低蛋白饮食联合α-酮酸治疗中期慢性肾衰竭疗效评价

由于透析和肾移植治疗费用昂贵,国内大多数早、中期慢性肾衰竭(CRF)患者仍依赖非透析疗法.大量研究[1]证明,低蛋白饮食和维持足够热能可延缓CRF的进展,但人们担心低蛋白饮食可能引起CRF患者营养不良或影响其预后.     

地塞米松对马兜铃酸诱导的人肾小管上皮-间充质转化的作用及可能机制

目的探讨地塞米松(Dex)对马兜铃酸诱导的肾小管上皮-间充质转化(EMT)的影响及可能机制。方法体外培养的人肾小管上皮细胞(HKC)分为阴性对照组、马兜铃酸(AA,10μg/ml)作用组、Dex(100μmol/L)作用组、AA(10μg/ml)+无水乙醇(100μmol/L)组、AA(10μg/ml)+Dex(100、10、1、0.1、0.01μmol/L)共同作用组,培养细胞48h,应用激光共聚焦显微镜(CFMS)观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-cadherin)的表达,采用Real-timePCR和WesternBlot方法检测α-SMA、E-cadherin、p-Smad3、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad7mRNA和蛋白的表达。结果 AA作用48h后,CFMS观察发现HKC细胞E-cadherin表达减弱而α-SMA表达增强;地塞米松干预后,E-cadherin表达逐渐增强而α-SMA表达减弱,且呈剂量依赖性。Real-timePCR、WesternBlot结果均显示,与阴性对照组相比,AA组α-SMA、p-Smad3、TGF-β1mRNA和蛋白表达水平均显著增强,E-cadherin、Smad7mRNA和蛋白的表达均减弱(P0.05)。同AA作用组比较,AA+Dex共同作用组随Dex剂量增加,α-SMA、p-Smad3、TGF-β1mRNA和蛋白的表达逐渐减弱,E-cadherin、Smad7mRNA和蛋白的表达逐渐增强(P0.05),而无水乙醇却无此作用。结论 Dex可抑制AA诱导HKC细胞发生EMT,并同时下调EMT过程中TGF-β1和p-Smad3的表达、上调Smad7分子的表达,提示TGF-β1/Smad下调可能是Dex抑制EMT发生的机制之一。     

低蛋白饮食加α-酮酸治疗慢性肾衰竭疗效观察

[目的]研究低蛋白饮食加α-酮酸对慢性肾衰竭(CRF)患者的治疗作用.[方法]以30例CRF患者为研究对象,按每日蛋白质供给量为0.6g/kg;α-酮酸片6片,3次/d,严格按照食谱进餐90d,观察指标为患者上臂围(MAC)、上臂肌围(MAMC)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、白蛋白(ALB).[结果]经治疗后患者上臂围(MAC)明显高于治疗前(P<0.05),血浆白蛋白(ALB)显著升高(P<0.05),血尿素氮显著下降(P<0.05).[结论]低蛋白饮食加α-酮酸对慢性肾衰竭患者有良好的治疗作用.     

