左旋四氢巴马汀对黑质、蓝斑、尾核中酪氨酸羟化酶和多巴胺—β—羟化酶活力的影响

用放射性同位素法测定大白鼠酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺—β—羟化酶(DβH)的活力,研究药物对它们的影响:1.DA受体拮抗剂氟哌啶醇和左旋四氢巴马汀的作用不完全相同,氟哌啶醇增强尾核的TH酶活力较明显,而左旋四氢巴马汀以抑制篮斑核TH酶活力为明显;2.排空剂利血平不影响TH和DβH两酶的活力。     

2,4-二氯苯氧乙酸对斑马鱼造血干细胞的影响

目的 观察2,4-二氯苯氧乙酸对斑马鱼胚胎的急性毒性和造血干细胞发育的影响。方法 野生型斑马鱼胚胎暴露于2,4-D水溶液中,RT-PCR测定2,4-D暴露后斑马鱼胚胎cmyb基因表达水平,cmyb探针原位杂交和cmyb： eGFP转基因鱼系观察2,4-D暴露后斑马鱼胚胎造血干细胞的发育水平。 结果 急性毒性试验显示,5、10mg/L 2,4-D组胚胎的死亡率随着暴露时间延长,胚胎死亡率维持在8%,而20mg/L 2,4-D组胚胎的死亡率随着暴露时间延长,胚胎死亡率逐渐上升,至96h时胚胎全部死亡。受精后48、72h暴露组胚胎孵化率随着暴露浓度增加而减少,并呈现一定的剂量效应关系,受精72h的LC50为16.3mg/L,95%的可信区间为（13.2mg/L,21.3mg/L）。与对照组相比,受精后48h 10mg/L 2,4-D组（t=13.11,P<0.001）和受精后72h 10mg/L 2,4-D（t=7.176,P<0.001）组胚胎造血干细胞数量减少,受精后48h 10mg/L 2,4-D组胚胎的造血干细胞标记基因cmyb(t=28.98,P<0.001)和原始红系祖细胞标记性基因gata1(t=13.60,P<0.001)表达量明显降低。结论 2,4-D可能通过影响cmyb基因的表达导致斑马鱼胚胎造血干细胞发育毒性。     

天麻对大鼠下丘脑及肾上腺酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶的影响

目的:实验观察灌胃天麻水提取物对大鼠下丘脑和肾上腺组织酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺-β-羟化酶(DBH)遗传因子的表达影响,探讨天麻的镇静作用机制。方法:分别取不同剂量组(10、20、40、80 mg/kg灌胃)和不同时间组(灌胃后2、4、6、8 h)大鼠的下丘脑和肾上腺组织,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与相应对照组(生理盐水灌胃)比较TH及DBH遗传因子的表达。结果:3个剂量组(20、40、80 mg/kg)大鼠下丘脑组织的TH及DBH遗传因子的表达与对照组相比均明显降低(为P<0.05,P<0.01,P<0.01)。肾上腺组织的TH表达在4个剂量组(10、20、40、80 mg/kg)与对照组相比都明显降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01);DBH表达在3个剂量组(20、40、80 mg/kg)与对照组相比都明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。天麻提取物灌胃(40 mg/kg)4小时及6小时后,下丘脑及肾上腺组织的TH和DBH遗传因子的表达与对照组相比均明显降低(均为P<0.01)。结论:天麻可降低下丘脑和肾上腺组织的酪氨酸羟化酶及多巴胺-β-羟化酶的活性。     

电离辐射对小鼠胸腺中多巴胺β羟化酶及β_2受体mRNA表达的影响

目的 :探讨交感神经系统调节辐射所致免疫功能变化的分子机制。方法 :采用斑点印迹杂交检测 X射线全身照射后小鼠胸腺中 DβH m RNA及 β2 - ARm RNA表达的变化。结果 :无论75 m Gy还是 2 Gy X射线全身照射后 8、48和 72 h,小鼠胸腺中 DβH m RNA表达较对照组升高约5 0 %～ 60 % ,β2 - AR m RNA表达较对照组也有升高趋势。结论 :X射线全身照射可诱导 DβHm RNA及β2 - AR m RNA的表达 ,提示交感神经系统是通过直接和间接两种方式对免疫系统进行调节 ,并在辐射生物效应中起到不可忽视的调节作用。     

