荧光PCR探针熔解曲线技术检测结核分枝杆菌对五种抗结核药物耐药性的研究

目的运用荧光PCR探针熔解曲线技术检测结核分枝杆菌(MTB)对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氟喹诺酮类共5种抗结核药物的耐药性,并评价其临床应用价值。方法收集2018年1—8月分离自抚顺市第四人民医院门诊患者的153株MTB临床分离株,采用荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素和氟喹诺酮类药物的耐药性。以比例法药物敏感性试验(简称"药敏试验")为金标准,评价荧光PCR探针熔解曲线法的敏感度、特异度和一致率。结果以比例法药敏试验为金标准,荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对利福平耐药性的敏感度为95.56%(43/45),特异度为94.44%(102/108),一致率为94.77%(145/153),Kappa值为0.88;对异烟肼耐药性的敏感度为90. 57%(48/53),特异度为96.00%(96/100),一致率为94.12%(144/153),Kappa值为0.87;对乙胺丁醇耐药性的敏感度为85.71%(18/21),特异度为92.42%(122/132),一致率为91. 50%(140/153),Kappa值为0. 69;对链霉素耐药性的敏感度为89. 66%(26/29),特异度为92.74%(115/124),一致率为92.16%(141/153),Kappa值为0.76;对氟喹诺酮类药物耐药性的敏感度为93. 75%(15/16),特异度为96. 35%(132/137),一致率为96. 08%(147/153),Kappa值为0. 81。结论荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素和氟喹诺酮类药物的耐药性具有良好的效能,可为医生制定用药方案提供重要依据。     

莫西沙星对老年耐多药肺结核病的临床观察

目的比较和评价含莫西沙星(MXFX)方案与含左氧氟沙星(LVFX)方案对老年耐多药肺结核病(MDR-PTB)的治疗效果及安全性。方法将80例老年痰菌阳性的MDR-PTB患者随机分成试验组(A组)40例及对照组(B组)40例,A组用含MXFX方案;B组用含LVFX方案,疗程结束时对两组患者进行比较。结果满3个月时痰菌阴转率A组为65%、B组为40%,两组对比差异有统计学意义,满18个月时A组及B组分别为77.5%、72.5%;疗程末影像吸收有效率A组72.5%,B组65%,空洞有效率分别为65%、52.5%;副作用A组30.0%,B组为37.5%。结论 MXFX对老年MDR-PTB的治疗是有效且安全的。     

左氧氟沙星治疗耐多药肺结核的疗效分析

目的观察和评价左氧氟沙星对耐多药肺结核（MDR-TB）的疗效及毒副作用。方法85例耐多药肺结核（MDR-TB）患者随机分为治疗组43例和对照组42例,化疗方案：治疗组为左氧氟沙星＋力克肺疾＋阿硫异烟胺＋利复喷丁＋乙胺丁醇,对照组为力克肺疾＋丙硫异烟胺＋利福喷丁十乙胺丁醇,左氧氟沙星均采用0．2,每日2次,口服,疗程均为18个月。结果所有病例均完成化疗疗程。治疗组和对照组痰菌阴转率3个月时分别为63％和29％,12个月时分别是77％和31％,满疗程18月时分别为91％和48％;痰菌阴转率治疗组明显高于对照组（P〈0．01）;胸部X线对比,治疗组和对照组的病灶吸收分别为95％和45％;空洞闭合情况分别为84％和43％;治疗组明显优于对照组（P〈0．05）;治疗组和对照组不良反应发生率分别为33％和31％,两组间对比无显著性差异（P〉0．05）。结论应用含左氧氟沙星的治疗方案治疗MDR—TB,有助于痰菌阴转和病变的吸收,疗效确切,药物不良反应低,值得临床使用。     

