快速石蜡的应用

我们应用“CZK0Ⅱ型肿瘤样品快速处理仪”（深圳越华公司生产），根据加温和超声波原理，将组织决这固定脱水包埋，常规切片染色，45分钟左右出报告。水温控制在70℃～80℃，取100ml烧杯，置于水浴祸中，每次加试剂40ml，除石蜡外，其余试剂一次性用完后弃之。组织块置于烧杯的液体中，打开超声波，按下列步回处理标本：①AF波（浓甲醛10ml，95％酒糟50ml）固定脱水2～5分钟．②无水酒精脱水2～5分钟。③丙酮（或二甲苯）透网2～5分钟．④浸蜡5分钟。⑤包埋切片染色．胃粘膜等小标本，每步用2～3分钟．稍大的标本每步用5分钟．大组织块时…     

改良铅苏木紫染色法与电镜对照在直肠类癌上的应用(摘要)

方法:(一)试剂配制:(1)1.5％硝酸铝蒸馏水溶液加等量醋酸铵饱和水溶液混合之。每100毫升上述混合液加2毫升40％甲醛,过滤后保存于室温中备用,几星期内有效。(2)0.2克苏木紫溶于1.5毫升95％酒精,用时须新鲜配制。取(1)混合液10毫升加(2)苏木紫液1.2毫升后,再加蒸馏水10毫升,总量共为21.2毫升,不停摇荡30分钟,得呈淡紫色沉淀后过滤,滤液光呈白色,后为淡兰红色,加蒸馏水至70毫升,即为应用液。(二)染色:福尔马林固定,石蜡增片5μ,常规脱蜡至水入应用液,70℃45分钟至1小时或在37℃水温箱     

应用药物辅料对福尔马林固定的组织冰冻切片质量的改进

低温恒冷切片现已广泛用于术中和门诊活检快速诊断中。但温纱布和倒空福尔马林的小瓶及福尔马林短时间固定送检的组织经冷冻后切片较困难,切片染色后留下冰晶间隙而影响诊断。本文通过应用药物辅料中的几种试剂处理这一类组织,可改变这一现象,现介绍如下。材料与方法一、材料1．药物辅料试剂：30％蔗糖、5％糊精。5％淀粉、2％明胶、3％阿拉伯胶及2％按甲基纤维素钠。2．选取病人手术大体标本,新鲜未固定,切取成6等份,1份不固定即快速冰冻切片,另5份用10％的福尔马林固定10分钟。20分钟、40分钟、24小时。3．门诊宫颈活检标本10例,…     

冷冻切片1 000例制作的体会

 目的 探讨冷冻切片在制作中的体会。方法 采用德国产Leica-CM1900型恒冷切片机：普通胶水、苏木精染色液、质量浓度为1 %醇溶性伊红、冰醋酸5 ml+质量浓度为10 %的中性甲醛10 ml+质量浓度为95 %的酒精85 ml混合固定液各100 ml盛于染色缸中备用。经常规冰冻切片取材、包埋、切片、染色后封片。结果 2003年至2005年共制作切片1 000例，诊断符合率达96.0 %以上。应用德国产Leica-CM1900型恒冷切片机制作冰冻切片，使用一次性日本羽毛切片刀，切片效果良好，切片完整，厚薄均匀无皱折，结构清晰，无空泡及空网状形成，亦无冰晶等现象。结论 冷冻切片质量好坏直接影响病理诊断，做好每一张切片都是一项关键性的技术操作。     

高温烤片对石蜡切片黏附、厚度与染色的影响

目的笔者实验室最近发现,高温烤片可有效解决甲基丙烯酸树脂包埋的组织切片的脱片问题,本文拟进一步研究确定高温烤片对石蜡包埋切片黏附、厚度及染色的影响。方法大鼠肾脏石蜡切片(切片机设定的切片厚度10μm)脱蜡后经90℃、140℃热板烤片30 min处理,然后用过碘酸-席夫试剂和苏木精染色,观察脱片情况、切片厚度及染色效果。大鼠脊髓石蜡切片(14μm厚)同样处理后分别进行小胶质细胞和突触素颗粒的免疫组化染色。结果与对照(未烤片)相比,90℃或140℃烤片都有效防止了肾脏石蜡切片从载玻片上脱落,但染色后的实际切片厚度减少了约50%(与设定切片厚度相比),染色变浅,结构清晰度欠佳(90℃烤片后),甚至有细胞消失(140℃烤片后);90℃烤片后免疫阳性小胶质细胞或突触素颗粒减少,非特异性染色加深,140℃烤片后几乎未见免疫阳性结构。结论高温烤片防脱片的方法可能不适用于石蜡切片。     

