卡托普利对原发性高血压患者纤溶功能的影响

目的：观察血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）类药物对原发性高血压患者纤溶功能的影响.方法：对31例高血压患者应用ACEI类药物卡托普利治疗前后情况进行比较,检测收缩压（SBP）、舒张压（DBP）,观察超声心动图.检测血肾素（PRA）、血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）、醛固酮（ALD）、组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、内皮细胞型纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）活性和含量.结果：治疗后SBP、DBP较治疗前均下降,差异有统计学意义（均P＜0.01）,左室射血分数、ALD及PRA治疗前后比较差异无统计学意义（均P＞0.05）,治疗后ATⅡ下降,PAI-1含量降低,tPA/PAI-1（活性）比值升高,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.PAI活性与ATⅡ正相关（r=0.576,P＜0.01）,与ALD、DBP正相关（r=0.451,r=0.430,均P＜0.05）.tPA与各项指标均无关.结论：ACEI对纤溶功能的影响是有利的,能改善高血压患者存在的内源性纤溶功能紊乱.     

抗栓酶3号对家兔血浆组织型纤溶酶原激活剂及其抑制物的影响

本文采用纤溶酶特异的发色底物分解产色法对注射不同剂量抗栓酶3号(Svate-3)的家兔血浆组织型纤溶酶原激活物(tPA)及其抑制物(PAI)的活性作了检测。结果发现给药后tPA活性增高.PAI活性降低.并与给药剂量及速度有关.血纤平板纤溶面积与tPA活性呈显著正相关(r=0.861;P<0.01),与PAI活性呈负相关(r=-0.769;P<0.01)因此认为Svate—3的溶纤作用可能与血管内皮tPA释放增加及PA I活性降低有关.     

蝎毒素Ⅳ对血管内皮细胞介导纤溶作用的影响

目的：研究蝎毒素Ⅳ纤溶作用的内皮细胞介导机制。方法：培养的人脐静脉血管内皮细胞分别与剂量为0，1，2，4，8mg／L的蝎毒素Ⅳ孵育后，测定蝎毒素Ⅳ对内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、组织型纤溶酶原激活荆抑制物(PAI-1)的影响。结果：蝎毒素Ⅳ在低剂量能降低t-PA和PAI-1活性，但t-PA／PAI-1比值较对照组相比明显升高。结论：蝎毒素Ⅳ能够通过影响内皮细胞功能，发挥纤溶作用，提示其为纤溶促进剂。     

蝎毒素IV对血管内皮细胞介导纤溶作用的影响

目的　研究蝎毒素IV纤溶作用的内皮细胞介导机制。方法　培养的人脐静脉血管内皮细胞分别与剂量为 0 ,1,2 ,4 ,8mg/L的蝎毒素IV孵育后 ,测定蝎毒素IV对内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)、组织型纤溶酶原激活剂抑制物(PAI 1)的影响。结果　蝎毒素IV在低剂量能降低t PA和PAI 1活性 ,但t PA/PAI 1比值较对照组相比明显升高。结论　蝎毒素IV能够通过影响内皮细胞功能 ,发挥纤溶作用 ,提示其为纤溶促进剂。     

蝎毒素IV对血管内皮细胞介导纤溶作用的影响

目的　研究蝎毒素IV纤溶作用的内皮细胞介导机制。方法　培养的人脐静脉血管内皮细胞分别与剂量为0 ,1,2 ,4 ,8mg/L的蝎毒素IV孵育后,测定蝎毒素IV对内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、组织型纤溶酶原激活剂抑制物(PAI 1)的影响。结果　蝎毒素IV在低剂量能降低t-PA和PAI-1活性,但t-PA/PAI-1比值较对照组相比明显升高。结论　蝎毒素IV能够通过影响内皮细胞功能,发挥纤溶作用,提示其为纤溶促进剂。     

脑血栓患者组织型纤溶酶激活物及纤溶酶原激活物抑制物活性研究

目的观察脑血栓患者急性期、恢复期组织型纤溶酶原激活物及其快速抑制物的变化规律.方法用发色底物法对73例脑血栓患者血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其快速抑制物(PAI-1)进行测查,并与43例健康对照组进行比较.结果急性期、恢复期脑血栓患者t-PA低于对照组,而PAI-1高于对照组.结论急性期脑血栓患者血浆纤溶活性明显下降,说明血浆t-PA及PAI-1参与了血栓形成的病理过程,恢复期血浆纤溶活性处于低水平,这种状态可能病前已经存在.     