荧光PCR探针熔解曲线技术检测涂阳患者痰标本中结核分枝杆菌耐药性的价值

目的 评估荧光PCR探针熔解曲线(MeltPro)技术检测涂阳患者痰标本中MTB耐药性的效能。方法 收集2016年9月至2018年8月西安市胸科医院500例痰涂片阳性患者的痰标本,分别进行痰涂片镜检、GeneXpert MTB /RIF检测、BACTEC MGIT 960(简称“MGIT 960”)液体培养、表型药物敏感性试验(简称“药敏试验”),并应用MeltPro法检测痰标本中MTB菌株对利福平、异烟肼、二线注射类和氟喹诺酮类等抗结核药物的耐药性,并以表型药敏试验为标准,评价MeltPro法的检测效能。结果 以表型药敏试验结果为标准,MeltPro法检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为98.7%(76/77)和94.2%(343/364),检测对异烟肼耐药性的敏感度和特异度分别为82.3%(102/124)和96.2%(304/316),检测对阿米卡星耐药性的敏感度和特异度分别为8/9和99.5%(432/434),检测对卷曲霉素耐药性的敏感度和特异度分别为6/7和99.1%(432/436),检测对左氧氟沙星耐药性的敏感度和特异度分别为90.6%(48/53)和99.2%(386/389),检测对莫西沙星耐药性的敏感度和特异度分别为88.1%(37/42)和96.5%(386/400)。以表型药敏试验结果为标准,GeneXpert MTB/RIF检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为94.8%(73/77)和94.0%(342/364)。GeneXpert-MTB/RIF和MeltPro法与表型药敏试验结果一致性均较好(Kappa值分别为0.81和0.84),但MeltPro法检测效能与表型药敏试验检测结果的一致性更高。结论 MeltPro法检测涂阳患者痰标本中MTB菌株对利福平、异烟肼,以及二线注射类和氟喹诺酮类抗结核药物耐药性有较好的效能。     

左氧氟沙星和力克肺疾联用治疗耐多药肺结核临床研究

将93例耐多药肺结核（MDR—TB）患者随机分为两组,治疗组48例采用含左氧氟沙星和力克肺疾的3DATZVL／9DLV方案治疗,对照组采用3HATZLE／9HLE方案治疗。治疗后治疗组痰菌阴转率、病灶明显吸收率、空洞闭合率均明显高于对照组,两组不良反应无统计学差异。     

耐多药肺结核患者血清蛋白指纹图谱测定初步研究

目的 评价血清蛋白指纹图谱技术在诊断耐多药肺结核患者中的应用价值。方法 选择痰Mtb培养阳性的肺结核患者70例,其中耐多药肺结核患者35例为A组,非耐药肺结核患者35例为B组;健康者35例为C组。以B、C组为对照组,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)和蛋白芯片技术检测血清蛋白,并应用Ciphergen protein chip 3.2.1软件进行比较,分析其相关血清蛋白峰值并进行统计学处理。 结果 耐多药肺结核患者组与对照组的血清蛋白质谱数据进行比较,存在 4个差异有统计学意义的蛋白峰;其中质荷比(mass to charge ratio,m/z)在1369、3400 m/z为低表达,而8700、22 794 m/z为高表达;其灵敏度分别为77.1%（27/35）、71.4%（25/35）、80.0%（28/35）、74.3%（26/35）,特异度分别为72.9%（51/70）、74.3%（52/70）、75.7%（53/70）、81.4%（57/70）;χ²值分别为23.7、20.2、29.6、31.0,P值均＜0.01,差异有统计学意义。结论 血清蛋白质指纹图谱技术简便、快速,标本用量少,可能成为筛选耐多药肺结核一种新的检查指标。     