介绍改良的组织切片苏木素伊红染色法

一、材料1．IIE染液：苏木素2g,纯乙醇100nd,甘油100ml,蒸馏水100Inl,钾明矾15g,冰醋酸10Inl,碘酸钠300IDg,沉淀酸化伊红Y6g。将苏木素溶于乙醇中,钾明矾用蒸馏水加热溶解,混合二液,然后加人甘油、碘酸钠、冰醋酸,最后加伊红。2．稀氨水溶液：用立式染色缸量取5（）n蒸馏水加人浓氨水3滴即可。二、方法l。脱蜡至水：快速石蜡切片一二甲苯一无水乙醇一一一一MS％乙醇一85％乙醇一75％乙醇一水。冰冻切片经95％乙醇固定直接人下一步。2．HE染色（l）改良IIE染色法：①HE染色液45s－Inun;②自来水洗2S－5S;③稀氨水液2S…     

组织浸蜡和烤片的温度、时间对免疫组化染色的影响

在以往免疫组化染色中发现免疫活性弱的组织切片时 ,一般均会考虑可能是因固定不当所引起 ,或是免疫组化染色过程中所形成。而对经脱水透明后的组织在浸蜡时的温度及时间 ,以及组织切片烤片的温度及时间考虑很少 ,特别是将两者系统的结合考虑就更少。为此本文特进行了如下实验 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　收集本院外科手术切除标本 10例 (其中乳腺癌 3例 ,直肠癌 3例 ,肺癌 2例 ,食管癌 2例 ) ,每例标本均切取 4片组织 ,按常规甲醛固定液固定 6h后 ,经常规脱水透明后 ,一片按常规石蜡包埋 ,其他 3片分别在6 5℃、80℃、90℃的温度下浸…     

一种快速石蜡切片方法与快速冰冻切片方法的比较

我科在工作中一直用快速冷冻切片方法 ,但由于各种原因 ,影响着冰冻切片的质量 ,拖延病理报告发出的时间 ,也间接影响病人的预后。为了克服上述缺点 ,我们在实践中摸索出一种快速、简便、高质量的快速石蜡切片方法 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1　材料　湖北产亚光牌ＹＧＴ -5Ｅ生物组织快速脱水仪 ,从固定到浸蜡的全过程都应加温至 80℃。1 2　方法　①将取材后的新鲜组织 (1ｃｍ× 0 .5ｃｍ× 0 .3ｃｍ)直接放入 10 %甲醛溶液中固定 3～ 5分钟 ,取出组织块后用刀修至厚度不超过 1 5ｍｍ。骨组织经 10 %甲醛溶液固定后加入10 %盐酸软化后…     

微波制备快速石蜡切片方法的改进

目前手术中快速病理诊断主要靠冰冻切片和传统加温快速石蜡切片技术 ,但冰冻切片中细胞易肿胀 ,出现人为假象 ,且价格偏高 ;传统加温快速石蜡制片过程复杂 ,安全性差。为克服上述不足 ,我们对微波制备快速石蜡切片方法进行了改进 ,方便快捷 ,安全性好 ,制片质量优良。现介绍如下。材料　本院手术切除标本 12 0例 ,其中子宫肿瘤6 0例 ,乳腺肿瘤 2 0例 ,胃肠肿瘤 2 0例 ,其它 2 0例。常规取组织块V =1.0cm× 1.0cm× 0 .2cm。仪器设备　 1)浙江临安YWY781B医用微波仪 ;2 )AAF液 :含 95 %酒精 70mL ,冰醋酸 10mL ,4 0 %的中性甲醛 2 0mL ;…     

术中印片细胞学诊断与快速石蜡切片对照分析

配合临床手术进行快速诊断是医院病理科重要工作之一 ,目前大多数采取冰冻切片或快速石蜡切片 ,后者由于不需特殊设备、制片效果好 ,适合基层医院病理科应用 ,但快速石蜡切片操作时间长 ,如果一天有２～３例快速石蜡切片就显得很忙乱。我科在病理切片取材的同时 ,做几张印片细胞学检查 ,其阳性率可达９８．７% ,在快速诊断中有一定实用价值 ,现报导如下。１材料与方法对我院１９８５年～２０００年送检新鲜离体标本视标本大小和具体情况 ,将标本做一个或多个切面 ,行印片两张以上 ,快速入酒精乙醚固定液３～５分钟 ,染色同常规操作 ,镜检诊…     

