急性髓系白血病中乳腺癌耐药蛋白基因表达与临床意义

目的  研究急性髓细胞白血病（AML）患者乳腺癌耐药蛋白（BCRP）基因的表达以及在预后判断中的意义。方法  构建实时定量PCR检测BCRP基因表达的技术，定量检测20例初治组AML患者、20例完全缓解组AML患者及20例难治复发组AML患者BCRP基因的表达水平，分析其在AML患者和非血液系统恶性肿瘤患者中的差异及与临床疗效的关系。结果  急性髓系白血病患者中BCRP的表达高于对照组（P <0.01），初治组、完全缓解组、难治复发组的BCRP表达均存在差异（P <0.01），其中难治复发组表达最高，初治组次之，完全缓解组最低。结论  BCRP基因在急性髓系白血病患者中表达增高，BCRP的表达水平可能是疾病进展的重要标志，可能是AML的独立危险因素。

     

乳腺癌耐药蛋白在急性髓性白血病中的表达和临床意义

目的探讨急性髓性白血病（AML）患者乳腺癌耐药蛋白（BCRP）的表达与临床耐药的关系。方法应用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）,以MCF7乳腺癌细胞株、HL60白血病细胞株分别作为BCRP及MDR1 mRNA表达的参照标准,以β肌动蛋白（-βactin）为内对照,检测了54例AML患者BCRP mRNA的表达,其中8例患者测定MDR1 mRNA的表达,初步探讨BCRP表达在AML中的临床意义。结果AML中BCRP mRNA表达水平差异较大,BCRP表达由低到高依次为对照组、完全缓解组、初治敏感组和临床耐药组。其中临床耐药组BCRP阳性率显著高于对照组及完全缓解组,差异有统计学意义（P〈0.01及P〈0.05）,BCRP表达与MDR1表达无相关性（P〉0.05）。结论BCRP在AML中表达水平差异较大,与MDR1的表达无关,可能是AML患者临床耐药的一个独立的重要原因,是预后的不利因素。     

Nanog高表达可能是急性髓系白血病预后较好的生物标志

目的: 研究Nanog基因表达水平与急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者预后的关系。方法: 采用实时荧光PCR检测31例健康骨髓样本、146例初诊AML患者骨髓样本及其中11例经治疗后达到完全缓解的患者随访标本的Nanog mRNA表达水平。采用受试者工作特征曲线（ROC）区分AML患者与对照者。通过生存曲线分析Nanog mRNA表达水平与生存期的关联。结果： AML患者Nanog mRNA的表达显著高于健康组(P=0.01)。在非低危组患者中,Nanog高表达的患者生存时间明显长于Nanog mRNA低表达组(P＝0.031）。11例完全缓解患者的Nanog mRNA的表达量明显高于治疗前（P＝0.002）。多变量分析显示,Nanog低表达在AML患者中是一个独立的危险因素。 结论： 高表达的Nanog基因是急性髓系白血病患者较好预后的生物学标志。     

急性白血病患者骨髓组织survivin表达的研究

目的 探讨急性白血病(AL)患者骨髓组织survivin基因表达及其与疗效的关系.方法 采用RT-PCR检测57例急性白血病患者治疗前后骨髓中survivin基因表达水平,并与正常对照组进行比较.结果 初发白血病患者survivin的表达高于正常对照(P＜0.05),survivin高表达的急性非淋巴细胞白血病缓解率低,急性淋巴细胞白血病的缓解率与survivin表达无关.结论 survivin在白血病中均高表达,survivin可作为判断急性白血病的疗效和预后指标.     

