PCR检测HBV-DNA不同试剂和方法的比较

本文对目前部分市售的ＨＢＶＰＣＲ试剂进行了灵敏度和检测率的测定，并在检测ＨＢＶ低水平感染中，用ＰＣＲ和斑点杂交作了比较。结果不同公司试剂盒的ＨＢＶ－ＤＮＡ最低检测浓度从０．１ｆｇ到１ｐｇ不等，同一公司不同批号的ＨＢＶ－ＤＮＡ最低检测浓度也从１００ｆｇ到１００ａｇ不同，差达１０３～１０４倍。ＰＣＲ和斑点杂交在三组不同乙肝标志组中的阳性检测率为ＨＢｓＡｇ（＋）ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｅ（－）组：ＰＣＲ７０％，斑点杂交４６．４％；ＨＢｓＡｇ（＋）ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｓ（＋）组：ＰＣＲ３５．７％，斑点杂交２．９％；ＨＢｓＡｇ（－）抗ＨＢｅ（＋）抗ＨＢｓ（＋）／ＨＢｃ（＋）组：ＰＣＲ１６．６％，斑点杂交３．３％。三组检测率均Ｐ＜０．０１。因此，目前市售的ＨＢＶＰＣＲ试剂必须标化，ＰＣＲ更适合于检测ＨＢＶ低水平的感染     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的 用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ－ＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎疾病（ＨＢＶ）的数量和免疫指标以指导临床,方法 设计合成了ＨＢＶＦＱ－ＰＣＲ诊断试剂盒,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合产生的实时检测定量ＰＣＲ方法,检测了５３２份临床血清标本,结果 经ＦＱ－ＰＣＲ检测,１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原,ｅ抗原,ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ,ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本,其血清标本ＨＢ     

聚合酶链反应技术检测HBSAg阳性病人血清中HBV核心前/核心DNA

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）是嗜肝ＤＮＡ病毒之一，以往临床上通过放射免疫或酶联免疫吸附法检测血清中的ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢＳ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢＣ等指标判断乙型肝炎的传染性。近年来应用ＰＣＲ技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，是反映ＨＢＶ感染者体内病毒复制...     

HBV五项血清指标与HBV-DNA-PCR相关性探讨

ＨＢＶ五项血清指标与ＨＢＶ—ＤＮＡ—ＰＣＲ相关性探讨山东省青岛市胶州中心医院（青岛２６６３００）李志斌吴衍芝本文对５７２例肝炎门诊和住院病人进行ＥＬＩＳＡ法检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）五项血清指标和应用免疫ＰＣＲ技术检测ＨＢＶ－ＤＮＡ进行分析。１材料与...     

肝癌患者HBV血清标志物与HBV DNA检测的临床意义

为了解肝癌患者乙型肝炎病毒血清标志物 (ＨＢＶＭ )与ＨＢＶＤＮＡ情况 ,我们对 6 8例肝癌患者进行了观察 ,现将结果报告如下。一、对象和方法1.对象　经确诊的肝癌患者 6 8例 ,男 6 1例 ,女 7例 ,年龄 2 8～ 83岁。2 .方法　所有病例均抽取静脉血 ,分离血清用酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)进行ＨＢＶＭ (ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｅ、抗 ＨＢｃ)检测 ,试剂由上海实业科华生物技术有限公司提供 ;ＨＢＶＤＮＡ用聚合酶链反应 (ＰＣＲ) ＥＬＩＳＡ法检测 ,试剂由上海浩源生物制品有限公司提供 ;所有操作步骤按说明书…     

246份母—脐血配对HBV检测结果与分析

我们收集了 2 4 6份母 脐配对血进行ＨＢＶ血清标志物及ＤＮＡ定量检测 ,结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　 2 4 6份母 脐配对血均来自 1999年 11月至 2 0 0 0年 6月本院产科住院产妇静脉血及所产新生儿脐带血 ,分离血清置 - 2 0℃冰箱内保存。对ＨＢｓＡｇ阳性的母血 ,无论其对应脐血ＨＢＶ血清标志物结果怎样 ,均进一步用荧光定量ＰＣＲ(ＦＱ ＰＣＲ)检测ＨＢＶ ＤＮＡ。1 2　试剂与方法　ＨＢＶ Ｍ检测使用科华公司试剂盒按说明书操作。ＦＱ ＨＢＶＤＮＡ试剂购自复星公司。用ＰＥ5 70 0荧光定量扩增仪 ,结果自动测出。1 3　结…     

