免疫亲和柱净化HPLC柱后光化学衍生法测定34批中药材中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1

目的建立HPLC柱后光化学衍生法检测中药材中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1方法。方法样品经过70%甲醇提取、免疫亲和柱净化后,采用HPLC柱后光化学衍生-荧光检测器检测中药材黄曲霉毒素含量。对疑似成分进行液质确认。结果黄曲霉毒素G2和B2,G1和B1分别在0.75～22.5 pg和5～75pg线性关系良好,方法准确稳定。检测的34批次药材中,3批酸枣仁检出黄曲霉毒素,其中1批酸枣仁黄曲霉毒素B1超过5μg·kg-1。结论该方法简便、准确,适用于中药材黄曲霉毒素的检测。     

香砂六君丸中的黄曲霉素B_1、B_2、G_1、G_2的含量测定及安全性评价

目的建立高效液相色谱法测定香砂六君丸中的黄曲霉素B1、B2、G1、G2的含量测定,并评价香砂六君丸中黄曲霉素安全性。方法采用C18柱,流动相为甲醇-水(45∶55),紫外光衍生,荧光检测器,激发波长为360nm,发射波长450nm,并对全国流通领域的香砂六君丸中黄曲霉素B1、B2、G1、G2进行测定。结果建立的HPLC法,4种物质平均回收率92.6%、93.18%、92.99%、91.69%,RSD分别为:1.61%、1.72%、1.59%、1.31%,全国流通领域的香砂六君丸所含黄曲霉素的含量安全情况较好。结论该方法操作简便,结果稳定可靠,可作为该制剂的定量分析方法及安全评价。     

免疫亲和柱净化-在线柱后光化学衍生 HPLC-FLD 检测莲子中黄曲霉毒素B1, B2, G1, G2及其液质确证

目的:建立高效液相色谱-在线柱后光化学衍生-荧光检测器检测药食同源中药材莲子中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的含量,并采用液质联用法进行确证。方法:样品以甲醇-水(80∶20)溶液提取,经免疫亲和柱净化后,利用在线柱后光化学衍生-HPLC-FLD进行分析测定。并进一步采用LC-MS/MS对阳性样品进行确证。结果:在优化条件下,黄曲霉毒素B1,G1在0.3～30μg.L-1,黄曲霉毒素B2,G2在0.09～9.0μg.L-1线性关系良好,r>0.999 9,回收率86.7%～99.1%,RSD<4.87%。黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的检测限(LOD)分别为0.08,0.03,0.10,0.03μg.kg-1。所测的20批莲子样品中,有14批样品的黄曲霉毒素检测结果呈阳性,其中黄曲霉毒素B1的污染水平为0.40～586μg.kg-1,黄曲霉毒素总量(B1+B2+G1+G2)的污染水平为0.40～602.5μg.kg-1。通过LC-MS/MS确证,在与对照品相同的保留时间处,样品与对照品有相同的特征离子碎片,排除了样品假阳性的可能。结论:该方法简便快速,灵敏度高,重复性好,适用于莲子中黄曲霉毒素的检测。     

赵磊1,刘仕聪2,刘云菲2,李正刚1,王路宏1,孙艳涛2

目的:建立蛴螬的黄曲霉毒素的测定方法。方法:采用光化学衍生进行前处理,分子荧光-高效液相色谱法对蛴螬中黄曲霉毒素进行测定,以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)为流动相;激发波长λex=360nm,发射波长λex=450nm;流速1.0mL·min-1。结果:建立的方法能有效测定黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2的含量。结论:采用的光化学衍生-高效液相色谱法的实验结果表明,试验方法准确、简便,可用于测定有害物质黄曲霉毒素。     