CDX2基因在成人急性髓细胞白血病中的表达及临床意义

目的：研究尾型同源盒基因2（CDX2）在急性髓细胞白血病（AML）患者中的表达及临床意义。方法通过 RT‐PCR方法检测114例初发AML患者及56例诱导化疗后患者骨髓和（或）外周静脉血单个核细胞CDX2基因表达,19例随访患者每3个月定期检测CDX2基因表达。8名健康者外周静脉血和5名缺铁性贫血患者骨髓作为对照。结果114例A M L患者和13名对照的骨髓和（或）外周血单个核细胞均检测到CDX2基因表达。以第一个四分位数为界划分低表达组和高表达组,对照组CDX2基因表达水平均在低表达组,114例A M L患者高表达组90例（78．9％）,对照组与A M L患者CDX2基因表达差异有统计学意义（ P＜0．01）。初发患者骨髓和外周静脉血CDX2基因表达呈正相关（ r＝0．656,P＜0．01）。CDX2高低表达组诱导化疗完全缓解（CR）率差异无统计学意义（P＞0．05）。本组 AML 病例 CDX2高表达78．9％。CR患者 CDX2表达量为化疗前的10．3％～86．2％,且随着疗程增加逐步降低,复发时显著升高。随访6个月以上病例19例,两组早期复发率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 CDX2表达量变化反映患者体内白血病细胞负荷,持续高表达可能是预后不良指标之一,可作为染色体核型正常AML微小残留病监测指标。     

儿童急性白血病血管内皮生长因子的表达及其意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在儿童急性白血病患者的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法,检测41例(自愿)急性白血病患者治疗前后、缓解前后骨髓细胞VEGF的表达。选择同期住院的非白血病患者15例正常骨髓作为对照组。结果VEGF在急性白血病患者中表达明显高于对照组(P<0.01),在急性白血病患者中阳性表达状况与骨髓中原始细胞数呈正相关(r=0.536);治疗后19~35d急性淋巴细胞白血病(ALL)组、急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组VEGF表达水平明显下降(P均<0.01),仍高于正常对照组(P均<0.01);未缓解组患者化疗前表达显著高于缓解组及对照组(P均<0.05),未缓解组患者化疗后VEGF表达下降,但较化疗前差异无统计学意义(P>0.05),显著高于化疗后缓解组患者及对照组(P均<0.01)。结论VEGF在儿童急性白血病患者中存在高表达,一定程度上可能反映体内白血病细胞的总负荷量、疾病状态和预后;化疗未缓解组持续高表达,化疗缓解患者表达明显下降,血清VEGF水平可以作为诊断和预测白血病发生、是否难治的有效指标。     

DNA 甲基化检测及其在急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征中的临床应用分析

目的探讨DNA甲基化检测及其在急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)中的临床应用。方法选取2016年5月~2017年5月我院收治的急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者40例为研究组,选取同期健康体检人员40例为对照组,比较两组研究对象DNA甲基化检测结果。结果研究组患者PAX6甲基化表达明显高于对照组健康人群(P0.05),同时高危患者甲基化水平明显高于低危患者(P0.05);研究组患者GNDF甲基化表达明显高于对照组健康人群(P0.05),同时高危患者甲基化水平明显高于低危患者(P0.05);研究组患者TJP1甲基化表达明显高于对照组健康人群(P0.05),同时高危患者甲基化水平明显高于低危患者(P0.05)。结论急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者的PAX6、GNDF、TJP1表达均呈现出高甲基化状态,且表达水平与患者病情存在正相关,可以作为临床诊断及判断患者预后的依据。     

