细胞食物DNA·RNA:长寿和细胞再生上的一种突破

细胞食物DNA·RNA是美国新科技有限公司(Nu Science)推出的细胞食物配方的一种,其是世界上首个联合核酸根(主要营造DNA和RNA)、三磷酸腺苷(ATP增强分子能量)、甲基组(老化过程的调节剂和老化程序剂)及细胞食物的细胞再生配方(图1).该配方采用口腔喷雾(可显著提高细胞食物的传送系统)以及激光增强技术,两者的结合,让细胞食物DNA·RNA的吸收和同化达到最佳[1].     

许旺细胞源神经营养因子受体在外周神经组织中的分布研究

目的探讨许旺细胞源神经营养因子(SDNF)受体在外周神经的分布状况.方法应用放射性受体结合法检测外周神经组织中125I-SDNF的特异性结合.结果外周神经组织中存在许旺细胞源神经营养因子的特异性结合位点,且该特异性结合位点具有如下特点(1)高亲和力,Kd为(93.11±0.52)pmol/L;(2)低结合容量,Bmax为(8.91±0.26)fmol/mg;(3)可饱和性,饱和曲线呈双曲线型,Scatchard分析的回归线呈直线;(4)可逆性,结合常数K1为(3.91±0.63)×107M-1×min,解离常数K-1为(3.38±0.54)×10-3min-1;(5)特异性.结论外周神经组织中存在许旺细胞源神经营养因子的高亲和力受体,故为许旺细胞源神经营养因子发挥神经营养作用的靶组织.     

索拉非尼治疗晚期肾癌的临床研究进展

索拉非尼(sorafenib)是第一个口服的多靶点生物靶向抗肿瘤新药,通过抑制C-RAF和B -RAF的丝氨酸/苏氨酸激酶活性,抑制VEGFR、PDGFR、FLT3和C-KIT等酪氨酸激酶活性[1],抑制Mcl-1翻译[2]以及抑制致癌性RET突变[3]等,起到同时抑制肿瘤细胞增殖和血管牛成的双重作用.Ⅰ～Ⅱ期临床显示了其良好的耐受性、安全性及抗肿瘤活性,Ⅲ期临床试验结果 再次证实索拉非尼能明显延长晚期肾细胞癌患者的无进展生存期和总生存期,显示了明显的抗肿瘤活性.与其他药物联合应用显示了良好的耐受性和治疗前景.2005年12月美国FDA快速批准了索拉尼用于治疗晚期肾细胞癌.2006年9月,索拉非尼(商品名:多吉美)在中国经SFDA批准上市治疗转移性肾癌.     

细胞治疗在美容医学中的应用进展(续)

3.2 刺激细胞疗法 刺激细胞疗法包括刺激已退化的、老化的、休眠的细胞,使其活化,增加其功能.早在1952年,法国著名内科医师MicheI Pistor首先应用了中胚层疗法(Mesothera-py),1987年获法国卫生部批准,正式将Mesotherapy纳入传统医学治疗项目.1996年,南非著名医学教授Fermades首次提出了微针细胞治疗系统(microneedle cell therapy system,MCTS),如将药物准确运送到需施治的各部位,可使药物发挥最大的疗效.[40-41].     

蛋白转导技术在胰腺干细胞分化中的应用

蛋白转导是将具有生物学活性的目的 片段与蛋白转导结构域相连接,然后导入细胞中并发挥其生物学效应的一项技术.蛋白转导结构域是一种小分子多肽,不仅具有穿透细胞膜的功能,同时也能够保持其融合蛋白的活性.蛋白转导技术是一项新兴的生物学技术,自从这项技术发明以来,被广泛的应用到了细胞基因调控的各个方面.本文以Tat、Pdx-1、Beta2/NeuroD转导蛋白为例,综述蛋白转导技术在胰腺干细胞分化中的应用.     

类器官在器官移植领域的应用前景

类器官技术是近年来生物医学领域最具突破性的前沿技术之一.作为组织干细胞在体外三维培养所形成的微型器官,类器官在组织结构、细胞类型和功能等方面与来源组织高度一致,为生物医学基础研究、药物研发以及临床精准医疗提供了理想模型,并在再生医学中展现出重要潜在价值.器官移植是治疗器官衰竭最有效的手段之一,但目前供者器官来源有限,无...     

