BCG-DNA对哮喘小鼠气道反应性和气道炎症的影响

目的观察不同剂量卡介苗核酸(Bacille Calmette-guerin DNA,BCG-DNA)在不同干预时间对哮喘小鼠气道高反应性及气道炎症的干预作用。方法 1.将Balb/c雌鼠随机分为哮喘模型组、NS对照组、BCGDNA干预组。干预组根据干预的时间和干预制剂剂量的不同分为-7DNA1μg、-7DNA10μg、-7DNA100μg、10DNA1μg、10DNA10μg、10DNA100μg、17DNA1μg、17DNA10μg、17DNA100μg组。2.在末次激发48小时后,测定各浓度级乙酰甲胆碱激发下的增强的呼气间歇(Enhanced Pause,Penh)值,将其与小鼠激发前吸入NS后的Penh的百分比(Penh%NS),作为其气道反应性评价指标;其次对肺泡灌洗液进行细胞学分析。结果 1.气道反应性:1-7DNA1μg组从Mch为3.12~50 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);2-7DNA10μg组和-7DNA 100μg组从Mch为6.25~25 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);310DNA10μg组从Mch为12.5~25 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);4 10DNA100μg组从Mch为3.12、12.5~50 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);5 17DNA1μg组在Mch为3.12、12.5 mg/m L的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);6 17DNA10μg组在Mch为12.5 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05)2.气道炎症:10DNA1μg、-7DNA10μg、10DNA10μg和17DNA10μg组的BALF细胞分类Eos%分别为:35.34±3.81、27.30±6.91、38.20±6.56、42.17±5.17;显著低于哮喘组的Eos%(48.8±6.12)(P<0.05);10DNA1μg组的Eos%显著低于-7DNA1μg组的Eos%(P<0.05);-7DNA10μg组的Eos%显著低于10DNA10μg、17DNA10μg、-7DNA1μg和-7DNA100μg组的Eos%(P<0.05)。结论 BCG-DNA能降低哮喘小鼠的气道高反应性,减轻哮喘小鼠的气道炎症,早期(-7 d)中小剂量的干预效果较佳。     

通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症的影响

目的 观察通光散对小鼠哮喘模型气道反应和气道炎症的影响.方法 35只6周龄BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组、正常对照组和药物实验组.模型组和药物组以鸡卵白蛋白(OVA)致敏、激发;药物组在最后一次致敏后每天灌胃给予通光散汤0.72 mL(相当于0.04 g生药);对照组以等体积的NS代替OVA致敏、激发.末次激发48 h后处理小鼠:无创法测定小鼠的气道高反应性,观察气道阻力变化;支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类;观察肺组织的病理变化.结果 ①药物组小鼠气道阻力的变化与模型组相比明显下降,差异显著(P＜0.05);②药物组BALF白细胞总数和Eos(％)与模型组相比明显降低(P＜0.05).③模型组小鼠肺脏组织支气管、血管黏膜下和周围肺组织有明显的炎症细胞浸润,大量炎症细胞向支气管和血管迁移,上皮细胞部分有脱落,部分可见黏液栓,血管壁明显水肿;治疗组小鼠肺组织炎性细胞浸润和管腔黏液分泌情况较模型组明显减轻,气道粘液的分泌量得到明显的控制.结论 通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症有显著抑制作用.     