ICAM-3在急性白血病中的表达及临床意义

目的探讨细胞间粘附分子-3(inter cellular adhesion molecule-3，ICAM-3)在急性白血病（acute leukemia,AL）中的表达及其在临床疗效、髓外浸润中的意义。方法采用骨髓涂片免疫组织化学法检测了33例急性非淋巴细胞白血病（acute nonlymphoblstic leukemia，ANLL）、21例急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）患者治疗前后及10例正常对照骨髓单个核细胞ICAM 3的表达率。结果化疗前AL组ICAM-3表达率均显著高于正常对照组，ANLL组与ALL组比较ICAM-3表达率差异无统计学意义(P＞0.05)，且T-ALL组与B-ALL组ICAM-3表达率差异无统计学意义(P＞0.05)；ICAM 3的表达与患者发病年龄、性别、就诊时血红蛋白（Hb）、血小板（BPC）等因素无关，与骨髓原始细胞比例呈正相关(r=0.467,P＜0.01)；外周血白细胞（WBC）≥100×109患者ICAM 3的表达率比WBC＜100×109组高(P＜0.05)；所有AL患者经过一个疗程化疗后ANLL、ALL未缓解组的ICAM-3表达率明显高于缓解组(P＜0.01)，但缓解组与对照组之间ICAM-3表达率差异无统计学意义(P＞0.05)；组织浸润组骨髓AL细胞ICAM-3表达率高于无组织浸润组(P＜0.01)。结论ICAM-3在AL中的表达明显高于正常对照组，其表达水平的高低可作为AL观察临床疗效及判断预后的指标之一。同时，AL的组织浸润机制可能与细胞间粘附分子表达升高有关。     

急性白血病病人XIAP和Caspase-3的表达及其临床意义

目的：通过对急性白血病患者及健康成人骨髓细胞中X连锁凋亡抑制蛋白（x chromosome linked inhibitor of apoptosisprotein,XIAP）、半胱天冬蛋白酶-3（Caspase-3）表达的检测,探讨XIAP及Caspase-3在急性白血病（AL）发生、发展过程中的作用以及二者相关性,为临床诊疗及预后提供有价值的参照指标。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测50例AL患者及30例健康成人骨髓细胞中XIAP及caspase-3的表达情况。数据结果采用SPSS17.0统计软件进行数据分析,计量资料以均数±标准差（x±s）表示,组间比较采用独立样本t检验。Caspase-3与XIAP的相关性采用Spearman等级相关进行相关分析,P值〈0.05视为有统计学意义。结果：①急性白血病患者骨髓细胞中XIAP的表达水平明显高于正常健康成人骨髓细胞中XIAP表达水平（P〈0.05）;急性白血病患者骨髓细胞中Caspase-3的表达水平明显低于正常健康成人骨髓细胞中Caspase-3表达水平（P〈0.05）,二者的表达呈负相关（r=-0.837,P〈0.05）;②急性白血病初治患者骨髓细胞中XIAP的表达水平较复发组患者骨髓细胞中XIAP的表达明显减低（P〈0.05）。③急性白血病初治患者骨的表达水平明显高于复发组患者骨髓细胞中Caspase-3表达水平（P〈0.05）。④在急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病患者中XIAP及Caspase-3的表达水平无明显差异（P〉0.05）。⑤初治急性白血病患者XIAP高表达组的完全缓解率低于低表达组,Caspase-3高表达组的完全缓解率高于低表达组（P〈0.05）。结论：AL患者XIAP的表达高于对照组,Caspase-3的表达低于对照组,两者呈负相关,提示XIAP高水平表达与Caspase-3低水平表达可能与AL的发生发展密切相关。XIAP高表达及Caspase-3低表达的病人完全缓解率低,预后不良,提示这可能是导致白血病细胞对化疗药物不敏感的原因之一,但XIAP及Caspase-3在AL发生发展中的具体机制还有待于进一步研究。     