荧光PCR探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐药性的价值

搜集全部2017年9月至2019年8月西安市胸科医院确诊的结核病住院患者546例作为研究对象,评价荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)探针熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的临床应用价值。收集患者痰标本,每份标本量均不少于2ml。经菌种鉴定,最终纳入531例(株)为研究对象。每例患者采用同一标本进行BACTEC MGIT 960液体培养药物敏感性试验(简称“MGIT 960药敏试验”)和熔解曲线法耐药基因检测,对MGIT 960药敏试验和熔解曲线法检测利福平、异烟肼耐药性结果不一致者采用基因芯片法耐药基因检测对熔解曲线法结果进行验证。以MGIT 960药敏试验检测结果为参考标准,熔解曲线法检测肺结核患者痰标本MTB对链霉素耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为86.67% (39/45)、99.38% (483/486)、98.31% (522/531)和0.887;检测肺结核患者痰标本MTB对异烟肼耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为69.23% (54/78)、98.68% (447/453)、94.35% (501/531)和0.751;检测肺结核患者痰标本MTB对利福平耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为87.50% (42/48)、96.89% (468/483)、96.05% (510/531)和0.778;检测肺结核患者痰标本MTB对乙胺丁醇耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为50.00% (9/18)、98.83% (507/513)、97.18% (516/531)和0.531。在熔解曲线法检测结果为耐药而MGIT 960药敏试验为敏感的30例患者中,熔解曲线法检测结果显示:对异烟肼耐药的6例均为katG 315位密码子突变;对利福平耐药的15例中,ropB 507-512、ropB 521-528、 ropB 529-533位密码子突变分别为3例、3例、9例;对链霉素耐药的3例均为rrs 513-517位点突变;对乙胺丁醇耐药的6例均为embB 306位密码子突变。基因芯片法耐药基因检测结果显示:对异烟肼耐药的6例中katG 315 (AGC→ACC)突变和katG 315 (AGC→AAC)突变各3例;对利福平耐药的15例中,ropB基因511位CTG→CCG突变、526位CAC→TAC突变和531位TCG→TGG突变各3例、3例、9例,与熔解曲线法检测结果一致。可见,荧光PCR探针熔解曲线法对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇耐药性突变位点检测具有较好的检测效能,可用于临床上对一线抗结核药品耐药情况的快速筛查。     

含左氧氟沙星方案治疗耐多药肺结核近期疗效观察

目的观察含左氧氟沙星联合化疗方案在耐多药肺结核（MDR—TB）治疗中的疗效。方法将我院收治62例耐多药肺结核患者随机分为治疗组31例，对照组31例。治疗组患者给予左氧氟沙星联合异烟肼对氨基水杨酸钠、利福喷汀、乙胺丁醇、吡嗪酰胺。对照组用链霉素，异烟肼对氨基水杨酸钠、利福喷汀、乙胺丁醇、吡嗪酰胺，疗程均为18个月。结果两组患者6个月时痰菌阴转率间差异有非常显著性意义（P〈0．01）；两组患者病灶吸收情况间差异有显著性意义（P〈0．05）；两组患者药物不良反应发生率间差异无显著性意义（P〉O．05）。结论含左氧氟沙星的联合化疗方案治疗耐多药性肺结核，有助于痰菌阴转率和病灶显著吸收好转率，药物不良反应低，值得推广使用。     

地市级结核病定点医院耐多药肺结核诊断和治疗现状分析

目的 了解调查地区地（市）级结核病定点医院耐多药肺结核诊断和治疗现状,分析其在耐多药肺结核诊断和治疗方面存在的问题。 方法 采用访谈、问卷调查和病历调查相结合的方式,通过调查医院和访谈结核病控制关键人物了解地（市）级结核病定点医院耐多药肺结核服务提供情况;通过调查耐多药和疑似耐多药肺结核患者的住院病历了解患者住院期间接受的诊断和治疗服务情况,分析地（市）级结核病定点医院耐多药肺结核诊断和治疗过程中存在的问题。 结果 政府对5家医院的财政投入占医院总收入的比例在5.0%～30.2%不等,能开展药敏试验的医院所占比例仅为1/5。住院期间耐多药肺结核患者化疗方案规范率仅为13.3%,住院天数中位数为26 d,住院总费用10 893元,日均住院费用362.2元,住院费用自付费用比例59.0%,出院后转诊到结防机构的比例仅为6.6%。 结论 目前,政府对医院的财政投入较低,医院实验室耐多药肺结核的诊断能力较低。住院期间耐多药肺结核患者的化疗方案规范率较低,住院费用过高但医保报销比例低。出院后患者绝大部分没有及时转诊到当地结防机构,处于无人管理的自服药状态。     

