锰诱导的大鼠生精细胞凋亡通路的探索研究

[目的]研究锰对大鼠生精细胞caspase-3表达的影响,探讨锰对大鼠生精细胞caspase-3表达作用的机理.[方法]雄性SD大鼠(体重120±10 g)24只随机分为3组:空白对照组,15 mg/kg和30 mg/kgMnCl2组.8只/组.MnCl2组分别染锰(MnCl2·4H2O)4 w,空白对照组给予等容NS,给药途径均为腹腔注射,5 d/w,1次/d,于第4w末处死,免疫组化(SABC法)法检测睾丸caspase-3和cyto--c表达. [结果]与空白对照组比较,各染锰组cas-pase-3阳性细胞率均显著升高,cyto-c阳性细胞率均显著降低(P＜0.01).染锰时间相同,30 mg/kg MnCl2组与15 mg/kg MnCl2组比较,caspase-3阳性细胞率显著升高,cyto-c阳性细胞率显著降低(P＜0.01).各组caspase-3和cyto-c阳性细胞率呈显著负相关(r=-0.876,P＜0.01). [结论]锰可通过线粒体途径诱发大鼠生精细胞凋亡,且caspase-3的表达随染锰剂量的增加而增加,二者存在一定的剂量-效应关系.     

锰对大鼠生精细胞半胱氨酰天冬氨酸酶-3和细胞色素C表达的影响

目的研究锰对大鼠生精细胞中半胱氨酰天冬氨酸酶-3(caspase-3)和细胞色素C(cytochrome-c)表达的影响。方法将健康雄性清洁级SD大鼠48只随机分为高(30mg/kg)、低剂量(15mg/kg)MnCl2染毒组和空白对照组(生理盐水),每组16只。采用腹腔注射方式染毒,每天1次,每周5天,连续染毒6周。分别于染毒第4、6周末称重,处死大鼠,分离睾丸,采用免疫组化法检测睾丸生精细胞中caspase-3与cytochrome-c的阳性细胞率。并进行病理学观察。结果与空白对照组比较,高、低剂量MnCl2染毒组大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率均升高,cytochrome-c阳性细胞率均降低,差异有统计学意义(P<0.01);且随着锰染毒剂量的升高,大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率呈上升趋势,cytochrome-c阳性细胞率呈下降趋势。与染锰第4周比较,高、低剂量MnCl2染毒组第6周大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率均升高,cytochrome-c阳性细胞率均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。直线相关分析发现,各组大鼠生精细胞caspase-3阳性细胞率与cytoc...     

锰对大鼠睾丸SOD/(CAT+GSH-Px)和p53及Bcl-2表达的影响

[目的]研究锰对大鼠睾丸超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性和p53及Bcl-2表达的影响.[方法]将健康雄性SD大鼠随机分为3组.即空白对照组、15 mg/kg MnCl2组、30 mg/kg MnCl2组,各组给药途径均为腹腔注射,5 d/w,1次/d.大鼠于第6周末处死,取双侧睾丸.采用化学比色法检测睾丸组织SOD、CAT、GSH-Px活性,采用免疫组化法检测p53和Bcl-2的表达.[结果]①与空白对照组比较,15mg/kg MnCl2组和30 mg/kg MnCh组睾丸SOD/(CAT GSH-Px)比值均下降,有统计学意义(P<0.05,P<0.01).(②与空白对照组比较,15 mg/Kg MnCl2组和30 mg/kg MnCl2组生精细胞p53阳性细胞率显著升高,有统计学意义(P<0.01);30 mg/kg MnCl2组与15 ms/ks MnCl2组比较,生精细胞p53阳性细胞率显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).③30 mg/kg MnCl2组生精细胞Bcl-2阳性细胞率显著低干其余各组,有统计学意义(P<0.01).[结论]①15 mg/kg MnCl2可诱发大鼠睾丸组织SOD/(CAT GSH-Px)比值降低和生精细胞p53选择性高表达.②30 ms/kg MnCl2,可诱发大鼠生精细胞Bcl-2选择性低表达.(③大鼠睾丸组织SOD/(CAT GSH-Px)比值下降、生精细胞p53选择性高表达和Bcl-2选择性低表达可能是促生精细胞凋亡的重要原因.     