许旺细胞源神经营养因子受体在脊髓组织中的分布研究

目的　探讨脊髓组织中是否存在许旺细胞源神经营养因子 (SDNF)受体及其在亚细胞水平的分布情况。　方法　应用放射性配体结合法检测脊髓中1 2 5 I- SDNF的特异性结合。　结果　 (1)脊髓组织 1 2 5 I- SDNF特异结合的最大容量 (Bmax)为 (2 .86± 0 .2 2 ) fmol/ mg蛋白 ;平衡解离常数 (Kd)为(4 9.4± 6 .5 ) pmol/ L;(2 )动力学分析显示 K1 为 (9,2± 0 .7)× 10 7M- 1 × min- 1 ,K- 1 为 (4 .2± 0 .5 )× 10 - 3min- 1 ;(3)特异性分析表明对 SDNF高度特异性 ;(4 )亚细胞分布 :特异结合位点以微粒体膜含量最高。　结论　脊髓中存在 SDNF的受体 ,表明脊髓为 SDNF的靶组织     

异体脱细胞真皮基质的研究与应用

脱细胞真皮基质 (ａｃｅｌｌｕｌａｒｄｅｒｍａｌｍａｔｒｉｘ ,ＡＤＭ)是异体皮经特殊处理 ,去除其细胞成分后得到的一种真皮替代品。由Ｌｉｖｅｓｅｙ[1] 开发研制 ,Ｌｉｆｅｃｅｌｌ公司生产 ,商品名为ＡｌｌｏＤｅｒｍ ,已获美国ＦＤＡ批准应用于临床 ,近几年在烧伤和整形外科领域中得到了广泛的应用和发展。1　脱细胞真皮基质的制备方法ＡＤＭ的制备包含去表皮、脱真皮细胞及冷冻干燥处理 3个基本步骤 ,有两种方法。一是尸体皮经高渗盐水和 12烷基硫酸钠 (ＳＤＳ)处理 ,形成ＮａＣｌ ＳＤＳＡＤＭ[1,2 ] ;二是经ＤｉｓｐａｓｅⅡ处理…     

干细胞移植抗衰老的研究进展

随着现代科学技术的发展,尤其是干细胞研究的不断深入,通过输注干细胞抗衰老,是目前最为有效的抗衰老治疗手段。1998年,美国《科学》杂志将干细胞的研究成果列在十大科学进展的首位。干细胞抗衰老是再生医学中最核心的医疗技术,它最显著的作用就是补充种子细胞替代衰老细胞。1干细胞移植的现状生命是一个由发育、成熟,然后逐渐走向衰老的过程,衰     

Mesotherapy——美容医学的新技术

Mesotherapy(中胚层疗法)是法国的Dr.MichelPistor于1952年首创并开展的治疗技术,可译成中胚层疗法或间皮疗法,为原始的皮下注射治疗技术,主要用于治疗血管性和淋巴性疾病。法国在1964年成立Mesotherapy学会;并于1976年在法国首次召开Mesotherapy学术会议;1987年法国医学会将Mesotherapy治疗技术批准为一项医学专业治疗技术。目前,在法国已有15000余名的医师进行Mesotherapy的实践。近年来,Mesotherapy在欧洲和南美洲被推广并应用于患者的体形塑造等;美国也于近年开始应用Mesotherapy[1-14]。法国著名的Mesotherapy专家、协会主席Lione…     

细胞治疗在美容医学中的应用进展

笔者于2009年报道了"再生医学与干细胞在美容整形外科的研究与应用"[1-2].文中的部分叙述:①有了生命才会有再生和再生医学;②再生是大自然的普遍现象,没有再生也就没有生命;③对生命而言,再生主要体现在细胞的再生能力,细胞是生命的基本单位;④干细胞是再生医学的灵魂;⑤有科学家预言:21世纪第一个10年的主要方向是十细胞的基础研究;第二个10年是科学家们将科研成果--干细胞的再生能力广泛应用于临床;⑥人体细胞的寿命至少达至300年,即组织中的干细胞至少可以分化300年.     

临床细胞加工与细胞治疗

随着干细胞研究从实验室走向临床,临床细胞加工技术逐步成为热点.起源于造血干细胞移植的细胞加工技术,在发展中对条件与技术的要求越来越严格和规范.该文深入探讨了临床细胞治疗中的常见种类和方法,如应用免疫磁珠筛选外周血CD34 的造血干细胞;通过体外筛选、共培养和纯化技术改良淋巴细胞,防范移植物抗宿主或进行过继免疫治疗血液系统肿瘤或实体瘤;脐血造血干细胞移植的方法和优缺点;骨髓间充质干细胞的富集和体外扩增等加工技术及其诸多临床应用;树突状细胞体外激活后移植治疗肿瘤、胰岛细胞移植治疗Ⅰ型糖尿病、角膜缘干细胞移植修复角膜、神经干细胞移植治疗脑外伤和帕金森等疾病的技术方法和现状.还明确了目前临床细胞治疗的潜力和价值,强调了规范治疗的必要性.     