联合快速病理急诊检查300例分析

传统单一的快速病理检查与现代医学发展不相适应 ,同时与患者的需求相差甚远。采用快速冰冻切片、组织印片、刮取涂片等三种联合快速病理急诊检查收到了较好的效果 ,提高了快速病理检查诊断准确率 ,给外科医师提供了可靠的诊断依据 ,从而正确地决定了手术方式。现将三种联合快速病理急诊检查诊断结果与术后石蜡切片进行讨论分析。1　临床资料我科 1983年 12月— 1999年 12月共 16 a间有 30 0例新鲜标本同时做了快速冰冻切片、组织印片、刮取涂片检查 ,其中冰冻切片 2 89例与术后石蜡切片结果相符 ,符合率为 96 .3% ;刮取涂片 2 93例与术后石…     

细胞印片在术中快速冰冻病理诊断中的应用

目的:探讨细胞印片在术中快速冰冻病理诊断中的价值.方法:将246例术中送检标本进行细胞印片和冰冻切片诊断,并分别与术后石蜡切片诊断进行比较、计算诊断符合率,分析两者符合率的差异.结果:本组收集的术中标本246例,同时做细胞印片及冰冻切片,与石蜡切片结果对比,细胞印片能准确诊断的为232例,符合率为94.31％;冰冻切片能明确诊断的为235例,符合率为95.53％.二者没有显著差异(P＞0.05).结论:术中快速冰冻病理诊断中,细胞印片是一种简易、快速、直接判断良恶性的可靠辅助诊断手段.     

胃粘膜癌前期病变DNA合成的放射自显影的研究

用胃镜的活检组织放射自显影,研究了84例胃粘膜细胞增生水平,与癌前病变严重性的关系。用细胞增殖水平、有丝分裂指数和H~3标记率作为胃上皮恶性变的主要标准。 取出的胃粘膜组织在加有5μci/ml[~3H]-thym-idline培养液中37℃培养1小时后,Carnoy’s固定,制成石蜡切片。切片用“M”型光敏化剂复盖并在4℃曝露40天,用铁苏木精和曙红染色。在放射自显影片上计算800～1,200个细胞的标记上的细胞核数,然后计算标记指数(LI)。用同样的细胞数计算细胞的有丝分裂数和有丝分裂指数(MI)。     

应用于免疫组化染色中无需抗原修复的组织处理法

以常规福尔马林固定 ,酒精脱水处理的组织切片 ,在免疫组化染色时 ,常有部分待测的组织抗原由于蛋白质的交联作用 ,使免疫反应活性无反应或明显降低 ,需经抗原修复后免疫反应才能得到恢复。经复习文献发现一种组织处理方法简单 ,又能使组织免疫反应活性得到明显加强的方法 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1　材料　收集手术切除乳腺癌 15例 ,宫颈癌 10例和淋巴结 5例共 30例标本 ,新鲜未固定时 ,在肿块的最大面切取一片分成三等份 ,固定在丙酮中 ,室温下处理 10分钟后分别置入 - 2 0℃ ,- 15℃和 4℃冰箱中过夜 ,再经 4℃丙酮 30分钟 ,室温丙…     

细胞印片辅以快速石蜡切片在急诊病理中的应用

３６２例急诊病理采用细胞印片辅以快速石蜡切片的方法进行诊断。结果显示：两种方法结合进行的急诊病理诊断符合率为９６．４１％，恶性肿瘤诊断符合率９４．４８％，良性肿瘤符合率为９７．９９％。两者各有优势，细胞印片简便、迅速、印片范围广，３～５分钟既可诊断；快速石蜡切片分类较明确。两者相辅相成，比只用单一冰冻或快速石蜡切片诊断要全面而快速得多。     

细胞印片辅以快速石蜡切片在急诊病理中的应用

３６２例急诊病理采用细胞印片辅以快速石蜡切片的方法进行诊断。结果显示：两种方法结合进行的急诊病理诊断符合率为９６．４１％，恶性肿瘤诊断符合率９４．４８％，良种肿瘤符合率为９７．９９％。两者各有优势，细胞印片简便、迅速、印片范围广，３－５分钟既可诊断；快速石蜡切片分类较明确。两者相辅相成，比只用单一冰冻或快速石蜡切片诊断要全面而快速得多。     

