胶原蛋白研发的最新进展

胶原蛋白是一组由多糖蛋白分子组成的大家族,是结缔组织的主要蛋白成份.胶原蛋白富含多样性及组织分布的特异性,是与各种组织和器官功能相关的功能性蛋白.胶原蛋白不但在个体的发生、分化以及形成过程中与其它结缔组织一样起着重要的作用,而且与机体的衰老和疾病有极其密切的关系.与此同时,胶原蛋白由于其独特的理化性质、优良的生物相容性以及材料间的兼容性,在许多领域得到了广泛应用.本文对胶原蛋白的种类、性质、产品标准及其应用市场进行了综述.     

编码人C1q的A、B、C链的基因集合体定位于1p34.1～1p36.3

Clq是人补体第一成份(Cl)中的非酶性识别性亚成分,是Mr为460的糖蛋白,由三型共18条肽链(A6、B6、C6)组成.每条肽链的总体结构相似,分子时量均在26000左右,氨基酸数在225左右。近分子的N端含有由81位氨基酸组成胶原蛋白样区(Gly-Xan-Yaa),分子C端为非胶原区,由136位氨基酸组成。Clq的分子图象如一束郁金香花,由6个     

5′-氮胞苷选择性地增加γ-珠蛋白的合成治疗β~ 地中海贫血

β地中海贫血是由于基因突变导致β珠蛋白肽链合成减少或缺失的遗传性疾病。目前尚无有效和理想的治疗方法,鉴于该病的分子病理学是由于β肽链合成障碍,相对导致α肽链过剩的特点,如能增加Υ肽链的合成,与过剩α肽链形成HbF(α_2Υ_2),将有助于纠正α/非α链之间肽链合成的不平衡,从而能治疗该病。     

成骨不全症一家系调查报告

成骨不全症又称脆骨病。表现为全身结缔组织病。目前认为是由遗传因素所致的构成全身皮肤、肌腱、骨骼、软骨以及其他结缔组织的主要成分胶原蛋白发育不良。现将我们遇到的一个家系7例报告如下。 临床资料     

胶原蛋白海绵对肝脏创伤止血的效果北大核心

背景:艾瑞金胶原蛋白海绵理化性能稳定,并已通过国家食品药品监督管理局的理化性能和生物相容性评价检测。目的:观察艾瑞金胶原蛋白海绵的止血效果。方法:取21只SD大鼠,建立肝脏出血创面,随机分3组干预:在实验组(n=7)肝脏创口内部植入艾瑞金胶原蛋白海绵,同时在肝脏切口表面外敷艾瑞金胶原蛋白海绵;在阳性对照组(n=7)肝脏创口内部植入医用胶原蛋白海绵,同时在肝脏切口表面外敷医用金胶原蛋白海绵;在空白对照组(n=7)肝脏切口表面外敷医用纱布,记录出血量及止血时间,干预后7,14,28 d进行肝脏创面组织学观察。结果与结论:①出血量及止血时间:3组出血量比较无差异;实验组、阳性对照组止血时间与空白对照组比较差异无显著性意义,实验组止血时间短于阳性对照组(P≤0.05);②肝脏创面组织学观察:实验组干预后7 d胶原材料被纤维结缔组织完全包裹,炎性细胞浸润以中性粒细胞为主,胶原材料开始降解,周边结缔组织内有新生毛细血管;干预后14 d,包裹胶原材料的纤维结缔组织明显增厚,中性粒细胞减少,巨噬细胞增多;干预后28 d,胶原材料完全降解,大部肝组织恢复正常,部分肝组织旁的炎性结缔组织中可看到巨噬细胞、单核细胞、成纤维细胞和毛细血管。阳性对照组情况类似于实验组。空白对照组干预后14 d创伤处结缔组织明显,肝窦含有红细胞,偶见肝组织内出血,空泡变性;干预后28 d,创口处具有较厚结缔组织,肝窦含有红细胞,被复肝星状细胞;③结果表明:艾瑞金胶原蛋白海绵对肝脏创伤止血效果明显,组织相容性好。     

