CYP2C9、VKORC1基因多态性及患者临床特征对心脏瓣膜置换术后华法林稳态剂量的影响

目的 研究湖北地区汉族人细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体1(VKORC1基因型和临床特征与华法林稳态剂量的相关性.方法 收集2012年3-12月在我院行心脏瓣膜置换术后临床使用华法林的患者131例,记录患者的年龄、身高、体重、国际标准化比值(INR)、华法林稳态剂量等指标.采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PC R-RFLP)技术检测CYP2C9和VKORC1基因型.对基因型及临床特征与华法林稳态剂量进行直线相关及多元回归分析.结果 131例中CYP2C9基因型检测有125例为*1/*1型、6例为*1/*3型、未发现*2突变,*1/*3型较*1/*1型华法林需求量少(P＜0.05);VKORC1基因型检测有105例为AA型、25例为杂合子GA型、1例为纯合子GG型,AA型较GA型华法林需求量少(P＜0.01).相关性及多元回归分析均显示华法林稳态剂量与患者的年龄及不同的基因型有关.结论 在湖北地区汉族人群中,存在CYP2C9和VKORC1基因多态性,同时华法林稳态剂量与年龄及不同的基因型有关.     

VKORC1、CYP2C9、CYP4F2、EPHX1基因多态性对华法林剂量的影响

目的:探讨中国汉族人群VKORC1、CYP2C9、CYP4F2和EPHX1基因多态性对华法林剂量的影响。方法:采用限制性片段多态性技术和碱基淬灭探针技术检测197名心脏机械瓣膜置换术后患者的VKO RC1-1639G>A、CYP2C9 1075A>C、CYP4F2 rs2108622和EPHX1 rs2292566的基因多态性,结合患者的临床特征,分析各因素对华法林剂量的影响。结果:VKO RC1-1639G>A、CYP2C9 1075A>C、CYP4F2 rs2108622、EPHX1 rs2292566基因多态性以及体重和年龄分别解释了30.2%、7.0%、2.8%、3.6%、1.9%和1.7%的华法林个体剂量差异,多因素联合可解释46.7%的华法林个体剂量差异。结论:VKORC1-1639G>A和CYP2C9 1075A>C基因多态性是影响华法林稳定剂量重要的遗传因素;CYP4F2 rs2108622和EPHX1 rs2292566基因多态性以及年龄、体重对华法林的稳定剂量有影响,但较小。     

SYBR Green I实时荧光PCR检测VTKORC1和CYP2C9基因型

目的 建立一种检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因型的SYBR GreenI实时荧光PCR法.方法 提取134例心脏瓣膜置换术患者的外周血基因组DNA.针对VKORC11173C>T和CYP2C9 1075A>C两个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套等位基因特异性引物.PCR反应体系中加入荧光染料SYBR Green I,样本经扩增后结合熔解曲线分析,确定每个样本的基因型.结果 VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型.134例患者中,VKORC1 1173C>T基因型TT、TC和CC分别有111例、21例和2例,各占82.8%、15.7%和1.5%;CYP2C9 1075A>C基因型*1/*1和*1/*3分别有121例和13例,各占90.3%和9.7%,未检出纯合子*3/*3基因型.结论 基于荧光染料SYBR Green I的实时荧光PCR分型方法操作简便、价格低廉、结果准确可靠,适于临床实验室对VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C的基因分型.     

SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测VKORC1和CYP2C9基因型

目的建立一种检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因型的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法。方法提取134例心脏瓣膜置换术患者的外周血基因组DNA。针对VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C两个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套等位基因特异性引物。PCR反应体系中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,样本经扩增后结合熔解曲线分析,确定每个样本的基因型。结果 VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型。134例患者中,VKORC1 1173C>T基因型TT、TC和CC分别有111例、21例和2例,各占82.8%、15.7%和1.5%;CYP2C9 1075A>C基因型*1/*1和*1/*3分别有121例和13例,各占90.3%和9.7%,未检出纯合子*3/*3基因型。结论基于荧光染料SYBR GreenⅠ的实时荧光PCR分型方法操作简便、价格低廉、结果准确可靠,适于临床实验室对VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C的基因分型。     