耐多药肺结核患者营养状况调查分析

目的 了解耐多药肺结核患者的营养状况,为促进其治疗和康复提供科学依据.方法 搜集2012-2014年间在临沂市人民医院住院治疗的109例耐多药肺结核患者,其中初治组(初治耐多药肺结核患者)58例,复治组(复治耐多药肺结核患者)51例.记录两组患者入院时体格检查和血液学检查结果,包括体质量指数(BMI):＜18.5为营养不良(消瘦),18.5～23.9为正常,≥24为超重或肥胖;血红蛋白(Hb):＜110 g/L为营养不良(贫血),110～150 g/L为正常;外周血淋巴细胞计数(TLC):＜2.0×109/L为营养不良(TLC减少),(2～3.2)×109/L为正常;血清白蛋白(Alb):＜35 g/L为营养不良(低蛋白血症),35～55 g/L为正常,按照以上指标检测结果分析比较患者的营养状况.结果 109例耐多药肺结核患者中,消瘦者占42.2％(46/109),贫血者占29.4％(32/109),TLC减少者占69.7％(76/109),低蛋白血症者占55.0％(60/109).其中初治组患者消瘦者占37.9％(22/58),贫血者占27.6％(16/58),TLC减少者占69.0％(40/58),低蛋白血症者占41.4％(24/58);复治组患者消瘦者占47.1％(24/51),贫血者占31.4％(16/51),TLC减少者占70.6％(36/51),低蛋白血症者占70.6％(36/51).初治组和复治组仅以白蛋白(ALB)评价的营养不良差异有统计学意义(x2=9.356,P＜0.05).两组各项营养指标检测结果:初治组患者的BMI、Hb、TLC、Alb水平分别为20.58、124.41 g/L、1.63×109/L、35.26 g/L;复治组患者分别为18.06、116.86 g/L、1.42×109/L、31.53 g/L,初治组患者各项指标差异均高于复治组(x2值分别为4.438、2.215、2.122、3.638,P值均＜0.05).结论 耐多药肺结核患者营养不良的发生率较高,且复治组与初治组相比营养状况更差,在临床治疗过程中,应着重考虑患者的营养状况,尽早对患者采取具有针对性的营养支持治疗措施.     

耐多药结核病诊断方法研究进展

耐多药结核病的防治对于结核病的防控具有重要意义,已成为结核病防治的难点和热点问题。早期对结核病患者进行耐多药检测能够提高耐多药结核病患者的治疗成功率。耐多药结核病的诊断方法包括传统的培养方法及新型分子生物学诊断方法。作者对耐多药结核病的诊断方法进行综述,以期为耐多药结核病防治提供科学依据。     

Value of fluorescence PCR probe melting curve method in detecting resistance of Mycobacterium tuberculosis

搜集全部2017年9月至2019年8月西安市胸科医院确诊的结核病住院患者546例作为研究对象,评价荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)探针熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的临床应用价值。收集患者痰标本,每份标本量均不少于2ml。经菌种鉴定,最终纳入531例(株)为研究对象。每例患者采用同一标本进行BACTEC MGIT 960液体培养药物敏感性试验(简称“MGIT 960药敏试验”)和熔解曲线法耐药基因检测,对MGIT 960药敏试验和熔解曲线法检测利福平、异烟肼耐药性结果不一致者采用基因芯片法耐药基因检测对熔解曲线法结果进行验证。以MGIT 960药敏试验检测结果为参考标准,熔解曲线法检测肺结核患者痰标本MTB对链霉素耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为86.67% (39/45)、99.38% (483/486)、98.31% (522/531)和0.887;检测肺结核患者痰标本MTB对异烟肼耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为69.23% (54/78)、98.68% (447/453)、94.35% (501/531)和0.751;检测肺结核患者痰标本MTB对利福平耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为87.50% (42/48)、96.89% (468/483)、96.05% (510/531)和0.778;检测肺结核患者痰标本MTB对乙胺丁醇耐药性的敏感度、特异度、符合率和Kappa值分别为50.00% (9/18)、98.83% (507/513)、97.18% (516/531)和0.531。在熔解曲线法检测结果为耐药而MGIT 960药敏试验为敏感的30例患者中,熔解曲线法检测结果显示:对异烟肼耐药的6例均为katG 315位密码子突变;对利福平耐药的15例中,ropB 507-512、ropB 521-528、 ropB 529-533位密码子突变分别为3例、3例、9例;对链霉素耐药的3例均为rrs 513-517位点突变;对乙胺丁醇耐药的6例均为embB 306位密码子突变。基因芯片法耐药基因检测结果显示:对异烟肼耐药的6例中katG 315 (AGC→ACC)突变和katG 315 (AGC→AAC)突变各3例;对利福平耐药的15例中,ropB基因511位CTG→CCG突变、526位CAC→TAC突变和531位TCG→TGG突变各3例、3例、9例,与熔解曲线法检测结果一致。可见,荧光PCR探针熔解曲线法对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇耐药性突变位点检测具有较好的检测效能,可用于临床上对一线抗结核药品耐药情况的快速筛查。     