缬沙坦对哮喘大鼠气道炎症及气道反应性的影响

目的:研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对哮喘大鼠气道炎症及气道反应性的干预作用。方法:50只Wistar大鼠随机分成5组,每组10只:A组(正常对照组)、B组(哮喘组)、C组[15mg/(kg·d)缬沙坦]、D组[30mg/(kg·d)缬沙坦]和E组[50mg/(kg·d)缬沙坦]。应用动物肺功能仪测定大鼠气道反应性,支气管肺泡灌洗液测定细胞总数及嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)计数。结果:①与A组比,B组肺泡灌洗液中细胞总数和EOS计数增高(P<0.05,P<0.01),与B组比,缬沙坦干预后的C组、D组和E组肺泡灌洗液中细胞总数和EOS计数均减少(P<0.05￣0.01);与C组比,D组肺泡灌洗液中细胞总数和EOS计数均减少(P均<0.05)。②当氯化乙酰胆碱(ACH)以较低(10￣20μg/ml)浓度激发时,各组大鼠气道阻力(Re)比较差异无统计学意义(P均>0.05);Re在ACH(40￣320μg/ml)浓度时,哮喘组的Re较高,与对照组、A组、B组和C组比较差异有统计学意义(P均<0.05,320μg/mlACH时P<0.01)。结论:缬沙坦可能是通过抑制AT1受体抑制哮喘气道炎症和降低气道反应性。     

烟曲霉菌孢子对哮喘大鼠气道炎症和气道反应性的影响

目的研究大鼠哮喘模型接触烟曲霉菌孢子后的气道炎症和气道反应性的改变。方法70只健康雄性Wistar大鼠随机分为Ⅰ和Ⅱ两大组（每组35只），每组下分为空白对照组（5只）、哮喘组（10只）、孢子滴鼻对照组（10只）和孢子滴鼻哮喘组（10只）。以卵白蛋白（OVA）致敏并激发建立大鼠哮喘模型，分别在OVA激发前（Ⅰ组）或激发后（Ⅱ组）予烟曲霉菌孢子滴鼻。通过BCA法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）上清中总蛋白浓度以观察支气管上皮损伤情况，并进行BALF细胞计数和分类。通过测定跨肺压和气体流速来计算大鼠气道阻力和予以不同浓度乙酰胆碱（Ach）刺激后的气道反应性变化。结果在Ⅰ组中，激发前孢子滴鼻哮喘组（CA组）BALF上清中总蛋白浓度较未用孢子滴鼻的哮喘组（A1组）明显增多[（1．125±0．254）μg／mL比（0．825±0．173）μg／mL，P〈0．01]，且CA组大鼠在给予10μg／kg和100μg／kg Ach后的气道阻力[（0．997±0．196）cm H2O·mL^-1·s^-1，（1．123±0．142）cm H2O·mL^-1·s^-1]均较A1组[（0．655±0．089）cm H2O·mL^-1·s^-1，（0．687±0．048）cm H2O·mL^-1·s^-1]显著升高（P均〈0．05）。但在Ⅱ组中，激发后孢子滴鼻哮喘组（AC组）BALF上清中总蛋白浓度，基础气道阻力和给予Ach后气道阻力与哮喘组（A2组）比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。CA组BALF细胞总数和细胞分类与A1组间差异无统计学意义，但AC组BALF中性粒细胞较A2组明显升高[（2．488±0．420）×10^6比（0．936±0．459）×10^6，P〈0．05]。结论哮喘大鼠在雾化激发前接触烟曲霉菌孢子，能加重其支气管上皮损伤和增加气道反应性。     

原花青素抑制哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性

目的:探讨葡萄籽提取物原花青素对急性哮喘模型小鼠气道炎症和气道高反应的作用及其机制?方法:选择32只8周龄SPF级BALB/c雌性小鼠,随机平均分成4组:对照组?哮喘组?布地奈德组和原花青素组?卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型?小鼠末次激发24 h后,检测小鼠气道阻力;苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎性细胞浸润;过碘酸雪夫(PAS)染色观察杯状细胞增生?气道黏液分泌;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清总IgE和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4和干扰素(INF)-γ;免疫印迹(Western blot)测定肺组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平?结果:与正常组相比,哮喘组气道阻力?气道炎症?BALF中细胞计数和嗜酸性粒细胞分类计数?IL-4?血清总IgE以及肺内iNOS蛋白表达明显增高(P < 0.01),而BALF中INF-γ明显降低(P < 0.01);与哮喘组相比,除INF-γ升高外,原花青素治疗组和布地奈德组各项指标均降低(P < 0.05)?结论:原花青素通过减少肺内iNOS的表达而减轻哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性,具有潜在的临床应用前景?     

