M2型丙酮酸激酶非代谢功能在肿瘤治疗中的研究进展

丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK),作为糖酵解的关键酶之一,可以编码四个不同亚型的基因,其中M2型丙酮酸激酶(PKM2)主要表达在正常人类胚胎发育中,和组织修复、再生密切相关,随着研究的深入,PKM2在肿瘤组织中的作用受到越来越多的关注。PKM2除了代谢作用外,还可以通过PKM2抑制剂和激活剂变构调节四聚体和二聚体,二聚体状态的PKM2可以调节细胞核中的基因表达及细胞增殖。本文综述了PKM2表达调控,重点介绍了PKM2非代谢功能及在抗肿瘤治疗中的临床应用。     

M2型丙酮酸激酶在肿瘤代谢中的作用

M2型丙酮酸激酶（PKM2）是糖酵解途径的一个关键限速酶,在多种恶性肿瘤细胞中高表达.在肿瘤糖代谢通路中,PKM2可以通过在高活性的四聚体和低活性的二聚体之间相互转化,促进肿瘤的糖酵解和细胞增殖.肿瘤细胞通过多种方式调节PKM2的表达和酶活性如转录调节、变构调节和翻译后修饰调节.PKM2在肿瘤发生和肿瘤代谢中的重要作用使它有望成为肿瘤治疗的新靶点.     

m6A甲基化修饰在胃癌中的研究进展

N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m6A）甲基化修饰是真核细胞mRNA最常见的一种表观遗传修饰方式。m6A甲基化修饰通过调控修饰mRNA,广泛参与细胞内RNA的许多生物学行为,从而影响疾病进展与肿瘤的发生。m6A RNA修饰相关因子在胃癌（gastric cancer,GC）中的异常表达,引发 m6A甲基化修饰失调,影响GC的增殖、转移与侵袭、凋亡和耐药等生物学过程。因此,本文就m6A RNA甲基化修饰在GC发生发展中的作用以及化疗耐药予以综述。      

RNA m5C甲基化修饰在肿瘤中的研究进展

5-甲基胞嘧啶（5-methylcytosine,m5C）是RNA中重要的甲基化修饰之一,也是近年来的研究热点。随着甲基化测序技术的发展,在编码RNA及非编码RNA中均证实存在大量的m5C甲基化修饰。RNA m5C甲基化修饰受m5C甲基转移酶、去甲基化酶及m5C甲基化结合蛋白的调控。m5C甲基化修饰调节RNA的稳定性、转运、翻译和压力应激等,并参与调节肿瘤的发生发展、侵袭转移、肿瘤耐药等进程。本文对RNA m5C甲基化修饰的调控机制、功能以及在肿瘤中的研究进展进行综述,以期为肿瘤诊治研究提供新思路。      

RNA m5C甲基化的研究进展

RNA 5-甲基胞嘧啶（m5C）甲基化修饰是主要的RNA转录后修饰之一。这种修饰存在于几乎所有类型RNA中，受甲基转移酶、去甲基转移酶及结合蛋白的调控，具有调节核mRNA输出及RNA可变剪切、增加RNA稳定性、调节蛋白质翻译及RNA-蛋白质互相作用、维持RNA正常结构等作用。其水平异常与肿瘤、神经系统缺陷、心血管系统疾病和异常分化等疾病密切相关。为全面了解RNA m5C的研究现状，本文将从RNA m5C的分布特点、调控机制、生物学作用及其与疾病的关系等方面进行综述。     