实时荧光核酸恒温放大检测（SAT）法对肺结核诊断价值的研究

目的 检测实时荧光核酸恒温放大检测（SAT）法对结核病诊断的作用。 方法 收集172例疑似肺结核患者的痰液标本2份/例,1份进行涂涂片金-胺染色,另一份进行罗氏培养基培养与菌种鉴定及SAT法检测结核分枝杆菌,如SAT法和培养结果不符合则使用痰荧光定量PCR法（FQ-PCR)进行复核。 结果 172例入组患者中有156例根据临床及实验室结果确诊为肺结核病。如果以Mtb培养鉴定结果和荧光PCR结果作为判定金标准,SAT检测的敏感度和特异度分别为97.8%（89/91）和97.5%（79/81）。如以临床诊断为标准,SAT诊断结核的敏感度为58.3%（91/156）,特异度为100.0％（16/16）。对于痰菌阳性肺结核患者,SAT 阳性率为84.9%（79/93）;对于痰菌阴性患者,SAT的阳性率为19.0%（12/63）。 结论 SAT法可以作为临床对结核病的辅助诊断方法。     

荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐药基因的结果分析

目的 分析和探讨荧光PCR熔解曲线法对结核病的诊断和耐药检测的应用价值。方法 收集2015年9月至2016年12月新疆维吾尔自治区胸科医院的976例疑似结核病患者的痰标本,运用探针荧光PCR熔解曲线法来检测结核分枝杆菌及其对利福平、异烟肼的耐药突变情况。以BACTEC MGIT 960液体培养法及液体药敏试验检测结果为标准,评价探针荧光PCR熔解曲线法鉴定结核分枝杆菌及其耐药突变检测的敏感度、特异度、一致率、Kappa值等。结果 以MGIT 960液体培养结果为标准,荧光PCR熔解曲线法鉴定结核DNA的敏感度为85.44%(135/158),特异度为94.01%(769/818),Kappa值为0.75,诊断符合率为92.62%(904/976)。以MGIT 960液体药敏试验结果为标准,荧光PCR熔解曲线法对异烟肼耐药突变检测的敏感度为83.33%(20/24),特异度为94.59%(105/111),Kappa值为0.76,诊断符合率为92.59%(125/135);荧光PCR熔解曲线法对利福平耐药突变检测的敏感度为95.83%(23/24),特异度为95.50%(106/111),Kappa值为0.86,诊断符合率为95.56%(129/135)。结论 荧光PCR熔解曲线法检测速度快,对利福平和异烟肼耐药突变检测结果具有良好的敏感度和特异度,可用于临床上对结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药情况的快速筛查。     