三线定量胶体金免疫亲和试纸法定量中药饮片中黄曲霉毒素B1及B1、B2、G1、G2总量的研究

目的利用三线胶体金侧流向免疫色谱技术,针对中药特点对样品前处理和检测曲线进行研究,建立快速、准确的定量测定中药饮片中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2总量的方法,迅速检测中药饮片中黄曲霉毒素的污染程度。方法利用胶体金免疫亲和法建立《中国药典》2020年版规定限度的24种中药饮片中黄曲霉毒素测定方法,进行方法学验证,并对60种中药饮片,共计195批次样品进行分类测定。同时利用液质联用(三重四级杆质谱法)对上述样品进行定量检测,并比对2种检测方法。采用配对t检验法比较2种方法的检测结果是否存在显著性差异;通过加入其他真菌毒素对试纸条的特异性进行考察。结果通过胶体金侧流向免疫色谱技术测定中药饮片中黄曲霉毒素含量,胶体金方法和液质联用方法检测结果一致,无显著性差异,加样回收率为80.3%～119.7%,与黄曲霉毒素M1和M2、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮等其他真菌毒素没有交叉反应。单独研究黄曲霉毒素B1与B1、B2、G1和G2总量之间无交叉干扰,且其含量测定符合《中国药典》2020年版规定的标准检验要求。结论胶体金检测方法可以准确、定量、快速检测中药饮片中黄曲霉毒素含量。该方法具有简单、快捷和低毒等优点。     

免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱荧光法测定保和系列制剂中黄曲霉毒素

目的 研究建立光化学柱后衍生-高效液相色谱( HPLC) -荧光检测器测定保和系列制剂中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的方法.方法 70％甲醇提取样品,免疫亲和柱净化后,经高效液相色谱分离,由光化学柱后衍生,通过荧光检测器测定.结果 在优化条件下,黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1分别在0.064 6～3.230 ng、0.1992 ～9.960 ng、0.0684～3.420ng、0.1954～9.770 ng的范围内有良好的线性关系,r＞0.9996,回收率在85.5％ ～ 114.6％之间,RSD＞8.结论 该方法快速简便,灵敏度高、重现性好,对68个生产企业生产的3个剂型148批保和制剂进行了检测,结果表明该方法可作为保和系列制剂中黄曲霉毒素的检测,保和制剂黄曲霉毒素状况较好.     

免疫亲和柱净化-在线柱后光化学衍生-HPLC-FLD 同时测定甘草中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2 和赭曲霉毒素A的含量

目的:建立同时检测甘草中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2和赭曲霉毒素A的免疫亲和柱净化-在线柱后光化学衍生-HPLC- FLD测定的方法.方法:样品经甲醇-水(80:20)超声提取后,用免疫亲和柱净化和富集;以甲醇和0.5％乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,通过柱后光化学衍生,荧光检测器测定.结果:黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1和赭曲霉毒素A的检测限分别为0.02,0.06,0.015,0.03,0.25μg·kg-1,平均加样回收率为76.0％～103％,RSD低于13％.结论:该方法快速简便、准确,可用于甘草中同时测定黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2和赭曲霉毒素A的含量.     

HPLC法测定灵芝降糖胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1及三七皂苷R1的含量

目的:建立灵芝降糖胶囊的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法对制剂中的人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁及三七皂苷R1进行定量测定。结果:人参皂苷Rg₁在3.86～23.16μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率100.18%,RSD=1.52%;人参皂苷Re在0.628～3.768μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率100.22%,RSD=0.41%;人参皂苷Rb1在3.74～22.44μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率100.51%,RSD=0.74%;三七皂苷R₁在0.764～4.584μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.05%,RSD=1.10%。结论:所建立的方法简便、快捷,重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

免疫亲和柱净化HPLC柱后光化学衍生化法检测中药及染菌中药制剂中间体的黄曲霉毒素

目的:采用免疫亲和柱净化,结合柱后光化学衍生化的高效液相色谱-荧光检测器建立同步检测常用中药材及染菌中药制剂中间体中的黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的方法.方法:采用免疫亲和柱净化洗脱结合柱后光化学衍生手段,建立黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的分析方法,并分别对14种中药材及染菌中药制剂中间体进行检测.结果:黄曲霉毒素B2和G2,B1和G1分别在0.15 ～ 6.0和0.5 ～20.0 ng·mL-1线性关系良好,方法准确稳定.所选的14种中药中川芎和柏子仁检测出黄曲霉毒素B1,而以染菌中药川芎所制备的5种提取物中均未检出黄曲霉毒素.结论:采用此方法检测常用中药材及其制剂中间体中的黄曲霉毒素无干扰性杂峰,结果准确可靠.     