CYP2C9及VKORC1基因多态性对心脏瓣膜置换术后华法林个体剂量差异的研究

目的 研究湖北地区汉族人细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)基因和维生素K环氧化物还原酶复合体1(VKORC1)基因多态性分布特点及其对华法林稳态剂量的影响.方法 收集2012年3-8月湖北地区汉族临床使用华法林的患者108例作为华法林组,选择同期健康受试者85名为对照组.采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CYP2C9和VKORC1基因型,并比较不同基因型华法林稳态剂量.结果 两组基因型频率和等位基因频率分布比较差异无统计学意义(P＞0.05).华法林组中CYP2C9基因*1/* 3型较*1/*1型华法林稳态剂量小,VKORC1基因AA型较GA型华法林稳态剂量小(P＜0.05,P＜0.01).除了检测的3个多态位点,还发现了50多个变异位点.结论 在湖北地区汉族人群中,存在CYP2C9和VKORC1基因多态性,且不同基因型患者间华法林稳态剂量存在差异,华法林基因相关变异位点需要进一步证实.     

CYP2C9基因多态性对中国心脏机械瓣置换患者华法林初始抗凝效果的影响

目的评价CYP2C9基因多态性对中国心脏机械瓣置换患者华法林初始抗凝效果的影响。方法用Real-time PCR法检测254名中国心脏机械瓣置换患者CYP2C9基因多态性,观察6 d,比较不同CYP2C9基因型患者术后前5 d华法林累积剂量、术后第6 d的INR能否达到治疗窗、INR首次达到治疗窗时间的差异。结果不同CYP2C9基因型患者,术后前5 d华法林累积剂量及首次进入治疗窗的时间均无明显差异(P=0.669,P=0.933);*1/*1基因型患者于术后第6 d进入治疗窗的机会是携带*2和/或*3突变基因患者的4.8倍。结论CYP2C9基因多态性仅影响中国心脏机械瓣置换患者术后第6 d的INR能否进入治疗窗。     

华法林稳定剂量预测模型对新疆肺栓塞患者预测准确性的验证与评价

目的 验证与评价12个华法林稳定剂量预测模型对肺栓塞患者的预测准确性.方法 收集已达到华法林稳定剂量的131例肺栓塞患者完整临床资料,采集每位患者外周血2 mL,用聚合酶链反应-基因芯片杂交技术检测其细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)基因型,并对患者基因型分布...     

IWPC模型对下肢深静脉血栓形成患者 华法林初始低强度抗凝疗效的影响

目的：评价国际华法林药物基因组学联合会（IWPC）模型对下肢深静脉血栓形成患者（DVT）华法林初始抗凝疗效的影响。方法：100例DVT患者随机分为两组：研究组68例和对照组32例,均给予华法林抗凝治疗。研究组患者采用荧光染色原位杂交分析技术进行CYP2C9和VKORC1基因检测,利用IWPC模型计算华法林初始剂量,并根据国际标准化比值（INR）监测结果调整华法林至合适剂量;对照组直接根据INR监测结果调整华法林至合适剂量。比较两组患者在INR首次达标时间、INR达标维持时间、华法林抗凝治疗3、5、7天INR、INR达标率和INR总达标率、7天华法林累积剂量及治疗范围时间（TTR）的差异。结果：研究组患者CYP2C9 1075A＞C基因以AA型为主（91.18%）,C等位基因突变率5.15%,VKORC1 1639AA型79.41%,G等位基因携带率11.03%。研究组患者INR首次达标时间较对照组明显缩短（P＜0.001）,INR达标维持时间明显增加（P=0.02）,华法林抗凝治疗3天INR及INR达标率明显高于对照组（P=0.01）,且TTR为47.27%,较对照组29.01%明显增加（P＜0.001）。结论：IWPC模型有助于提高下肢深静脉血栓形成患者华法林初始抗凝疗效,但其在华法林长期抗凝中的应用价值有待于临床进一步验证。     