耐多药和广泛耐药肺结核患者外周血中免疫细胞的表达及其意义

目的 探讨耐多药(MDR)和广泛耐药(XDR)肺结核患者外周血CD3+CD16+CD56+自然杀伤(NK)T细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞和T细胞亚群的表达状态及其意义.方法 对2008年1月至2009年6月在上海市肺科医院住院的316例肺结核患者进行回顾性分析,其中男204例,女112例;年龄17～88岁,平均(44±16)岁;初治119例,复治197例.根据耐药情况分为MDR组146例,其中男102例,女44例,年龄19～84岁,平均(42±16)岁;XDR组77例,其中男42例,女35例,年龄18～88岁,平均(50±16)岁;敏感组93例,其中男60例,女33例,年龄17～83岁,平均(43±19)岁.另按照空洞所占肺野范围分为1～2个肺野组(132例)、3～4个肺野组(49例)和5～6个肺野组(9例).采用流式细胞仪抗体双标法检测患者外周血中NKT细胞、NK细胞和T细胞亚群表达率.两组间比较采用Wilcoxon秩和检验,多组间比较采用Kruskal-Wallis秩和检验.结果 XDR组NKT细胞和NK细胞表达率的中位数(四分位间距)[11%(6%～16%)和7%(4%～12%)]明显高于MDR组[8%(5%～14%)和6%(4%～11%)]和敏感组[7%(4%～11%)和5%(3%～9%)],3组间两两比较,差异均有统计学意义(H值分别为6.478和8.369,均P＜0.05);XDR组男性NKT细胞和NK细胞表达率[(14±9)%和(11±7)%]明显高于女性[(9±5)%和(6±4)%],CD4T细胞表达率和CD4/CD8[(38±10)%和1.9±1.3]明显低于女性[(44±10)%和2.2±0.7],两两比较,差异均有统计学意义(z值为-2.91～2.41,P＜0.05和P＜0.01);1～2个肺野组CD4 T细胞表达率最高[(42±9)%],CD8 T细胞表达率最低[(22±8)%];5～6个肺野组CD4 T细胞表达率最低[(36±11)%],CD8 T细胞表达率最高[(28±12)%],CD4/CD8最低(1.5±0.8),差异均有统计学意义(H值为8.404～16.175,均P＜0.01).结论 NKT细胞和NK细胞表达率随结核病耐药程度加重而升高,但T细胞亚群表达率不随耐药程度加重而变化.肺结核患者的空洞范围越大,其外周血中CD4T细胞和CD4/CD8值越低,CD8T细胞值越高.XDR男性肺结核患者的细胞免疫功能损害更为明显.

Abstract：

Objective To explore the expressions and the significance of CD3+ CD16+CD56+ NKT cells,CD3-CD16+CD56+ NK cells and T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with multi-drug resistant ( MDR-TB ) and extensively drug-resistant ( XDR-TB ) pulmonary tuberculosis. Methods The data of 316patients with pulmonary tuberculosis hospitalized in Shanghai Pulmonary Hospital from January 2008 to June 2009 were retrospectively analyzed, of whom 119 were newly diagnosed, and 197 were retreated patients.There were 204 males and 112 females, aged from 17 -88 years, mean ( 44 ± 16 ) years. According to the results of drug-resistance, these patients were divided into a MDR group, an XDR group and a sensitive group. There were 146 patients in the MDR group, with 102 males and 44 females, aged from 19 - 84years, mean ( 42 ± 16 ) years. There were 77 patients in the XDR group, with 42 males and 35 females,aged from 18 -88 years, mean (50 ± 16) years. There were 93 patients in the susceptible group, with 60males and 33 females, aged from 17-83 years, mean (43 ± 19) years. According to the distribution of cavitation in lung fields, these patients were also divided into 1 -2 lung field affected group (n = 132), 3 -4 lung field affected group ( n = 49 ) and 5 - 6 lung field affected group ( n = 9 ). The frequencies of NKT cells, NK cells and T cells from whole blood were tested by flow cytometry. Rank test (SAS software) was used for statistic analyses. Results The expression rate of NKT cells and NK cells was the highest in the XDR group [11%(6% - 16%) and 7% (4% - 12%)], as compared to the MDR group [8% (5% -14% ) and 6% (4% - 11% ) ], and the susceptible group [7% (4% - 11% ) and 5% (3% -9% ) ], the difference being statistically significant ( H = 6. 478 - 8. 369, P ＜ 0. 05 ). The expression rate of the NKT (14 ± 9)% and NK cells (11 ± 7)% in males of the XDR group was significantly higher than that in females [ NKT (9 ±5)% and NK cell (6 ±4)% ], while CD4(38 ± 10)% and CD4/CD8( 1.9 ± 1.3) were significantly lower than those of the females [ CD4 (44 ± 10) % and CD4/CD8 ( 2. 2 ± 0. 7 ) ], the difference being statistically significant (z = - 2. 91 - - 2. 79, P ＜ 0. 05, P ＜ 0. 01 ). The expression rate of CD4(42 ± 9)% was the highest, but CD8 (22 ± 8)% was the lowest in the 1 -2 lung field group. While in the 5-6 lung field group, the expression rate of CD4 (36 ± 11 )% was the lowest, CD8 (28 ± 12)% was the highest, and CD4/CD8 (1. 5 ±0. 8) was the lowest, the difference being statistically significant (H = 8. 404 -16. 175, P ＜0. 01 ). Conclusions With the increasing level of drug resistance, the expression rate of NKT cells and NK cells increased, while the expression of T cell subsets did not change. The value of CD4 and CD4/CD8 in peripheral blood decreased, but CD8 increased as the extent of cavitation increased in these patients. The impairment of cellular immune function in XDR-TB was more prominent in male patients.     