急性应激对大鼠行为学及蓝斑TH、DBH基因表达的影响

目的观察急性应激状态下大鼠行为学的改变及不同时间点蓝斑内酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺-β-羟化酶(DBH)的基因表达。方法将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和模型组,模型组又分为造模后1、3、6h组,每组6只。运用束缚和游泳的方法造模,观察其行为学的改变;并分别在造模后相应时间点取出蓝斑,用RT-PCR法检测蓝斑TH、DBH的表达。结果模型组造模前后比较,1、6h组的穿越格数和直立次数明显下降(P<0.05),3h组的穿越格数、直立次数和理毛次数均明显降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01);与对照组大鼠相比,造模后1h组的穿越格数减少(P<0.05),1、3h组的直立次数明显降低(P<0.01,P<0.05),1、3、6h组的理毛次数降低明显且差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组蓝斑TH和DBH表达水平较对照组升高,其中3h组表达最高(P<0.05),1、6h组差异均无统计学意义(P>0.05),TH和DBH两者的表达趋势相似。结论急性应激使大鼠的行为能力降低,蓝斑去甲肾上腺素能神经元中TH、DBH表达增高,使去甲肾上腺素合成增多,而去甲肾上腺素可以显著影响大鼠的情绪行为,在应激过程中起重要作用;TH、DBH表达的增高可能参与了急性应激所致的行为异常。     

甲状腺机能亢进症患者血浆多巴胺-β-羟化酶(DBH)活性降低

本文观察到甲亢(Gravcs病)病人未治疗组血浆DBH活性低于正常人组(P<0.05); 而甲亢缓解组DBH活性又恢复正常水平,与未治疗组相比,差异有显著性(P<0.05)。提示甲亢病人交感神经亢进症状群的表现可能系甲状腺激素和多巴胺共同作用所引起。     

乐果对大鼠纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶活性的影响

 目的 观察乐果染毒对大鼠大脑纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶(dopamine-β hydroxylases,DβH) 活性变化的影响,对乐果中毒机制作进一步的探讨。方法 56只雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水,n=8)和乐果染毒低(38.9 mg/kg,n=8)、中(83.7 mg/kg,n=8)和高(180 mg/kg,n=32)3个剂量组,腹腔一次注射染毒。高剂量组大鼠分别在给药后0.5、2、8、24 h断头处死取血制备血清待测,并分离脑组织纹状体,生理盐水匀浆待测。其他组动物在给药后2 h断头处死,同样方式取样供分析。利用DβH将酪胺代谢为真蛸胺原理检测DβH活性。另取正常大鼠血清和纹状体匀浆,体外乐果染毒,观察其对DβH抑制状况。结果 给予不同剂量乐果对大鼠纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,存在剂量 效应关系(r=-0.996 7, P<0.05)。乐果高剂量(180 mg/kg)染毒后大鼠大脑纹状体和血清中DβH活性与对照组相比,在不同时程观察点差异均有统计学意义(P<0.05),随时程增加抑制也加深,24 h内时程效应关系(P<0.05)明确。体外乐果对纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,有剂量 效应关系(r=-0.891 2, P<0.05),但在高浓度有饱和现象。结论 大鼠大脑纹状体和血清中DβH水平有随染毒剂量和时程的增加而抑制加深的趋势,存在剂量效应和时程效应关系。     

红花黄色素对幼鼠缺氧-复氧损伤的保护作用

目的：观察幼鼠缺氧-复氧后脑水肿和脂质过氧化作用的变化及红花黄色素对其影响和意义。方法：采用SD幼鼠缺氧-复氧模型，于缺氧前30min腹腔注射红花黄色素(7g生药／kg体重)。幼鼠窒息缺氧40min后，再复氧24h、48h，用干湿质量法测定脑组织含水量。以硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量，用黄瞟呤氧化酶法测超氧化物歧化酶(SOD)活性。观察红花黄色素对缺氧-复氧24h、48h时脑组织含水量、MDA及SOD活性的影响。结果：缺氧-复氧48h时脑组织含水量、MDA含量明显增加，而SOD活性下降，红花黄色素能减轻脑组织水肿程度，抑制MDA生成，增强SOD活性。结论：红花黄色素通过减少脂质过氧化作用对缺氧-复氧脑损伤有保护作用。     