不伴有气道高反应性的过敏性气道炎症

目的　探讨在SD大鼠过敏性气道炎症情况下气道阻力及气道对乙酰胆碱的反应性变化情况。方法　用卵清蛋白(OA)免疫和激发SD大鼠。以气道阻力较基线值升高 2 0 0 %时所需乙酰胆碱的负对数浓度 (-LogPC2 0 0 )为标准检测气道反应性。结果　①哮喘组气道阻力基线值较对照组明显升高 (从 2 2 82± 0 12 8到 3 193± 0 2 39,P <0 0 1)。②反复OA激发后气道对乙酰胆碱的反应性明显降低 (-LogPC2 0 0 从 4 0 0 6± 0 5 5 4到 2 0 5 9± 0 2 6 2 ,P <0 0 1)。支气管肺泡灌洗液 (BALF)和肺组织病理切片均证实过敏性气道炎症存在。结论　本研究证实反复过敏原激发后支气管收缩反应和气道高反应性不存在相关性 ,同时提示反复OA激发后虽然出现过敏性气道炎症 ,但气道反应性降低伴持续支气管收缩反应。     

吸入性糖皮质激素对咳嗽变异性哮喘气道炎症和高反应性的影响

目的探讨吸入性糖皮质激素对咳嗽变异性哮喘（CVA）患者气道炎症和高反应性的影响。方法选取2011年7月至2012年7月收治的CVA患者30例作为观察组,以同时间段我院体检健康者30例作为对照组。治疗前对所有入选对象进行肺功能检查、支气管激发试验及诱导痰检查。观察组患者给予布地奈德吸入剂治疗,随访观察1年。评估观察组患者治疗前及治疗3、6、9、12个月后的PD20-FEV。值,诱导痰中IL-5、IL-10含量和嗜酸性粒细胞比例。结果治疗前观察组患者诱导痰中的IL-5含量和嗜酸粒细胞比例明显高于对照组,IL-10含量明显低于对照组,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;治疗3个月后观察组患者PD20-FEV。较治疗前明显提高,治疗12个月后观察组患者的气道高反应性达到极轻度水平,但仅有53．3％（16／30）的气道高发应性转阴率;治疗后各时间节点观察组患者诱导痰中IL-5、IL-10含量和嗜酸性粒细胞比例较治疗前明显变化,但与对照组比较差异仍存在统计学意义（P〈0．05）。结论1年的吸入性糖皮质激素治疗可以显著缓解咳嗽变异性哮喘患者的气道炎症和高反应性,但是气道炎症的完全消退和气道高反应性的转阴需要更长时间的维持治疗。     

吸入性糖皮质激素对咳嗽变异性哮喘气道炎症和高反应性的影响

目的 分析吸入性糖皮质激素对咳嗽变异性哮喘患者气道炎症和高反应性的影响.方法 选取2017年2月至2018年10月本院收治的62例咳嗽变异性哮喘患者为观察组,另选同期60名本院健康体检者为对照组.观察组给予吸入性糖皮质激素治疗1年,观察并比较两组气道指标,比较观察组患者治疗前后气道反应及气道炎症的变化情况.结果 观察组嗜酸性粒细胞在其他炎症细胞中的占比高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组FEV1、FEV1/FVC比较差异无统计学意义;随着治疗时间的增加,观察组气道反应性FEV1-PD20水平、气道炎症水平IL-10逐渐升高,气道炎症水平IL-5逐渐降低,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 长期吸入性糖皮质激素治疗咳嗽变异性哮喘患者效果显著,可有效控制气道炎症,促进气道高反应性好转,值得临床推广应用.     