基于生物信息学分析PKM2在肺腺癌中的表达及临床意义

目的：通过生物信息学方法分析M2型丙酮酸激酶（Pyruvate kinase M2, PKM2）在肺腺癌（lung adenocarcinoma,LUAD）中的表达及临床意义。方法：利用Oncomine和TCGA数据库荟萃分析PKM2 mRNA在LUAD组织和正常肺组织中的表达差异,验证HPA数据库中PKM2蛋白表达;分析该基因与LUAD患者生存的关系;LinkedOmics和Metascape平台做PKM2与LUAD临床病理特征及KEGG通路分析;String-DB网站构建PPI网络。结果：LUAD组织中PKM mRNA表达水平是正常肺组织的1.95倍（P<0.05）。免疫组化结果显示PKM2蛋白在LUAD组织中高表达。PKM2表达与LUAD的病理分级、Ｔ分期和Ｎ分期呈正相关（均P<0.05）,且高表达者总生存率低于低表达者（P<0.001,HR=2.56）。PKM2共表达基因主要与糖酵解、癌症中央碳代谢、HIF-1等信号通路有关。结论：PKM2在LUAD组织中高表达,且与LUAD患者不良预后相关,有望成为LUAD诊断和治疗的有效生物标志物。     

肿瘤免疫治疗新视角：RUNX的作用与意义

N7-甲基鸟苷（m7G）是表观遗传学调控过程中最常见的RNA 修饰之一,在mRNA、核糖体RNA（rRNA）、转运RNA （tRNA）、miRNA 等多种RNA分子的加工和代谢中起着重要作用,进而参与细胞增殖、分化、凋亡和迁移等多种功能。越来越多的证据表明,m7G甲基化修饰参与肿瘤的发生发展。异常的m7G甲基化修饰通过调控癌基因和抑制基因的表达促进或抑制多种肿瘤的进展,m7G甲基化修饰及其调控因子可能是肿瘤诊断和治疗的潜在靶点。本文就m7G甲基化修饰的最新研究进展、检测方法及其在肿瘤发生发展中作用的分子机制进行评述。     

RNA N7-甲基鸟苷甲基化修饰在肿瘤发生发展中的作用

N7-甲基鸟苷（m7G）是表观遗传学调控过程中最常见的RNA 修饰之一，在mRNA、核糖体RNA（rRNA）、转运RNA （tRNA）、miRNA 等多种RNA分子的加工和代谢中起着重要作用，进而参与细胞增殖、分化、凋亡和迁移等多种功能。越来越多的证据表明，m7G甲基化修饰参与肿瘤的发生发展。异常的m7G甲基化修饰通过调控癌基因和抑制基因的表达促进或抑制多种肿瘤的进展，m7G甲基化修饰及其调控因子可能是肿瘤诊断和治疗的潜在靶点。本文就m7G甲基化修饰的最新研究进展、检测方法及其在肿瘤发生发展中作用的分子机制进行评述。     

m6A RNA甲基化修饰因子在肝癌中作用的研究进展

m6A RNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰，这种转录后的RNA修饰是受甲基化酶、去甲基化酶和识别m6A修饰的蛋白质调控的动态和可逆的过程。m6A参与了真核生物RNA代谢的各个方面，包括mRNA前剪接、3' 端加工、核输出、翻译调节、mRNA衰变和非编码RNA(ncRNA)加工。已有较多的证据表明m6A因子的异常表达或功能异常与肝癌的发生和进展有关，但仍有部分m6A甲基化修饰因子在肝癌中的作用机制未明。本文就m6A甲基化修饰因子在肝癌中的作用进行了系统回顾，归纳了m6A因子在肝癌中的作用机制及其对预后的影响，总结了目前研究尚不充分的领域。该研究为开展下一阶段的m6A甲基化修饰在肝癌中的机制研究提供借鉴。     

膀胱癌中肿瘤坏死因子α表达的临床意义

目的 :探讨内源性肿瘤坏死因子α(TNFα)在膀胱癌发病机制中作用及其与生物学行为之间的关系。方法 :应用免疫组化方法检测 88例膀胱癌组织和 12例正常膀胱组织中TNFα的表达。结果 :正常膀胱组织中TNFα阳性率为 2 5 0 % ,显著低于膀胱癌组织的 6 1 5 %。膀胱癌组织中TNFα表达与肿瘤病理分级、分期和大小密切相关 ,但与肿瘤复发无显著意义。结论 :TNFα异常高表达参与膀胱癌发病过程 ,而且可以作为评估肿瘤侵袭性和恶性程度的指标     