锰对大鼠生精细胞凋亡及caspase-3表达的影响

[目的]研究染锰大鼠睾丸生精细胞凋亡和caspase-3表达的变化。[方法]雄性SD大鼠48只随机分为6组:空白对照组,15mg/kg、30mg/kgMnCl2组。8只/组。15mg/kg、30mg/kgMnCl2组分别染锰(MnCl2·4H2O)4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水(NS),给锰及生理盐水途径均为腹腔注射,5d/周,1次/d,大鼠分别于第4周末和第6周末处死,取睾丸和附睾作以下检测:①检测精子数量;②应用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术(terminal deoxynucleotidy transferase mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡指数(apoptosis index,AI);③免疫组组织化学链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(streptavidin-biotin-peroxidase complex,SABC)法检测生精细胞caspase-3表达。[结果]①与空白对照组比较,各染锰组精子数量均显著降低(P﹤0.05),生精细胞AI均升高(P﹤0.05),caspase-3阳性细胞率均显著升高(P﹤0.05)。②染锰剂量相同,染锰6周组与染锰4周组比较,精子数量均显著降低,生精细胞AI与caspase-3阳性细胞率均显著升高(P﹤0.05)。③染锰时间相同,30mg/kgMnCl2组与15mg/kgMnCl2组比较,精子数量均显著降低(P﹤0.05),生精细胞AI和caspase-3阳性细胞率均显著升高(P﹤0.05)。④各组大鼠精子数量和生精细胞AI呈负相关(r=-0.700,P﹤0.05),和生精细胞caspase-3阳性细胞率呈负相关(r=-0.870,P﹤0.05),生精细胞AI和caspase-3阳性细胞率呈正相关(r=0.855,P﹤0.05)。[结论]过量锰诱发大鼠生精细胞caspase-3高表达,从而导致凋亡增加,精子数量减少,这可能是大鼠生精障碍的主要机制。     

锰对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的研究氯化锰对大鼠生精细胞凋亡的影响,探讨锰诱发生精细胞凋亡的机制。方法24只健康雄性SD大鼠随机分为3组。锰染毒组给MnCl2.4H2O(15 mg/kg,30 mg/kg)4周,对照组给予生理盐水,各组给药途径为腹腔注射,1次/d,5 d/周。应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)技术检测睾丸生精细胞凋亡;免疫组化法检测生精细胞p53和Bcl-2蛋白的表达;化学比色法检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果生精细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)在锰染毒15 mg/kg组为(1.05±0.19)%,锰染毒30 mg/kg组为(1.80±0.21)%,均明显高于对照组(0.48±0.01)%(P<0.01);p53阳性细胞率在锰染毒15 mg/kg组为(9.83±1.15)%,锰染毒30 mg/kg组为(18.23±2.15)%,均明显高于对照组(3.72±0.35)%(P<0.01);锰染毒30 mg/kg组Bcl-2阳性细胞率(21.26±2.50)%明显低于对照组(52.46±3.57)%和锰染毒15 mg/kg组(51.34±3.87)%(P<0.01)。锰染毒组睾丸组织SOD、CAT及GSH-Px活力均明显低于对照组(P<0.01)。结论锰诱导的p53高表达、Bcl-2低表达以及抗氧化能力的下降可能是大鼠生精细胞凋亡增加的重要原因之一。     

染锰鼠支持细胞波形蛋白表达与精子数量关系

目的探讨染锰鼠支持细胞波形蛋白(vimentin,VM)表达与精子数量关系。方法雄性SD大鼠48只随机分为6组,15,30 mg/kg MnCl2组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等溶生理盐水(4,6),腹腔注射;取睾丸和附睾分别检测支持细胞VM表达(免疫组织化学法)和精子数量。结果染锰15,30 mg/kg 4和6周组支持细胞波形蛋白阳性细胞率分别为(30.55±2.33)%,(9.01±2.27)%和(7.62±1.08)%,(2.33±0.63)%;精子数量分别为(0.53±0.11),(0.47±0.06)和(0.26±0.07),(0.23±0.04)×107/mL;与空白对照组比较,各染锰组支持细胞VM阳性细胞率及精子数量均明显降低(P0.01),并呈一定时间-效应和剂量-效应关系;各组大鼠精子数量和支持细胞VM阳性细胞率呈正相关(r=0.895,P0.01)。结论过量锰可诱发支持细胞VM表达降低,导致大鼠精子数量减少,可能是大鼠生精障碍的主要分子机制之一。     