甲基强的松龙对星形胶质细胞作用的研究

目的 研究甲基强的松龙(MPSS)对体外培养的星形胶质细胞的作用.方法 采用出生3d内的SD大鼠的新生鼠的大脑制成细胞悬浊液后,应用含15%胎牛血清的DMEM培养液中培养,通过摇床和逐渐传代纯化星形胶质细胞,通过PBS缓冲液代替培养基模拟缺营养模型3h后即刻应用甲基强的松龙(10umol/1),然后继续培养3d,免疫荧光技术鉴定星形胶质细胞;MTT法检测细胞的增殖活性和凋亡;PCR技术测定细胞GFAP表达的变化.结果 星彤胶质细胞摇床后传至第三代,经鉴定其星形胶质细胞纯度达95%以上;缺氧3h后部分细胞形态变圆甚至死亡漂浮在正常细胞表面;正常组和损伤组分别加入MPSS 3d后,损伤组细胞活性与GFAP表达均明显升高,但是正常则没有明显变化.结论 适当剂量的MPSS对缺营养损伤的星形胶质细胞有显著的保护作用,而对正常的星形胶质细胞无显著性保护作用.     

内皮素对人肾小球系膜细胞表达细胞粘附分子的影响

目的 探讨内皮素-1(ET1-1)对体外培养的人肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)的调节作用。方法 利用Northern杂交技术和细胞ELISA方法分别从mRNA和蛋白质两个水平观察ICAW-1和VCAM-1的变化。结果 在正常培养条件下,人肾小球系膜细胞仅低水平表达一定量的ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白质;ET-1(10~(-7)mol)刺激后,这两种细胞粘附分子的mRNA表达迅速上调,且随后其相应蛋白质表达也显著增加并呈时间依赖性。结论 提示ET-1对粘附分子表达的促进作用可能在传小球疾病的发生中具有重要意义。     

小鼠CD4T细胞转化的双阴性T细胞的效应分子研究

目的 研究小鼠CD4 T细胞转化的CD4-CD8-双阴性T细胞的功能特点,进一步明确双阴性T细胞的免疫抑制作用机制.方法 应用转录组测序和蛋白质质谱技术分析了小鼠转化的双阴性T细胞基因表达谱.应用流式细胞术等技术验证了细胞活化分子CD44、CD69和OX40的表达水平并应用CFSE染色法验证双阴性T细胞的杀伤功能.结果 小鼠转化的双阴性T细胞表达了与其他成熟CD4 T细胞不同的细胞表型.小鼠转化的双阴性T细胞明显高表达细胞表面活化分子CD44、CD69和OX40,以及颗粒酶、穿孔素等细胞杀伤相关基因.穿孔素基因敲除的双阴性T细胞抑制淋巴细胞增殖的能力明显降低.结论 小鼠CD4 T细胞转化的双阴性T细胞是与其他成熟CD4 T细胞不同的T细胞终末分化亚群.小鼠转化的双阴性T细胞高表达细胞活化分子和免疫杀伤类细胞因子,并主要通过穿孔素途径发挥免疫抑制功能.     

"慢性肾衰基本方"含药血清对人肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:观察经验方"慢性肾衰基本方"对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的肾小管上皮细胞(TECs)转分化及细胞外基质分泌的影响,以进一步证实并初步探讨其延缓慢性肾衰竭肾小管-间质纤维化的作用机制.方法:给予家兔中药灌胃3 d后制备"慢性肾衰基本方"含药兔血清,应用不同浓度含药血清处理经TGF-β1诱导活化的HK-2细胞,然后应用免疫细胞化学方法、流式细胞技术测定HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达率;应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)测定培养上清纤维连结蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)水平,并进而计算单个细胞FN及Col-Ⅳ分泌水平.结果:含药兔血清呈剂量依赖方式逆转TGF-β1诱导的HK-2细胞α-SMA的表达,并呈剂量依赖方式抑制单个细胞FN及Col-Ⅳ的分泌.结论:"慢性肾衰基本方"至少部分是通过抑制肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质的过度分泌而对防治肾小管-间质纤维化发挥作用.     