荧光PCR探针熔解曲线技术检测MTB耐药性的成本分析

目的 通过将荧光PCR探针熔解曲线技术(简称“熔解曲线技术”)与BACTEC MGIT 960技术(简称“MGIT 960”)对MTB耐药性检测的成本进行比较,评估熔解曲线技术在中国不同地区、不同层级结核病防治机构检测MTB耐药性的可行性。 方法 选择西安市胸科医院、新疆维吾尔自治区胸科医院、沈阳市胸科医院、南阳市第六人民医院、遵义医学院附属医院和杭州市红十字会医院6家结核病定点医院,按照高、中、低3种工作量收集3次MGIT 960和熔解曲线技术的成本数据,采用“要素法(包括管理费、建筑费、设备费、人员费、试剂费、耗材费)”计算每种方法的单位检测成本,计算不同检测方法检出每例患者的检测成本。 结果 使用MGIT 960、熔解曲线技术平均每例患者的检测成本分别为702.6(4215.8/6)和440.7(2644.3/6)元。当熔解曲线技术检测敏感度超过70%,在结核病人群MDR-TB患病率≤50%的情况下,使用熔解曲线技术进行耐药MTB检测的每例患者检测成本(熔解曲线技术检测敏感度为70.0%时,结核病患者MDR-TB的患病率在1.0%、5.0%、10.0%、15.0%、20.0%、30.0%、50.0%时,熔解曲线技术检出1例MDR-TB患者的平均成本分别为62957.1、12591.4、6295.7、4197.1、3147.9、2098.6、1259.1元;熔解曲线技术检测敏感度为80.0%时,上述患病率情况下平均成本分别为55087.5、11017.5、5508.8、3672.5、2754.3、1836.3、1101.8元)均低于MGIT 960(平均成本分别为70260.0、14052.0、7026.0、4684.0、3513.0、2342.0、1405.2元)。 结论 与MGIT 960相比,熔解曲线技术更具成本-效益,具备在中国不同地区、不同层级结核病防治机构检测MTB耐药性的价值。     

基因芯片与线性探针技术检测涂阳肺结核患者痰标本MTB耐药性的价值

目的 评价基因芯片技术与线性探针技术(GenoType MTBDRplus)快速检测MTB耐药性的临床应用价值。方法 选取西安市胸科医院2017年4月至2018年8月住院治疗的493例涂阳肺结核患者作为研究对象,收集其痰标本,痰标本量均不少于2ml。每例患者用同一份痰标本分别进行基因芯片检测、线性探针检测和BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960液体培养”),同时对培养阳性且鉴定为MTB的临床分离株进行MGIT 960液体药物敏感性试验(简称“药敏试验”)。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,分析基因芯片技术及线性探针技术检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性的效能。结果 454例研究对象同时具有3种药敏试验检测结果。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,基因芯片法和线性探针法检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为89.0%(65/73)、96.1%(366/381)、0.82和90.4%(66/73)、96.1%(366/381)、0.83;检测涂阳肺结核患者痰标本MTB异烟肼耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为80.2%(93/116)、96.7%(327/338)、0.80和81.9%(95/116)、97.0%(328/338)、0.82。454例涂阳肺结核患者痰标本中,453例应用2种分子生物学检测方法检测MTB利福平耐药性结果相同,符合率为99.8%;445例应用2种分子生物学方法检测MTB异烟肼耐药性结果相同,符合率为98.0%。结论 基因芯片技术和线性探针技术(GenoType MTBDRplus)检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性与MGIT 960液体药敏试验具有较高的一致性,二者均可为临床提供快速、特异的耐药检测结果。