锰对大鼠生精细胞凋亡及p53和Bcl-2表达的影响

目的 研究氯化锰对大鼠生精细胞凋亡及p53、Bcl-2表达的影响.方法 将24只健康雄性SD大鼠随机分为3组,即15和30 mg/kg染锰组和0 mg/kg(阴性对照)组,腹腔注射给药,每天1次,每周5 d,连续4周.停药2周后,称重并应用电镜和原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL法)检测睾丸生精细胞凋亡;免疫组化S-P法检测生精细胞p53和B淋巴细胞瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)蛋白的表达.结果 电镜下各组大鼠可见生精细胞凋亡表现;15和30 mg/kg组生精细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)和p53阳性细胞率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),且30 mg/kg组高于15 mg/kg组,差异有统计学意义(P＜0.01).30 mg/kg组Bcl-2阳性细胞率明显低于0和15 mg/kg组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 锰可诱导大鼠生精细胞凋亡,p53表达上调和Bcl-2表达下调可能是生精细胞凋亡增加的重要原因之一.     

锰对大鼠睾丸抗氧化能力及生精细胞凋亡的影响研究

目的:研究氯化锰对SD大鼠睾丸抗氧化能力和生精细胞凋亡的影响。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为3组。染锰组给予MnCl2.4H2O(15mg/kg、30mg/kg)4周,对照组给予生理盐水,各组给药途径均为腹腔注射,每天1次,每周5天。应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记技术检测睾丸生精细胞凋亡;化学比色法检测睾丸组织超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果:生精细胞凋亡指数染锰组明显高于对照组,且随染锰剂量的增加而升高(P<0.01);睾丸组织超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性均染锰组明显低于对照组(P<0.01)。结论:锰诱导的抗氧化能力下降可能是大鼠生精细胞凋亡增加的重要原因之一。     

染锰大鼠生殖激素水平与生精细胞凋亡基因表达

目的 探讨染锰大鼠血清生殖激素水平与生精细胞凋亡基因Caspase-3表达关系.方法 雄性SD大鼠48只,随机分为对照组和15,30 mg/kg氯化锰组,分别染锰4,6周,乙醚麻醉,眼眶取血,分离双侧睾丸,称重,采用免疫组织化学方法检测生精细胞caspase-3表达,放射免疫法检测血清睾酮(testosterone,T)、卵泡刺激素(follicle stimulating,FSH)、黄体生成素(luteinizine hormone,LH)水平.结果 30 mg/kg氯化锰组染锰4,6周,血清中T、FSH、LH含量分别为(2.78±0.74)和(2.76±0.81)nmoL/L,(0.44±0.03)和(0.57±0.03),(0.19±0.02)和(0.19±0.03)U/L;Caspase-3表达水平分别为(65.49±11.34)和(82.65±5.26);染锰组大鼠生精细胞Caspase-3表达与血清T含量呈负相关(r=-0.799,P<0.01),与血清中FSH、LH水平呈正相关(r=0.735,r=0.737,P<0.01).结论 染锰大鼠血清T水平降低,FSH和LH水平上升是生精细胞caspase-3表达上调的主要原因.     

染锰大鼠生精细胞天冬氨酸特异性的半胱氨酸酶-3和增殖细胞核抗原表达及锌的拮抗作用

目的研究Mn Cl2对生精细胞天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨Mn诱发大鼠生精细胞caspase-3和PCNA表达的机制及Zn的拮抗作用。方法雄性SD大鼠80只随机分为空白对照组,Zn Cl2对照组,15和30 mg/kg Mn Cl2组;15和30 mg/kg Mn Cl2+Zn Cl2组。Mn Cl2组染Mn 4和6周,Zn Cl2对照组和Mn+Zn组始终或染Mn 4周后给予100 mg Zn2+/kg饲料2周。采用免疫组织化学法检测睾丸caspase-3和PCNA表达。结果各染Mn组、Mn+Zn组及染Mn剂量相同的6周组,染Mn时间相同的30 mg/kg Mn Cl2组caspase-3阳性细胞率均显著升高,Mn+Zn组显著降低。染Mn 4周PCNA阳性细胞率显著降低,染Mn 6周组和Mn+Zn组由于残存细胞数量减少反而升高。结论染Mn15 mg/kg 4周可诱发大鼠生精细胞caspase-3表达且抑制PCNA表达,且随染Mn时间和剂量的增加而增加,两者分别存在一定时间-效应和剂量-效应关系;摄入含Zn100 mg/kg的食物可拮抗Mn诱发生精细胞caspase-3表达。     