CYP2C9和VKORCl基因多态性对肺栓塞患者华法林维持剂量的影响

目的 研究细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)及维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORCl)基因多态性对中国肺栓塞患者华法林维持剂量的影响.方法 对108例INR已稳定达标的中国肺栓塞患者,采用TaqMan MGB探针法,检测CYP2C9*2、*3位点和VKORCl-1639A＞G位点基因型.记录患者的年龄、性别、体重、身高及华法林日平均剂量.结果 VKORCl -1639AG或GG基因型患者华法林稳定日均剂量明显高于AA基因型患者(5.81±1.93vs 3.33±1.11mg,P ＜0.001);CYP2C9*2或*3变异的患者华法林稳定日均剂量低于无变异的患者(2.57±1.31 vs 3.97±1.67mg,P＜0.001);包括患者性别、年龄、身高、体重、CYP2C9和VKORC1基因型等因素在内的华法林稳定剂量预测模型可解释51.1％左右的华法林稳定剂量个体差异(R2=0.511,P＜0.001).结论 CYP2C9和VKORC1基因型检测对指导中国肺栓塞患者个体化应用华法林有一定的临床意义.     

基于CYP2C9和VKORC1基因多态性预测老年房颤患者使用华法林的稳定剂量

目的:探讨CYP2C9和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林稳定剂量的影响,建立适合汉族人群老年房颤患者的华法林给药模型,指导华法林个体化抗凝治疗。方法:对200例口服华法林抗凝的老年患者进行CYP2C9和VKORC1基因分型,比较不同基因型房颤患者华法林日均稳定剂量的差异。采用多元线性回归分析法依据CYP2C9和VKORC1基因型、年龄、身高、体质量、合并用药建立华法林稳定剂量计算公式。结果:INR稳定在2.0～3.0之间时,CYP2C9*1/*1基因型患者日均使用华法林剂量(3.87±0.71)mg显著高于CYP2C9*3基因型患者(1.05±0.59)mg;VKORC1-1639AA基因型患者日均使用华法林剂量(2.94±1.03)mg显著低于VKORC1-1639GA/GG基因型患者(5.76±1.12)mg。通过多元线性回归分析得出华法林稳定剂量公式,建立的回归模型中包含年龄、体质量、合并用药、CYP2C9*3和VKORC1-1639基因型,该模型能解释约56.5%个体间华法林剂量差异。结论:基于CYP2C9和VKORC1基因多态性建立的华法林稳定剂量预测公式,能帮助指导华法林在老年房颤患者中的抗凝治疗。     

CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响

目的:探讨CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响。方法:采用PCR-RFLP法检测157例口服华法林抗凝治疗房颤患者CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性,登记并计算患者INR稳定在1.5~3.0时一周的平均日剂量。比较不同基因型房颤患者华法林日用量的差异。结果:INR稳定在1.5~3.0时,CYP2C9*1/*1个体使用华法林剂量[(2.73±0.80)mg·d^-1]显著高于*1/*3使用量[(1.83±0.51)mg·d^-1];VKORC1TT基因型携带者使用剂量[(2.56±0.79)mg·d^-1]显著低于CT基因携带者使用量[(3.31±0.75)mg·d^-1];CYP4F2 CC基因型使用剂量[(2.58±0.78)mg·d^-1]显著低于TT基因携带者使用量[(3.21±1.04)mg·d^-1];GGCX CC基因型使用剂量[(2.49±0.89)mg·d^-1]显著低于GG基因型使用量[(3.04±0.75)mg·d^-1]。多因素回归分析结果显示CYP2C9、VKORC1和GGCX与个体华法林剂量有关。结论:CYP2C9、VKORC1和GGCX基因多态性可能与个体华法林使用剂量差异有关。     

