性影细胞癌中的表达

目的 对牙本质生成性影细胞瘤(dentinogenic ghost cell tumor,DGCT)和牙源性影细胞癌(ghost cell odontogenic carcinoma,GCOC)中基质金属蛋白酶(matrix metallopmteinases,MMP)和金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP)的表达特点进行研究.方法 免疫组织化学分析15例DGCT和9例GCOC中MMP-2、MMP-9、MMP-14、TIMP-1和TIMP-2的表达.对DGCT和GCOC各一例分析MMP-2、MMP-9、MMP-14、TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;明胶酶谱分析MMP-2和MMP-9酶原和活化蛋白的表达.结果 MMP-9和TIMP-1在GCOC中高表达(7/9,8/9);TIMP-1在GCOC中的高表达,与在DGCT中相比差异具有统计学意义(P＜0.05).对一例DGCT和一例GCOC病例研究发现,MMP-9酶原和活酶在GCOC中高表达,并且MMP-9和TIMP-1 mRNA在GCOC中高表达.结论 MMP-9和TIMP-1可能与GCOC的性质和生物学行为有关.     

MMPs及TIMPs在ACC-M、ACC-2裸鼠移植瘤中的表达

目的:探讨唾液腺腺样囊性癌高低转移细胞株(ACC-M、ACC-2)裸鼠移植瘤中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)及基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissueinhibitorofmetalloproteinases,TIMPs)的表达。方法:采用ACC-M、ACC-2细胞株,建立ACC-M、ACC-2细胞株的裸鼠皮下移植瘤模型。在2组模型中,每组随机取3只裸鼠,用半定量RT-PCR分析移植瘤中MMP-2、MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因的表达水平,同时用免疫组化方法检测2个细胞株裸鼠移植瘤的MMP-2、MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白的表达情况,检测并记录其积分光密度值。所有检测数据用SPSS11.5软件进行均数t检验处理。结果:半定量RT-PCR和免疫组化结果均显示,MMP-2、MMP-7、MMP-9、TIMP-1的表达为ACC-M显著高于ACC-2(P<0.05);TIMP-2在2个细胞株裸鼠移植瘤的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MMP-2、MMP-7、MMP-9、TIMP-1的表达差异可能与ACC-M、ACC-2转移能力的大小相关。     

Effects of nicotine and lipopolysaccharide on the expression of matrix metalloproteinases, plasminogen activators, and their inhibitors in human osteoblasts

Objective

Lipopolysaccharide (LPS) from periodontopathic bacteria can initiate alveolar bone loss through the induction of host-derived cytokines. Smoking increases the risk and severity of periodontitis. We examined the effects of nicotine and LPS on the expression of matrix metalloproteinases (MMPs), plasminogen activators (PAs), and their inhibitors, including tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) and PA inhibitor-1 (PAI-1), in osteoblasts.

Methods

The cells were cultured with or without 10⁻⁴ M nicotine and 100 ng/ml LPS for 12 days or with 100 μg/ml polymyxin B, 10⁻⁴ M d-tubocurarine, 10 μmol/ml NS398, or 10⁻⁶ M celecoxib in the presence of either nicotine or LPS for 12 days. The gene and protein expression levels for MMPs, PAs, TIMPs, and PAI-1 were examined using real-time PCR and ELISAs, respectively. PGE₂ production was determined using an ELISA.

Results

The addition of nicotine and/or LPS to the culture medium increased the expression of MMP-1, -2, and -3 and tissue-type PA (tPA); decreased the expression of TIMP-1, -3, and -4; and did not affect expression of TIMP-2 or PAI-1. In the presence of d-tubocurarine or polymyxin B, neither nicotine nor LPS stimulated the expression of MMP-1. In the presence of NS398 or celecoxib, the stimulatory effects of nicotine and LPS on MMP-1 expression were unchanged, but they were unable to stimulate PGE₂ production.

Conclusion

These results suggest that nicotine and LPS stimulate the resorption process that occurs during turnover of osteoid by increasing the production of MMPs and tPA and by decreasing the production of TIMPs. Furthermore, they suggest that the stimulatory effect of nicotine and LPS on PGE₂ production is independent of their stimulatory effect on MMP-1 expression.     

缺氧对人牙周膜成纤维细胞基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制物mRNA表达的影响

目的 探讨缺氧对人牙周膜成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)和组织金属蛋白酶抑制物(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase,TIMP) mRNA表达的影响,以期为牙周组织修复再生机制研究提供依据.方法 组织块法培养人牙周膜成纤维细胞,分为缺氧组和常氧组(对照组).缺氧组细胞分别于1％O2、5％ CO2、94％N2的37℃培养箱中培养12、24和48 h(分别为12、24、48 h缺氧组);常氧组细胞在20％O2、5％ CO2、75％N2的37℃培养箱中培养.采用反转录聚合酶链反应技术检测MMP和TIMP相关基因的表达.缺氧组与常氧组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD检验.结果 12、24、48 h缺氧组MMP-2 mRNA的表达呈明显递增趋势(分别为0.769±0.038、0.793±0.043、0.865±0.047),均显著高于常氧组(0.294±0.117),P＜0.01;12h缺氧组TIMP-1,2 mRNA的表达(分别为1.870±0.645、0.862±0.043)均有一过性升高,均分别显著高于常氧组TIMP-1,2 mRNA的表达(分别为0.816±0.043、0.426±0.097),P＜0.05.12h缺氧组MMP-1/TIMP-1 mRNA的比值(0.392±0.206)显著低于常氧组(0.859 ±0.126),P＜0.05;24、48 h缺氧组MMP-2/TIMP-2 mRNA的比值(分别为1.091±0.207、1.264±0.377)均显著高于常氧组(0.695±0.255),P＜0.05.结论 缺氧可以导致MMP-1、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达,并使MMP-2 mRNA与TIMP-2 mRNA的比值失衡,这可能是缺氧导致牙周炎患者牙周组织破坏加重的机制之一.     