非基因法检测地中海贫血现状

地中海贫血（thalassemia，地贫）是一种常染色体隐性遗传性病，为世界常见的遗传病之一。其发生是由于珠蛋白基因突变，导致珠蛋白肽链生物合成障碍，引起一种或几种珠蛋白肽链合成不足或完全缺乏，临床上表现为溶血性贫血。根据受累珠蛋白基因不同，地贫可分为α、β、δβ、δ等类型，临床常见为α-地贫和β-地贫两种。     

一种杂合受体使胰岛素激活EGF受体的酪氨酸激酶活性

胰岛素和上皮生长因子(EGF)受体可能有相同的起源,两者胞外结构中富含半脱氨酸的区域具有很大的相似性,胞内有一高度保守的酪氨酸蛋白激酶的结构域,但EGF受体为单肽链,而胰岛素受体则由完全不同的α和β亚基以α_2β_2异源四聚体组成受体复合物,尽管如此,两者在功能上仍有很大     

人类的tRNA基因功能性阻遏物的制造—β地中海贫血基因治疗的一种途径

地中海贫血是一组异质性的遗传病,特点是珠蛋白肽链合成缺乏,可以分为两种主要类型——α和β地中海贫血,分子遗传学研究表明,许多不同类型的突变都能产生地中海贫血表型。这类损害包括:结构基因缺失、插入顺序中的核苷酸替换引起的异常mRNA 修饰以及编码区发生无义突变导致的珠蛋白肽链生成的提前终止。我们曾报告过引起β~0地中海贫血的两种不同的突变类型,他们没有β珠蛋白肽链合成。在一例华人患者表现为β~(17Lys)密码AAG→UAG 突变,使β~(17Lys)密码转变为琥珀终止     

自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对肝星状细胞增殖活化的影响

目的 观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,设立空白对照组和3-MA低剂量组(2.5 mmol/L)、中剂量组(5 mmol/L)、高剂量组(10 mmol/L).RT-PCR分析不同浓度3-MA对HSC活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及Ⅰ型胶原蛋白基因表达的影响,Western blot法检测不同浓度3-MA对HSC中自噬水平标志蛋白LC3Ⅱ、α-SMA以及Ⅰ型胶原蛋白表达水平的影响;MTT法检测3-MA对HSC增殖的影响,流式细胞术分析3-MA对HSC细胞周期的影响.结果 低、中、高剂量3-MA作用于HSC后,HSC-T6细胞自噬水平随3-MA浓度升高逐渐下降,α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达量均明显低于对照组(P＜0.05),LC3Ⅱ、α-SMA以及Ⅰ型胶原蛋白相对表达量均明显低于对照组(P＜0.05).与对照组相比,低、中、高剂量时3-MA对HSC增殖的影响均显著下降(P＜0.05),G2期比例与对照组比较均明显增加(P＜0.05).结论 3-MA可下调大鼠HSC-T6细胞LC3Ⅱ的表达,抑制α-SMA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA及蛋白的表达,使HSC-T6细胞周期停滞于G2期,抑制HSC增殖活化.     

胶原蛋白的市场前景

胶原蛋白是人体内含量最多、分布最广的蛋白质，是一种与组织和器官功能密切相关的功能性蛋白。胶原蛋白主要分布在人体的结缔组织中，对人体皮肤，血管，骨骼，筋腱和软骨的形成以及维持其韧性和弹性都十分重要。     

人胰结缔组织纤维的细微和超微构筑及其意义--NaOH消蚀法SEM观察

目的探讨胰结缔组织纤维的细微和超微构筑及其意义.方法采用NaOH消蚀和超声波(USW)清洗技术,制备只保留结缔组织纤维成分的人胰组织样品,进行扫描电镜(SEM)观察和分析.结果经NaOH消蚀和USW清洗处理的胰组织,其细胞和基质成分全被消蚀掉,只留有结缔组织纤维,仍保持原有构筑特征.胰腺小叶、小叶间结缔组织和胰岛的轮廓清晰可见.穿行于小叶间结缔组织内的胰腺导管、动脉和静脉血管、淋巴管以及神经纤维束,易被辨认和区别.结缔组织纤维织成的束或网,均由胶原蛋白聚合而成的纳米(10-100mm)纤维,或称胶原细纤维所组成.结论活体上充满组织液的胰结缔组织纤维网,构成了该器官的组织支架和通道,为胰内、外分泌细胞的支持与保护、营养与代谢、分泌与通讯、再生与修复等,提供了适宜的微环境.     

