Tim3在再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征鉴别诊断中的意义

目的：探究T细胞免疫球蛋白黏液素（T cell immunoglobulin and mucin,Tim）3在再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）和骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome,MDS）鉴别诊断中的意义。方法：流式细胞术检测24例AA患者、20例MDS患者和17例健康对照者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）中CD4+Tim1+和CD4+Tim3+细胞比例。实时荧光定量PCR检测AA、MDS患者和健康对照者PBMC中Tim3 mRNA和S型凝集素半乳糖凝集素9（galectin?9,Gal?9）mRNA表达水平。结果：健康对照者、AA和MDS患者PBMC中CD4+Tim1+细胞比例差异无统计学意义;MDS患者的CD4+Tim3+细胞比例明显高于AA患者和健康对照者（P < 0.05）;高危组MDS患者CD4+Tim3+细胞比例明显高于低中危组MDS患者（P < 0.01）和健康对照者（P < 0.05）;健康对照者、AA和MDS患者的Tim3 mRNA和Gal?9 mRNA水平差异无统计学意义。结论：MDS患者Tim3表达水平明显高于AA患者,并与疾病危险度有关,提示Tim3可能参与MDS的发病,并可能成为临床鉴别AA与MDS的标志物。     

晚期NSCLC患者外周血CD8+T细胞表面NK相关受体表达变化及与预后的相关性分析

[摘要]：目的 探讨晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD8+T细胞表面NK相关受体表达变化及与预后的相关性。方法 选取2017年10月至2019年9月我院收治的94例晚期NSCLC患者，设为病例组，另按照2:1的比例选择与病例组性别、年龄信息匹配的47例体检者为对照组；检测并比较两组外周血CD8+T细胞表面NK活化性受体（NKG2D+CD8+）及抑制性受体（NKG2A+CD8+）细胞比率；并分析NKG2D、NKG2A与晚期NSCLC患者临床病理特征及预后的关系。结果 病例组外周血NKG2D+CD8+比率低于对照组，NKG2A+CD8+比率高于对照组（P＜0.05）。与东部肿瘤协作组（ECOG）0~1分、TNM III期者相比，晚期NSCLC患者ECOG 2~3分、TNM IV期者NKG2D+CD8+比率较低，NKG2A+CD8+比率较高（P＜0.05）。经Kaplan-Meier生存分析，NKG2D高水平与低水平患者累积生存率分别为71.0%、40.4%，平均生存时间分别为（23.97±1.65）、（31.17±1.31）个月，且NKG2D高水平患者总生存时间较低水平患者延长（Logrank 2=9.763，P=0.002）；NKG2A低水平与高水平患者累积生存率分别为66.2%、45.1%，平均生存时间分别为（30.41±1.25）、（24.80±1.73）个月，且NKG2A低水平患者总生存时间较高水平患者延长（Logrank 2=5.353，P=0.021）；COX多因素分析显示，N1~N3分期[HR(95%CI)=1.780(1.135~4.786)]、TNM IV期[HR(95%CI)=4.224(2.005~12.394)]、NKG2D低水平[HR(95%CI)=3.954(1.856~10.039)]、NKG2A高水平[HR(95%CI)=3.600(1.732~9.587)]均是影响晚期NSCLC患者总生存期的独立危险因素（P＜0.05）。结论 晚期NSCLC患者外周血中CD8+T细胞表面NKG2D低表达、NKG2A高表达，二者表达情况与患者身体机能、临床分期及预后有关，可作为评估晚期NSCLC患者预后的可靠参考指标。     

T淋巴细胞亚群在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中T淋巴细胞亚群的表达及与预后的关系.方法 采用流式细胞技术,根据白细胞表面抗原分化群(CD)检测92例NSCLC 患者外周血中的CD3+、CD4+、CD8+、CD19+及CD25+细胞,以健康人群做对照,结合临床病理及随访资料进行分析.结果 NSCLC患者CD3+、CD8+细胞明显低于健康对照组(P<0.01),CD25+细胞显著高于对照组(P<0.01),CD19+细胞高于对照组(P<0.05).CD4+细胞两组间无差异(P >0.05).Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血CD4+、CD25+T细胞水平较Ⅲ、Ⅳ期患者高(P<0.01).鳞癌患者外周血CD8+T细胞水平较腺癌患者高(P<0.01).结论 T细胞淋巴亚群在机体肿瘤免疫中的作用和地位不能单从数量上来判断机体的免疫状态,联合多因子检测才能较完整的反映机体的免疫状态.     