低蛋白加α-酮酸饮食对5/6肾大部切除大鼠营养物质代谢及残肾组织硬化的影响

目的 观察低蛋白加α-酮酸饮食对5/6肾大部切除大鼠营养物质代谢及残肾组织硬化的影响.方法 30只雄性SD大鼠行516肾大部切除术建立慢性肾衰竭模型,1周后予不同饲料喂养,根据喂养方式分组如下:正常蛋白组(NPD组)予18%酪蛋白,低蛋白组(LPD组)予6%酪蛋白,低蛋白+α-酮酸组(LK组)予5%酪蛋白+1%α-酮酸,每组10只.另取10只雄性SD大鼠行假手术后予正常蛋白(18%酪蛋白)饲料喂养作对照组(Sham组).12周后麻醉处死大鼠,留取血、尿标本,应用糖原染色法(过碘酸雪夫反应)观察残肾组织病理改变,应用免疫组织化学和Western印迹法检测残肾组织中转化生长因子(TGF)-β1的表达.结果 建模3个月后,各组大鼠血压、体重、血白蛋白和总蛋白水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05).NPD、LPD、LK组大鼠血磷、iPTH、稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和三酰甘油水平均较Sham组显著升高(P值均<0.05),而LK组大鼠各项指标均较LPD和NPD组显著降低(P值均<0.05).NPD、LPD、LK组血CO2结合力显著低于Sham组(P值均<0.05),LK组又显著高于NPD和LPD组(P值均<0.05).NPD、LPD、LK组大鼠血肌酐水平较Sham组显著升高(P值均<0.05),但前3组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05).NPD、LPD、LK组大鼠尿蛋白水平较Sham组显著增高(P值均<0.05),其中LK组尿蛋白总量较NPD和LPD组显著降低(P值均<0.05).NPD、LPD、LK组大鼠的肾小球病理硬化积分(GSI)和肾小球细胞外基质/肾小球面积之比均显著高于Sham组(P值均<0.05),LK、LPD组又显著低于NPD组(P值均<0.05).iPTH(r=0.704)、三酰甘油(r=0.455)、胆固醇(r=0.348)与血肌酐水平呈正相关(P值均<0.05),CO2结合力(r=-0.848)与血肌酐水平呈负正相关(P(0.05).iPTH(r=0.685)、三酰甘油(r=0.506)与TGF-β1呈正相关(P值均<0.05),CO2结合力(r=-0.779)与TGF-β1呈负相关(P<0.05).结论 在5/6肾大部切除大鼠中,低蛋白加α-酮酸饮食在保证全身营养状态稳定的情况下具有独立于降压之外的减轻蛋白尿等肾脏保护作用,可能与直接改善残肾组织硬化以及纠正血脂代谢异常、继发性甲状旁腺功能亢进和代谢性酸中毒等间接途径有关.     

低蛋白配伍α-酮酸饮食对慢性肾衰竭大鼠体内氧化应激水平的影响

目的研究低蛋白配伍α-酮酸饮食对慢性肾衰竭大鼠体内氧化应激水平的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组(行剥离肾包膜假手术,n=10)和模型组(行两步法肾大部切除术,n=30)。模型组1周后根据不同喂养方式分为以下亚组:正常蛋白组(NPD组,n=10,以含18%酪蛋白的饲料喂养)、低蛋白组(LPD组,n=10,以含6%酪蛋白的饲料喂养)、低蛋白+α-酮酸组(LK组,n=10,以含5%酪蛋白+1%α-酮酸的饲料喂养)。对照组以含18%酪蛋白的饲料喂养。观察各组大鼠体质量及血、尿生化指标的改变,生化指标包括血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb)、总蛋白(TP)和24 h尿蛋白排泄量。分光光度法测定血清和肾皮质匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。放射免疫法测定肾皮质匀浆中肾素和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)活性;ELISA法测定血浆中AngⅡ的活性。结果饲养12周后,各模型组大鼠的体质量、Alb和TP水平与对照组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。饲养4、8、12周时,各模型组大鼠的24 h尿蛋白排泄量均显著高于对照组(均P<0.05);其中LPD组和LK组均显著低于NPD组(均P<0.05),LK组较LPD组进一步降低(P<0.05)。LK组大鼠肾皮质匀浆中肾素活性和AngⅡ活性均较NPD组显著降低(均P<0.05)。与对照组比较,各模型组大鼠血清和肾皮质匀浆中MDA水平均显著升高(均P<0.05),SOD和GSH-Px水平均显著降低(均P<0.05);其中LPD组和LK组MDA水平较NPD组显著降低(均P<0.05),SOD和GSH-Px水平显著升高(均P<0.05)。相关性分析结果显示:肾皮质匀浆中MDA水平与AngⅡ的活性呈正相关(r=0.892,P<0.001),而SOD和GSH-Px水平均与AngⅡ的活性呈负相关(r值分别为-0.978和-0.965,均P<0.001)。结论低蛋白配伍α-酮酸饮食在维持营养状态稳定的前提下具有肾脏保护作用,可改善慢性肾衰竭大鼠体内增强的氧化应激及减少蛋白尿排泄;该作用可能与营养治疗本身有关,也可能与抑制肾脏局部肾素—血管紧张素系统的活性有关。     