激活态雪旺细胞源性神经营养因子对胚芽干细胞向神经细胞分化的影响

目的 探索小鼠胚芽干细胞(embryonic germ cells,EGCs)分离、培养的有效方法;观察激活态雪旺细胞(activated Schwann cells,ASCs)源性神经营养因子对小鼠EGCs向神经细胞分化的影响.方法 分离受精11d胚胎小鼠生殖腺嵴及同时取少量的腹壁组织共同消化培养,经胰蛋白酶消化制备成EGCs悬液,将细胞种植在饲养层细胞上.观察小鼠EGCs集落形成情况,并采用阶段特异性胚胎抗原-1染色、碱性磷酸酶染色、过碘酸-雪夫染色对其进行鉴定.采用双酶消化组织块法结合机械分离法分离培养ASCs.神经诱导实验采用基础培养基+小鼠EGCs(空白对照组)和ASCs培养基与小鼠EGCs共培养(实验组),培养3周后对神经诱导结果进行NeuN、MBP、GFAP免疫荧光染色鉴定,计算细胞染色阳性率,对实验结果进行统计学分析.结果 小鼠EGCs呈集落性生长,集落隆起、多数呈鸟巢状、与周围饲养层细胞存在明显界限;集落内的细胞密集,呈现一个或几个核仁、核质比高的圆形或卯圆形;阶段特异性胚胎抗原-1染色、碱性磷酸酶染色、过碘酸-雪夫染色均阳性.小鼠EGCs神经诱导1周后,倒置相差显微镜下可见EGCs克隆的边缘出现向外迁移的细胞,圆形或椭圆形,部分细胞有突起伸出.3周后,迁移的、有细长突起的细胞越来越多,NeuN、MBP、GFAP免疫荧光染色均阳性.细胞染色阳性率比较差异有统计学意义.结论 通过一种简单、经济的方法体外成功分离并获得小鼠EGCs;ASCs源性神经营养因子能够促进小鼠EGCs在体外向神经细胞分化.     

多西紫杉醇对前列腺癌PC-3细胞的作用

目的 :观察多西紫杉醇对前列腺癌细胞系PC 3的体外作用 ,并探讨其作用机制。方法 :应用光镜形态学、MTT法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了 1 0 -6mol/L、1 0 -7mol/L、1 0 -8mol/L浓度多西紫杉醇在体外对前列腺癌细胞系PC 3的作用和对细胞DNA含量及CyclinD1 表达的影响。结果 :1 0 -7mol/L以上浓度多西紫杉醇对前列腺癌细胞系PC 3有明显的的生长抑制作用 (抑制率≥ 4 7.5 % ,P <0 .0 5 ) ,诱导凋亡 (凋亡率≥1 6 .8% ,P <0 .0 5 ) ,下调CyclinD1 的表达 (表达率≤ 1 0 .8% ) ,与阳性对照组CyclinD1 表达率 2 5 .5 %相比有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :多西紫杉醇对前列腺癌细胞系PC 3有明显的生长抑制和诱导凋亡作用 ,显示了多西紫杉醇有用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性     

射频凝固器在左半肝切除术中的应用

肝切除术作为目前治疗肝脏肿瘤的主要方法之一,其技术不断完善和成熟,许多肝脏中心把围手术期病死率也控制在1％ ～5％,但术中或术后出血仍然是影响肝切除术成败和预后的关键[1-2].2002年Habib教授在射频技术治疗肝脏肿瘤的基础上发明了射频凝固器(Habib 4x,美国瑞达公司),将射频技术应用于肝切除实质离断,从而真正向无血肝切除迈出了重要一步.2009年7月至2010年6月我们应用Habib 4x行左半肝切除术治疗12例肝左叶恶性肿瘤,现将结果报告如下.     

肾细胞癌中微血管密度与肿瘤细胞凋亡的关系

目的　探讨肾癌组织中微血管形成与肿瘤细胞凋亡的关系。方法　应用免疫组织化学方法对 51例肾癌组织中血管内皮细胞的第Ⅷ因子抗原进行染色 ,并计数肿瘤的微血管 ;应用原位DNA片段末端标记法检测肾癌组织细胞凋亡状态。结果　肾细胞癌微血管密度在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肿瘤中分别为 49.3± 2 5.3、54.0± 2 8.8、94.9± 38.7;在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ Ⅳ期肿瘤中分别为 45.2± 2 1 .2、68.5±32 .6、99.5± 43.7,其密度在肿瘤的临床分期及病理分级间差异具有显著性 (P <0 .0 5)。肾细胞癌微血管密度与肿瘤细胞的凋亡指数呈负相关 (rs=- 0 .61 8,P <0 .0 0 1 ) ,但与肿瘤的Ki67标记指数无关(rs=0 .0 96,P >0 .0 5)。结论　在肾细胞癌发展过程中 ,微血管的形成可抑制肿瘤细胞的凋亡 ,而促进肿瘤的恶性进展