生物样品分析中基质效应和准确度的确定

在生物样品分析中,除了被分析药物本身高活性和高度不稳定性等因素造成的问题之外,生物样品中基质效应的存在也会使生物样品分析的复杂性和难度加大。目前人们通常采用加样回收的方法考察生物样品分析方法的准确度。如果分析方法准确度不合格,所得到的数据也是无意义的,但一些作者并没有充分认识到准确度的重要性。本文主要通过引用国际权威机构的分析方法验证指南以及国内最新版药物分析教科书中有关内容对准确度进行阐述。值得注意的是,在药代动力学研究中,血清中药物测定数据的准确性以及是否可用取决于回收率结果是否合乎要求,但关于药物在生物体内的分布问题上,即使采用加样回收方法也不一定能保证数据是准确的。     

生物分析方法确认策略

本文介绍了葛兰素威康研究实验室药物代谢研究部门对生物分析方法进行确认的策略。阐述了设计一个恰当生物分析方法的基本原理，以及建立一个适当的方法之前必须对实验数据进行评估，评估参数包括选择性、专属性、定量检出限、线性、准确度、精密度和回收率等。本文还讨论了药物各发展阶段确认设计前必须考虑的一些要点，如生物基质、分析工作标准、样品分批量大小及组成、分析仪器、初始方法确认、临床前方法确认、临床方法确认、方     

生物药物分析方法验证体系的研究

目的:探讨生物药物分析方法验证中存在的问题及改良策略。方法:分析国内外对于生物药物分析方法验证的理念、特点及研究进展,将质量源于设计的理念同传统方法验证理念进行比较研究。结果与结论:将指标化、终点化控制的传统验证体系改良为可视化、可溯源、立体化过程控制的方法验证系统。将方法建立及验证工作有机融合一体,为高质量数据提供保障。这个体系不但可有效整理记录方法建立及验证过程,利于分析方法转移过程中有效信息的传递,也有利于生物药物分析方法的评价和研究。     

生物样品分析中的试验样品再分析研究进展

生物样品分析中,由于基质成分的不同、蛋白结合的差异、已知和未知代谢物的转化、样品的不均一性和伴随服用的其他药物等原因,方法验证过程中使用的标准曲线和质控(QC)样品不能完全地模拟试验样品。这些因素在试验样品的储存、处理及检测过程中,可能会影响试验样品中待测物测定的准确度和精密度,因此需要采用试验样品再分析评估生物样品分析方法的重现性和准确性。本文首先介绍试验样品再分析的概念及在生物样品分析中发展的历程。然后对其重要性、实施规范、应用范围、样品选择、可接受标准、结果调查等方面进行综述,并对其失败原因进行分析和讨论,举例具体分析其主要的影响因素及如何利用其结果改进生物分析方法的质量,最后对其应用前景和发展方向进行展望。     

LC-MS/MS同时测定5种探针底物代谢产物和快速评价细胞色素P450同工酶的活性

目的建立同时测定奥美拉唑（CYP2C19）、右美沙芬（CYP2D6）、睾酮（CYP3A4）、氯唑沙宗（CYP2E1）和甲苯磺丁脲（CYP2C9）5种探针底物代谢产物的Cocktail体外方法,快速评价药物对人肝微粒体细胞色素P450同工酶活性的影响。方法通过人肝微粒体与5种探针底物在还原系统NADPH的作用下,于37℃水浴条件下共同孵育,采用液质联用（LC-MS/MS）分析方法,测定探针底物的代谢产物生成量来评价各P450同工酶的活性。结果建立了同时测定5种P450同工酶活性的酶反应条件和LC-MS/MS分析方法,数据显示该方法具有良好的线性和分析灵敏度,以及具有良好的准确度、精密度、重现性,可用于药物间相互作用的体外快速评价。结论可用于体外快速评价药物对相应的CYP450亚型酶活性的影响,以预测潜在的药物相互作用。     

人体苯磺酸氨氯地平生物分析方法验证问题的探讨

目的探讨国内进行生物分析方法验证存在的问题。方法分析2001年至2013年含测定人体苯磺酸氨氯地平浓度的生物分析方法验证的20篇文献(除去相同试验的文献),并与欧盟生物分析方法验证指导原则进行对比。结果与结论国内的试验单位进行生物分析方法验证时在基质效应、稳定性的验证方面需要加强;建议增加残留、稀释完整性、已测样品再分析、系统适用性等方面的内容以提高生物分析的质量。我国的药品申报者、生物分析研究单位,应充分认识到生物分析方法验证的意义和重要性,关注科学和法规的不断发展,开展系统、合理的方法学验证工作,以保证药物安全性、有效性研究的科学性。     

电位滴定法在药物分析中的应用进展

利用电位滴定的方法对药物进行定量分析是经典的分析方法,可以有效的对混浊或有颜色的待测溶液进行测定,而且分析结果更为精确。但由于其对测定仪器设备的要求比较高,且操作较为复杂,在我国的发展和应用还不是十分成熟,需要进一步的研究推广。本文将对在药物分析中应用电位滴定的方法进展进行分析和探讨。     