HPLC法测定抗纤益心浓缩丸中人参皂苷Rg1、Rb1、Re的含量

目的:测定抗纤益心浓缩丸中人参皂苷Rg1、Rb1、Re的含量。方法:通过HPLC法测定。结果:人参皂苷Rg1、Rb1、Re分别在0.88~4.4μg、0.78~4.4μg、2.14~10.7μg范围内构成良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.6%、97.1%、98.1%。结论:该方法专属性强,可作为抗纤益心浓缩丸质量标准的含量测定方法。     

愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1和Rb1的HPLC-ELSD法测定

目的建立愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1和Rb1的含量测定方法。方法采用HPLC-ELSD法,色谱柱为HypersilODS2(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水梯度洗脱;蒸发光散射(ELSD)参数:漂移管温度为110℃,气体流量为3.02~3.05 SLPM。结果人参皂苷Rg1在2.272~11.360μg范围内线性关系良好,r=0.9991;人参皂苷Rb1在2.232~11.160μg范围内线性关系良好,r=0.9994;两者的平均回收率分别为96.6%,98.6%;RSD分别为1.7%,2.3%。结论该法简便、准确、可靠,可用于愈伤灵胶囊的质量控制。     

双参片中人参皂苷Rb1、Rg1、Re含量测定

目的:建立双参片中人参皂苷Rb1、Rg1、Re的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rb1、Re和Rg1的含量.结果:人参皂苷Rb1对照品进样量在2.408～24.08 μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=299.82X-26.243(r=0.9995),人参皂苷Rg1、Re对照品进样量分别在0.600～2.400 μg、5.000～20.000 μg范围内呈良好的线性关系,回归方程分别为Y=270.6X-9.5751(r=0.9999)和Y=241657X 15.104(r=0.9999),平均回收率分别为97.41%、97.67%、96.10%, RSD分别为1.92%、2.14%、1.26%(n=5).结论:本法测定双参片中人参皂苷Rb1、Rg1、Re的含量测定方法简便,灵敏,准确,专属性强,能够有效控制双参片的内在质量.     

HPLC测定田七痛经胶囊中人参皂苷Rb1、Rg1的含量

目的:建立用HPLC法测定田七痛经胶囊(三七,五灵脂,蒲黄等)中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的含量.方法:采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1检测波长为203 nm;流速:1.0 mL·min-1.结果:人参皂苷Rb1在0.967～9.67μg呈良好的线性关系(r=0.9999),回收率为98.8%,RSD为0.37%(n=6);人参皂苷Rg1在0.784～7.84μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),回收率为98.8%,RSD为0.38%(n=6).结论:本法快速、准确,可同时测定田七痛经胶囊中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的含量.     

HPLC-ELSD法测定白灵片中人参皂苷Rg1、Rb1的含量

目的：建立白灵片处方中人参皂苷Rg1、Rb1的含量测定方法。方法：比较HPLC-ELSD与HPLC法,采用HPLC-ELSD梯度洗脱的方法进行色谱分离。色谱柱：大连依利特ODS柱;流动相为乙腈-水;梯度洗脱;漂移管温度95℃。结果：人参皂苷Rgl在0.28～4.27μg范围内呈现良好线性关系（r=0.9992）;人参皂苷Rb1在0.30～4.54μg范围内呈现良好线性关系（r=0.9998）,平均回收率分别为102.5%和101.8%,RSD分别为2.8%和2.3%。结论：该测定方法操作简便、结果准确,可用于白灵片质量控制。     

HPLC测定颈康胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1与三七皂苷R1的含量

目的建立颈康胶囊(熟地、何首乌、三七等)中人参皂苷Rg1、Rb1与三七皂苷R1的含量测定方法.方法采用高效液相色谱梯度洗脱法,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长为203 nm.结果三七皂苷R1在0.327～2.180 μg范围内线性关系良好(r=0.999 4),平均回收率为98.23%,RSD=1.53%(n=6),人参皂苷Rg1在0.909～6.060 μg范围内线性关系良好(r=1.0),平均回收率为99.04%,RSD=1.00%(n=6),人参皂苷Rb1在0.672～4.480 μg范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.17%,RSD=1.31%(n=6).结论本法简便、快速、准确,可用于该制剂的质量控制.     