白癜风患者外周血黑素细胞抗原特异性T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞水平及意义

目的 探讨白癜风患者外周血黑素抗原特异性CD8+T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞的变化及意义。方法 采用流式细胞术对初诊123例白癜风患者（观察组）和30例正常人（对照组）外周血中黑素细胞抗原特异性T细胞（CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL）、调节性T细胞（CD4+CD125+CD127-Tregs）及自然杀伤T细胞（CD3+TCRα24+β11+NKT）进行定量分析并进行比较。结果观察组CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL水平显著高于对照组（P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平均低于对照组（均P＜0.05）。不同分期白癜风患者外周血各种T细胞表达水平比较中,CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL在各期中均高于对照组（均P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平仅在进展期中均低于对照组（均P＜0.05）,稳定期则无统计学差异。3种细胞水平与患者的白斑面积明显相关（r=0.929、-0.982、-0.957,均P＜0.01）。结论CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL、CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平的异常导致白癜风患者体内免疫调节功能失衡,与白癜风的发生、发展有密切关系。     

再生障碍性贫血与T细胞亚群及调节性T细胞的相关性分析

目的 对再生障碍性贫血患者的T细胞亚群与调节性T细胞进行分析,探讨再生障碍性贫血和T细胞亚群及调节性T细胞的关系。 方法 选择浙江省人民医院再生障碍性贫血患者30例为再生障碍性贫血组,30例健康者作为对照组,再生障碍性贫血组分为重型再生障碍性贫血组和非重型再生障碍性贫血组,比较各组患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和T细胞亚群的表达情况。 结果 再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low的表达低于对照组(P＜0.05),再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25+CD127high的表达高于对照组(P＜0.05)。再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD4+和CD4/CD8低于对照组(P＜0.05),再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD8+的表达高于对照组(P＜0.05)。重型再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low的表达低于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05),重型再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25+CD127high的表达高于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05)。重型再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD4+和CD4/CD8低于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05),重型再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD8+的表达高于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05)。 结论 再生障碍性贫血患者存在T细胞亚群和调节性T细胞的异常,再生障碍性贫血的发病和严重程度可能和T细胞亚群和调节性T细胞水平相关。      

非小细胞肺癌患者外周血CD8+CD39+T细胞水平及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平及临床意义。方法选取60例NSCLC患者为NSCLC组,60例健康人群为对照组。检测两组外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平,分析NSCLC患者外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平与其临床特征和预后的关系。结果NSCLC组外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平显著高于对照组(P＜0.05)。肿瘤直径＞3 cm、低分化、TNMⅢ期的NSCLC患者外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平高于肿瘤直径≤3 cm、中高分化、TNMⅠ~Ⅱ期的患者(P＜0.05)。CD8⁺CD39⁺T细胞高水平组术后1年肿瘤无进展生存率及无进展生存期均低于低水平组(P＜0.05)。TNM分期、外周血CD8⁺CD39⁺T细胞水平是NSCLC患者预后的影响因素(P＜0.05)。结论CD8⁺CD39⁺T细胞在NSCLC患者外周血中呈高水平,且与临床病理特征及预后关系密切,可作为患者病情和预后的评估指标。     

