益胃汤对初老大鼠卵巢抑制素α亚基的影响

目的:探讨益胃汤延缓初老大鼠卵巢机能衰老的机制。方法:4~6月龄雌性大鼠为正常对照组;10~12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:益胃汤高剂量组,益胃汤中剂量组,益胃汤低剂量组,己烯雌酚组,模型对照组,六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取右侧卵巢用于RT-PCR测卵巢抑制素α亚基mRNA的表达。结果:益胃汤高、中、低剂量组与模型对照组比较,均使卵巢抑制素α亚基mRNA表达增加。结论:益胃汤具有增加卵巢抑制素的分泌的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机制之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢细胞色素C表达的影响

目的：探讨“补益阳明津气”延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理。方法：4～6月龄雌性大鼠为正常对照组；10～12月龄，阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为：益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组。灌药4周后检测卵巢细胞色素C。结果：与模型对照组比较，使卵巢细胞色素C表达减少。结论：提示益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用，这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢微血管密度的影响

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理,并以此佐证中医传统经典理论"五七,阳明脉衰"在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响,为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据.方法:4～6个月龄雌性大鼠为正常对照组,10～12个月龄、阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组、六味地黄丸组.灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢血管.结果:与模型对照组比较,补益阳明津气可使卵巢内微血管数目增加,改善卵巢局部微循环,增加卵巢血供.结论:益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

益胃汤对初老雌性大鼠下丘脑作用的差异蛋白分析

[目的]研究益胃汤对初老雌性大鼠下丘脑产生调节作用的相关蛋白质,在分子水平上探索益胃汤的作用机制。[方法]将20只4～6月龄雌性大鼠随机分成正常组、去势组,每组10只,10只10～12月龄雌性大鼠作为初老组。给药结束后,取3组大鼠下丘脑组织,运用同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)分离、分析、鉴定大鼠下丘脑差异蛋白。[结果]分析比较初老组、去势组、正常组3组大鼠下丘脑蛋白质,通过多组数据韦恩图分析发现初老组与去势组有17种共同表达的差异蛋白。通过火山图(Volcano Plot)过滤,确定显著差异蛋白[差异倍数(FC)1.5或2/3,P0.05];筛选出了7种与衰老相关的显著差异蛋白及其相关KEGG通路,它们分别为:plasminogen、α-crystallin B chain、Hsp70 binding protein 1、serum transferrin、unconventional myosin-Id、myelin oligodendrocyte glycoprotein、protein Fbxo44。[结论]益胃汤对这7种显著差异蛋白起到上调或下调的作用,为研究益胃汤延缓衰老作用的靶蛋白奠定了基础。     

熊果酸诱导SKOV3细胞凋亡与线粒体凋亡通路

目的:观察熊果酸(Ursolic acid,UA)是否通过激活卵巢癌SKOV3细胞的线粒体凋亡通路诱导细胞凋亡。方法:MTT法检测细胞增殖抑制,采用流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位,免疫印迹法检测细胞色素C的表达,分光光度法检测Caspase-9、Caspase-3的活性。结果:熊果酸可以抑制SKOV3细胞增殖,40μmol/L熊果酸,作用于SKOV3细胞48 h,增殖抑制率可以达到76.85±3.1%;UA可以诱导细胞发生凋亡;熊果酸可以降低SKOV3细胞的线粒体膜电位,促进细胞色素C的表达,增强Caspase-9、Caspase-3的活性。结论:熊果酸可以促进SKOV3细胞的凋亡,可能的作用机制之一是可以激活SKOV3细胞的线粒体凋亡通路。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢门血管影响的实验研究

目的探讨“补益阳明津气”对初老雌性大鼠卵巢门血管的影响,并以此佐证中医传统经典理论“五七,阳明脉衰”在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响。为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据。方法4-6月龄雌性大鼠为正常对照组;10—12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组和六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢门血管。结果与模型对照组比较,益胃汤高、中剂量组卵巢门血管壁变薄,管腔扩大,卵巢血供增加。结论实验研究提示益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机制之一。     