极化液对冠心病患者纤溶系统功能的影响

目的：观察极化液葡萄糖－胰岛素－氯化钾（ＧＩＫ）用于冠心病治疗时对纤溶系统功能的影响。方法：４６例确诊冠心病患者,其中陈旧性心肌硬塞１０例,不稳定性心绞痛１４例,稳定性心绞痛２２例。给予ＧＩＫ液,即１０％葡萄糖５００ｍｌ＋普通胰岛素１０μｌ＋氯化钾１ｇ静滴 ８～１２ ｄ。于用药前后测定组织型纤溶酶原激活物活性（ｔ－ＰＡ：Ａ）及其抑制物活性（ＰＡＬ：Ａ）,纤溶酶原活性（ＰＬｇ）,组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）及其抑制物（ＰＡＩ－Ｉ）含量及Ｄ－二聚体（Ｄ－Ｄｉｍｅｒ）含量,空腹血清胰岛素水平。结果：用药前与正常比较,ｔ－ＰＡ活性降低,ＰＡＩ－１活性增高,胰岛素水平增高,高胰岛素者占７８．２％。用药后ｔ－ＰＡ活性及含量、纤溶酶原活性均较前降低（Ｐ＜０．０１）,ＰＡＩ－１含量较前增加（Ｐ＜０．００１）,而ＰＡＩ－１活性及Ｄ－Ｄｉｍｅｒ变化不明显。结论：冠心病特别伴有胰岛素水平增高患者,应用ＧＩＫ液可能通过其对纤溶系统功能的不良影响促使病变进展。     

蝎毒活性肽对内皮细胞释放t-PA和PAI的影响

血管内皮细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＶＥＣ)能合成和分泌组织型纤溶酶原激活物 (ｔｉｓｓｕｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ ,ｔ ＰＡ) ,使纤溶酶原激活为纤溶酶 ,促进局部血栓溶解 ,ＶＥＣ还可分泌纤溶酶原激活物抑制剂 ( ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎ ｈｉｂｉｔｏｒ,ＰＡＩ) ,当机体处于正常情况下ｔ ＰＡ与ＰＡＩ保持动态平衡 ,这对于维持血液纤溶和凝血系统的稳定至关重要 ,因此 ,血管内皮细胞在调节血栓的形成和溶解方面具有十分重要的作用。全蝎是名贵中药材 ,有祛风、…     

养阴与益气活血方药对培养人脐静脉内皮细胞抗凝和纤溶等功能影响的对比研究

目的：研究养阴，益气活血方药及其组合抗凝，纤溶及抗自由基损伤的作用。方法：采用血清药理学方法研究养阴，益气活血方药及其组合对培养人脐静脉内皮细胞抗凝，纤溶及抗自由基损伤的作用，并对其作用进行对比分析。结果：养阴方具有显著提高前列环素（6-keto-PGF1α）含量；提高组织型纤溶酶原激活物（t-PA)活性，抑制组织型纤溶酶原激活抑制物（PAI）活性；提高超氧化物歧化酶（SOD）活力，降低丙二醛（MDA）含量。降低内皮素（ET）含量。提高一氧化氮（NO）含量等作用。结论：养阴方药与益气活血方药相伍在抗栓，溶栓，抗自由基损伤等方面具有协同作用。认为养阴生津是治疗血瘀证的重要法则。     

脑血栓形成患者血浆纤溶活性指标的动态观察

为了解脑血栓形成患者血浆纤溶系统活性变化,对71例脑血栓形成患者急性期(发病第3天)、亚急性期(第15天)及恢复期(第30天)的血浆组织型纤溶酶原激活物(t-pA)、组织型纤溶酶原激活物抑制物(PAI)的活性水平进行动态观察,并与正常对照组比较。结果表明,脑血栓形成患者与对照组相比,急性期t-pA和PAI活性水平差异无显著意义(P&gt;0.05);亚急性期t-pA明显升高,PAI明显降低;恢复期t-pA明显降低,PAI明显升高(P&lt;0.01)。结论:测定恢复期血浆t-pA及PAI水平,有助于对血栓前状态的了解,并对预测脑血栓形成的复发有一定的意义。     

高糖对HUVEC功能的影响及机制研究

目的观察葡萄糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性功能的影响及机制研究。方法内皮细胞培养液体外培养HUVEC,用不同浓度(10、20、30、40、50mmol/L)的葡萄糖作用于HUVEC,用NO含量、eNOS活性检测、细胞凋亡测定和细胞内ROS检测方法,观察不同浓度葡萄糖作用后的HUVEC功能活性的影响。结果高糖对HUVEC的增殖活性具有剂量依赖性抑制作用。高糖剂量依赖性抑制HUVEC细胞eNOs活性、NO的产生,增强细胞凋亡和细胞内ROS的生成。结论葡萄糖对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性功能具有抑制作用,其机制与增强细胞凋亡和增加细胞内ROS有关。     

Morroniside protects cultured human umbilical vein endothelial cells from damage by high ambient glucose