M2型丙酮酸激酶的抗肿瘤作用研究进展

摘 要：糖酵解（Warburg效应）是肿瘤细胞的重要特征，其相比于线粒体氧化磷酸化来说更高效地产生能量及大量的中间产物用于生物合成，还可抑制活性氧的生成。M2型丙酮酸激酶（pyruvate kinase M2，PKM2）多以低活性的二聚体形式存在于肿瘤细胞等快速增殖细胞中，作为催化糖酵解最后一个步骤的限速酶，是肿瘤细胞Warburg效应的一个关键调节因子。PKM2在肿瘤细胞中也发挥着重要的非代谢作用。PKM2被诱导转移入细胞核后，通过磷酸化特定的核蛋白后激活诸多基因的转录，促进肿瘤的生长。基于这些研究成果，该文综述了PKM2在肿瘤生长中的作用，并对PKM2的抑制剂和激活剂的抗肿瘤疗效分别进行讨论，并预测PKM2可能成为癌症治疗的潜在靶点。     

ceRNA调控miR-145-5p介导肿瘤发生发展的研究进展

miR-145-5p是一种微小RNA分子,基因定位于染色体5q32.1,参与恶性肿瘤的发生发展。竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)与mRNA竞争结合miRNA结合位点,进而调控miRNA的作用,可能参与调控肿瘤的生物学特性。因此,本文就ceRNA靶向调控miRNA-145-5p与肿瘤的发生发展作一综述。     

代谢重编程在化疗耐药乳腺癌中的作用机制

摘 要：［目的］ 探讨葡萄糖代谢在耐药乳腺癌组织中的改变及其在乳腺癌细胞化疗耐药中的作用机制。［方法］ 取10只裸鼠，分别采用人乳腺癌细胞株MCF7和紫杉醇耐药细胞株MCF7-Taxol右侧腋下接种建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型和紫杉醇耐药乳腺癌模型各5 只。给药4 周后处死，免疫组织化学染色法、Western blot法用于检测癌组织和耐药癌组织糖酵解关键酶的表达。采用乳酸测定试剂盒和丙酮酸测定试剂盒分别检测两组癌组织中乳酸和丙酮酸的含量。在耐药细胞MCF7-Taxol中用siRNA敲低HK2、PFKFB3、PKM2表达，Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测HK2、PFKFB3、PKM2的敲低效率，CCK8法检测MCF7-Taxol耐药性改变。［结果］ 紫杉醇耐药乳腺癌组织中糖酵解关键酶HK2、PFKM、PKM2表达明显高于紫杉醇敏感乳腺癌癌组织（P值均<0.0001）。相对于癌组织，耐药癌组织中的乳酸产量和丙酮酸产量相对提高增高约28%（P=0.0005）和 50%(P=0.001）。与siNC组（1.00±0.02）相比，敲低组细胞中的HK2 mRNA（0.56±0.03）、PFKFB3 mRNA（0.37±0.01）、PKM2 mRNA（0.42±0.01）相对表达水平明显降低，蛋白水平也明显降低（P值均<0.05）。CCK8结果显示糖酵解酶敲低后MCF7-Taxol紫杉醇耐药性不同程度的减低（P值均<0.05）。［结论］ 糖酵解关键酶的高表达介导了化疗耐药乳腺癌的代谢重编程。抑制糖酵解关键酶HK2、PFKM、PKM2表达逆转了乳腺癌的紫杉醇耐药性，有望成为治疗化疗耐药乳腺癌的有效措施。     

卵巢癌组织中miR-125B-5p通过调控己糖激酶-2降低肿瘤能量代谢和抑制肿瘤细胞增殖

背景与目的 细胞内能量代谢异常是肿瘤的十大特征之一,微小RNA(microRNA,miRNA)可能通过调节有氧糖酵解相关酶的表达来介导有氧糖酵解,从而调控肿瘤细胞代谢和增殖.本研究对卵巢癌患者肿瘤组织中miR-125B-5p和己糖激酶-2(hexokinase-2,HK2)的表达水平与肿瘤能量代谢和增殖的关系进行了初步...     