网状纤维的显示和探讨

结缔组织的细胞间质包括纤维和基质。纤维有胶原纤维、网状纤维和弹力纤维，网状纤维由交错排列的纤细而短的纤维组成。网状纤维经免疫荧光法及免疫电镜所证实由Ⅲ型胶原蛋白构成，网状纤维与胶原纤维在理化性状上有一定的差异，但都具有典型呈６４ｎｍ周期性横纹，网状纤...     

HLA—DR抗原多态性的双相凝胶电泳分析法

本文利用免疫沉淀、双相凝胶电泳技术分析了某些DR位点纯合子细胞DR抗原电泳图谱。待检细胞用~3H-亮氨酸生物合成性标记,提取膜蛋白,对抗DR单态型抗血清做免疫沉淀,沉淀物用双相凝胶电泳进行分析。结果表明,DR抗原α肽链电泳图单一,各DR型间无差异:β肽链电泳图谱因DR型别而异,是区分DR型别的主要依据。此外,2例DR2纯合子细胞图谱明显不同,提示为两个不同的亚型。     

Ⅳ型胶原蛋白NC1片段在精子发生及血睾屏障中作用的研究进展

在哺乳动物睾丸中，位于生精上皮基底膜附近的血睾屏障(blood-testis barrier, BTB)对精子发生至关重要。BTB由相邻的支持细胞(Sertoli细胞)连接而成，将生精上皮分为靠近基底膜的“基底室”和靠近生精小管管腔的“近腔室”,为精子发生提供了免疫屏障。Ⅳ型胶原蛋白是基底膜的重要组成成分，啮齿类动物的睾丸中Ⅳ型胶原蛋白主要是由3条α3链组成的三螺旋结构。大鼠睾丸的Ⅳ型胶原蛋白α3链C端可以水解成大小为28 ku的蛋白片段，称为C端非胶原结构域(noncollagenous domain-peptide, NC1片段)。NC1片段作为一种基底膜源性多肽在参与精子发生与维系BTB功能方面发挥了重要作用。本文通过分析、总结近期研究结果，概述Ⅳ型胶原蛋白NC1片段在睾丸中的作用及其机制，尤其是其在精子发生与BTB中作用的研究进展。     

肥厚腰椎黄韧带中成纤维细胞生长因子、转化生长因子及结缔组织生长因子的表达

背景:腰椎黄韧带肥厚是临床上引起腰椎管狭窄的主要因素之一,但其分子机制仍不是非常清楚。目的:分析纤维化相关细胞因子碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1和结缔组织生长因子在腰椎黄韧带肥厚过程中的作用。方法:取临床手术所取黄韧带,对照组6例(椎管内占位且无腰椎不稳患者黄韧带)、突出组(单纯腰椎间盘突出症患者黄韧带)6例、腰椎管狭窄症组6例。采用实时定量RT-PCR的方法检测各组黄韧带中碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1、结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原蛋白的mR NA含量,分析3个细胞因子在黄韧带肥厚过程中的作用。结果与结论:腰椎管狭窄症组碱性成纤维细胞生长因子mR NA表达均明显高于突出组和对照组(均P0.05);腰椎管狭窄症组转化生长因子β1 m RNA在3组中的表达明显高于对照组和突出组(均P0.01);结缔组织生长因子mR NA 3组间差异无显著性意义(P0.05)。腰椎管狭窄症组Ⅰ型胶原蛋白mR NA表达明显高于突出组和对照组(均P0.05);Ⅲ型胶原蛋白、Ⅴ型胶原蛋白mR NA表达3组之间差异无显著性意义(P0.05)。结果说明碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1在腰椎黄韧带肥厚形成过程中有重要作用,引起黄韧带肥厚的主要胶原产物为Ⅰ型胶原蛋白。     