HIF-1α在成人急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞中的表达及意义

目的探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在成人急性淋巴细胞白血病（ALL）患者骨髓单个核细胞中的表达及意义。方法选取73 例成人初诊ALL患者,同期留取非白血病骨髓30 份作为对照组,采集并分离骨髓单个核细胞,利用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测骨髓单个核细胞中HIF-1α 基因表达,利用Kaplan-Meier生存分析分析HIF-1α 基因表达对患者无复发生存时间的影响。结果成人初诊ALL患者骨髓单个核细胞中HIF-1α mRNA 相对表达量（1.86±0.18）,高于对照组（1.17±0.09）,差异有统计学意义（t =25.020, p=0.000）;B 系-ALL（B-ALL）和T 系-ALL（T-ALL）患者骨髓单个核细胞中HIF-1α mRNA 相对表达量均高于对照组（p <0.05）,而B-ALL和T-ALL患者之间差异无统计学意义（t =0.807,p =0.211）;费城染色体（Ph）阳性和Ph 阴性患者HIF-1α mRNA 相对表达量均高于对照组（p <0.05）,而Ph 阳性和Ph 阴性患者之间差异无统计学意义（t =1.314,p =0.096）;B-ALL和T-ALL成人初诊ALL患者骨髓单个核细胞中HIF-1α 信使核糖核酸（mRNA）相对表达量均与性别、年龄、白细胞水平和危险度分级无关（p >0.05）;以HIF-1α mRNA 相对表达量的P25 为截点,将患者分为低表达组（n =18）和高表达组（n =55）,低表达组随访中复发4 例,复发率22.2%,高表达组随访中复发20 例,复发率36.4%,Kaplan-Meier生存分析显示,低表达组无复发生存时间11.2 个月,长于高表达组的8.6 个月,但差异无统计学意义（χ2=1.771, p=0.183）。结论HIF-1α在成人初诊ALL患者骨髓单个核细胞中呈高表达,可能与ALL患者化疗耐药及复发相关。     

儿童急性白血病survivin基因表达及临床意义

目的探讨儿童急性白血病（AL）survivin基因的表达及其临床意义。方法用逆转录多聚酶链式反应技术（RT—PCR），对42例AL患儿和13例完全缓解AL（AL—CR）患儿及15例非恶性疾病患儿骨髓进行survivin基因表达的检测。结果Survivin基因的表达在AL组明显高于对照组和完全缓解组（P〈0．01），复发组高于初发组（P〈0.01）；survivin基因在AL的高危组和标危组中的表达有显著性差异（P〈0．01）；化疗后达完全缓解的患者survivin表达水平与治疗前及治疗后均明显低于未能缓解者（P均〈0．05）。结论儿童AL的发生发展可能与survivin基因的过度表达密切相关，可作为化疗疗效的观察指标；survivin高表达者易复发，可作为估计预后的指标之一。     

儿童急性白血病骨髓细胞PCNA和Bcl-2基因表达及其意义

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)及原癌基因Bcl- 2在儿童急性白血病 (AL)骨髓细胞的表达及临床意义。方法　应用S -P免疫组化法检测 41例儿童AL骨髓标本PC NA和Bcl- 2。结果　急性淋巴细胞白血病 (ALL)组及急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)组PC NA表达率与对照组比较均有显著差异 (P <0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,ALL标危组显著高于高危组 (P <0 .0 5 ) ;ALL及ANLL组的Bcl- 2表达率高于对照组 (P <0 .0 1) ,标危组显著低于高危组 (P <0 .0 5 )。PCNA高表达者缓解率显著高于低表达者 (P <0 .0 1) ;Bcl- 2阳性表达者 3年无病生存率显著低于阴性表达者 (P <0 .0 1)。结论　PCNA、Bcl- 2基因在儿童AL中存在表达异常 ,二者均参与发病过程 ,但其作用机制可能是独立的 ,联合检测有助于判断预后。     

定量检测WT-1基因在急性白血病病人中的表达及临床意义

目的研究Wilms基因（WT-1）在急性髓系白血病（AML）病人骨髓细胞中的表达,并分析其表达与临床疗效的关系。方法收集AML病人66例,其中急性早幼粒细胞白血病（APL）组8例,急性非淋巴细胞白血病（ANLL,除APL）组58例。对照组20名为健康体检者。采用实时定量PCR法检测骨髓细胞中WT-1表达,并以WT-1的中位表达水平作为界值,将初诊AML病人（APL除外）分为WT-1高表达组和低表达组,并分析其表达与病人性别、年龄、骨髓原幼细胞比例、外周血白细胞数、血红蛋白、血小板数、乳酸脱氢酶（LDH）、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、完全缓解（CR）率及复发率的关系,以揭示WT-1基因表达水平与AML预后的关系。结果病例组与对照组相比WT-1表达率差异有统计学意义（χ2=29.34,P < 0.01）。各组WT-1表达水平相比差异有统计学意义（F=7.206,P < 0.05）,与对照组相比,APL病人和ANLL中M1的病人的WT-1表达水平均较高（P < 0.05）。ANLL病人各亚型间相比差异有统计学意义（F=4.981,P < 0.05）,与M1组病人相比,M2组和M3组病人的WT-1表达水平相对较低（P < 0.05）;与WT-1低表达组相比,WT-1高表达组中骨髓原幼细胞比例、外周血白细胞数显著升高（P < 0.05）;而性别、年龄、血红蛋白、血小板数、LDH、CRP、PCT差异无统计学意义（P>0.05）,2组病人预后水平差异无统计学意义（P>0.05）;AML病人WT-1高表达组CR率低于低表达组（P < 0.05）。结论WT-1在AML病人骨髓细胞中表达水平可作为临床评估疾病的预后、疗效的指标。     