补肾壮督方对大鼠退变椎间盘细胞线粒体凋亡通路的影响

目的:观察补肾壮督方对大鼠退变椎间盘细胞凋亡的影响,探讨其改善椎间盘退变的机制。方法:100只SD雄性大鼠,采用纤维环全层针刺造模,随机分为空白组,模型组,补肾壮督方低、中、高剂量组(0. 38,0. 77,1. 53 g·kg-1),连续中药灌胃4周后,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠椎间盘组织病理学变化;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测退变椎间盘中髓核细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测椎间盘组织中活化半胱氨酸蛋白酶-3(active Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),细胞色素C(cyt C)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠椎间盘组织病理学评分显著增加,髓核细胞凋亡率明显增加(P 0. 05),active Caspase-3,cyt C和Bax表达量均明显增加(P 0. 05),Bcl-2表达量明显下降(P 0. 05)。与模型组比较,补肾壮督方低、中、高剂量组组织病理学评分明显降低(P 0. 05),髓核细胞凋亡率明显减少(P 0. 05),active Caspase-3,cyt C及Bax表达量均明显下降(P 0. 05),Bcl-2表达量明显增加(P 0. 05)。结论:补肾壮督方可能通过减少active Caspase-3,cyt C和Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达,抑制线粒体凋亡通路,并存在一定剂量依赖性,从而改善椎间盘退变。     

地黄饮子对快速老化小鼠 SAMP8线粒体通路细胞凋亡的影响

目的：研究地黄饮子对快速老化小鼠P8线粒体通路细胞凋亡的影响,探讨其治疗AD的药效及作用机制。方法：运用RT-PCR检测地黄饮子对SAMP8小鼠Caspase -3、Caspase -9、Apaf -1基因mRNA表达的影响,观察小鼠细胞凋亡情况。结果：地黄饮子能下调海马Caspase-3 mRNA、Caspase -9mRNA、Apaf-1mRNA的表达,且均有统计学意义。结论：地黄饮子可通过对细胞凋亡的线粒体途径的影响,抑制促凋亡基因,减少神经元的丢失,从而改善学习记忆能力。     

中药干预细胞凋亡线粒体通路研究进展

细胞凋亡是细胞在特定条件下的一种程序性死亡模式,既在机体正常发育、保持自身稳定方面发挥重要作用,又在病理情况下引发细胞过度死亡,使组织器官丧失功能,因此,抗细胞凋亡已成为目前药物机制研究的热点。线粒体作为细胞凋亡过程的关键环节,是抗凋亡药物研究的重要靶标。在中药抗线粒体损伤、抑制细胞凋亡方面的研究日益深入,并取得了重要进展。笔者现就近年来中药及中药有效成分通过干预线粒体相关通路抑制细胞凋亡的研究进行综述,以期为中药抗细胞凋亡的研究提供思路和依据。     

补经合剂对初老大鼠卵巢细胞Fas、Caspase-3表达的影响

目的:补经合剂具有补肾益精、养血益气的功效,临床上用于治疗月经后期或伴量少属肾虚血亏者。本研究着重以该方对大鼠卵巢卵泡细胞凋亡的影响,拟从分子生物学水平探讨该方的作用机理。方法:以雌性初老大鼠为自然肾虚模型,采用免疫组织化学方法观察了补经合剂对肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞 Fas表达、凋亡蛋白酶 Caspase-3表达的影响。结果:补经合剂高剂量组(相当于原生药31g/kg)能抑制肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞凋亡蛋白酶 Caspase-3表达(P<0.05);同时中成药乌鸡白凤丸也具有相似的作用。结论:补经合剂临床上用于治疗月经后期或伴量少的机理,可能与该药抑制肾虚大鼠卵巢的卵泡细胞凋亡蛋白酶Caspase-3表达水平有关。     

补肾养经汤对雌性去势大鼠子宫形态学影响的实验研究

目的研究补肾养经汤对雌性去势大鼠子宫形态学的影响。方法将60只3月龄大鼠饲养2周后,随机取50只摘除双侧卵巢,余10只行假手术。50只去势大鼠随机分为5组;模型空白组、补肾养经汤高、中、低剂量组、六味地黄丸组,观察各组用药后子宫形态的变化。结果补肾养经汤能够显著增加去势大鼠子宫重量,使去势大鼠子宫内膜明显增厚,并能明显增加子宫内腺体数目及血管分布。结论补肾养经汤可能直接作用子宫,改善子宫内膜的状态,从而缓解子宫萎缩的作用。     

人参养荣汤对亚急性老化小鼠肝及脑组织线粒体膜流动性保护作用的研究

目的研究人参养荣汤对亚急性老化小鼠肝、脑细胞线粒体膜流动性的保护作用。方法40只ICR系小鼠随机分为青年对照组、模型组及人参养荣汤高、中、低3个剂量组,测定肝、脑细胞线粒体膜流动性,测定线粒体丙二醛含量,进行分析。结果模型组小鼠肝、脑细胞线粒体膜流动性明显降低,线粒体丙二醛含量明显增高；不同剂量中药组随用药浓度增加,线粒体膜流动性明显升高,线粒体丙二醛含量明显降低。结论人参养荣汤可以通过保护小鼠肝、脑细胞线粒体膜流动性随增龄所产生的变化,减少线粒体内丙二醛的含量而起到抗衰老的作用。     