VEGF对上皮间充质转化的抑制与Smad信号途径及SnoN表达的变化

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞发生肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的过程中对Smad2/3,Smad7信号途径以及SnoN表达的影响。方法体外培养的HK-2细胞分为:①正常对照组;②TGF-β1(5μg/L)阳性对照组;③VEGF165(100μg/L)作用组;④TGF-β1(5μg/L)+VEGF165(100μg/L)共同作用组。采用WesternBlot法和RT-PCR分别检测各组细胞p-Smad2/3和Smad2/3(共同作用30和60min),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad7、SnoN的表达水平(共同作用48h)。结果 TGF-β1组α-SMA蛋白和mRNA表达与正常对照组比较明显增强,TGF-β1与VEGF165共同作用组α-SMA蛋白和mRNA表达与TGF-β1单独作用组比较明显减弱(P0.05)。体外HK-2细胞,TGF-β1组刺激30、60min,与正常对照组比较,(p-Smad2/3)/(Smad2/3)比值明显升高,TGF-β1+VEGF165组与TGF-β1单独作用组相比明显下降,且以30min时下降明显。TGF-β1组作用48h与正常对照组比较,Smad7蛋白和mRNA表达明显下降,VEGF165+TGF-β1组较TGF-β1单独作用组Smad7表达明显升高(P0.05)。VEGF165组与正常对照组相比,α-SMA、(p-Smad2/3)/(Smad2/3)、Smad7蛋白和mRNA表达的差异无统计学意义(P﹥0.05)。TGF-β1组SnoN蛋白表达与正常对照组比较明显增强(P0.05),TGF-β1与VEGF165共同作用组SnoN蛋白表达与TGF-β1单独作用组相比差异无统计学意义(P﹥0.05),各组SnoNmRNA表达差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论 VEGF165抑制TGF-β1诱导HK-2细胞EMT的机制可能与直接抑制Smad2/3磷酸化、上调Smad7信号表达有关,而与调节SnoN表达无关。     

红细胞生成素对肾小管上皮-间充质细胞转化的抑制作用及其与VEGF表达变化的关系

目的探讨红细胞生成素（rHuEPO）对人肾小管上皮细胞（HKC）上皮-间充质细胞转化（EMT）的作用及其与该细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达变化的关系。方法体外培养HKC,以未处理的HKC为阴性对照,以8ng/ml的转化生长因子-β1（TGF-β1）处理的HKC为阳性对照,以不同浓度（0.1、1.0、10、50、100IU/ml）的rHuEPO与8ng/ml的TGF-β1共同处理HKC,或在不同时间（-24、0、12、24、36h）用同一浓度rHuEPO（100IU/ml）对8ng/ml的TGF-β1处理的HKC进行干预。应用RT-PCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和VEGFmRNA转录水平,应用免疫印迹方法检测α-SMA、E钙黏蛋白以及VEGF的蛋白表达水平。结果rHuEPO以剂量和时间依赖的方式抑制TGF-β1诱导的HKCα-SMAmRNA和蛋白的表达（P〈0.05或P〈0.01）,保护性上调TGF-β1抑制的HKC细胞E钙黏蛋白的表达（P〈0.05或P〈0.01）;同时上调TGF-β1抑制的HKC细胞VEGFmRNA和蛋白的表达（P〈0.05或P〈0.01）。结论rHuEPO对TGF-β1诱导的EMT具有一定的抑制作用,并具剂量-时间依赖性;该作用可能与rHuEPO上调肾小管上皮细胞VEGF的表达有关。     

α-酮酸加低蛋白饮食对慢性肾功能衰竭合并甲状旁腺素的作用

目的对低蛋白饮食加α-酮酸(开同)治疗慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺亢进的疗效进行评价。方法选择38例慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺亢进患者,肌酐200～700μmol/L,用低蛋白饮食加α-酮酸治疗3个月,每天蛋白质摄入量0.6g/kg,开同4～8片/d,观察生化指标:肌酐、尿素氮、全段甲状旁腺激素、血钙、血磷、碱性磷酸酶、HCO-3等治疗前后的变化。结果治疗第1个月患者的全段甲状旁腺激素、血磷等有所下降,治疗3个月时下降更显著。结论低蛋白饮食加α-酮酸能有效治疗慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺功能亢进。     