药代动力学与生物利用度研究中生物样本分析方法的合格性查证

在药代动力学、生物利用度(bioavailability)与生物等效度的研究中,重要的是必须采用具有特征的且经充分合格性查证(Validated)的现代化分析方法,以获得能供满意解释的可靠数据。分析方法经常在改进,需要强调:每一种分析技术都具有自己的因药而异的特点。分析技术的适用性受研究工作最终目标的影响。用于每种药物或代谢物的分析方法,需要各自明确的合格性查证标准.当样本进行多中心分析时,必须在每个实验室对分析方法进行合格性查证,并为每个实验室提供适当的合格性查证信息,使各实验室之间的测定结果具有相互可信性。除非一     

拉曼光谱法快速测定氨茶碱注射剂中无水茶碱和乙二胺的含量

目的建立一种运用拉曼光谱技术快速测定氨茶碱注射剂中无水茶碱和乙二胺的方法。方法采用拉曼光谱技术对3种规格的氨茶碱注射剂直接测定,分别以CLS、PLS和PCR定量模型对数据进行分析,并将无水茶碱和乙二胺的定量结果与法定方法的结果进行比较。结果CLS定量模型测定氨茶碱注射剂中2种成分的结果较PLS和PCR定量模型法理想,其无水茶碱的回收率为98．4％,乙二胺的回收率为105．9％。其样品测定结果与法定方法测定结果基本一致。其中无水茶碱测定结果的准确度为（99．7±0．9）％,乙二胺的准确度为（96．5±5．5）％。结论本方法操作简便、快速无损,可成为注射剂快速检测的分析方法。     

非临床研究中大分子生物分析方法验证报告审核方法

目的：掌握大分子生物分析方法验证报告审核的方法和原则,确保验证报告的科学性、合规性和完整性。方法：将完整的生物分析方法验证报告和原始记录拆分为原始记录、数据及数据处理、验证报告,分别对三部分进行全面系统性审核,最后将审核的结果进行分析和汇总。结果与结论：通过系统性的审核,熟练掌握审核的方法和要点,提高大分子生物分析方法验证报告的审核效率,提升报告质量,满足机构SOPs和国内外法律法规的要求,推进客户药物研发和申报进程。     

核酸适配体药物生物分析方法的研究进展

目的结合目前核酸适配体药物的体内研究,综述核酸适配体药物的生物分析方法。方法查阅国内外近年相关文献42篇,对其进行归纳、总结,从核酸适配体药物研究概况、分析样品前预处理差异及各方法的优缺点等方面进行了介绍。结果应用于核酸适配体药物定量的生物分析方法各有其优缺点,应用时应根据具体情况合理选择灵敏度高、专属性强的方法。结论随着核酸适配体技术的发展,不断有崭新的核酸适配体药物诞生、完善、进入临床阶段并最终成为上市药物,针对其体内定性和定量的分析方法也将越来越成为研究热点。     

治疗药物监测质量控制体系初建

目的 优化治疗药物监测质量控制方法,提高血药浓度监测的质量. 方法 完成日常血药浓度监测,完善治疗药物监测标准操作规程,规范各项试验记录,运用Westgard规则分析质控结果及其变化规律,建立符合实验室现有条件的质量控制体系. 结果 建立完善标准操作规程4项,完成治疗药物监测操作人员的定期及不定期培训,根据质控数据绘制质量控制图,分析质量控制结果对失控结果进行分析,提高了血药浓度监测的准确度. 结论 初步建立符合本实验室的质量控制体系,确保血药浓度检测结果的准确、可靠.     

内源性药物尿药生物等效性的试验设计和分析方法

目的以枸橼酸钾为例,介绍内源性药物的尿药生物等效性试验(BE)的设计和分析方法。方法根据FDA关于内源性药物BE研究相关指南及相关文献,以枸橼酸钾尿药BE研究为实例,探讨其研究流程、质量监控、剂量选择、样本采集以及数据分析等关键问题。结果在枸橼酸钾BE研究中,用单剂量、双交叉设计,对试验期间的饮食和活动进行标准化控制,用同一周期的给药前的内源性物质作为基线,校正尿药排泄量,最后用24 h尿药累积排泄量(Ae0-24h)、最大尿药排泄速率(Rmax)进行生物等效性分析。结论内源性药物BE研究,在设计上更为复杂,饮食和生理因素对结果影响大,需要基线校正,数据波动明显。尿药参数以Ae0-t和Rmax为主,而Tmax和T1/2没有实际意义。     

洋地黄毒甙药物动力学及生物利用度的专一分析方法

本文报道一种能将洋地黄毒甙(DG)从其代谢物中分离的专一分析方法。该法的灵敏度足以对单剂量给药后血清中DG 及其代谢物的浓度加以定量测定。用此专一分析方法,测定6例正常人在静脉给药及口服给药后,体内DG 药物动力学及生物利用度性质。并将分析结果与非专一分析方法[直接血清放射免疫分析(RIA)]的结果相比较。用本法测定时,先采用改良Becton-Dickinson-~(125)I-RIA 法对血样中DG 的放射免疫可分析的总物质进行测定后,用二氯甲烷提取血清3次,将二氯甲烷提取液浓缩并立即在硅胶TLC 点样,以分离母体DG 及     