CIK细胞免疫疗法联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床疗效

  目的   评价化疗联合CIK（cytokine-induced killer）细胞免疫疗法对非小细胞肺癌NSCLC早期、晚期患者的临床疗效。   方法   收集2013年1月至2016年12月昆明医科大学第三附属医院收治NSCLC患者122例为研究对象,按患者病程分为Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期,将其随机分入4个受试组:化疗A组（n = 30）,联合CIK A组（n = 31）,化疗B组（n = 30）,联合CIK B组（n = 31）。其中,受试组采用化疗方法均为吉西他滨联合顺铂治疗（GP）。评价患者临床疗效、生存质量和外周血淋巴细胞和细胞因子变化。   结果   与化疗组比较,联合CIK治疗组显著提高ORR值和DCR值,分别是（67.74%,45.16%）和（74.19%,64.52%）（P < 0.05）;提高KPS评分和ECOG评分,分别是（80.65%,58.06%）和（80.65%,70.97%）（ P < 0.05）;提高患者外周血中CD3 +、CD8+淋巴细胞亚群比率及CIK细胞比率（P < 0.05）;提高患者外周血中IFN-γ,TNF-α、IL-4、IL-6细胞因子表达水平（ P < 0.05）;延长患者生存期（ P < 0.05）。与联合CIK A组（Ⅰ-Ⅱ期）比较,联合CIK B组（Ⅲ-Ⅳ期）患者外周血中CD3 +、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞比率、CIK细胞比率均显著提高（P < 0.05）,维持和调控增强外周血中IFN-γ,TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6细胞因子表达水平（ P < 0.05）。   结论   化疗联合CIK细胞治疗能显著提高不同阶段NSCLC患者临床疗效、延长生存期、提高近期生存质量,提高化疗期患者体内免疫细胞持续对抗肿瘤的细胞毒性和免疫应答能力,尤其对晚期患者的疗效更佳。      

妊娠期高血压疾病妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达分析

目的 分析妊娠期高血压疾病(PIH)妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达变化。方法 连续选择近期住院确诊的PIH 妇女27例(PIH组),入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD+4CD+25 Treg 和CD+4CD+25 Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测,并与同期住院正常怀孕产妇 (对照组,20例)相同测试结果进行比较。结果 调节性T细胞数据中,PIH组血清CD+4CD+25 Treg和CD+4CD+25 Foxp3+ Treg水平明显低于对照组(P均<0.05～0.01)。辅助性T细胞中,PIH组血清CD+4/CD+8表达水平明显高于对照组,而CD+8表达水平则显著低于对照组(P均<0.05～0.01)。结论 PIH患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

慢性HCV感染患者外周血CD81、CD4表达的观测

目的    研究慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染患者外周血CD81、CD4的表达,探讨CD81对患者机体免疫系统的调节作用。方法    选择HCV感染患者55例(感染组),健康对照25例（健康对照组）,采用流式细胞术检测其外周血CD81、CD4的表达水平,ELISA法检测血清中白介素 2（IL 2）的含量, RT-PCR法检测血清中HCV RNA的含量。结果    感染组CD81分子的表达水平与血清中HCV RNA的含量呈正相关（r=0.474, P＜0.01）。感染组外周血淋巴细胞中CD81+细胞和CD3+CD4+T细胞中CD3+CD4+CD81+T细胞的数量均高于健康对照组（P＜0.01）,且二者呈正相关（r=0.581, P＜0.01）;感染组CD3+CD4+T细胞的数量和血清中IL 2的含量均显著低于健康对照组（P＜0.05）,且两者呈正相关（r=0.378,P＜0.05）。结论    HCV感染后,HCV RNA的持续存在可能促进细胞表面CD81分子的表达;CD81分子高表达的同时,伴随CD3+CD4+T细胞数量降低,且分泌的细胞因子IL-2减少,参与患者机体的免疫调节。     