α-酮酸加低蛋白饮食对慢性肾功能衰竭合并甲状旁腺素的作用

目的 对低蛋白饮食加α-酮酸(开同)治疗慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺亢进的疗效进行评价.方法 选择38例慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺亢进患者,肌酐200～700 μmol/L,用低蛋白饮食加α-酮酸治疗3个月,每天蛋白质摄入量0.6g/kg,开同4～8 片/d,观察生化指标肌酐、尿素氮、全段甲状旁腺激素、血钙、血磷、碱性磷酸酶、HCO-3等治疗前后的变化.结果 治疗第1个月患者的全段甲状旁腺激素、血磷等有所下降,治疗3个月对下降更显著.结论 低蛋白饮食加α-酮酸能有效治疗慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺功能亢进.     

TGF-β诱导肿瘤细胞上皮-间充质转化的调节及信号转导机制研究进展

上皮-间充质转化( EMT)是源于上皮细胞的恶性肿瘤细胞获得迁徙和侵袭能力的重要生物学过程。恶性上皮性肿瘤细胞和基质细胞分泌的转化生长因子β( TGF-β)诱导和促进了肿瘤细胞的EMT过程。有研究表明TGF-β借助于Smad依赖性或非Smad依赖性信号转导通路,诱导或抑制EMT过程关键基因的表达;细胞外及细胞膜的多种因子则对上述信号转导过程产生调节作用。结果提示,在TGF-β诱导的肿瘤细胞的EMT过程,涉及一个复杂而精细的信号转导调控网络。     

MCP-1诱导的肾小管上皮-间充质细胞转化与整合素连接激酶表达变化的关系

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）诱导体外培养的肾小管上皮细胞转分化的作用及其与细胞整合素连接激酶（ILK）表达变化的关系。方法体外培养的HKC,以未处理的HKC为阴性对照,以8ng／mlTGF-81处理的HKC为阳性对照,以不同浓度的MCP-1（0．1、1．0、10、100ng／m1）处理细胞,或以同一浓度的MCP-1（1ng／ml）在不同时间点（0h、12h、24h、36h、48h、72h）处理细胞。用半定量RT-PCR方法测定各组HKC细胞α—SMA mRNA的表达,Western blot方法测定各组HKC细胞α-SMA及ILK表达。在上述实验基础上进一步观察MEK抑制剂（PD98059,10μmol／L）,p38MAPK抑制剂（SB203580,5／μmol／L）和ROCK抑制剂（Y27632,500μmol／L）对HKC细胞ILK表达的影响。结果MCP-1（0．1、1．0ng／m1）作用后HKC细胞α-SMA mRNA和α—SMA、ILK蛋白表达显著高于阴性对照组（P＜0．01）,但低于阳性对照组（P＜0．01）;其中以1．0ng／ml MCP-1组作用后α—SMAmRNA和α—SMA、ILK蛋白表达水平增高更为显著（P＜1．001）。1．0ng／ml MCP-1作用后细胞α-SMA mRNA和α-SMA、ILK蛋白表达在0-48h内逐渐增加,48h达最高峰（P＜0．01）,72h时呈下降趋势。分别加入阻断剂PD98059、SB203580和Y27632后,HKC细胞ILK蛋白表达水平与MCP-1单独作用无显著性差异（P＞0．05）。结论MCP-1可诱导肾小管上皮细胞转分化并呈时间浓度依赖性,该作用可能与MCP-1上调ILK的表达有关;本研究未发现MCP-1上调ILK的信号传导途径与MEK1、p38MAPK、ROCK途径有关。     

低蛋白饮食联合复方α-酮酸治疗慢性肾功能衰竭的疗效观察

目的观察低蛋白饮食联合复方α-酮酸（开同）治疗慢性肾功能衰竭的临床效果。方法共42例患者,分为治疗组和对照组,每组21例,两组均给予低蛋白饮食0．5-0．6g／（kg·d）,热量35kcal／（kg·d）,治疗组同时口服复方α-酮酸,每天3次,每次4-8片,治疗5个月后,比较生化指标。结果两组对比,治疗组血浆蛋白、钙解代谢、尿素氮及血肌酐显著改善,P〈0．05。结论低蛋白饮食联合复方α-酮酸能显著改善尿毒症症状和保护残余肾功能。     