新药的纯度测定及评价

由于题材广泛,本文拟限于讨论药物纯度测定的绝对方法和色谱法、杂质的性质和意义以及杂质的限度.纯度测定的绝对方法本方法是以热力学为基础的热分析方法,可对药物状态的变化及纯度提供资料.最常用的热分析技术即为差示扫描量热法(DSC)以及热重量分析法(TG).为了解一药物的特性,通常先在宽范围以较高加热速度(10℃/     

生物分析的液相色谱方法认证

生物分析方法在用于生物利用度、生物等效性和药代动力学研究之前必须进行认证,以证明该方法适合于研究需要,本文讨论了在生物分析色谱方法认证中应考虑的参灵敏,这些参数是：（1）专属性和选择性;（2）检测限和定量下限;（3）线性范围;（4）准确度;（5）精密度;（6）回收率;（7）稳定性;（8）严密性和耐用性。     

内源性物质药物的定量测定及生物等效性评价研究进展

从定量分析和方法验证的角度来看,生物样品中内源性化合物的定量测定是非常复杂和困难的,而内源性药物的生物等效性评价同样也有其特殊性。文中通过对国内外文献资料进行调研、分析和总结,详细综述了内源性药物的生物分析方法及生物等效性试验设计和评价方法,并对面临的不同问题提出针对性解决方法。本文提供的一些思路和方法,对内源性药物的生物样品分析及生物等效性评价有重要意义。     

活血化瘀类中药生物效价检测方法的建立

目的中药质量控制一直是中药现代化的重点和难点,随着中药国际化的进程,FDA也明确提出植物药申报时需提供适于质量一致性评价的生物效价(Bioassay)方法。目前,国际上获批的生物效价方法以均是以计算待测物与标准物质(同质物质)的相对效价值表示,由于中药成分复杂,很难找到同质物质作为标准物质使用,因此目前尚未有复方中药开发相对生物效价方法的报道。本课题组尝试选择适当的中药有效成分为标准物质,以效应曲线的斜率比为计算方法,建立相对生物效价检测方法,拟用于活血化瘀类中药质量生物控制。方法依据美国FDA最新颁布的《Botanical Drug Development Guidance for Industry》中对植物药生物效价研究提出的要求,针对活血化瘀药物多数具有的抗血小板聚集的作用机制,建立家兔体外抗血小板聚集检测方法,参照USP39中对方法学开发及方法学验证的要点要求,选择纯度高、来源稳定且具有较好的抗血小板聚集活性的中药活性成分丹酚酸B作为标准物质建立相对效价测定方法,并且从线性与范围、重复性、精密度及准确度四个方面对方法进行系统考察。同时开展了第三方实验室的验证研究,对方法的可推广性进行了评估。结果以LOG(剂量)为X轴,抑制率为Y轴,绘制标准物质丹酚酸B量效曲线,显示其呈现较好的线性关系。(y=0.8262x+0.0189,R2=0.9901),重复性考察RSD=11.9%,日内精密度为10.53%,日间精密度为10.58%,准确度考察,检测丹酚酸B的相对效价值,结果显示6次测定的效价值为1.083±0.129,测定准确度为8.3%,方法满足美国药典USP39以及CFDA颁布的《生物制品质量控制分析方法验证技术一般原则》中对离体效价实验方法对精密度的要求,方法通过验证。将方法推广应用,委托第三方实验室采用该方法对同一检测样本进行检测,检测结果实验室间无统计学差异,提示该方法具有较好的实验室间重现性。两家机构结果均显示加速过期样品效价值较提取物效价值有明显降低(P<0.01),证明方法有较好的区分性。结论经方法优化及方法学验证,所建立的抗血小板聚集生物效价检测方法与活血化瘀作用机制相关,与标准物质丹酚酸B计算出的相对效价值具有较好的精密度、准确度和重现性,可作为生物检测方法,用于活血化瘀类中药的质量控制。     

紫外分光光度法测定合欢皮总皂苷的含量

目的 建立测定合欢皮总皂苷含量的方法.方法 采用紫外分光光度法,以齐墩果酸为对照品,测定合欢皮总皂苷的含量,并分析方法的可行性.结果 合欢皮提取物中总皂苷的含量可达63.49%,加样同收率为107.86%.结论 新建方法操作简便,精密度、准确度、重复性均好,可用于合欢皮总皂苷的含量测定及质量控制.     

报告基因法在生物技术药物活性检测中的应用

摘要：随着生物技术药物不断发展,对建立稳定高效的生物活性分析方法的需求不断上升。报告基因法与生物技术药物作用机制有关,方法变异小,准确度高,广泛应用于各种细胞因子、激素、抗体等生物技术药物生物活性检测。本文综述了报告基因、报告基因法的类型及特点,以及报告基因法在多种生物技术药物活性检测中的应用。