注意缺陷多动障碍与多巴胺β羟化酶基因多态性的关系

目的:探讨注意力缺陷多动障碍(ADHD)的不同亚型与多巴胺β-羟化酶基因(DBH)5′侧翼区-1021C →T多态的关系.方法:以DSM-Ⅳ诊断标准为依据,选择292个ADHD汉族核心家系作为研究对象,采用以家系为基础的遗传统计学方法研究DBH-1021C →T多态和ADHD各亚型之间的关系,并按照性别进行了分组比较.结果:基于单体型的单体型相对危险度(HHRR)结果显示DBH-1021C →T多态与ADHD-I(P=0.067)和ADHD-C(P= 0.076)不存在传递不平衡,但有传递不平衡趋势.在男孩核心家系中,DBH-1021C →T多态与ADHD-C存在传递不平衡(P=0.04),T等位基因的RR=2.011(P=0.02).结论:DBH基因与ADHD-I、ADHD-C存在关联趋势,与男孩ADHD-C相关联.T等位基因为其危险因素.     

转录因子AP-2α对脑外伤后蓝斑神经元TH表达的影响

目的 探讨转录因子激动蛋白-2α(activator protein 2α, AP-2α)对脑外伤后蓝斑去甲肾上腺素能神经元中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)表达的影响.方法 将90只Wistar大鼠分为对照组和脑外伤组,脑外伤组又分为外伤后1、3、6、24、72 h共5个组(n=15).用Feeney氏法制作机械性脑外伤大鼠模型,分别于脑外伤后各相应时间点取出脑干,对蓝斑(locus ceruleus, LC)所在部位作冷冻切片,用免疫荧光双标检测TH和AP-2的表达,观察二者在外伤后各相应时间点LC神经元中的表达变化.结果 在脑外伤后各时段,LC神经元的TH和AP-2α 阳性细胞数量和荧光强度值均比对照组明显增加(P《0.05),3 h达到高峰,随后逐渐降低,但72 h仍然高于对照组;而且TH和AP-2α的表达变化趋势基本一致,在同一神经元可以共表达.结论 机械性脑外伤使LC去甲肾上腺素能神经元中TH表达增加,使去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)合成增多,NE在外伤应激过程中起着重要作用;AP-2α参与了TH的表达调控,AP-2α上调可能是导致了TH表达增加的重要原因.     

抑郁模型大鼠蓝斑酪氨酸羟化酶表达研究

目的采用慢性应激复制抑郁大鼠模型,观测抑郁模型大鼠蓝斑酪氨酸羟化酶的表达,探讨抑郁症的发病机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组,运用慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型,以免疫组化方法研究抑郁模型大鼠海马蓝斑酪氨酸羟化酶的表达。结果与正常大鼠比较,模型组蓝斑酪氨酸羟化酶的表达下调,其平均灰度值分别为(62.16±2.43)和(89.00±1.83)(P<0.05)。结论抑郁模型大鼠蓝斑酪氨酸羟化酶的表达较正常大鼠显著减少。     

大鼠蓝斑酪氨酸羟化酶样神经元至背海马投射观察

目的 :观察大鼠蓝斑至背海马投射纤维的递质性质。方法 :用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行追踪法和免疫组织化学相结合的双重标记技术研究蓝斑TH样神经元至背海马投射。结果 :在双侧蓝斑内可见到HRP标记细胞、TH阳性反应细胞和TH HRP双标细胞 ,同侧明显多于对侧。结论 :背海马接受双侧蓝斑纤维的投射 ,并呈同侧优势     

人胎蓝斑生长抑素神经元免疫组化研究

目的 :探讨人胎蓝斑生长抑素 (SOM)免疫反应神经元的胚胎发育 ,为蓝斑脊髓移植挑选适宜胎龄提供形态学基础。方法 :用免疫组织化学法系统地观察人胎蓝斑生长抑素免疫反应神经元的发育。结果 :①蓝斑SOM神经元在胎龄 4mon已经出现。②蓝斑SOM神经元随胎龄增长逐渐增多 ,以 5mon时增加显著。③SOM神经元主要分布在蓝斑的背侧部。④SOM神经元开始出现时呈圆形或卵圆形 ,5mon～ 6mon时呈锥形和梭形 ,7mon～ 8mon时以梭形细胞为主。结论 :人胎蓝斑移植以 4mon胎龄作移植供体较适宜。     