谷胱甘肽对锰染毒大鼠抗氧化能力的影响

目的研究谷胱甘肽(GSH)对锰染毒大鼠抗氧化能力的影响。方法将48只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为6组,即空白对照组(生理盐水)、拮抗组(1 mmol/kg GSH)、低剂量染毒组(15 mg/kg MnCl2.4H2O)、高剂量染毒组(30mg/kgMnCl2.4H2O)、低剂量染毒拮抗组(15 mg/kgMnCl2.4H2O和1 mmol/kgGSH)和高剂量染毒拮抗组(30 mg/kg MnCl2.4H2O和1 mmol/kgGSH),每组8只。采用化学比色法检测血清和睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,并对睾丸组织进行病理学检查。结果与空白对照组比较,高剂量染毒组血清和睾丸组织SOD、CAT及GSH-Px活力均下降(P<0.01);低剂量染毒组血清SOD、CAT、GSH-Px活力和睾丸SOD活力均下降(P<0.05,P<0.01);高剂量染毒拮抗组血清和睾丸组织SOD和CAT活力明显下降(P<0.01)。与相同剂量的单纯锰染毒组比较,低剂量染毒拮抗组血清和睾丸组织SOD、CAT、GSH-Px活力均恢复至对照组水平;高剂量染毒拮抗组血清SOD、CAT、GSH-Px活力均明显上升(P<0.01),睾丸组织SOD和GSH-Px活力明显上升(P<0.01)。病理检查可见低剂量染毒组和高剂量染毒组睾丸生精小管呈现不同程度的变性,生精上皮变薄,管腔内精子较少或缺如。低剂量染毒拮抗组睾丸病理学的改变基本恢复正常;高剂量染毒拮抗组睾丸仍然可见变性的生精小管,管腔内精子较少见。结论GSH可拮抗锰染毒大鼠抗氧化能力的降低,对机体起一定的保护作用。     

大气细颗粒物水溶成分对大鼠胸主动脉舒缩功能的影响

目的探讨大气细颗粒物(PM2.5,)水溶成分静脉染毒后1、6 h,对大鼠胸主动脉血管环收缩、舒张功能的影响.方法 雄性Wistar大鼠30只,分为空白对照组、1 h对照组、6 h对照组、染毒1 h组、染毒6 h组,每组6只.染毒组以PM2.5水溶成分(1 ml/kg)尾静脉注射1、6 h后,分别以25%乌拉坦腹腔注射(0.4 ml/100 g)麻醉后,迅速开胸取大鼠胸主动脉,制备血管环,置于张力换能器进行实验.1 h,6 h对照组以0.9%氯化钠注射液(1 ml/kg)尾静脉注射,处理同染毒组.结果 空白对照组、1 h对照组、6 h对照组三组间血管环舒缩反应差别无统计学意义.染毒1 h后,胸主动脉血管环对60 mmol/L KCi的收缩反应减弱,6 h后有升高趋势,但仍低于对照组.10-6mol/L去甲肾上腺素(NE)预收缩的血管环:乙酰胆碱(ACh)浓度在10-5moL/L、10-7moL/L水平,染毒后1 h舒张率降低.ACh浓度在10-5～10-7mol/L水平,染毒6 h组舒张率较染毒1 h组升高;硝普钠(SNP)浓度在10-5～10-9mol/L水平,染毒后1 h舒张率降低,在10-6mol/L、10-9mol/L水平,染毒后6 h组舒张率较染毒1 h组升高,在10-5～10-7moL/L水平,染毒6 h组舒张率仍低于对照组.结论 PM2.5水溶成分静脉染毒1 h后引起血管收缩抑制、舒张下降,6 h后该作用减弱.     