α_1(Ⅰ)、α_2和α_1(Ⅲ)三股胶原肽链顺序的比较分析

含有α_1(Ⅰ)和α_2链的Ⅰ型胶原以及由α_1(Ⅲ)链组成的Ⅲ型胶原,其氨基酸顺序已经明了,其中α_1(Ⅰ)与α_2链之比为2:1。作肽链内部分析,α链分为四个D单位,每个D单位具有234个氨基酸残基的长度。除D单位之外,还可观察到其它周期,有D/3(78个残基)、D/6(39个残基)、D/11(21个残基)和D/13(18个残基),这些周期在α_1(Ⅰ)和α_1(Ⅲ)中尤其突出。D单位为功能性重复单位,由能相互作用的极性残基与疏     

α-地中海贫血特征的免疫学诊断

α-地中海贫血(简称α-地贫)有两种不同的等位基因,即α-地贫-|和α-地贫-2。前者α链合成完全抑制,后者只部分抑制,因α-地贫杂合基因所致的红细胞形态学改变极微,α-地贫-2的红细胞形态和MCV均正常,以致血液学检查往往不能诊断α-地贫的待征。虽然测定α链和β链的相对合成率能鉴别α-地贫|和α-地贫-2彼此间及它们与正常人的特征,但此法不适于普查。同时新生儿中α-地贫-|或α-地贫-2等位基因携带者,虽有少量的Hb Bart＇s可检出,但生后3～4月,无论Hb Bart＇s或HbH皆不能由常规电泳或层析法检出。既然α-地贫特征者的肽链合成始终不平衡,就应有微量Hb Bart＇s     

见于中国人的HPFH和δβ-地中海贫血的分子基础

组成血红蛋白（Ｈｂ）的α－和β－类珠蛋白肽链的合成受控于它们各自的基因——α－类珠蛋白基因和β－类珠蛋白基因。这两个基因家族的成员在不同发育阶段的特异性表达及其表达水平的一致性（平衡表达）是维持Ｈｂ正常“装配”的分子基础。遗传性持续性胎儿血红蛋白综合...     

AMPK在高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原过度表达中的作用

目的 观察高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原蛋白表达水平的变化,以及这种变化与AMP活化蛋白激酶（AMPK）的关系。方法 实验分4组：对照组（糖浓度5.6 mmol/L）,高糖组（22.0mmol/L）,低浓度5-氨基-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸（AICAR）组（0.5mmol/L AICAR+高糖）,高浓度AICAR组（1.0mmol/L AICAR+高糖）。孵育24h后,用RT-PCR法测定AMPKα1 mRNA水平,用Western blot法分别测定总AMPKα蛋白（AMPK）、磷酸化AMPKα蛋白（p-AMPK）和Ⅳ型胶原蛋白α5（COL4α5）亚单位的表达水平。结果 高糖组AMPKα1 mRNA水平低于对照组（p＜0.01）;高糖组总AMPKα蛋白和磷酸化AMPKα蛋白表达水平均低于对照组（p＜0.01）,高糖组COL4α5亚单位表达水平高于对照组（p＜0.01）;AMPK激活剂AICAR可在不同程度上纠正上述变化。结论 高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原蛋白表达水平上调,这可能与AMPK表达下调及其活性降低有关。     

毛细管区带电泳分离珠蛋白肽链

目的介绍一种可快速分离临床样品珠蛋白肽链的新技术。方法用未涂层毛细管，酸性尿素、ＴｒｉｔｏｎＸ－１００、巯基乙醇、磷酸盐电泳缓冲液，采用毛细管区带电泳法，对ＨｂＡ标准品、６０名正常人、１３例β地中海贫血患者及１例ＨｂＨ病患者，进行毛细管电泳分离其珠蛋白肽链。结果用纳升级样品，在４０分钟内即能一次性分离出α、β、Ｇγ、δ和Ａγ５种珠蛋白肽链；电泳图基线平稳，目标峰清晰，电泳重复性良好；时间变异系数在３％以内，峰面积变异系数在４％以内。另外对６０名正常人及１４例地中海贫血患者珠蛋白肽链含量进行了分析。结论毛细管区带电泳技术能成功地分离珠蛋白肽链，该技术具有简便、快速、高效、样品用量少等优点，适用于对临床样品进行血红蛋白病的快速诊断。