大鼠蓝斑内微量注射加压素对心血管活动的影响及其机制

[目的 ]探讨单纯兴奋蓝斑内血管升压素受体对心血管活动的影响及其机制 .[方法 ]将不同剂量的加压素注入到麻醉大鼠蓝斑内 ,观察血压、心率和肾交感神经放电活动的变化 .[结果 ]往蓝斑内微量注射血管升压素引起血压升高、心率加快和肾交感神经放电活动增强 ,其反应呈剂量依赖性 .[结论 ]加压素参与蓝斑对心血管活动的调节 ,这与外周交感神经紧张性增加有关     

慢性应激肝郁模型大鼠蓝斑CRF、c-fos的表达及逍遥散的干预作用

目的观察慢性应激状态下大鼠一般状况,血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)浓度,蓝斑(LC)中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、即刻早期基因c-fos的表达,以及逍遥散对其的干预效应。方法将18只SD健康雄性大鼠随机分为正常对照、模型、逍遥散治疗组,每组6只。采用束缚的方法造模,观察大鼠行为、饮食、排便的变化;造模21d后取出蓝斑,用ELISA法检测血清中CRH浓度,Real-timePCR检测蓝斑中CRFmRNA和c-fosmRNA的表达。结果模型组大鼠行为、排便、饮食出现明显异常;与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH浓度升高,蓝斑中CRFmRNA和c-fosmRNA表达均上调(P<0.01);与模型组比较,逍遥散组大鼠血清CRH浓度下降,蓝斑中CRFmRNA和c-fosmRNA表达下调(P<0.01);逍遥散组较对照组CRH浓度升高、CRFmRNA和c-fosmRNA表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论神经递质CRF介导了慢性束缚应激中LC的激活,转录因子c-fos亦参与了其调控,而逍遥散则可以有效地进行干预,下调其过表达。     

蓝斑注射升压素受体1阻断剂OPC-21268对刺激麻醉大鼠室旁核所致心血管效应的影响

［目的］探讨蓝斑内升压素受体１是否参与室旁核对心血管活动的调节过程．［方法］动物为 Ｗｉｓｔａｒ系雄性大鼠,用乌拉坦和氯醛糖行腹腔麻醉,在观察室旁核微量注射Ｌ－谷氨酸对血压和心率的影 响的基础上,进一步观察了蓝斑内预注升压素受体１阻断剂ＯＰＣ－２１２６８后,室旁核内微量注射Ｌ－谷氨 酸对血压和心率的影响． ［结果］室旁核微量注射 Ｌ－谷氨酸引起血压下降（３．２６＋ ０．２２）ｋＰａ,心率减慢 （２１．６９±２．２３）次／ｍｉｎ;蓝斑内预注升压素受体１阻断剂后,室旁核内注射Ｌ-谷酸引起血压下降（０,９８ ± ０． ３２）ｋＰａ,心率减慢（２．８０± １．２９）次 ／ ｍｉｎ． ［结论］ Ｌ－谷氨酸兴奋室旁核所致血压下降和心率减慢的 效应在蓝斑内预注升压素受体１阻断剂后显著减弱,提示蓝斑内升压素受体１参与室旁核调节心血管 活动的过程     

育亨宾对应激大鼠蓝斑核去甲肾上腺素释放的影响

目的 在体电刺激蓝斑核,探讨抑郁样行为模型大鼠下丘脑内的去甲肾上腺素（NE）释放调控机制.方法 应用慢性不可预见性应激刺激结合孤养建立抑郁样行为大鼠模型,通过行为学检测观察造模是否成功.在体电刺激两组大鼠蓝斑核,应用碳纤维电极测量技术记录下丘脑内NE的释放量,分析两组大鼠NE释放信号的峰值、达峰时间和半衰期三个指标.结果 行为学检测表明模型组大鼠的体质量[（263.9±16.4）g]、旷场实验得分[（19.4±7.9）分]和糖水偏爱百分比[（44.3±10.8）％]低于对照组[（314.3±24.3）g,（53.3±19.0）分,（60.6±13.3）％]（P＜0.01）.电刺激蓝斑核,在下丘脑通过微碳纤电极检测NE释放,模型组大鼠NE释放的峰值[（176.9±50.4） pA]比对照组大鼠减少[（361.6±88.6） pA] （P＜0.01）,达峰时间缩短（P＜0.05）;在腹腔注射α2受体拮抗剂育亨宾（3 mg/kg）后,模型组大鼠NE释放的峰值和达峰时间均明显增大,差异有统计学意义.对照组大鼠用育亨宾（3 mg/kg）后NE信号的峰值和达峰时间虽然有所增加,但差异无统计学意义.结论 慢性不可预见性应激导致的抑郁样行为模型大鼠的蓝斑核投射到下丘脑的神经末梢释放的NE减少;育亨宾可以通过抑制突触前α2受体增加模型组大鼠蓝斑核投射至下丘脑NE的释放.结果提示蓝斑投射到下丘脑的去甲肾上腺素能通路可能参与到抑郁症的发生.     

