HPLC测定黔产钩藤不同部位钩藤碱和异钩藤碱的含量

目的 HPLC测定黔产钩藤不同部位中钩藤碱和异钩藤碱的含量,并比较其差异。方法 以钩藤碱、异钩藤碱为对照品,采用CAPCELL PAK C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.1%三乙胺水溶液（1%磷酸调pH=9）为流动相,流速1 mL·min^-1,检测波长245 nm,柱温30℃,进样量10µL。结果 钩藤碱与异钩藤碱分离良好,线性、重复性以及回收率均符合要求,钩藤不同部位中的含量存在差异,由高到低依次为皮 > 茎 > 带钩茎枝 > 叶,而茎薄壁组织与木质部未检测到钩藤碱与异钩藤碱。结论 该含量测定结果为钩藤资源的充分利用提供了科学依据。     

HPLC法测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量

目的建立中药钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量的高效液相色谱检测方法,为中药钩藤中有效成分的含量测定提供科学的参考。方法高效液相色谱条件为:色谱柱Phenomenex C18(250nm×4.0nm,5μm),流动相:甲醇-水(55∶45),紫外检测波长:254nm,流速:1.0mL/min,柱温:28℃,进样量:20μL。结果以峰面积为纵坐标浓度为横坐标,计算得到钩藤碱和异钩藤碱回归方程分别为Y=0.999E+6x-21133,R2=0.9998和Y=1.008E+6x-13556,R2=0.9999。结果显示钩藤碱和异钩藤碱分别在0.244～1.534μg和0.226～1.288μg浓度范围内其浓度与峰面积具有良好的线性关系。另外本法在精密度、稳定性、重复性上均取得了较好结果。结论高效液相色谱法测定钩藤中藤碱和异钩藤碱含量,具有快速、简便、重复性好的特点,值得在中药含量测定上大力推广应用。     

高效液相色谱法测定钩藤中钩藤碱,异钩藤碱含量

钩藤［Ｕｎｃａｒｉａｒｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌａ（Ｍｉｑ）Ｊａｃｋｓ］为常用中药,具有清热镇惊、平肝熄风功能,钩藤中已分离出３０多种化合物,主要为吲哚类生物碱,评价钩藤及其制剂质量多以钩藤总生物碱或钩藤碱含量为指标,测定钩藤碱方法有薄层扫描法［１］和高...     

HPLC法测定不同煎剂中钩藤碱和异钩藤碱煎出效率

目的:测定两种不同方剂中钩藤碱与异钩藤碱煎出效率,并得到其最佳煎煮时间.方法:采用HPLC法,色谱柱为C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm):流动相:甲醇-水=68:32(含0.2％三乙胺水溶液,冰乙酸调pH=7.0),流速为0.8mL/min,波长254nm,柱温30℃.结果:钩藤碱和异钩藤碱分别在0.0021～0.05mg/mL(r2=0.9997)和0.0023～0.872mg/mL(r2=0.9998)范围内有良好的线性关系.讨论:钩藤饮片在不同方剂中应用煎法后下时,最佳煎出效率不一致.天麻钩藤饮中11分钟最佳,半夏天麻钩藤汤中13分钟最佳.     

钩藤植物不同药用部位中钩藤碱的含量分析

目的 分析广西不同产地钩藤植物不同药用部位钩藤碱的含量.方法 采用HPLC法分别测定10批钩藤药材中带钩茎枝、无茎枝钩、无钩茎枝、主杆和叶的钩藤碱含量.采用Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(含2 mmol·L-1三乙胺,冰乙酸调pH7.5)(64∶36),流速1.0 mL· min-1,检测波长254 nm.结果 广西10个产地钩藤植物各个不同部位大部分可检出钩藤碱成分,钩藤碱的含量主杆＞带钩茎枝、无茎枝钩、无钩茎枝＞叶.结论 钩藤植物不同药用部位大部分含钩藤碱成分,这为扩展钩藤植物的药用部位、充分利用钩藤资源提供了试验依据.     

异钩藤碱药动学及其含量测定方法研究概述△

目的:归纳异钩藤碱药动学及其含量测定方法的研究进展。方法:查阅国内外有关文献进行综合分析。结果:异钩藤碱是中药钩藤中的主要生物碱之一,目前主要采用HPLC、反相HPLC等方法检测动物组织和血液中异钩藤碱浓度,并进行了异钩藤碱在大鼠、兔、猫体内的药动学研究;采用HPLC、超高效液相色谱、非水毛细管电泳、高效毛细管电泳、薄层色谱傅里叶变换表面增强拉曼散射法测定钩藤药材中异钩藤碱的含量。结论:虽然对异钩藤碱药动学及其含量检测方法研究取得了一定成果,随着科技发展和高端检测仪器的应用,还需采用更加快速、便捷、精确的检测方法,为异钩藤碱今后的进一步研究和开发提供技术支撑。     