半夏泻心汤及其拆方对老年大鼠胃排空影响的研究

目的：研究半夏泻心汤及其拆方对老年大鼠胃排空的影响。方法：选取老年大鼠随机分为5组．分别以半夏泻心汤辛开、苦降、甘润和全方相应药液及生理盐水（对照组）灌胃,于第21d给药后45min给予营养性半固体糊．并于30min后断尾采血约2ml,检测胃内残留率、血浆胃动素和胃泌素．结果：与对照组比较．甘润组和全方组血浆胃动素、胃泌素含量显著升高,胃内残留率显著降低（P〈0．05或P〈0．01）;苦降组血浆胃泌素含量显著升高（P〈0．01）．但血浆胃动素、胃内残留率与对照纽比较无显著性差异（P〉0．05）;辛开组血浆胃泌素含量与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）．血浆胃动素含量显著降低（P〈0．01）,胃内残留率显著高于对照组（P〈0．05）。结论：半夏泻心汤全方组增加血浆胃动素、胃泌素的含量,调节老年胃动力的作用最为显著充分体现了经方的科学性夸理性和配伍严谨的特点。     

舒郁宁心汤对抑郁模型大鼠海马凋亡的影响

目的:探讨舒郁宁心汤抗抑郁功效的作用机理。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、氟西汀组。建立慢性应激抑郁大鼠模型。TUNEL法检测大鼠海马凋亡细胞,免疫组化方法观察大鼠海马Bcl-2表达的变化。结果:模型组海马CA3区细胞凋亡数比正常组增加,差异有统计学意义(P0.01);舒郁宁心中药组、氟西汀组海马CA3区细胞凋亡数较模型组减少,差异有统计学意义(P0.01)。与空白对照组比较,模型组大鼠海马Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P0.01或P0.05);与模型组相比中药组、氟西汀组大鼠海马区Bcl-2表达升高,差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:舒郁宁心汤可能通过减少海马神经元细胞凋亡,发挥抗抑郁作用。     

活血清解汤对大鼠急性胰腺炎早期胰腺细胞凋亡的作用

目的探讨活血清解汤对大鼠急性胰腺炎（AP）治疗作用机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为3组：正常对照组组、非治疗组、活血清解汤治疗组。采用经腹腔注射L-精氨酸制作大鼠急性胰腺炎模型,经注胃管给予生理盐水或中药,每6小时1次。NS组、非治疗组、活血清解汤治疗组分别于造模后24、36h处死各10只。分别取血查血清淀粉酶、TNF、IL-1、IL-10。观察各组胰腺组织的病理变化并评分,同时行末端脱氧核苷酸转换酶介导的原位末端标记检测胰腺细胞凋亡情况。结果活血清解汤治疗组24h、36h血清淀粉酶、TNF、IL-1活性明显下降,而IL-10水平明显上升;胰腺组织出血坏死减轻,24h、36h病理评分均低于非治疗组;给药后24、36h胰腺细胞凋亡指数均高于非治疗组。结论中药活血清解汤能控制过度的炎性反应状态,维持细胞因子网络平衡,诱导非治疗受损胰腺细胞凋亡,起到治疗急性胰腺炎作用。     

涤痰汤对老年轻度认知障碍大鼠海马NMDA受体亚基表达的影响

目的:观察涤痰汤对老年轻度认知障碍大鼠认知功能及海马区NMDA受体含量的影响。方法:将60只13月龄SD大鼠随机分为5组,即空白组、模型组、涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组、西药组,另设12只青年大鼠作为青年对照组。以注射D-半乳糖促衰老并结合半高脂饮食建立老年轻度认知障碍动物模型。采用穿梭箱对大鼠进行行为学检测,以Real Time PT-PCR检测大鼠海马区NMDA受体亚基NR2A、NR2B的基因表达。结果:与模型组相比,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组大鼠的电击次数均明显减少(P0.05),主动逃避潜伏时间明显缩短(P0.05),涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组NR2A、NR2B基因表达量均明显上调(P0.05),其中,涤痰汤高剂量组NR2A基因表达量明显高于西药组(P0.05)。结论:涤痰汤能通过上调NR2A、NR2B基因表达量改善老年轻度认知障碍大鼠的学习记忆功能。     