褐藻多糖硫酸酯抑制大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的观察褐藻多糖硫酸酯（FPS）对慢性肾衰竭大鼠肾间质纤维化及肾小管上皮-间充质细胞转化（EMT）的作用,并探讨该作用与肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、血小板反应蛋白1（TSP-1）和血管内皮生长因子（VEGF）表达变化的关系。方法将6周龄Wistar雄性大鼠随机分为3组,即正常对照组（n=15）,进食普通饲料;CRF模型组（n=24）,进食含0.75%腺嘌呤的饲料;CRF＋FPS组（n=24）,进食含0.75%腺嘌呤饲料的同时,每天给予FPS200mg/kg灌胃。分别于第2、4、6周末处死大鼠,留取肾组织。采用免疫组化方法检测肾组织肌动蛋白α（α-SMA）的表达,分别采用免疫组化方法和逆转录酶PCR法（RT-PCR）检测肾组织TGF-β1、MCP-1、TSP-1及VEGF的蛋白和mRNA表达情况。结果第2、4、6周时CRF＋FPS组大鼠肾组织α-SMA蛋白表达均明显低于同期CRF模型组（P〈0.05）。CRF＋FPS组大鼠肾组织第2、4周时TGF-β1、MCP-1、TSP-1表达明显低于同期CRF模型组（P〈0.05）,而第2周时TGF-β1、MCP-1、TSP-1的mRNA表达明显低于同期CRF模型组（P〈0.05）,第4周时MCP-1的mRNA表达明显低于同期CRF模型组（P〈0.05）。CRF＋FPS组第2、4周时肾组织VEGF蛋白和mRNA表达明显高于同期CRF模型组（P〈0.05）。结论FPS对慢性肾衰竭大鼠肾小管上皮-间充质细胞转化具有抑制作用,该作用与肾组织TGF-β1、MCP-1及TSP-1的表达下调和VEGF表达上调有关,这可能部分解释FPS的肾保护作用机制。     

肾小管上皮-间充质细胞转化机制与治疗意义

肾间质纤维化是慢性肾病（chronic kidney diseases,CKD）进行性发展的共同途径。RIF的主要病理表现为肾间质细胞外基质累积、肾小管萎缩、肾间质肌成纤维细胞（myofibroblasts,MF）增多等。而肾间质MF是合成细胞外基质的主要细胞,在间质纤维化的发病中起重要作用。目前认为,MF主要来源为骨髓干细胞、肾小管上皮细胞转化和肾间质局部成纤维细胞活化。肾小管上皮细胞失去自身的细胞特性而获得肌成纤维细胞的特性,称为上皮-间充质细胞转化（epithelial—mesenchymal transition,EMT）。研究表明,EMT在肾间质纤维化的发生和发展中起重要作用;而抑制或逆转EMT的发生和发展,已成为控制肾间质纤维化的重要途径之一。     

慢性肾功能衰竭患者应用低蛋白饮食联合复方α-酮酸的临床疗效观察

目的评价低蛋白饮食联合复方α-酮酸治疗延缓慢性肾功能衰竭（CRF）、改善钙磷代谢异常的临床疗效。方法中度CRF患者40例（血肌酐177-450μmol／L），随机分为低蛋白饮食联合复方α-酮酸治疗组（α-酮酸组）20例及单独低蛋白饮食组（低蛋组）20例，治疗前及治疗后每2个月进行生化指标评估，两组患者均随访6个月。结果治疗后α-酮酸组患者的血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平均有所降低，尤以BUN降低明显，血钙（Ca）水平显著上升，血磷（P）水平呈下降趋势。结论低蛋白饮食联合复方α-酮酸治疗在改善慢性肾衰竭患者的钙磷代谢异常及稳定肾功能方面具有一定疗效。     