HPLC-ELSD测定三七胶囊中人参皂苷Rg1和Rb1

目的:研究三七胶囊的质量标准.方法:应用HPLC-ELSD对三七胶囊中的活性成分人参皂苷Rg1和Rb1的含量进行测定.结果:人参皂苷Rg1在1.3μg～6.5μg范围内呈现良好的线性关系(r=0.9994),平均回收率为98.30%,RSD为1.20%(n=5).人参皂苷Rb1在1.0μg～5.0μg范围内呈现良好的线性关系(r=0.9996),平均回收率为97.12%,RSD为1.17%(n=5).结论:该方法简便,快速,重现性好,可用于三七胶囊的质量控制方法.     

高效液相色谱法同时测定醒脑化瘀胶囊中人参皂苷Rg_1、Rb_1和三七皂苷R_1的含量

目的:建立醒脑化瘀胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的质量分数测定方法。方法:采用HPLC法同时测定醒脑化瘀胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的质量分数。Gemini C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;乙腈、水为流动相,梯度洗脱;检测波长为203nm;流速为1.0mL·min-1。结果:人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1分别在2.0600～10.3000μg、1.0740～5.3700μg及0.1994～0.9970μg范围内呈现良好的线性关系;回收率分别为97.81%、97.74%和97.33%,RSD分别为1.14%、1.10%和1.14%(n=6)。结论:该方法简便、准确,重现性好,可用于醒脑化瘀胶囊的质量控制。     

HPLC测定止鼾胶囊中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1含量

目的:测定止鼾胶囊中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1的含量。方法:采用HPLC,phenomenexC18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:乙腈-水(20∶80)保持15min,15min后乙腈-水(40∶60)。流速:1.0mL.min-1,检测波长为203nm。结果:三七皂苷R1对照品在0.42～2.09μg线性关系良好,平均回收率为97.63%,RSD=1.16%(n=6);人参皂苷Rg1对照品在1.64～8.21μg线性关系良好,平均回收率为97.69%,RSD=1.49%(n=6);人参皂苷Rb1对照品在1.62～8.11μg线性关系良好,回收率为98.50%,RSD=1.70%(n=6)。结论:本实验三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量测定方法简单,结果稳定可靠,可作为止鼾胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的定量分析方法。     

HPLC梯度洗脱法测定愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1的含量

目的:研究愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定方法,为制定质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法:采用ODS色谱柱(250mm×4.6mm),乙腈-水梯度洗脱,0～35min(19:81),35～75min(19:81→21:79),流速:1.0ml·min-1,检测波长:203nm,柱温:30℃,进样量:10μl。结果:人参皂苷Rg1在0.217～2.604μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为96.59%,RSD为1.34%。结论:该方法简便、快速、重现性好、准确可靠,可用于愈伤灵胶囊中人参皂苷Rg1的含量测定。     

HPLC法测定参紫灵胶囊中人参皂苷Rb_1的含量

目的:建立参紫灵胶囊中人参皂苷Rb1含量的测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Inertsil ODS-3(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈∶水(34∶66);检测波长:203 nm;柱温:40℃;流速:1.0 mL/min。结果:人参皂苷Rb1在62.5-1000μg/mL范围内呈良好线性关系(r2=0.9993),稳定性、重复性良好。平均回收率99.95%,RSD%为1.00%。结论:该方法简便、快速、准确,可用于测定参紫灵胶囊中人参皂苷Rb1的含量。