RNA螺旋酶与肿瘤关系研究现状

RNA螺旋酶是在RNA转录后加工中具有重要作用的一类酶。主要参与翻译起始、前mRNA剪接、mRNA转运、RNA降解、核蛋白体生成以及在细胞核内和线粒体内RNA转录后加工等生物学过程。多种RNA螺旋酶在肿瘤组织中表达失调。部份RNA螺旋酶参与细胞分化、细胞凋亡、细胞周期、癌基因表达和肿瘤耐药基因表达的调控，在肿瘤发生发展中具有重要的作用。本文就RNA螺旋酶的结构、功能、在肿瘤中表达和可能致瘤机制作一综述。     

lncRNA BCYRN1在结外NK/T细胞淋巴瘤糖酵解激活中的作用及其机制研究

目的 探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）BCYRN1在结外NK/T细胞淋巴瘤（extranodal NK/T- cell lymphoma,ENKTCL）糖酵解激活中的作用及其机制。方法 收集2010—2021年于首都医科大学附属北京同仁医院诊治的236例ENKTCL患者信息,分析空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）与无疾病进展生存（progression-free survival,PFS）的相关性;采用qRT-PCR检测32例初诊ENKTCL患者组织中的BCYRN1含量并分析其与PFS的相关性。利用质粒转染法构建过表达BCYRN1（OE-BCYRN1组）和干扰BCYRN1（shBCYRN1组）的ENKTCL SNK-6细胞株,采用Screen QuestTM比色法检测葡萄糖摄取能力,用乳酸检测试剂盒检测乳酸的生成能力;采用qRT-PCR和Western blot法检测糖酵解关键分子PKM2、HIF-1α、SLC2A1、LDHA和PDK1的表达水平;分别添加蛋白合成抑制剂、溶酶体抑制剂或激活剂后观察BCYRN1对PKM2稳定性的影响。采用RNA pull-down和RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）实验判断BCYRN1与PKM2相互作用的模式。结果 236例ENKTCL患者中,高血糖组（FBG>5.6 mmol/L）49例,正常血糖组（FBG≤5.6 mmol/L）187例,高血糖组5年PFS率低于低血糖组（32.1% vs 63.7%,P<0.001）;BCYRN1高表达组3年PFS率低于低表达组（26.1% vs 82.5%,P=0.014）。干扰BCYRN1后,ENKTCL SNK-6细胞对葡萄糖的摄取量和乳酸生成水平均显著降低（均P<0.05）;过表达BCYRN1后,糖酵解关键分子PKM2、HIF-1α、SLC2A1、LDHA和PDK1的表达量均显著升高（均P<0.05）。应用蛋白合成抑制剂（放线菌酮）分别处理SNK-6细胞3 h和6 h后,OE-BCYRN1组中PKM2的降解比例均显著低于OE-CTRL组（均P<0.05）,而shBCYRN1组中PKM2的降解比例均显著高于shCTRL组（均P<0.05）。经溶酶体抑制剂（Leupeptin）处理后shBCYRN1+Leupeptin组的PKM2降解比例明显下降（P<0.01）;经溶酶体激活剂（6-Aminonicotinamide,6-AN）处理后OE-BCYRN1+6-AN组的PKM2降解比例显著增加（P<0.001）。RNA pull-down和RIP实验显示BCYRN1基因可与PKM2蛋白发生直接相互作用。结论 BCYRN1可能通过溶酶体途径上调PKM2表达而激活ENKTCL糖酵解途径。     