广州地区CYP2C9/VKORC1基因多态性及行个体化治疗患者凝血指标的改变

目的：调查广州地区汉族人群与华法林代谢相关的CYP2C9/VKORC1基因多态性分布特征,并了解经验用药患者与根据基因型进行个体化抗凝治疗患者凝血指标（TT、PT、PT-INR、FIB）的改变。方法：选取2015年1月至12月住院或门诊676例患者,采用基因芯片法进行CYP2C9/VKORC1基因多态性检测,分析基因型频率和等位基因频率,了解广州地区汉族人群CYP2C9/VKORC1基因多态性分布特征和凝血情况。随机选取初期2.5~3 mg·d^-1经验用药组（A组）服用华法林患者91例;经验用药一段时间后进行了CYP2C9/VKORC1基因多态性检测,并根据基因型行个体化用药（B组）。2组患者均按要求定期检测凝血指标。结果：广州地区汉族人群CYP2C9/VKORC1基因型*1*1/AA占74.567%;*1*1/GA占16.57%;*1*3/AA占6.21%;*1*3/GA和*1*1/GG各占1.18%;*1*2/AA和*1*3/AA各占0.15%。凝血指标（TT、PT、PT-INR、FIB）A组依次为（13.97±1.43）s、（16.74±8.34）s、（1.47±0.77）INR、（3.34±0.90）s,B组依次为（13.76±1.17）s、（21.71±11.40）s、（1.96±0.90）INR、（3.63±0.92）s;经配对资料t检验,TT 2组间无显著差异（P>0.05）;PT和PT-INR 2组间均有非常显著差异（P<0.01）;FIB A组与B组间有显著差异（P<0.05）。A组、B组患者在治疗过程中PT-INR控制在2~3 INR抗凝治疗理想范围的分别占13.6%和23.57%,经χ²检验有显著差异（P<0.05）。结论：广州地区汉族人群CYP2C9/VKORC1呈基因多态性,因此华法林按传统经验用药抗凝治疗模式存在一定的盲目性和潜在的危险性,以基因为导向的个体化抗凝治疗为临床在调整华法林抗凝治疗方案提供了科学依据,减少不良事件的发生率。     

CYP2C9 VKORC1基因多态性指导对非瓣膜性心房颤动患者华法林剂量的影响

目的 探讨CYP2C9、VKORC1基因多态性对非瓣膜性心房颤动（NVAF）患者华法林应用剂量的影响。方法 选择合肥市第二人民医院2017年11月至2019年10月收治的214例NVAF患者,采用随机数字表法分为基因指导组（69例）与对照组（145例）,基因指导组检测VKORC1、CYP2C9基因多态性,对照组按常规剂量给予华法林,比较两组患者华法林起效剂量、有效剂量、起效时间及第14、21天达稳定剂量患者比例等指标。结果 基因指导组患者在华法林应用初始剂量为（1.67±1.63）mg、稳定剂量为（2.02±0.94）mg,均低于对照组,起效时间为（7.62±2.87）d,短于对照组短,差异有统计学意义（P<0.05）。CYP2C9、VKORC1组华法林应用初始剂量、稳定剂量均低于对照组,起效时间短于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。基因指导组第14、21天达稳定剂量患者比例（76.44%、98.27%）高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 VKORC1、CYP2C9基因多态性检测结合NVAF患者临床特点可为临床精准合理应用华法林提供参考。     

A case study of acenocoumarol sensitivity and genotype-phenotype discordancy explained by combinations of polymorphisms in VKORC1 and CYP2C9

AIMS: To determine the cause of a genotype-phenotype discordancy for acenocoumarol sensitivity. Methods A patient, highly sensitive to acenocoumarol, and previously determined to carry only a single CYP2C9*3 allele, was genotyped for additional functionally defective alleles in the CYP2C9 and VKORC1 genes. Family members were also analyzed to trace the pedigree. Results The acenocoumarol-sensitive patient was found to possess, in addition to CYP2C9*3 allele, a CYP2C9*11 allele and the VKORC1 AA diplotype which were all traced back through the parental lines. Conclusions Acenocoumarol sensitivity in this subject is the consequence of inheritance of multiple functionally defective alleles in both the CYP2C9 and VKORC1 genes. The study provides additional data in support of diminished CYP2C9 activity due to the presence of the rare *11 allele.     