谷胱甘肽拮抗锰致雄性大鼠生殖损伤的研究

目的:研究谷胱甘肽(GSH)对锰致雄性大鼠睾丸氧化损伤的拮抗作用。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为3组进行急性和亚急性染毒。染锰组腹腔注射30mg/kgMnCl2.4H2O染毒1周(急性染毒)和4周(亚急性染毒),GSH拮抗组染毒后再给予2周1mmol/kgGSH,对照组染毒后给予生理盐水。TUNEL法检测生精细胞凋亡;化学比色法检测睾丸丙二醛和谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果:急性锰染毒时,染锰组生精细胞凋亡指数和睾丸丙二醛含量高于对照组和GSH拮抗组(P<0.01);各组间谷胱甘肽过氧化物酶活性无差异。亚急性锰染毒时,染锰组生精细胞凋亡指数和睾丸丙二醛含量高于对照组和GSH拮抗组(P<0.01),GSH拮抗组高于对照组(P<0.01);染锰组睾丸谷胱甘肽过氧化物酶活性低于对照组和GSH拮抗组(P<0.01)。结论:及时补充谷胱甘肽可通过抑制脂质过氧化作用而拮抗锰引起的雄性大鼠生精细胞凋亡。     

高脂饮食对1,2-二甲基肼诱导大鼠肠道肿瘤的影响

目的用1,2-二甲基肼诱导大鼠肠道肿瘤,同时观察高脂对1,2-二甲基肼诱导大肠肿瘤的影响。方法Westar大鼠50只,鼠龄7周,根据不同饮食及是否腹腔注射二甲基肼将大鼠分为4组：标准饮食对照组（n=10）、标准饮食±二甲肼诱导成瘤（SDT,n=15）组、高脂饮食对照组（n=10）、高脂饮食±二甲肼诱导成瘤（HFDT,n=15）组。实验18周后处死大鼠,酶联免疫吸附法检测大鼠血清甘油三酯（TG）、肿瘤坏死因子（TNF）-α及结肠TNF-α、白介素-6（IL-6）水平;取出肠道,观察肿瘤部位、数量、大小等,制作病理切片,观察组织学改变,免疫组织化学法检测TNF-α、Ki-67在正常组织、肿瘤中的分布。结果实验结束时SDT组大鼠死亡率20．00％、成瘤率75．00％、荷瘤率117％,HFDT组大鼠死亡率26．67％、成瘤率81．82％、荷瘤率191％,SDT组和HFDT组死亡率、成瘤率（P=0．545）及荷瘤率（χ^2=1．343,P=0．247）差异均无统计学意义。SDT组中肿瘤平均体积〉0．05cm^3个数占28．57％,HFDT组中肿瘤平均体积〉0．05cm^2个数占66．67％,两组肿瘤平均体积差异具有统计学意义（P=0．030）。高脂饮食大鼠血清TG[（1．39±0．31）mmol／L]、TNF-α[（124．80±21．69）ng／L]较标准饮食大鼠血清TG[（0．46±0．20）mmol／L]、TNF-α[（85．83±17．45）ng／L]显著升高（P值均=0．000）。高脂饮食大鼠结肠黏膜TNF-α[（6．22±0．63）ng／g]、IL-6[（13．50±0．67）ng／g]较标准饮食大鼠结肠黏膜TNF-α[（2．33±0．44）ng／g]、IL-6[（7．31±0．41）ng／g]显著升高（P=0．020,P=0．000）;高脂饮食对照组Ki-67阳性表达率40％,较标准饮食对照组10％显著升高（P=0．028）;HFDT组Ki-67阳性表达率90．48％较SDT组50％显著升高（P=0．015）。结论高脂饮食可能通过导致大鼠血清TG、TNF-α上升,上调结肠黏膜炎症因子TNF-α、IL-6及增殖细胞核抗原Ki-67的表达,从而介导炎症进展及细胞增殖,最终影响肿瘤形成及进展,有关高脂对1,2-二甲基肼诱导肠道肿瘤的作用仍需更深入的研究。     