诱导型一氧化氮合酶和胱硫醚-β-合酶在新生大鼠缺氧缺血脑组织中的表达

目的研究缺氧缺血(HI)对新生大鼠脑白质细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及胱硫醚-β-合酶(CBS)表达的影响及二者的相关性,以及它们在新生大鼠脑白质损伤(WMD)发病机制中的作用。方法将80只3日龄大鼠随机分为实验组和对照组,每组40只。建立新生大鼠WMD模型,分别于HI后12、24、48、72 h及7 d处死,取大鼠脑组织应用免疫组织化学法检测iNOS及CBS的表达水平。结果实验组大鼠脑白质和胼胝体中iNOS于HI后12 h表达开始增加,72 h达高峰,7 d仍有表达;CBS于HI后12 h表达开始增加,24 h达高峰,7 d仍有表达。实验组大鼠HI后12、24、48、72 h及7 d iNOS和CBS在胼胝体和脑室周围白质的表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。iNOS和CBS在大鼠脑室周围白质和胼胝体的表达呈正相关(rs=0.66、0.68,P<0.05)。结论 HI可导致新生大鼠脑白质iNOS及CBS表达水平增高,iNOS和CBS可能参与新生大鼠WMD的病理生理过程。     

艾灸对抑郁症模型大鼠色氨酸羟化酶2基因表达与单胺氧化酶活性的影响

目的 观察艾灸对抑郁症模型大鼠中缝核色氨酸羟化酶2基因表达( TPH2mRNA)以及血清和大脑皮质单胺氧化酶(MAO)活性的影响,探讨艾灸治疗抑郁症的作用机制.方法 雌性SD大鼠,采用随机数字表将大鼠分为正常组(6只)、模型组(7只)和艾灸组(7只),孤养和慢性不可预见性温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型.利用RT-PCR技术检测大鼠中缝核TPH2 mRNA的表达;比色法测试大鼠血清和大脑皮质MAO活力.结果 艾灸组大鼠中缝核TPH2 mRNA的相对表达量高于模型组,差异有统计学意义[相对密度值:(0.3759±0.0272),(0.2573±0.0581),P＜0.05];血清和大脑皮质MAO活力[分别为(1.919±1.243) U/ml,(1292.048±90.072) U/mg protein)]均低于模型组[分别为(4.117±2.727)U/ml,( 1441.345±117.050) U/mg protein].结论 艾灸可能通过提高中缝核TPH2的表达,降低MAO活力达到改善抑郁症的效果.     

早产大鼠宫内感染肺损伤时支气管肺泡灌洗液及肺组织中脂肪型脂肪酸结合蛋白的表达

目的:观察宫内感染肺损伤时脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)在早产大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中的表达,探讨其与新型支气管肺发育不良(BPD)发病的关系。方法:定期受孕的SD大鼠分为LPS组和对照组,于孕15 d羊膜腔内注射LPS或生理盐水。2组动物均于出生后第1天(P1)、第4天(P4)和第7天(P7)各取8只,应用ELISA方法检测BALF中FABP4的含量,采用免疫组化法和RT-PCR技术检测肺组织中FABP4蛋白及mRNA的表达水平。结果:FABP4主要在肺泡巨噬细胞、血管内皮细胞及少量支气管上皮细胞表达。LPS组早产大鼠BALF中FABP4含量、肺组织中FABP4蛋白及mRNA的相对表达量较对照组均升高,且与时间存在交互作用(P均<0.05)。结论:宫内感染肺损伤时FABP4表达升高,可能是引起肺微血管病理性重塑及肺泡化进程受阻,进而导致新型BPD发生发展的重要因素。