AIM: To determine whether morroniside, a compound in Cornus officinalis Sieb et Zucc can prevent cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) from damage by high ambient glucose. METHODS: HUVEC was incubated in glucose, 5 or 30 mmol/L, either alone or in the presence of morroniside (final concentration 100, 10, and 1 μmol/L, respectively) for 48 h. The proliferation of HUVEC was quantified by MTT method; its cycle was analyzed by flow cytometry; morphological change…     

苦参碱对U937细胞及人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察苦参碱（Matrine，Mat）对U937细胞及人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）增殖的影响。方法：采用体外培养技术，通过细胞形态、MTT实验、细胞周期测定观察Mat对U937细胞及HUVECs增殖的影响。结果：Mat（0．2～0．5mg／mL）作用24h后对U937细胞均有增殖抑制作用（P〈0．05或P〈0．01），在该浓度范围内呈剂量和时间依赖性，其作用U937细胞48h的半数抑制浓度（IC50）约为0．4mg／mL，有效作用时间为1d；Mat（0．1～0．5mg／mL）作用24、48、72h后对HUVECs增殖无明显抑制作用，亦无剂量和时间依赖性（P〉0．05）；Mat（0．2～0．5mg／mL）作用U937细胞48h后，S期细胞比例增加，细胞发生S期阻滞（P〈0．05或P〈0．01）；Mat（0．1～0．5mg／mL）作用HUVECs 48h后，对细胞周期无明显影响（P〉0．05）。结论：一定浓度Mat对U937细胞具有增殖抑制作用，呈时间-剂量依赖关系。Mat在一定浓度和时间下不能抑制HUVECs增殖，对其细胞周期亦无明显影响。     

皮质醇对人脐静脉内皮细胞迁移功能的影响及机制研究

目的 探讨皮质醇抑制血管新生的机制.方法 将体外培养G0/G1期的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为皮质醇组(无血清RPMI1640培养液中加入皮质醇)和对照组(仅用无血清RPMI1640培养液),细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞存活率,细胞迁移实验观察皮质醇对细胞迁移的影响,酶联免疫吸附法测定细胞中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和基质细胞衍生因子1(SDF1)含量,蛋白质印迹法测定细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达.结果 皮质醇组细胞活力与对照组相比无明显差异;细胞迁移数目明显少于对照组,差异有统计学意义[ (618 ±117)个比(1200 ±57)个,P=0.00011];bFGF、SDF1与NO水平明均明显低于对照组[bFGF为(69.7 ±5.7) ng/L比(99.3±11.0) ng/L,P＜0.01;SDF1为(10.2 ±2.1)ng/L比(12.4 ±2.5)ng/L,P＜0.05;NO为(58.5±10.3)μmol/L比(97.3±6.2)μmol/L,P=0.03407].结论 皮质醇对HUVEC细胞活力无明显抑制作用,但可以明显抑制其迁移功能,并降低细胞中NO、bFGF、SDF1的含量,这可能是皮质醇抑制HUVEC迁移的作用机制.     

Study on the action of resistin-induced human umbilical vein endothelial cell dysfunction

The aim of this paper was to investigate the effects of resistin on human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), and to explore its role and mechanism of action in atherosclerosis. HUVECs were incubated with recombinant human resistin (0, 50, 100 ng/mL) for 24 h. ICAM-1, VCAM-1 and reactive oxygen species (ROS) were assayed by flow cytometer. ET-1, eNOS and iNOS mRNA expression were measured by semi-quantitative RT-PCR. Incubation of HUVECs with resistin resulted in an increase in ICAM-1 expression and ET-1 mRNA expression. However, resistin had no effect on VCAM-1 expression and ROS release. eNOS and iNOS mRNA expression were not altered by resistin stimulation. Adipokine resistin exerted a direct effect in promoting HUVEC dysfunction by promoting ICAM-1 and ET-1 expression. These data suggest that adipocyte-endothelium cross-talk might play an important role in the pathogenesis of cardiovascular disease in diabetes mellitus. Translated from Journal of Sun Yat-Sen University (Medical Sciences), 2006, 27(3): 258–261 [译自: 中山大学学报 (医学科学版)]     

Genipin inhibits endothelial exocytosis via nitric oxide in cultured human umbilical vein endothelial cells