亚慢性染毒B[a]P与大鼠海马细胞凋亡及学习记忆损伤的关系

[目的]观察亚慢性染毒苯并[a]芘（benzo[a]pyrene,B[a]P）对大鼠海马细胞凋亡的影响,分析其与学习记忆损伤的关系,探讨B[a]P神经毒性机制。[方法]选取健康雄性SD大鼠48只,饲养一周后根据Morris水迷宫检测结果将其分为空白对照组、溶剂对照组、B[a]P染毒组[0.5、1.5、4.5和10.0mg（/kg.bw）]。隔日腹腔注射染毒90d后,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;流式细胞仪检测海马细胞凋亡。[结果]4.5、10.0mg/kg B[a]P组大鼠平均潜伏期显著高于空白和溶剂对照组和0.5、1.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）;10.0mg/kg B[a]P组大鼠穿越平台次数和平台象限滞留时间百分比显著低于空白和溶剂对照组及0.5、1.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）;4.5mg/kg B[a]P组大鼠穿越平台次数和平台象限滞留时间百分比显著低于空白和溶剂对照组及0.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）;10.0mg/kg B[a]P组大鼠平台象限滞留时间显著低于空白和溶剂对照组及0.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）。10.0mg/kg B[a]P组海马细胞早期凋亡率和总凋亡率显著高于空白和溶剂对照组及0.5、1.5和4.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义（P〈0.05）。Pearson相关性分析结果显示,B[a]P染毒大鼠海马细胞早期凋亡率与平均潜伏期呈正相关（r=0.542,P〈0.05）;海马细胞早期凋亡率与平台象限滞留时间呈负相关（r=-0.395,P〈0.05）、与平台象限滞留时间百分比呈负相关（r=-0.592,P〈0.05）。[结论]亚慢性染毒B[a]P可导致大鼠海马细胞凋亡和学习记忆能力损伤,海马细胞凋亡可能是B[a]P诱发大鼠学习记忆能力损伤的机制之一。     

镉暴露小鼠生精细胞DNA损伤与Bcl-2和Bax表达率及超微结构改变

目的研究镉暴露对小鼠睾丸生精细胞DNA的损伤作用、bcl-2和Bax蛋白表达率及超微结构的变化。方法取24只雄性ICR小鼠随机分为4组，每组6只，分别以1、5、10μmol／kg氯化镉腹腔注射，每天1次，连续5d，设阴性对照生理盐水组。于第6天用单细胞凝胶电泳（single-cell gel electrophoresis，SCGE）技术检测生精细胞DNA损伤情况，免疫组化法测定生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达阳性率，透射电镜观察生精细胞超微结构变化。结果腹腔注射1、5、10μmol／kg氯化镉组小鼠睾丸生精细胞DNA损伤率（分别为35．00％、61．25％、82．50％）明显高于对照组（14．75％），差异有统计学意义（P〈0．01），Bcl-2蛋白表达阳性细胞率明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01），5μmol/kg组Bax蛋白表达细胞阳性率明显高于对照组和1、10μmol／kg组。透射电镜观察显示，3种剂量处理组生精细胞核染色质、核膜、线粒体和内质网超微结构发生不同程度的病理改变，并随着处理浓度的升高，超微结构改变程度加重。结论小鼠镉暴露可导致生精细胞DNA断裂，Bcl-2和Bax蛋白表达率发生变化，细胞超微结构发生病理性改变。     

镉对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响及锌的保护作用

为探讨对镉对睾丸结构和功能损害及锌对其保护作用的分子机制,研究镉对生精细胞凋亡的影响和锌的保护作用,选用２月龄Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠２４只,均分为染镉组、镉加锌组和对照组,分别自腹腔注射氯化镉（２ｍｇ／ｋｇＢＷ）,注射氯化镉同时及其前后２ｈ各注射醋酸锌一次和等量生理盐水,７ｄ后采用原位缺口平移技术（ＩＮＳＴ）检测各组睾丸生精细胞凋亡数目的变化。结果显示与对照组相比,染镉组大鼠睾丸生精细胞凋亡数目明显     

氨茶碱联合纳洛酮治疗早产儿原发性呼吸暂停疗效观察

目的观察氨茶碱联合纳洛酮治疗早产儿原发性呼吸暂停的疗效。方法选择自2003年1月至2008年3月在笔者所在医院新生儿病房住院的诊断为原发性呼吸暂停早产儿70例,随机分为治疗组和对照各35例。两组病例在首次发生呼吸暂停之后,均给予氨茶碱负荷量5mg／kg,于20min内静滴注,12h后给2mg／kg的维持量,每隔12h静脉滴注一次。治疗组同时加用纳洛酮,首次0．1mg／kg静脉注射,继而按0．1mg／kg加入10％葡萄糖注射液20ml以0．02—0．04mg／（kg·h）静脉泵入。结果治疗组显效率71．4％,总有效率96．1％,对照组显效率41．7％,总有效率71．4％,显效率比较,=3．92,P〈0．05,总有效率比较X^2=6．67,P〈0．01,差异均有统计学意义。结论氨茶碱联合纳洛酮治疗早产儿原发性呼吸暂停比单用氨茶碱有显著的疗效,并对减少早产儿的后遗症有重要的意义。     