An immunohistochemical study of XIAP expression in pleomorphic adenoma and carcinoma ex pleomorphic adenoma

Background: X‐linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP) is a member of the inhibitor of apoptosis proteins family of caspase inhibitors. Expression of XIAP in various neoplasms has been associated with aggressive behavior. The biological progression from pleomorphic adenoma (PA) to carcinoma ex pleomorphic adenoma (CXPA) has been poorly understood. We studied XIAP expression by immunohistochemistry in PA and CXPA. Materials and methods: Formalin‐fixed, paraffin‐embedded representative sections of 14 cases of PA and seven cases of CXPA (four invasive and three intracapsular) were stained with anti‐XIAP (# 610763; BD Biosciences, San Jose, CA, USA) following citrate‐based antigen retrieval. Granular cytoplasmic staining was considered positive and intensity was assessed from weak (1+) to strong (3+). PAs were morphologically evaluated for cellularity, cytological atypia and mitotic activity. Results: Of the seven PAs composed mostly of myxohyaline stroma with scattered ductal elements, two tumors showed no staining and five showed rare (<1%) 1+ positive cells. Of seven more cellular PAs, five had sheets of tumor cells comprising more than 50% of the tumor and two had sheets comprising more than 80% of the tumor (cellular PA), focal to diffuse 2+ to 3+ staining was observed. Tumor cells with strong staining often exhibited cytological atypia in the form of nuclear enlargement and contour irregularity, prominent nucleoli and eosinophilic cytoplasm. Mitotic activity was occasionally seen in cellular areas expressing XIAP. All cases of CXPA demonstrated diffuse 3+ staining in the carcinomatous component and 1+ to focally 3+ staining in cellular areas of the underlying PA. Conclusion: Increased expression of XIAP from PA to cellular PA to CXPA and in atypical cells within cellular areas of PA adds to our growing understanding of defective apoptotic pathways in malignant transformation in this group of salivary gland tumors and suggests an adenoma to adenocarcinoma model of progression. Further correlation with other oncogene expression may provide insight into the multiple molecular pathways that are affected in these tumors. Targeted therapy of XIAP may play a future role in the management of CXPA.     

Immunohistochemical detection of matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) in ameloblastomas

BACKGROUND: To evaluate the roles of matrix metalloproteinases (MMPs) and their tissue inhibitors (TIMPs) in tumor progression, expression of MMP-1, -2 and -9 and TIMP-1 and -2 was analyzed in ameloblastomas as well as tooth germs. METHODS: Frozen tissue sections of seven tooth germs and 22 ameloblastomas were immunohistochemically examined using anti-MMP-1, -2 and -9 and anti-TIMP-1 and -2 antibodies. RESULTS: MMP-1, -2 and -9 and TIMP-1 and -2 were expressed strongly in mesenchymal components of tooth germs, and stromal cells of ameloblastomas. Immunoreactivity for MMP-9 in stromal cells of ameloblastomas was significantly stronger than in mesenchymal cells of dental follicles and dental papillae. Dental laminae showed weak MMP-2 expression in six tooth germs, MMP-9 expression in two tooth germs and TIMP-1 expression in six tooth germs. Some tumor cells showed weak MMP-2 expression in 19 ameloblastomas, MMP-9 expression in four ameloblastomas and TIMP-1 expression in all cases. TIMP-2 reactivity was prominently found in basement membrane zones of dental laminae in tooth germs, and tumor cell islands or nests in ameloblastomas. CONCLUSION: Expression of MMPs and TIMPs was considered to be associated with interactions between epithelial cells and mesenchymal components in normal and neoplastic odontogenic tissues; these molecules might play a role in regulation of tumor progression in ameloblastomas as well as regulation of developmental processes in tooth germs.     

涎腺多形性腺瘤中赖氨酰氧化酶表达的研究

目的 检测涎腺多形性腺瘤(salivary pleomorphic adenoma,SPA)组织中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达,探讨LOX与SPA发生发展的关系.方法 取20例SPA组织标本,并配对20例SPA瘤旁涎腺组织,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR方法检测LOX mRNA在组织中的的表达水平,并分析其表达变化,用蛋白质印迹法检测LOX的蛋白表达水平.结果 SPA组织中LOX mRNA表达水平明显高于瘤旁涎腺组织(12.81 ±0.92),SPA组织中LOX蛋白表达水平明显高于瘤旁涎腺组织.结论 LOX mRNA和蛋白在SPA瘤组织中均呈高表达,提示LOX的异常表达可能参与了SPA的发生、发展.