提高免疫组化反应的抗原修复方法

目的　探讨免疫组织化学反应不同预处理方法对反应结果的影响。方法　对5 0例经10 %中性福尔马林液固定过的组织,经脱水、石蜡包埋,制成切片,分别采用3种不同方法作预处理后,进行免疫组织化学(S P法)染色。结果　石蜡组织切片免疫组化反应预处理,采用中温水浴抗原修复法,其阳性表达率为5 2 .6% ,脱片率为2 .0 % ;采用高压锅抗原修复法,其阳性表达率为47.4% ,脱片率为2 0 .0 % ;采用水沸抗原修复法,其阳性表达率为3 9.5 % ,脱片率为12 .0 %。结论　免疫组化反应采用中温水浴抗原修复法作预处理,石蜡组织切片阳性表达率较高压锅抗原修复法提高了5 .2 % ,P <0 .0 5 ,较水沸抗原修复法提高了13 .1% ,P <0 .0 5 ;采用中温水浴抗原修复法石蜡组织切片脱片率较高压锅抗原修复法降低了18.0 % ,P <0 .0 1,较水沸抗原修复法降低了10 .0 % ,P <0 .0 1。预处理采用中温水浴抗原修复法,即提高了免疫组织化学反应阳性表达率,又提高了制片质量,操作方法易于掌握,是1种理想的免疫组化反应预处理方法,值得推广。     

双重氧化脱黑色素法在恶性黑色素瘤免疫组化诊断中的应用

目的:探讨双重氧化脱黑色素法在恶性黑色素瘤免疫组化诊断中的应用.方法:20例经病理确诊为恶性黑色素瘤的石蜡组织标本,用5种不同浓度的过氧化氢液先氧化脱色,经观察选取15％的过氧化氢液氧化30 min后,再用0.5％高锰酸钾液加强氧化5 min,最后5％草酸液清洁5 min,应用Envision免疫组化法检测Melan-A、Melanoma、S-100和VIM阳性的表达.结果:20例恶性黑色素瘤切片在脱色素前HE染色可见棕黄色色素颗粒,经双重氧化脱色素处理后,HE染色效果好,无脱片;应用15％的过氧化氢脱色效果优于其他4种浓度的过氧化氢,滴加0.5％高锰酸钾5 min,再滴加5％草酸液5 min,黑色素完全消失;脱色处理后Melan-A、Melanoma、S-100和VIM阳性定位准确,着色好.结论:采用双重氧化脱黑色素法进行免疫组化染色具有较理想的作用,值得采用.     

甲状腺癌冷冻与石蜡切片诊断指标及形态变化对比分析

目的 探讨甲状腺癌冷冻切片的诊断指标及形态变化，加强对其形态学的认识，提高诊断水平。方法 收集甲状腺癌冷冻切片病例29例，对其浸润行为，生长方式、细胞核形态变化等辅助特点进行冷冻切片与石蜡切片HE染色多指标形态学和半定量分析。结果 29例中，乳头状癌26例（89．7％），其他类型癌3例（10．3％）。主要指标为浸润局部组织、瘢痕样胶原、周围软组织、包膜或血管：冷冻切片与石蜡切片分别占86．2％／96．6％，100％／100％，37．9％／41．4％，13．8％／41．4％或0．0％／10.3％；辅助指标为沙砾体、坏死或细胞异型性：冷冻切片与石蜡切片分别占62．1％／58．6％，13．8％／10．3％或37．9％／24．1％。对26例乳头状癌，冷冻与石蜡切片在毛玻璃样核、核沟、假包含体、核内空泡、核密度及乳头分枝密度等多指标观察，并进行半定量分析。除浸润包膜冷冻切片与石蜡切片有统计学意义外，其余指标与石蜡切片基本一致，无统计学差异。结论 甲状腺癌冷冻切片的诊断主要指标靠见到局部组织、胶原和周围软组织等的浸润；参考指标和进一步分型靠肿瘤生长方式、毛玻璃样细胞核等特点。     

甲状腺肿块术中冰冻切片与术后石蜡切片对照分析

通过快速冰冻切片术中判断甲状腺肿块的性质在许多医院已列为常规;外科医生往往依赖术中冰冻切片的报告来决定手术方式及范围。但是术中冰冻切片与术后石蜡切片报告不相符合的情况并不鲜见。本文就我科甲状腺肿块术中冰冻切片与术后石蜡切片结果不符的病例分析讨论如下。临床资料 1983年12月～1991年12月间我科共计有392例甲状腺肿块做了术中冰冻切片检查,其中15例术中冰冻切片与术后石蜡切片报告结果不符,占3.8％;3例术中冰冻切片未能作出诊断,占0.8％。