lncRNAMAFG-AS1调控miR-532-3p表达对肺癌A549细胞糖酵解的影响

目的：探讨lncRNA MAFG反义RNA1（MAFG-AS1）调控miR-532-3p表达对肺癌A549细胞糖酵解的影响。方法： 用qPCR法检测人肺癌A549细胞和正常肺上皮细胞BEAS-2B中MAFG-AS1和miR-532-3p的表达水平。利用脂质体介导转染 技术,分别构建MAFG-AS1表达下调和miR-532-3p过表达的A549细胞,用分光光度法检测细胞培养上清中葡萄糖消耗量与乳 酸含量,qPCR和WB法分别检测细胞中M2型丙酮酸激酶（pyruvate kinase M2,PKM2）、己糖激酶2（hexokinase 2,HK2）mRNA和 蛋白的表达水平。用双荧光素酶报告基因实验验证MAFG-AS1与miR-532-3p的靶向关系,观察MAFG-AS1和miR-532-3p同时 低表达对A549细胞葡萄糖及乳酸含量和PKM2、HK2表达的影响。结果：与BEAS-2B细胞比较,A549细胞中MAFG-AS1表达 上调而miR-532-3p表达下调（均P<0.01）。下调MAFG-AS1或miR-532-3p过表达均可降低A549细胞葡萄糖消耗量及乳酸含量, 并抑制PKM2、HK2 mRNA和蛋白的表达（均P<0.01）。miR-532-3p可与MAFG-AS1靶向结合抑制野生型MAFG-AS1细胞的荧 光素酶活性（P<0.01）,下调MAFG-AS1可使A549细胞中miR-532-3p表达升高（P<0.01）。miR-532-3p低表达可逆转MAFG-AS1 表达下调对细胞葡萄糖消耗量及乳酸含量和PKM2、HK2表达的影响（均P<0.01）。结论：下调MAFG-AS可通过促进miR-532-3p 表达而抑制肺癌A549细胞糖酵解。     

研究发现 PKM2抑制细胞凋亡的新机制

PKM2（ Pyruvate kinase M2 isoform）是糖酵解途径的关键酶,在肿瘤细胞的发生发展中起重要作用;除了其代谢活性以外,现已有多个实验室报道了其蛋白激酶活性。研究人员早期发现在EGFR激活的条件下,PKM2可转运至细胞核,磷酸化组蛋白H3,通过表观遗传的方式调控一系列原癌基因的表达。除了在细胞增殖中发挥作用,最近有报道称PKM2在肿瘤细胞的抗凋亡过程中也发挥着作用,但其作用机制尚不清楚。     

MicroRNA在缺氧诱导肿瘤生物学行为改变中的研究进展

缺氧是肿瘤微环境的一个重要特征。缺氧微环境在多种肿瘤生物学行为的改变中发挥重要作用,包括肿瘤细胞增殖与凋亡、新生血管形成、代谢、自噬、侵袭与转移等。microRNA是一类长度为19～24nt的内源性单链非编码RNA片段,与靶mRNA 的3’-非翻译区结合,以调控mRNA翻译的方式调节基因表达,是缺氧诱导肿瘤生物学行为改变的重要调控因子。本文就缺氧微环境下microRNA在肿瘤生物学行为改变中的调控机制作一综述。     

MicroRNAs与OCT4基因之间的相互作用

OCT4基因是POU转录因子家族中的一员,它能与含八聚体基序(ATGCAAAT)的DNA结合。OCT4是一个关键的转录因子,在未分化胚胎干细胞中参与维持多能性和自我更新性,在许多种癌症包括肺癌、生殖细胞肿瘤、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胃癌、肝癌和卵巢癌中过表达。Micro RNAs(mi RNAs)是一种小的非编码RNA,通过和靶基因m RNA碱基配对来调控m RNA表达,降解m RNA或阻碍蛋白合成。一些mi RNAs被证实在癌细胞中调控干细胞因子如OCT4、NANOG、SOX2和KLF4,进而调控癌细胞的增殖、凋亡、分化、抗药性和免疫性。