祛痰消脂方治疗老年原发性高脂血症临床观察

血脂异常是发生动脉粥样硬化的主要原因,尤其是低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平升高是发生冠心病的重要危险因子,同时高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）水平降低,可预示冠心病发病率升高,其作用独立于LDL—C等其他危险因子的变化。2008年1月-2008年12月,笔者采用祛痰消脂方和辛伐他汀治疗老年原发性高脂血症,比较两者临床疗效,现报道如下。     

调经活血汤对多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究调经活血汤对多囊卵巢(PCO)大鼠的血清激素水平、卵巢质量、形态及卵巢颗粒细胞凋亡等的影响,探讨其治疗效果及作用机制.方法 大鼠造模成功后随机分成中药治疗组和对照组,观察动物体重增加幅度、血清激素水平变化情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察卵巢颗粒细胞凋亡,免疫组化法观察颗粒细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化.结果 治疗组动物体重增加幅度明显降低,中药治疗组血清T浓度较对照组、正常组显著性降低;血清E2较对照组明显降低;血清P水平较对照组明显升高,血清FSH、LH浓度与对照组无明显差异.中药治疗组卵巢镜下可见多个囊状扩张的卵泡,但体腔较对照组明显缩小,颗粒细胞层数增加至4～7层,并可见少量黄体形成;中药治疗组卵巢颗粒细胞凋亡率较对照组显著降低,卵巢颗粒细胞Bcl-2表达的OD值较对照组显著增高,Bax表达的OD值显著降低.结论 调经活血汤能使多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2表达明显升高,Bax表达明显降低,巢颗粒细胞凋亡率显著性降低;卵巢颗粒细胞层数增加,黄体形成增加:体重、血清T、E2激素水平明显下降,血清P激素水平明显升高,其作用可能与调节卵巢颗粒细胞上Bcl-2和Bax蛋白表达,影响两蛋白的比例关系,增加Bcl-2/Bax的比值,使Bax与Bcl-2蛋白形成异源二聚体,发挥其抗细胞凋亡的作用有关.     

张氏益胃汤对胃癌T细胞亚群的影响

目的探讨张氏益胃汤联合化疗对中晚期胃癌患者的临床疗效及其对中晚期胃癌患者T细胞亚群和生活质量的影响。方法将60例患者随机分为对照组和治疗组,每组30例。对照组单纯采用OFL方案化疗,治疗组在OFL方案基础上加用张氏益胃汤联合治疗。结果实体瘤近期疗效,治疗组有效率56.67%,受益率93.33%,对照组有效率36.67%,受益率70.00%,两组比较,有效率无显著性差异(P0.05),但受益率明显优于对照组(P0.05)。在改善中医临床症状、生活质量及T细胞亚群方面,治疗组和对照组比较,均有显著性差异(P0.05)。结论张氏益胃汤联合OFL方案化疗治疗中晚期胃癌能改善患者临床症状,提高生活质量和免疫功能,控制肿瘤,值得进一步研究探讨。     

抑睾调经汤对多囊卵巢综合征模型大鼠排卵功能障碍的干预作用

目的:研究抑睾调经汤对多囊卵巢综合征模型大鼠排卵功能障碍的干预作用,为健脾化痰,活血化瘀法应用于PCOS的治疗提供科学依据.方法:将雌性SD大鼠60只随机分为正常对照组、模型对照组、达英-35对照药组、抑睾调经汤高剂量治疗组、抑睾调经汤低剂量治疗组五组各12只,采用Poresky L法,皮下注射绒毛膜促性腺激素(HCG)、中性胰岛素,制备出PCOS模型大鼠.各组动物等容灌胃,正常对照组和模型对照组给予生理盐水,达英-35组、抑睾调经汤高、低剂量分别灌胃14 d,日2次.观察大鼠胰岛素(INS)、黄体生成激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、卵巢病理组织学的变化.结果:①抑睾调经汤组可显著降低PCOS模型大鼠血清LH水平,与模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);并能升高FSH,与模型组比较差异有统计学意义.②抑睾调经汤组能明显降低PCOS模型大鼠血清INS水平,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).③抑睾调经汤组能使PCOS模型大鼠恢复排卵,增加卵泡壁颗粒细胞层数和黄体组织数量.结论:抑睾调经汤具有调整下丘脑—垂体—卵巢轴,降低胰岛素水平,恢复排卵的作用.