小鼠哮喘模型气道反应性检测方法的建立

目的 建立小鼠哮喘模型气道反应性检测方法。方法 20只BABL／c小鼠随机分为两组：模型组以OVA致敏、激发;对照组以等体积的NS代替OVA致敏、激发。末次激发48h后处理小鼠：用Buxco小鼠肺功能仪有创肺阻抗法测定小鼠的气道反应性,观察气道阻力增高一倍时乙酰甲胆碱的浓度（PC100）;支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞学分类;观察肺组织的病理变化。结果 ①模型组PC100均≤6．25mg／ml,对照组PC100均≥6．25mg／ml。②模型组BALF白细胞总数和Eos（％）与对照组相比明显增高（P〈0．01）。③模型组小鼠肺脏组织支气管及血管周围大量炎性细胞浸润,气道上皮分泌大量黏液。结论 在成功建立BALB／c小鼠哮喘模型的基础上,通过小鼠有创肺功能仪成功建立了小鼠气道反应性的检测方法。     

哮喘患者气道反应性和气道阻塞可逆性测定

以支气管组胺激发试验和支气管扩张剂试验对31例缓解期哮喘进行了气道反应性和气道阻塞可逆性测定。结果,气道反应性测定对判断哮喘存在非常敏感,并可反映病情严重程度;测定结果与基础肺功能及受检时缓解期长短密切相关。本文以吸入支气管扩张剂后一秒钟用力呼气容积改善≥15%作为判断气道“可逆性”的标准,结果符合者仅35.4%,肺功能接近正常者大多无支扩反应,提示气道阻塞可逆性测定的临床应用受到限制。     

射干麻黄汤加味对哮喘小鼠气道炎症及树突细胞的影响

目的：探讨射干麻黄汤加味对慢性哮喘小鼠气道炎症及树突状细胞的影响。方法：健康清洁级雌性BALB／c小鼠50只,每组10只,随机分为A组：正常对照组;B组：哮喘模型组;C组：地塞米松组;D组：射干麻黄汤组;E组：射干麻黄汤加味组。建立慢性哮喘小鼠模型后,分别予以相应药物干预,取材后采用HE染色、免疫组化检测小鼠气道炎症情况及树突状细胞数量。结果：与正常对照组相比哮喘小鼠的BALF中白细胞总数、EOS、淋巴细胞、肺组织DC数量均明显增加（P〈0．05）;经给予地塞米松、中药处理后上述指标均明显减少,哮喘发作程度减轻（P〈0．05）,射干麻黄汤加味优于射干麻黄汤。结论：射干麻黄汤加味可抑制BALB／c哮喘小鼠哮喘的发生,其机制有可能是通过降低气道炎症及DC的数量而实现的。     

小气道功能测定在支气管哮喘与慢性阻塞性肺病中的价值

目的研究小气道功能在支气管哮喘和慢性阻塞性肺病中的临床价值。方法通过观察两组患者舒张实验前后第一秒呼气流量（FEVI）、呼气中段流量（FEF25％。75％）的变化。结果哮喘组经支气管舒张实验FEV1和FEF25％～75％差异有统计学意义,而FEF25％～75％在哮喘组的改善更显著。结论小气道功能可作为区分支气管哮喘和慢性阻塞性肺病的参考指标。     

哮喘缓解期“宿痰伏肺”与慢性气道炎症相关性讨论

通过中医对哮喘"宿痰伏肺"理论认识的阐述,以及西医对哮喘缓解期存在慢性气道炎症的病理认识的总结,联系临床实践说明了哮喘缓解期"宿痰伏肺"与慢性气道炎症是中西医对同一病理机制认识的不同表述。阐明了中医运用"宿痰伏肺"理论指导临床实践的科学性。     

氯胺酮雾化吸入对气道反应性的影响

目的：探讨雾化吸人氯胺酮对气道反应性及肺和小气道病理改变的影响。方法：用整体引喘法分别测定雾化吸人1％-5％氯胺酮5min后和3％氯胺酮雾化吸人3、5、10、15、30min后对豚鼠气道反应性的变化。每天豚鼠雾化吸人5％氯胺酮2h，连续6天后观察肺部的病理变化。测定雾化吸人3％或5％氯胺酮30min后小鼠的痛阈改变。结果：2％-5％氯胺酮雾化吸人5min后有明显的气道舒张作用(P＜0．05)。3％氯胺酮雾化吸人5min以上均有舒张气道的效应(P＜0．05)，且各时点之间无明显区别(P＞0．05)。3％和5％氯胺酮雾化吸人对小鼠的痛域无影响(P＞0．05)。连续6天雾化吸人5％氯胺酮后末见气道与肺明显的病理变化。结论：3％-5％氯胺酮雾化吸人5min以上有良好的平喘作用。氯胺酮雾化吸人对外周痛阈不产生明显影响。氯胺酮雾化吸人对肺和小气道不产生病理影响。     