哮喘患者外周血调节性T细胞和Th17细胞数量及其转录因子的变化

[摘要] 目的： 观察哮喘患者外周血CD4+CD25+Foxp3+、CD4+IL-17+细胞的百分比和Foxp3、白介素-17(IL-17)、RORγt mRNA的表达水平的变化与哮喘发病的关系。方法： 分别取23例哮喘缓解期患者、25例哮喘急性发作期患者和20例健康人（对照组）的外周血单个核细胞（PBMC）,免疫磁珠阴选CD4+T细胞,采用Foxp3、IL-17胞内染色的方法,通过流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+以及CD4+IL-17+细胞的百分比,应用RT-PCR检测Foxp3、IL-17、RORγt mRNA水平。结果： 免疫磁珠阴选CD4+T细胞纯度达90％以上。急性发作组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+细胞百分比以及Foxp3 mRNA水平较对照组和缓解组明显降低（P＜0.01）,而缓解组和对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;急性发作组CD4+IL-17+细胞比例以及IL-17、RORγt mRNA表达较对照组和缓解组明显增高（P＜0.01）,而缓解组亦明显高于对照组（P＜0.05）。结论： Treg/Th17失衡可能和哮喘发病密切相关。     

Expression of PD1 and BTLA on the CD8+ T Cell and γδT Cell Subsets in Peripheral Blood of Non-Small Cell Lung Cancer Patients

Objective To investigate the expression and regulation of programmed cell death protein 1 (PD1), B lymphocyte and T lymphocyte attenuator (BTLA) in peripheral blood of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC); to examine the correlation of the mRNA levels between PD and BTLA in NSCLC. Methods Flow cytometry was used to detect the expression of PD1 and BTLA on the surfaces of CD8⁺ T cells and γδ⁺ T cells in the peripheral blood samples collected from 32 in-patients with stage IV NSCLC and 30 healthy individuals. We compared the expression of PD1 and BTLA on the surfaces of γδ⁺ T cells in the NSCLC patients with bone metastasis before and after the treatment of zoledronic acid. The correlations of PD1 and BTLA, as well as their ligands were analyzed using Pearson correlation analysis with the cBioPortal data platform. Results The frequency of PD1 on the surfaces of CD8⁺ T cells was significantly higher than that of the γδT cells in both healthy controls (t=2.324, P=0.024) and NSCLC patients（t=2.498, P=0.015). The frequency of PD1 on CD8⁺ T cells, rather than on γδ⁺ T cells, was significantly upregulated in advanced NSCLC patients compared with that in healthy controls (t=4.829, P<0.001). The PD1⁺ BTLA⁺γδT cells of the healthy controls were significantly lower than that of the NSCLC patients (t=2.422, P=0.0185). No differences in percentage of PD1⁺γδ⁺ and BTLA⁺γδ⁺ T cells were observed in 7 NSCLC patients with bone metastasis before and after zoledronic acid treatment. PD1 was positively correlated with BTLA in both lung adenocarcinoma (r=0.54; P<0.05) and lung squamous cell carcinoma (r=0.78; P<0.05). Conclusions The upregulation of co-inhibitory molecules occurs on the surfaces of both CD8⁺ T cells and γδT cells in advanced NSCLC, suggesting that these molecules were involved in regulating the inactivation of CD8⁺ T cells and γδ⁺ T cells, immune escape and tumor invasion.     

变应性鼻炎辅助性T细胞免疫球蛋白功能区和黏液素样功能区-1的表达

目的 探讨人辅助性T细胞(helperT lymphocyte,Th)表达T细胞免疫球蛋白功能区和黏液素样功能区-1(T cell immunoglobulin domain and mucin domain-1,TIM-1)在变应性鼻炎(allergicrhinitis,AR)中的作用.方法 密度梯度离心分离20名健康人和20例AR患者外周血单个核细胞(human peripheral blood mononuclear cells,PBMC),免疫磁珠分选CD4+T细胞,CD4+CD45RA+T细胞,免疫荧光和流式细胞仪检测TIM-1阳性细胞.对比植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA,20μg/ml)非特异性刺激上述细胞后表达TIM-1阳性细胞的差异.标准变应原(屋尘螨,50000 SOU/ml)和内毒素(脂多糖,lipopolysaccharide,LPS,20ng/ml)特异性刺激树突状细胞(dendritic cells,DC),观察DC提呈抗原并诱导初始Th细胞表达TIM-1的特点.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养液中IL-4、IFN-γ的分泌.结果 AR患者组CD4+T细胞中TIM-1阳性CD4+T细胞9.48%4±1.51%,高于健康组3.12%±0.32%(P＜0.05);PHA刺激后两组表达TIM-1的CD4+T细胞均高于刺激前(P值均<0.05).DC提呈抗原刺激健康组初始Th细胞后,检测混合细胞液中表达TIM-1的细胞,标准变应原组10.81%±1.48%,高于LPS组6.07%±1.45%(P＜0.05).ELISA检测相应IL-4、IFN-γ的分泌,标准变应原组IL-4为(74.61±13.82)pg/ml、(25.31±7.23)pg/ml;LPS组分别为(28.57±3.36)pg/ml、(163.41±82.37)Pg/ml.结论 AR患者中表达TIM-1的Th细胞高于健康者,DC提呈抗原后可以促进其表达;TIM-1的表达有利于初始Th细胞向Th2分化,由此诱发以Th2细胞因子为主的免疫反应.     