不同粒径纳米二氧化钛对大鼠氧化应激的影响

目的探讨不同粒径的纳米二氧化钛(TiO2)对大鼠氧化应激的影响。方法将50只SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组以及200、25和15 nm 3种粒径的TiO2染毒组。每天以40 mg TiO2进行皮肤染毒,连续染毒7 d,股动脉取血,检测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)等指标。结果200、25和15 nm TiO2染毒组雌性大鼠血清SOD活性分别为(22.73±5.10)、(18.13±6.02)和(12.87±4.23)U/ml,空白对照和溶剂对照组分别为(28.77±3.05)和(24.43±5.92)U/ml,25 nm TiO2染毒组SOD活性较空白对照组下降(P0.05),15 nm TiO2染毒组较空白对照、溶剂对照和200 nm TiO2染毒组均下降(P0.05),而雄性大鼠各组间SOD活性无明显变化(P0.05);200、25和15 nm TiO2染毒组雌性大鼠血清8-OHdG分别为(7.91±0.66)、(8.02±0.93)和(8.93±0.56)ng/ml,空白对照和溶剂对照组分别为(7.24±0.69)和(7.66±0.69)ng/ml,15 nm TiO2染毒组8-OHdG含量较空白对照、溶剂对照组均升高(P0.05),而雄性大鼠各组间8-OHdG无明显变化(P0.05);CAT活性、MDA含量各组间差异无统计学意义(P0.05)。结论 25 nm和15 nm级TiO2皮肤染毒可引起大鼠氧化应激反应,该反应与TiO2的粒径大小有关,并具有性别差异。     

姜黄素对大鼠肺间质纤维化影响的机制研究

目的 研究姜黄素对大鼠肺间质纤维化的治疗作用及其可能机制.方法 健康雄性SD大鼠80只,随机分为对照组、模型组、泼尼松组和姜黄素组,每组20只.除正常对照组外,其余各组大鼠气管内一次性注入博来霉素诱导肺纤维化.造模后第15天起,姜黄素组和泼尼松组分别给予姜黄素（300 mg/kg）和泼尼松（5 mg/kg）每日灌胃一次,其余两组每日给予1%羧甲基纤维素钠（10 ml/kg）灌胃一次.各组动物分别于造模后第21、28、42及56天随机处死5只,取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化,消化法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量,免疫组化法测定肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）、血小板源性生长因子（PDGF）的表达.结果 姜黄素组肺纤维化程度,肺组织HYP含量在第42和56天显著低于同期模型组[42 d：1.28±0.61 vs 2.28±0.39,P〈0.01;（1.73±0.22）mg/g vs（2.50±0.37）mg/g,P〈0.01;56 d：1.00±0.59 vs 1.73±0.36,P〈0.05;（1.57±0.36）mg/g vs（2.20±0.42）mg/g,P〈0.01],第42天姜黄素组HYP含量显著低于同期泼尼松组（P〈0.05）,肺组织TGF-β1、PDGF蛋白表达于造模后第28、42及56天显著低于模型组（28d：TGF-β1：3642.05±839.31 vs 5067.35±738.39,P〈0.05;PDGF：2957.55±739.16 vs 4457.75±568.39,P〈0.05;42 d：TGF-β1：2689.73±529.22 vs 4089.50±619.37,P〈0.01;PDGF：2834.46±567.16 vs 3239.52±628.26,P〈0.01;56 d：TGF-β1：1968.57±408.36 vs 2968.20±498.42,P〈0.01;PDGF：1083.36±381.35 vs 2019.40±412.36,P〈0.01）,第42、56天显著低于泼尼松组（42 d,TGF-β1：3529.07±981.35,PDGF：2618.34±813.34;56 d,TGF-β1：2530.83±439.37,PDGF：1738.35±536.62,P均〈0.05）,其中第56天时与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化形成阶段应用姜黄素于预能有效减轻肺纤维化程度,可能机制为姜黄素抑制了TGF-β1、PDGF蛋白在肺组织的表达.