急性白血病患者骨髓细胞中TSLC1的表达及其临床意义

目的:观察肺癌肿瘤抑制物1(tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1)在急性白血病(acute leukemia,AL)患者骨髓细胞中的表达情况,探讨其在AL的早期诊断、预后评估及指导治疗中的意义。方法:应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测39例AL患者及10例对照组骨髓细胞中TSLC1 mRNA的表达情况。结果:对照组TSLC1表达阳性率为80.00%,AL组为12.82%,两组差异有统计学意义(P<0.01)。急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)中M1、M2及M5型与对照组TSLC1表达差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01);M3、M4型与对照组TSLC1表达差异均无统计学意义(P>0.05),各亚型间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:AL中TSLC1失表达是一个频发事件,可能与AL的发生、发展有关,对AL的早期诊断、预后评估及指导治疗具有重要意义。     

Survivin基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义

目的:检测凋亡抑制基因Survivin在急性白血病(AL)患者骨髓细胞中的表达变化,探讨其与AL的发生、发展及预后的关系。方法:选取40例初发急性白血病患者为实验组和8例正常的骨髓细胞作对照组,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测两组骨髓细胞SurvivinmRNA的表达情况以及采用免疫组化SP法检测Survivin蛋白的表达情况,分析急性白血病阳性表达和阴性表达间完全缓解率(CR)的差别,采用卡方检验进行统计学分析。结果:40例AL病人骨髓细胞SurvivinmRNA阳性表达率为67.5%,显著高于正常对照组12.5%(P<0.05);Survivin蛋白在急性白血病骨髓细胞中的阳性表达率65.0%(26/40)明显高于正常对照组12.5%(1/8)(P<0.05),骨髓细胞Survivin表达阴性者化疗后骨髓完全缓解率(CR)为70.0%,明显高于阳性表达者的CR为30.0%(P<0.05)。结论:(1)Survivin的过度表达与急性白血病的发生发展有关,其阳性表达可能显示急性白血病的预后不良;(2)Survivin基因表达在白血病细胞的增殖分化和(或)抗凋亡过程中发挥了重要作用,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一,Survivin基因可作为靶向白血病治疗的一个潜在靶点。     

MDR1、BCRP、CXCR4在耐药白血病中的表达研究

目的本研究选择与白血病耐药密切相关的MDR1、BCRP及CXCR4为研究对象,在临床病例中进行检测,为指导治疗和判断预后提供临床依据。方法采用荧光定量RT-PCR方法检测白血病化疗耐药、白血病化疗敏感患者及正常人MDR1、BCRP及CXCR4的表达。结果 MDR1、BCRP、CXCR4基因的表达量在耐药组、敏感组及正常对照组间有显著性差异,P〈0.05;CXCR4与MDR1基因的表达量有显著正相关性,R值为0.366;BCRP基因的表达量在ALL患者中高于AML患者,P〈0.05;MDR1基因的表达量在老年组高于儿童少年组,P〈0.05。结论联合检测MDR1、BCRP、CXCR4对于指导白血病治疗和判断预后具有重要意义。     