PCR检测HBV—DNA与乙型型肝炎病毒不同血清标志的对比分析

为探讨ＨＢＶ－ＤＮＡ在乙肝炎病毒血清不同标志模式中的分布状况及临床意义。方法：应用聚合酶链反应技术在４８５例血清标本进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测，并与血清五项免疫指标对比分析。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗－ＨＢｃ阳性模式中，阳性率最高达９２．８６％；其次是ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ及ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ，阳性率分别为６６．２５％和６８．８３％；除单项抗－ＨＢｓ和免疫指标     

用PCR技术检测50名HBsAg阴性献血者血清HBV－DNA结果

用ＰＣＲ技术检测５０名ＨＢｓＡｇ阴性献血者血清ＨＢＶ ＤＮＡ结果１２１００１锦州医学院生化教研室赵勇周影ＰＣＲ是ＤＮＡ聚合酶链反应的简称，是一种基因的体外扩增技术。笔者利用该技术对ＥＬＩＳＡ检测显示ＨＢｓＡｇ阴性的５０名献血者的血清进行了ＨＢＶ ＤＮ...     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的数量和免疫指标,以指导临床。方法设计合成了ＨＢＶＦＱＰＣＲ诊断试剂盒,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量ＰＣＲ方法,检测了５３２份临床血清标本。结果经ＦＱＰＣＲ检测,１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原、ｅ抗原、ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本,其血清标本ＨＢＶＤＮＡ也全部阳性,平均ＨＢＶＤＮＡ拷贝数为１．１×１０８／ｍｌ;９８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性的标本,其阳性率为７３％（７１例）,平均拷贝数为８．６×１０５／ｍｌ,而常规ＰＣＲ只有３３％的阳性率;６７例ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性标本的平均拷贝数为２．３×１０５／ｍｌ。结论能够避免ＰＣＲ后处理导致的假阳性污染,并实现准确定量。ＦＱＰＣＲ可以检测ＨＢＶ的真实感染和复制情况,对于乙型肝炎的临床诊断,治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义。     

聚合酶链反应检测血透患者血清中HBV DNA的临床意义

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了４２例维持性血液透析患者血清标本的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，以评价ＰＣＲ技术在调查透析中心ＨＢＶ感染的流行病学方面的应用价值。结果在４２例标本中有１７例ＨＢＶＤＮＡ阳性（４０．５％），与常规血清标志物相比较，ＨＢｓＡｇ阳性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６０．９％，而全部血清标志物均阴性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为１３．３％。提示：ＰＣＲ方法是监测中心透析ＨＢＶ传染的更灵敏、更可靠手段。它也是对ＨＢＶ变异类型的鉴别及疗效评价方面的一个重要方法。     

不同血清学标志血清中HBV DNA和HCV RNA的分析研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测４８１例乙肝血清学五项指标至少一项阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果显示ＨＢＶＤＮＡ的检出率为９１．５％，ＨＣＶＲＮＡ的检出率为１５．４％，并提示（１）当乙肝患者血清中抗ＨＢｅ阳性甚至抗ＨＢｓ阳性时，仍有相当部分的ＨＢＶ存在且仍在复制；（２）ＨＢＶ和ＨＣＶ感染可相互增加其易感性；ＨＢｓＡｇ阳性与否与抗ＨＣＶ可能有一定关系；（３）ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ具有较高的敏感性。     

乙型肝炎患者HBV－DNA和HBeAg检测的比较

乙型肝炎患者ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ检测的比较上海第二医科大学（２０００２５）刘丹，支立民，徐伯忠本文应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和酶联免疫吸附法对６６例确诊为乙型肝炎患者的血清，分别检测ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｇ，现将结果报道如下。一、...     

复合PCR检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，建立了复合ＰＣＲ，并对临床标本进行检测，５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；１０例慢性ＮＡＮＢ抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶ－ＲＮＡ，１例ＨＢＶ－ＤＮＡ和     

乙型肝炎表面抗原阳性血清经不同方法消毒后用PCR法对HBV—DNA…

经用ＰＣＲ法技术检测，以辐照度值〉１０５μＷ／ｃｍ＾２的紫外线对ＨＢｓＡｇ阳性血清照射８小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ有一定灭活作用。煮沸１０分钟，或者以７５％乙醇作用１小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ灭活能力较差。     

双带PCR提高检测血清HBV-DNA质量的意义

应用双带ＰＣＲ方法（ＤＢ－ＰＣＲ）检测了２４０份血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，该方法能直接观察和判断假阴性和假阳性结果，提高了检测的准确性。与国内其它ＰＣＲ试剂比较，符合率分别为９４．０５％（ＤＢ－ＰＣＲ／华美产品），和９５．２８％（ＤＢ－ＰＣＲ／长城产品）。ＨＢｅＡｇ阳性的血清，经ＤＢ－ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者达９３．５５％（２９／３１）。ＰＣＲ产物Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ后能与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针杂交，证明了该方法的特异性。     