Effects of Ligustrazine on Airway Inflammation in A Mouse Model of Neutrophilic Asthma

Objective

To investigate the effects of ligustrazine (LTZ) on airway inflammation in a mouse model of neutrophilic asthma (NA).

Methods

Forty healthy C57BL/6 female mice were randomly divided into 4 groups using a random number table, including the normal control, NA, LTZ and dexamethasone (DXM) groups, with 10 rats in each group. The NA mice model was established by the method of ovalbumin combined with lipopolysaccharide sensitization. At 0.5 h before each challenge, LTZ and DXM groups were intraperitoneally injected with LTZ (80 mg/kg) or DXM (0.5 mg/kg) for 14 d, respectively, while the other two groups were given the equal volume of normal saline. After last challenge for 24 h, the aerosol inhalation of methacholine was performed and the airway reactivity was measured. The bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was collected. The Wright-Giemsa staining was used for total white blood cells and differential counts. The levels of cytokines interleukin (IL)-17 and IL-10 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The pathological change of lung tissue was observed by hematoxylin eosin staining.

Results

The airway responsiveness of the NA group was signifificantly higher than the normal control group (P<0.05), while those in the LTZ and DXM groups were signifificantly lower than the NA group (P<0.05). The neutrophil and eosinophil counts in the LTZ and DXM groups were signifificantly lower than the NA group (P<0.05), and those in the LTZ group were signifificantly lower than the DXM group (P<0.05). There were a large number of peribronchiolar and perivascular inflammatory cells in fifiltration in the NA group. The airway inflflammation in the LTZ and DXM groups were signifificantly alleviated than the NA group. The infifiltration in the LTZ group was signifificantly reduced than the DXM group. Compared with the normal control group, the IL-17 level in BALF was signifificantly increased and the IL-10 level in BALF was signifificantly decreased in the NA group (P<0.05). LTZ and DXM treatment signifificantly decreased IL-17 levels and increased IL-10 levels compared with the NA group (P<0.05), and the changes in the above indices were more signifificant in the LTZ group (P<0.05).

Conclusion

LTZ could alleviate the airway inflflammation in the NA mice model through increasing the IL-10 level and decreasing the IL-17 level.

     

BCG干预对哮喘小鼠气道炎症及调节性T细胞生成的影响

目的观察减毒卡介活菌疫苗(BCG)干预后哮喘小鼠气道炎症及调节性T细胞生成的变化,以探讨其可能的作用机制。方法24只昆明小鼠随机分为哮喘组、BCG干预组、正常对照组。昆明小鼠以卵白蛋白(OVA)致敏激发建立哮喘模型,于OVA致敏前及后5d分别以BCG皮内注射干预;正常对照组小鼠以生理盐水代替OVA致敏激发。所有小鼠在最后一次激发后24h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和外周血。计数BALF中的细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数。并用流式细胞仪分析外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)的百分比。开腹取脾,制备脾单细胞悬液并培养48h,收集上清液。Elisa法测定上清液中的IL-10含量。结果哮喘组小鼠BALF中的细胞总数及EOS计数较正常对照组显著增高(P<0.01),而BCG干预组其BALF中的细胞总数及EOS的计数较OVA致敏激发组降低(P<0.01);哮喘组外周血CD4 CD25 Treg百分比为(11.59±1.33)%,较正常对照组的(13.66±1.68)%显著下降(P<0.01);而BCG干预组CD4 CD25 Treg百分比为(14.4±2.75)%,较哮喘组明显上升(P<0.05)。BCG干预组脾细胞培养上清液中IL-10的水平(7.79±1.34pg/ml)较哮喘组(5.54±0.66pg/ml)显著升高(P<0.01)。结论BCG能明显抑制哮喘小鼠气道的炎症反应,其干预机制可能与促进Treg生成有关。     