细胞周期蛋白A在成人急性白血病中的表达及意义

目的　探讨细胞周期蛋白A(cyclinA)在成人急性白血病 (AL)患者骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法　采用RT PCR法对 10 0例初治及复发的AL患者进行cyclinAmRNA水平的检测 ,对其阳性表达的PCR扩增产物进行DNA测序分析。对其中 75例AL患者 ,用流式细胞术检测cyclinA蛋白表达水平 ,10例正常人作为对照。 结果　 (1)AL患者cyclinA蛋白表达在细胞周期中的分布无异常 ,cyclinA蛋白及mRNA的阳性率 (分别为 6 6 7% ,5 9 0 % )和中位表达水平 (分别为18 5 % ,0 5 39± 0 4 90 )明显高于正常人 ,同一实验条件下未发现在正常人中有cyclinA蛋白及mRNA阳性表达 (P <0 0 1) ;经测序分析发现cyclinA阳性扩增片段序列与基因库中的目标序列完全一致 ;(2 )cyclinA蛋白及mRNA水平与S期、G2 /M期细胞所占的比例呈正相关 (P <0 0 1)。 (3)复发组急性淋巴细胞性白血病 (ALL)患者的cyclinA蛋白表达水平 (15 4 % )明显低于初治组(2 9 5 % ) ,差异有统计学意义 (t=14 4 18,P =0 0 2 2 )。 (4 )cyclinA蛋白或mRNA高表达患者的完全缓解率 (分别为 87 9%、85 7% )明显高于低表达患者 (分别为 38 2 %、5 3 3% ) (P <0 0 5 )。结论　cyclinA在AL患者中是一种增殖标志 ,是影响AL患者完全缓解率的因素 ,其高表达可能是AL患者     

CD173在急性白血病中的表达及临床意义

目的 探讨CD173在急性白血病中表达及其临床意义.方法 应用直接荧光标记法,经流式细胞术对我院血液内科2016年6~11月收治的42例急性白血病和15例对照组(非白血病患者)骨髓细胞进行CD173和CD34的检测.结果 对照组患者的骨髓单个核细胞均未见CD173阳性表达,42例急性白血病患者中阳性率为4.8%,但差异无统计学意义(P>0.05);CD173在对照组有核红细胞中的阳性率为53.3%,阳性细胞表达水平为(23.0±16.4)%,而急性白血病组有核红细胞的阳性率为50.0%,阳性细胞表达水平(21.3±13.0)%,差异均无统计学意义(P>0.05);对照组患者的骨髓单个核细胞未见CD34阳性表达,急性白血病组患者阳性率为61.9%,差异有显著统计学意义(P<0.01);26例CD34+急性白血病患者中2例表达CD173阳性,16例CD34-急性白血病患者中未见CD173阳性表达,差异无统计学意义(P>0.05).结论 CD173在急性白血病和非白血病中的表达无差异.     

BRD7基因在急性白血病细胞中的表达及SNP分析

目的:探讨BRD7基因在急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞(BMNCs)中的表达水平及单核苷酸多态性(SNP)分布.方法:采用半定量RT-PCR方法检测52例AL患者及30例非恶性血液病对照的BMNCs BRD7基因的表达水平,并应用单链构象多态性加直接测序法检测BRD7基因点突变或SNP,分析BRD7基因与AL的相关性.结果:在52例AL患者和30例对照组患者中均存在BRD7基因表达.急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者BRD7 mRNA的相对表达量均高于对照组(P＝0.001;P＝0.037).BRD7基因编码区(447～844 bp)存在3个cSNPs,即C657A,C495T和A737G,其中C495T和A737G偶联发生.C657A多态性的基因频率在AL组和对照中差异无统计学意义.两个偶联的SNPs等位基因频率及基因型频率在AL组和对照中差异存在统计学意义(P＜0.01);但在AL组中3种基因型之间BRD7 mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:BRD7基因在急性白血病患者细胞中表达上调.BRD7基因编码区(447～844 bp)2个偶联SNPs (C495T和A737G)与AL存在相关性,可能是AL的遗传易感因子之一.