钩藤药材中异钩藤碱含量的超高效液相色谱和高效液相色谱法的测定

目的对超高效液相色谱和高效液相色谱法在钩藤药材中异钩藤碱含量测定中的应用情况进行分析探讨,为今后的研究工作提供可靠的参考依据。方法试验中高效液相色谱法所需色谱柱为Alltech C18柱,流动相为乙腈-水,流速为1.0 mL/min,检测波长为246 nm,柱温为25℃,超高液相色谱法色谱柱为Waters AC-QIITY UPLCTMT3 C18柱,流动相为乙腈-水,流速为0.6 mL/min,检测波长为246 nm,柱温为50℃。结果对比发现两种检测方法的检测结果一致,无明显差异。结论采取超高液相色谱法和高效液相色谱法对钩藤中钩藤碱以及异钩藤碱含量进行测定的方法简单、可靠,值得关注并推广。     

高效液相色谱法测定小儿七星茶冲剂中钩藤碱含量

目的建立小儿七星茶冲剂中钩藤碱的含量测定方法.方法以高效液相色谱法测定,色谱柱Phenomexne BDSC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相甲醇-水(加0.5%三乙胺,冰醋酸调节pH5.2)(7030);检测波长为254nm.结果钩藤碱线性范围为10.8～64.8μg,平均回收率91.34%,RSD为1.88%.结论方法可靠,简单可行,为控制小儿七星茶冲剂的质量提供了科学依据.     

反相高效液相色谱法测定安神养血口服液中钩藤碱含量

目的研究安神养血口服液的质量标准。方法采用反相高效液相色谱（RP—HPLC）法,色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-0．02％三乙胺（70：30）,流速为1．0mL／min,检测波长为254nm。结果钩藤碱质量浓度在5．0-50．0μg／L范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为98．8％,RSD=1．15％（n=6）。结论RP—HPLC法操作简便、重现性好、结果准确,可作为安神养血口服液的质量控制方法。     

高效毛细管电泳法测定钩藤中的钩藤碱

目的分离钩藤碱与异钩藤碱,测定钩藤中的钩藤碱。方法采用高效毛细管电泳法,运行缓冲液为0.05 mol.L-1硼砂溶液(pH6.9)-0.02 mol.L-1羟丙基-β-环糊精和0.05 mo.lL-1胆酸钠的甲醇溶液(85:15),操作电压为12 kV,温度为40℃,检测波长为250 nm。结果钩藤碱0.025~0.496 mg.ml-1与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),加样回收率为99.8%,RSD=1.91%。结论所用方法可快速有效地分离钩藤碱及异钩藤碱,并测定植物中的钩藤碱。     

HPLC测定广西产钩藤药材中的钩藤碱

目的评价广西不同产地钩藤Uncaria rhynchophylla的药材质量,确定药材的最佳采收期。方法采用HPLC测定28批不同产地和1个产地不同时期钩藤药材钩藤碱的含量,采用Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(含0.002 mol.L-1三乙胺,用冰乙酸调pH7.5)(64∶36),流速1.0 mL.min-1,检测波长254 nm。结果 28批不同产地钩藤药材中有11批药材能检出钩藤碱,但含量差异较大;有17批药材未能检出钩藤碱成分;不同时期钩藤中钩藤碱的动态积累差异较大。结论广西不同产地钩藤药材的质量有一定差异;钩藤药材于秋、冬二季采收似乎较合理。     

高效液相色谱法测定新乐康片中钩藤碱的含量

目的建立新乐康片中钩藤碱的含量测定方法。方法采用HPLC法,PhenomexneBDSC18柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-0．5％三乙胺（冰醋酸调节pH值5．2）（70：30）;检测波长为254nm;流速为0．8mL·min^-1,柱温为室温。结果钩藤碱进样量在0．0102～0．0612μg与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率101．7％,RSD为1．87％。结论该方法可靠、简单可行,为控制新乐康片的质量提供了科学依据。     

Stereoselective in vitro metabolism of rhynchophylline and isorhynchophylline epimers of Uncaria rhynchophylla in rat liver microsomes

1.?The objective was to investigate the underlying mechanism of the stereoselectivity in the metabolism of rhynchophylline (RIN) and isorhynchophylline (IRN) epimers in rat liver microsomes (RLM).

2.?After incubation, eight metabolites of RIN (M1-5) and IRN (M6-8) reacted at A- and C-ring were identified using LC-Q-TOF/MS. Metabolic pathways included oxidation, hydroxylation, N-oxidation and dehydrogenation. In addition, hydroxylation at A-ring was the major metabolic pathway for RIN whereas the oxidation at C-ring was the major one for IRN.

3.?Enzyme kinetics showed that the intrinsic clearance (CL_int) for IRN elimination was 1.9-fold higher than RIN and the degradation half-life (T_1/2) of RIN was 4.7-fold higher than that of IRN, indicating IRN was more favorable to be metabolized than RIN in RLM.

4.?Data from chemical inhibition study demonstrated CYP3A was the predominant isoform involved in the metabolic elimination of both epimers, as well as the formation of M1-8.

5.?In conclusion, data revealed that due to the spatial configurations at C-7 position, RIN and IRN epimers possessed different hepatic metabolic pathways and elimination rates which were mainly mediated by CYP3A.     