卵巢癌患者CD8+ T细胞中调节性T细胞相关分子标志物的表达率及临床意义

目的 :检测卵巢癌患者组织及外周血CD8~+T细胞中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)相关分子标志物的表达率,探讨其在卵巢癌发生发展中的临床意义。方法:用流式细胞术检测31例卵巢癌患者、31例卵巢良性肿瘤患者和31例健康对照者的外周血,以及14例卵巢癌组织和12例卵巢良性肿瘤组织CD8~+T细胞中Foxp3、CD25、CD28、CTLA-4及GITR的表达率。结果:Foxp3和CTLA-4在卵巢癌组织CD8~+T细胞中的表达率显著高于卵巢良性肿瘤组织(P<0.05);CD28在卵巢癌组织CD8~+T细胞中的表达率显著低于卵巢良性肿瘤组织(P<0.05)。卵巢癌患者外周血CD8+T细胞中Foxp3、CD25、CTLA-4的表达率显著高于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.05),CD28的表达率显著低于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.05)。结论:卵巢癌组织及外周血CD8~+Treg所占的比例显著高于卵巢良性肿瘤组及健康对照组,且CD8~+T细胞中Foxp3的表达率可能对了解卵巢癌进展状况有一定帮助。     

血清COL4A3蛋白与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理特征及预后的相关性

 目的 探索血清COL4A3蛋白与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者临床病理特征及预后的相关性。方法 ELISA试剂盒检测90例NSCLC患者和58名健康对照血清中COL4A3蛋白含量。ROC曲线分析血清COL4A3水平以预测NSCLC患者肿瘤转移的敏感性与特异性。Kaplan-Meier生存分析研究血清COL4A3蛋白表达与患者生存期的相关性。对NSCLC患者预后的相关性因素进行单因素和多因素分析。采用MTT实验和Transwell实验分别检测血清COL4A3蛋白对NSCLC细胞增殖和迁移能力的影响。结果 NSCLC患者血清COL4A3水平明显高于健康对照（P<0.001）,且高表达COL4A3的患者总生存期（overall survival,OS）低于低表达患者（P=0.021）。在单因素分析中,NSCLC患者预后与肿瘤大小（P=0.015）、病理组织分级（P=0.042）、淋巴结转移（P=0.015）、临床分期（P<0.01）以及COL4A3表达（P<0.01）密切相关;在多因素分析中,NSCLC患者的预后与患者淋巴结转移（P=0.032）、临床分期（P<0.01）以及血清COL4A3水平（P=0.012）密切相关。COL4A3蛋白可显著增强体外NSCLC细胞增殖和迁移能力,并呈浓度依赖性。结论 血清COL4A3蛋白水平与NSCLC进展密切相关,可能是一种NSCLC患者预后不良的独立标志物。     