乙肝标志物聚合血清白蛋白受体与HBV－DNA检测的比较分析

乙肝标志物聚合血清白蛋白受体与ＨＢＶ－ＤＮＡ检测的比较分析嘉兴市第二医院（３１４０００）金利民，王志刚，朱国利应用潍坊３Ｖ诊断技术公司提供的固相放射免疫分析试剂检测聚合血清白蛋白受体（ＰＨＳＡＲ）及军事医科院放射医学研究所提供的ＰＣＲ试剂盒检测ＨＢＶ...     

e抗原阴性乙肝患者HBV—DNA检出率与临床疾病状态的关系

研究肝病患者ｅ抗原转阴后病毒复制情况以及ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率与临床疾病状态的关系。方法采用ＰＣＲ技术对１０８例ｅＡｇ阴性、ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者进行血清ＨＢＶ－ＤＮＡ分析，同时进行肝功能指标检测。结果５０．９％的患者体内仍存在乙肝病毒复制。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性无症状携带者２７．８％、慢迁肝４５．８％、慢活肝７７．８％、肝硬化５６．５％、肝癌３７．５％。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组ＡＬＴ值为１３８．６±１０２．８ＩＵ，而ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性组为３４．２±３０．２ＩＵ。结论ｅＡｇ阴性乙肝病毒感染者中仍有相当一部分存在乙肝病毒复制。慢性活动性肝炎患者ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率最高。但是疾病发展到晚期，病毒复制能力又开始下降。     

荧光定量PCR检测HBV—DNA的临床意义

本文采用荧光定量ＰＣＲ法对本院临床和门诊血清标本2 0 0份进行ＨＢＶ ＤＮＡ含量测定 ,探讨ＨＢＶ ＤＮＡ含量与肝病变发展的关系。1　材料和方法1 1　材料　标本取自确诊或怀疑乙肝的患者及无症状体检者 ,共检测 2 0 0例。试剂∶荧光定量ＨＢＶ ＤＮＡ试剂盒由匹基公司提供。仪器∶ＰＥ5 70 0ＰＣＲ仪。1 2　方法　ＨＢＶ ＤＮＡ定量分析采用荧光定量ＰＣＲ法。按操作说明书进行。1 3　统计学方法　各组ＨＢＶ ＤＮＡ含量均数比较采用ｔ检验。遇有阴性结果不参加平均值的统计。2　结果2 1　ＨＢＶ ＤＮＡ、ＦＱ ＰＣＲ标准曲线　ＨＢＶ …     

乙型肝炎病毒前S1蛋白及其抗体与HBV血清标志物的相关性

为探讨Ｐｒｅ－Ｓ１、抗Ｐｒｅ－Ｓ１与ＨＢＶ免疫标志物的相关性，正确评价其临床意义，我们采用ＥＬＩＳＡ对３３０例ＨＢｓＡｇ阳性标本进行了Ｐｒｅ－Ｓ１、抗Ｐｒｅ－Ｓ１与ＨＢＶ血清标志物相关性的探讨。１　材料和方法１．１　标本　收集ＨＢｓＡｇ阳性标本３３０份，－２０°Ｃ保存。１．２　试剂　ＨＢＶ血清标志物检测试剂由科华生物技术有限公司生产，批号９８０３２０，前Ｓ１试剂盒由新新医学生物工程公司提供，批号９８０４２６。１．３　方法　按说明书操作。２　结果２．１　血清前Ｓ１和ＨＢＶ免疫标志的检测　结果见表１…     

乙型肝炎血清学标志物抗力的比较

经检测，对钴－６０辐照，病人血清中ＨＢｓＡｇ、ｐＨＳＡ－Ｒ与ＨＢＶ－ＤＮＡ抗力较其中ＨＢＶ－ＤＮＡｐ、ＨＢｅＡｇ及纯化ＨＢｓＡｇ者为强．ＨＢＶ颗粒经１７．９０ｋＧｙ剂量辐照后在电镜下仅见碎片．对所试含氯消毒剂、碘酊、高锰酸钾、盐酸与过氧化物消毒剂，病人血清中的ＨＢｓＡｇ较其中ｐＨＳＡ－Ｒ、ＨＢｅＡｇ及纯化ＨＢｓＡｇ的抗力为强．