中国汉族患者CYP2C9基因多态性和年龄对华法林剂量的影响

目的：研究中国汉族患者细胞色素P450（CYP）2C9基因多态性和年龄对华法林剂量的影响,以利于其剂量的调整。方法：2008年4月至2009年3月在首都医科大学附属北京友谊医院服用华法林达稳定状态的住院患者161例纳入研究。患者被分为2组：老年组和成年组。老年组男55例,女45例,平均年龄（72±6）岁;成年组男34例,女27例,平均年龄（49±8）岁。记录患者所服用的华法林剂量、国际标准化比值（INR）、发生抗凝过量和出血的病例、抗凝治疗达稳定剂量-效应关系的时间;应用ABI3700DNA测序仪检测2组患者CYP2C9基因型,比较不同基因型和不同年龄患者华法林的维持剂量、治疗初始阶段抗凝过量发生率、出血发生率以及达稳定剂量-效应关系的时间。结果：2组患者CYP2C9AA基因型和AC基因型分布差异无统计学意义（P〉0.05）。AC型患者华法林维持剂量明显低于AA型患者[（2.40±0.96）mg比（2.73±0.65）mg,P〈0.01];在AA和AC型患者中,老年组患者华法林维持剂量均明显低于成年组患者[（2.47±0.48）mg比（3.24±0.85）mg,（2.08±0.71）mg比（2.72±1.04）mg,均P〈0.01]。华法林治疗初始阶段,AC型患者抗凝过量发生率明显高于AA型患者（35.0%比5.7%,P〈0.01）;在AA型患者中,老年组患者抗凝过量发生率明显高于成年组（9.3%比0,P〈0.05）。AC型患者出血发生率明显高于AA型患者（30.0%比5.0%,P〈0.05）;在AA型患者中,老年组患者出血发生率明显高于成年组（8.1%比0,P〈0.05）。AC型患者应用华法林达稳定剂量-效应关系的时间明显长于AA型患者[（21.4±3.2）d比（10.0±3.5）d,P〈0.01],相同基因型老年组与成年组患者达稳定剂量-效应关系的时间比较差异无统计学意义。结论：中国汉族患者CYP2C9基因型和年龄均可影响华法林的治疗剂量,CYP2C9基因多态性的检测结果可作为指导华法林剂量的依据。     

基于连接酶反应快速检测华法林相关基因VKORC1、CYP2C9多态性

目的：建立基于连接酶反应检测华法林相关基因分型分布的新方法。方法：设计多重PCR体系,构建多重PCR/连接酶检测方法检测华法林相关基因（VKORC1、CYP2C9）多态性,并用本方法检测207份北方汉族人血样DNA。结果：本研究检测结果未发现rs1799853（CYP2C9＊2）突变。CYP2C9＊3,VKORC1：1173C〉T,VKORC1：3730G〉A,VKORC1：-1639G〉A等4个SNP位点的发生率分别为4.35%、5.80%、5.31%、6.76%。位于CYP2C9第三个内含子的rs4086116发生率为10.14%。结论：本方法可靠、迅速,自动化程度高,检测结果与既往报道相符。     

胺碘酮和CYP2C9、VKORC1基因型对华法林抗凝效果的影响分析

分析胺碘酮在不同的CYP2C9和VKORC1分型患者对华法林的抗凝作用的影响。纳入从2008年9月至2009年11月某三甲医院应用华法林的入院患者,收集患者一般信息、合并用药及其他临床相关数据,检测患者VKORCl和CYP2C9基因型;比较使用或未使用胺碘酮治疗患者抗凝稳定期INR值及华法林用量,纳入基因分型进行华法林/胺碘酮相互作用的亚组分析。结果未发现胺碘酮应用患者华法林稳定期用量和INR值的统计学差异,基因型亚组差异无统计学意义。这说明院内短期合并使用胺碘酮患者对华法林稳定剂量和INR值无显著影响。