CD4^＋CD25^high Regulatory Cells in Peripheral Blood of NSCLC Patients

The proportion and changes of CD4 CD25high regulatory T cells (Trs) in peripheral blood of non-small cell lung cancer (NSCLC) patients were analyzed and their clinical significance explored. The peripheral blood was collected from 61 patients with NSCLC and 15 healthy controls. By using monoclonal antibodies, the blood samples were evaluated with the flow cytometry for lymphocyte subsets (CD3 , CD4 and CD8 ) and CD4 CD25high Tr cells. The results showed that the proportion of CD4 CD25high Tr cells in NSCLC group was significantly higher than in control group [(4.36±2.07) % vs (2.04±1.03) %, P<0.01]. The proportion of CD4 CD25 high Tr cells in late stage was higher than that in early stage [stages I II (2.26 0.6) %; stage III (3.28 1.38) %; stage IV (6.06±4.08) %] (P<0.05). Kaplan-Meier survival analysis revealed that the prognosis of the patients who had higher proportion of CD4 CD25high Tr cells in peripheral blood was worse (P=0.0026). In conclusion, the relative increase in CD4 CD25high Tr cells in peripheral blood may be related to im-munosuppression and tumor progression in patients with NSCLC. This finding suggests that CD4 CD25 high Tr cells in peripheral blood of NSCLC may be positive for prognosis analysis. The use of depletion of the CD4 CD25high Tr cell therapy to treat NSCLC patients may be an effective strategy.     

MMP_2、MMP_9、TIMP_1、TIMP_2和CD44V6在非小细胞肺癌中的表达及与转移、预后的关系

目的探讨CD44V6、基质金属蛋白酶MMP2、MMP9及抑制剂TIMP1、TIMP2在非小细胞性肺癌(NSCLC)中的表达及与转移、预后的关系。方法采用免疫组织化学S-P法,分别检测43例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中CD44V6、MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的蛋白表达。43例均随访或追观3年以上。结果43例NSCLC的CD44V6阳性表达率65.1%(28/43),15正常支气管上皮组织阳性表达13.3%(2/43),两者相比差异有显著性(P<0.05);肺鳞癌组织的CD44V6阳性率85.7%(18/21),肺腺癌组织阳性度45.5%(10/23),两者相比差异有显著性(P<0.01);Ⅲ期和Ⅰ期之间CD44V6表达有显著差异(P<0.05);肺癌伴淋巴结转移者的CD44V6表达高于未发生淋巴结转移者(P<0.05);CD44V6高表与患者3年生存期成负相关(P<0.05),但与肺癌细胞分化程度及临床参数等均无明显关系(P<0.05)。MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2在NSCLC中的阳性表达率(分别为79.1%、74.4%、55.8%及60.5%)明显高于正常支气管上皮组织(分别为27.7%、26.7%、20.0%、及26.7%)(P<0.01或P<0.05);腺癌中MMP9的阳性表达率(90.9%)显著高于鳞癌(57.1%,P<0.05);MMP2、MMP9的表达随着病理分级和临床分期增加而有增高趋势;而TIMPl、TIMP2的阳性表达则呈下降趋势。MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的阳性表达率与患者淋巴结转移和3年生存期密切相关(P<0.05),但与患者的临床参数均无明显关系(P>0.05)。结论CD44V6、MMP2、MMP9、TIMPl及TIMP2的过度表达与NSCLC的发展、淋巴结转移及预后有密切关系,可作为临床评估NSCLC的进展及预测其转移潜能和预后的重要指标之一。     