HPLC法测定安乐片中钩藤碱和异钩藤碱的含量

目的：建立安乐片中钩藤碱和异钩藤碱的含量测定方法。方法：用高效液相色谱法Agilent XDB C₁₈(250 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-0.2%氨水溶液(60:40)为流动相;检测波长为245nm,流速为1 mL.min_-1,柱温25 ℃。结果：钩藤碱进样量在0.0285～0.7133ug(r=0.9999)与峰面积线性关系良好;异钩藤碱进样量在0.0166～0.416ug(r=0.9998)范围内线性良好, 钩藤碱的平均回收率为98.61%,RSD为1.56%,异钩藤碱的平均回收率为97.49%,RSD为1.27%。结论：本法灵敏、准确,专属性强,能简便有效的控制安乐片中钩藤碱和异钩藤碱的含量。     

非水毛细管电泳法测定钩藤中的钩藤碱和异钩藤碱

目的 建市同时测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱含量的方法.方法 采用非水毛细管电泳法,运行缓冲液为0.05 mol·L~(-1)的醋酸铵甲醇溶液(冰醋酸凋pH6.4),操作电压25 kV,温度为20℃,检测波长为239 nm.结果 钩藤碱0.014～0.570mg·mL~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),加样同收率为98.8%,RSD=2.34%;异钩藤碱0.008～0.194 mg·mL~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),加样回收率为96.3%,RSD=3.06%.钩藤碱及异钩藤碱可良好地分离.结论 所建方法可快速有效地分离钩藤碱及异钩藤碱并测定植物中钩藤碱的含量.     

钩藤总碱的热稳定性研究

目的考察钩藤总碱的热稳定性。方法在不同温度条件下,用高效液相色谱检查钩藤总碱中的钩藤碱和异钩藤碱。结果与钩藤碱相比,异钩藤碱溶液对热不稳定,60℃或90℃2 h后异钩藤碱含量明显降低,而钩藤碱溶液在60℃2 h或4℃6 d的环境中稳定。而且,钩藤碱和异钩藤碱成盐后更加稳定。结论异钩藤碱的热不稳定性是钩藤"后下"的原因。     

钩藤碱阻滞钙离子通道的药理作用研究进展

钩藤碱在传统中药中占有重要的地位,在中枢神经和心血管等系统中有较显著的药理作用,临床上可用于治疗高血压、癫痫、心律失常等疾病。多项实验研究钩藤碱的作用机制,发现钩藤碱大多是通过拮抗钙来发挥作用的。为更好地利用钩藤碱,综述了钩藤碱阻滞钙离子通道的药理作用,为推进钩藤碱深入研究提供参考。     

正天丸中钩藤的薄层色谱鉴别方法改进

目的：对正天丸原质量标准中钩藤的薄层色谱鉴别项下的供试液制备及层析条件进行改进，使检验结果更易判断。方法：对原标准中钩藤的薄层色谱鉴别项下的提取方法和层析及显色条件进行改进。经过酸碱交替提取，很大程度上排除了中性及酸性成分的干扰，展开剂改用碱性，使钩藤中的生物碱容易游离出来，选用生物碱显色剂碘化铋钾，使鉴定效果更加灵敏、稳定，阴性对照无干扰，斑点更清晰易分开。结果：操作简便，色谱斑点清晰、无干扰。结论：改进法更有利于检验结果的判定。     

钩藤碱对家兔血小板聚集及胞浆游离钙离子浓度的影响

目的 研究钩藤碱(Rhy)对兔血小板细胞内游离钙离子浓度及血小板聚集的影响.方法 56只雄性家兔的血样随机分为正常对照组,阿司匹林0.85,1.69和2.78 mmol·L-1组,Rhy 0.33,0.65和1.30 mmol·L-1组.Born法测定血小板聚集率,双波长Fura-2荧光分光光度法测定血小板胞浆游离钙离...     

钩藤碱对多巴胺诱导的NT2细胞凋亡的影响

目的:观察钩藤碱(rhnchophylline,Rhy)对多巴胺(dopamine,DA)诱导NT2细胞凋亡的防护作用.方法:以LDH的漏出率反映细胞的生存率;用TUNEL染色法和DNA琼脂糖凝胶电泳法观察NT2神经元凋亡情况;用Western blotting法测定Bcl-2蛋白表达.结果:Rhy在5和50μmol/L的浓度下能显著地抑制由DA所致的乳酸脱氢酶的漏出,以及明显地提高以PMS试剂转化为指标的生存率(P<0.05,P<0.01);在分化的NT2细胞神经元中,转染bcl-2基因的神经元凋亡率明显低于未经bcl-2基因转染的神经元,而Rhy使DA诱导的转染bcl-2基因神经元和未转染bcl-2基因神经元的凋亡率均明显减少;Rhy能抑制DA所致的DNA降解,但Phy对NT2细胞Bcl-2蛋白表达无明显影响.结论:Rhy能对抗DA诱导的NT2细胞的损伤.