Aim： Exocytosis of endothelial Weibel-Palade bodies, which contain von Willebrand factor （VWF）, P-selectin and other modulators, plays an important role in both inflammation and thrombosis. The present study investigates whether genipin, an aglycon of geniposide, inhibits endothelial exocytosis. Methods： Human umbilical vein endothelial cells （HUVECs） were isolated from umbilical cords and cultured. The concentration of VWF in cell supernatants was measured using an ELISA Kit. P-selectin translocation on the cell surface was analyzed by cell surface ELISA. Cell viability was measured using a Cell Counting Kit-8. Mouse bleeding times were measured by amputating the tail tip. Western blot analysis was used to determine the amount of endothelial nitric oxide synthase （eNOS） and phospho-eNOS present. Nitric oxide （NO） was measured in the cell supernatants as nitrite using an NO Colorimetric Assay. Results： Genipin inhibited thrombin-induced VWF release and P-selectin translocation in HUVECs in a dose- and time- dependent manner. The drug had no cytotoxic effect on the cells at the same doses that were able to inhibit exocytosis. The functional study that demonstrated that genipin inhibited exocytosis in vivo also showed that genipin prolonged the mouse bleeding time. Furthermore, genipin activated eNOS phosphorylation, promoted enzyme activation and increased NO production. L-NAME, an inhibitor of NOS, reversed the inhibitory effects of genipin on endothelial exocytosis. Conclusion： Genipin inhibits endothelial exocytosis in HUVECs. The mechanism by which this compound inhibits exocytosis may be related to its ability to stimulate eNOS activation and NO production. Our findings suggest a novel antiinflammatory mechanism for genipin. This compound may represent a new treatment for inflammation and/or thrombosis in which excess endothelial exocytosis plays a pathophysiological role.     

溶血卵磷脂对血管内皮细胞增殖及凋亡的影响

目的观测溶血卵磷脂(LPC)对血管内皮细胞增殖及凋亡的影响,从而探讨动脉硬化发生的机制。方法取体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),在含不同浓度LPC(5、10、20mg/L)的培养基中分别培养6、12、24、48h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪、荧光显微镜观测血管内皮细胞增殖及凋亡的变化。结果与正常对照组比较,LPC抑制内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,且其作用呈时间-效应、浓度-效应依赖关系,但随着LPC浓度增加,细胞凋亡增加的同时细胞死亡比例也增加。结论LPC抑制血管内皮细胞增殖,促进细胞凋亡,可能是其致动脉粥样硬化机制之一。     

Glucagon-like peptide-1 activates endothelial nitric oxide synthase in human umbilical vein endothelial cells

Aim:

To investigate the effects of glucagon-like peptide-1 (GLP-1) on endothelial NO synthase (eNOS) in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), and elucidate whether GLP-1 receptor (GLP-1R) and GLP-1(9–36) are involved in these effects.

Methods:

HUVECs were used. The activity of eNOS was measured with NOS assay kit. Phosphorylated and total eNOS proteins were detected using Western blot analysis. The level of eNOS mRNA was quantified with real-time RT-PCR.

Results:

Incubation of HUVECs with GLP-1 (50–5000 pmol/L) for 30 min significantly increased the activity of eNOS. Incubation of HUVECs with GLP-1 (500–5000 pmol/L) for 5 or 10 min increased eNOS phosphorylated at ser-1177. Incubation with GLP-1 (5000 pmol/L) for 48 h elevated the level of eNOS protein, did not affect the level of eNOS mRNA. GLP-1R agonists exenatide and GLP-1(9–36) at the concentration of 5000 pmol/L increased the activity, phosphorylation and protein level of eNOS. GLP-1R antagonist exendin(9–39) or DPP-4 inhibitor sitagliptin, which abolished GLP-1(9–36) formation, at the concentration of 5000 pmol/L partially blocked the effects of GLP-1 on eNOS.

Conclusion:

GLP-1 upregulated the activity and protein expression of eNOS in HUVECs through the GLP-1R-dependent and GLP-1(9–36)-related pathways. GLP-1 may prevent or delay the formation of atherosclerosis in diabetes mellitus by improving the function of eNOS.     

多奈哌齐对人脐静脉内皮细胞损伤的防护作用研究

目的 探讨多奈哌齐对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的防护作用,并研究其作用机制.方法 将实验细胞平均分为对照组、模型组、多奈哌齐组,通过过氧化氢建立细胞损伤模型,采用细胞计数试剂盒( CCK-8)法检测细胞存活率,通过光镜观察细胞形态,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的形态学变化,蛋白质印迹测定细胞中锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白表达.结果 多奈哌齐组与模型组比较,细胞存活率明显增加,且差异有统计学意义[(60.8±12.2)％比(44.7±9.3)％,P＜0.05];多奈哌齐组皱缩细胞数量介于模型组和对照组处理组之间;而多奈哌齐组细胞凋亡数量和程度均较模型组降低,差异有统计学意义[(30.8±10.4)％比(45.1±14.1)％,P＜0.05];此外,蛋白质印迹试验结果表明,多奈哌齐组细胞MnSOD蛋白表达强于对照组.结论 多奈哌齐可以明显减少过氧化氢诱导的HUVEC损伤,提高细胞存活率.多奈哌齐对于过氧化氢诱导的内皮细胞损伤的防护作用可能通过上调MnSOD的表达来实现.