TIM-1 和TIM-4 mRNA 在HAV 患者中的表达及其临床意义

目的 观察典型病程甲型病毒性肝炎（HAV）患者外周血中T 细胞免疫球蛋白域蛋白-1 （TIM-1）和T 细胞免疫球蛋白域蛋白-4（TIM-4）mRNA 的表达水平,探讨HAV 患者病情进展的不同时 期TIM-1 和TIM-4 mRNA 水平与HAV RNA 含量,HAV 免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）浓度 及肝功能指标的关系。方法 选取HAV 典型病程的30 例患者作为HAV 组,分别于潜伏期或黄疸前期、黄 疸期及恢复期留取血液标本,以同期30 例健康体检者作为对照组,收集血液标本。采用实时荧光定量聚合 酶链反应检测TIM-1 和TIM-4 mRNA 表达水平,同时检测HAV 患者外周血HAV RNA 含量,酶联免疫 吸附法检测HAV 患者外周血HAV 抗体IgM、IgG 滴度水平,全自动生化分析仪检测肝功能指标谷丙转氨 酶、谷草转氨酶及总胆红素。结果 HAV 组患者外周血TIM-1 和TIM-4 mRNA 表达水平高于对照组患者 （P <0.05）。随着疾病进程的继续,TIM-1 及TIM-4 mRNA 表达水平于黄疸期达峰值,恢复期下降。TIM- 1 mRNA 表达水平与HAV 患者IgM 滴度、AST 及TBIL 呈正相关（P <0.05）,与IgG 滴度无关（P >0.05）。 结论 HAV 患者外周血中TIM-1 和TIM-4 mRNA 的表达水平与HAV 的疾病进展有较好的拟合性,TIM-1 和TIM-4 mRNA 可能在HAV 的发生、发展中发挥作用。     

铁皮石斛和CIK细胞对非小细胞肺癌患者术后外周血循环肿瘤细胞、细胞免疫功能和预后的影响

目的观察铁皮石斛和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后外周血循环肿瘤细胞(CTC)、细胞免疫功能和预后的影响。方法选取2016年2月—2018年6月云南省肿瘤医院收治行肺癌根治手术治疗的NSCLC患者360例,随机数字表法分为2组。对照组(n=175)患者采用CIK治疗,观察组(n=175)采用CIK联合铁皮石斛治疗,2组均治疗4个疗程。观察2组治疗前,第一、二、三、四疗程后外周血CTC、T细胞亚群、自然杀伤(NK)细胞、CIK细胞变化。分析2组患者无疾病进展生存率和总生存率差异。结果最终350例均完成治疗。治疗4个疗程后,2组外周血CTC计数均降低(F/P=6.695/<0.001、15.352/<0.001),CD3⁺细胞占比、CD4⁺细胞占比、CD4⁺/CD8⁺比值、NK细胞占比、CIK细胞占比均增高(对照组:F/P=18.135/<0.001、20.354/<0.001、23.054/<0.001、12.328/<0.001、10.325/<0.001;观察组:F/P=35.124/<0.001、42.051/<0.001、59.421/<0.001、15.351/<0.001、21.265/<0.001);观察组第二、三、四疗程后外周血CTC计数低于对照组(P<0.05),CD3⁺细胞占比、CD4⁺细胞占比、CD4⁺/CD8⁺比值、NK细胞占比、CIK细胞占比高于对照组(F/P=29.351/<0.001、32.515/<0.001、38.124/<0.001、21.265/<0.001、29.168/<0.001)。中位随访48(36~60)个月,随访失联12例,复发10例,转移32例,死亡253例,观察组总生存率、无疾病进展生存率为33.53%、20.00%,高于对照组的16.67%、5.36%(χ²=9.667、13.820,P=0.002、<0.001)。结论铁皮石斛联合CIK治疗较单独CIK治疗可更有效地降低外周血CTC水平,增强细胞免疫功能,延长患者生存时间。     

老年2型糖尿病周围神经病变患者外周血调节性T细胞的检测及其临床意义

目的：探讨2型糖尿病周围神经病变（DPN）患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（Treg）的变化及其检测的临床应用。方法：采用流式细胞技术多色荧光分析法,对20例初诊老年DPN患者、20例初诊老年2型糖尿病（T2DM）不伴并发症患者及20例性别年龄匹配的健康对照（CON）者外周血中Treg细胞测定,对两组结果进行统计学分析。结果：与正常对照组比较,DPN组和DM组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞数量均显著减少（P<0.05）,且DPN组患者较DM组患者亦显著减少（P<0.05）;DPN组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞比例与MNSI评分呈负相关,但无统计学意义,而与MDNS评分则呈显著负相关（r=-0.339,P<0.05）。结论：老年DPN患者中CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞数量减少,可能在DPN的发生发展中起到一定作用。