射干麻黄汤对哮喘患者气道高反应性的影响

目的观察射干麻黄汤对寒哮患者气道高反应性的影响。方法 51例轻、中度寒哮患者随机分为两组。对照组给予沙丁胺醇气雾剂,治疗组在对照组的基础上加用射干麻黄汤中药配方颗粒冲服,两组均治疗12周,分别于治疗前和治疗后进行哮喘控制测试评分(ACT评分)、最大呼气峰流速(PEF)、肺通气功能及支气管激发或舒张试验检测,并进行疗效判定。结果治疗组疗效优于对照组(P0.05),两组FEV1、FEV1%预计值、PEF均较治疗前显著改善(P0.05),而治疗组气道高反应性(支气管激发或舒张实验阳性率)及PEF变异率均较对照组下降(P0.05),ACT评分较对照组明显改善(P0.05)。结论射干麻黄汤能改善哮喘患者的症状及气道高反应性。     

中医药治疗小儿哮喘气道炎症机制研究

中医药治疗小儿哮喘气道炎症的机制优势主要体现在以下方面：①验证了中医药在细胞分子水平上对气道炎症的防治作用,为中医药治疗哮喘提供了临床实验依据;②一些文献证明中医药或中西医结合控制气道炎症的作用优于单独使用激素治疗或其他西医常规治疗,中医药调节机体动态平衡的作用是其潜在优势;③中医药在哮喘缓解期仍有控制气道炎症的作用,其注重扶正固本的治则可有效缓解激素的不良反应,有助于解除对激素的依赖性。但中医药在此类研究中尚存在一些不足之处：①中医药对气道炎症的临床作用机制研究仍处于现代医学研究成果的验证阶段,即对若干指标的影响,缺少基于循证医学的理论创新;②由于临床标本采取受限,中医药对气道炎症的临床作用机制研究尚未进行纵向深入探索,不能充分揭示各因素之间的动态演变过程;③绝大多数文献没有考虑中医的证和症与检测指标的相关性,不能完全体现中医药在防治气道炎症方面的辨证施治精神;④部分临床能快速抑制气道炎症的复方缺少相关动物实验研究,尚无法深入揭示其作用机制,限制了中成药的研发与推广;⑤尚缺少多中心大样本研究,部分文献分组及统计方法不尽科学,影响研究质量。     

小剂量氨茶碱对粉尘螨诱导的哮喘小鼠气道炎症及树突状细胞作用的研究

目的:研究氨茶碱对临床常见变应原粉尘螨致敏诱发的哮喘小鼠气道炎症及树突状细胞(DC)密度、分布的影响。方法:粉尘螨腹腔注射与雾化吸入诱发BALB/c小鼠哮喘发作,末次吸入24 h后采用免疫组织化学及计算机图像分析方法比较各组小鼠气道DC的分布及密度改变,并测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数及IL-5(ELISA测定)浓度。结果:粉尘螨诱发后哮喘小鼠BALF中EOS计数(3.29±1.38)×1 06/L、IL-5水平(25±5)pg/ml均较正常组EOS计数(0.05±0.01)×106/L、IL-5水平(6±3)pg/ml显著升高(P<0.05、P<0.01),气道DC密度个数每平方毫米上皮面积(1542±28)个与正常组小鼠每平方毫米上皮面积(600±20)个比较,差异有显著性(P<0.01)。小鼠经小剂量氨茶碱处理后气道DC密度、BALF中EOS计数和IL-5水平与哮喘组比较,差异有显著性(P<0.05)。各组小鼠肺内DC分布未见明显变化。结论:小剂量氨茶碱抑制EOS性气道炎症,下调气道DC密度,未影响DC肺内分布。