低蛋白饮食加α酮酸延缓慢性肾脏病进展的临床研究

目的探讨低蛋白饮食加复方α酮酸治疗慢性肾脏病(CKD)Ⅲ～Ⅳ期患者的临床疗效。方法选择CKDⅢ～Ⅳ期患者(非透析治疗)101例,其中4例因病情加重退出实验,至实验结束时为97例,所有患者给予低蛋白饮食,控制蛋白摄入量为0.6 g/(kg.d),再加以复方α酮酸治疗。随访12个月,检测治疗前后血清肾功能和白蛋白,并以MDRD法测算肾小球滤过率(GFR)。结果 97例CKD患者治疗前后肌酐、尿素、白蛋白、GFR差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CKDⅢ～Ⅳ期患者予以低蛋白饮食加α酮酸治疗,可防止必需氨基酸缺乏和改善代谢紊乱,且复方α酮酸可能在本质上具有肾脏保护作用,发挥有效延缓CKD进展的作用。     

血管内皮生长因子对肾小管上皮-间充质细胞转化的作用及其与骨形成蛋白-7、分化抑制因子表达的关系

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的作用及其与骨形成蛋白-7(BMP-7)、分化抑制因子(Id)2、Id3表达的关系。方法体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)经转化生长因子-β1(TGF-β1,5ng/ml)与不同浓度VEGF165(0.1、1、10、100ng/ml)共同作用,或TGF-β1(5ng/ml)与血管内皮生长因子受体-1(VEGFR1)抗体(10μg/ml)共同作用48h后,免疫组织化学双染方法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素表达,实时荧光定量PCR法、Westernblot法检测细胞α-SMA、BMP-7、Id2和Id3的表达。TGF-β1(5ng/ml)、VEGF165(100ng/ml)与激活素受体样激酶-6/Fc嵌合体(Alk6/FcChimera)(2μg/ml,中和内源性BMP-7)共同作用48h后,Westernblot法检测细胞α-SMA、Id2的表达情况。结果TGF-β1作用后,α-SMA表达比正常对照显著增强(P<0.05),E-钙黏素、BMP-7、Id2及Id3的mRNA及蛋白质表达均显著减弱(P<0.05)。VEGF165以浓度依赖方式增强BMP-7及Id2蛋白表达,而显著降低TGF-β1上调α-SMA表达的作用(P<0.05)。加入VEGFR1抗体(10μg/ml)后,TGF-β1上调α-SMA表达的作用显著增强(P<0.05),而E-钙黏素、BMP-7、Id2表达显著减弱(P<0.05)。TGF-β1 VEGF165 Alk6/FcChimera共同作用后α-SMA蛋白表达比TGF-β1 VEGF165共同作用后显著增强(P<0.05),而Id2表达差异无显著性。结论VEGF165可抑制TGF-β1诱导HK-2细胞发生EMT;其机制可能与BMP-7和Id2表达上调有关,而与Id3表达变化无关。Id2表达增强可能与VEGF165的直接作用有关,而与BMP-7无关。     

低蛋白饮食加α-酮酸治疗慢性肾功能衰竭合并甲状旁腺素30例疗效分析

目的 评价低蛋白饮食加α-酮酸(开同)治疗慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺亢进的疗效.方法 选择30例慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺亢进患者,肌酐200～700μmol/L,用低蛋白饮食加α-酮酸治疗3个月,每天蛋白质摄入量0.6g/ kg,开同4～8片/d,观察生化指标:肌酐、尿素氮、全段甲状旁腺激素、血钙、血磷、碱性磷酸酶、HCO3-等治疗前后的变化.结果 治疗第1个月患者的全段甲状旁腺激素、血磷等有所下降,治疗3个月时下降更显著.结论 低蛋白饮食加α-酮酸能有效治疗慢性肾功能不全合并继发性甲状旁腺功能亢进.     

三七总皂苷对大鼠肾小管上皮间充质转化过程的影响

目的研究三七总皂苷(PNS)对大鼠肾小管上皮间充质转化及肾间质纤维化的作用。方法建立大鼠肾纤维化的动物模型,将30只SD大鼠随机分为正常对照组、梗阻组和梗阻+PNS组,各10只。分别进行相应的处理后,观察其肾组织的间质纤维化情况,进行波形蛋白、小鼠抗大鼠细胞角蛋白(CK)、小鼠抗大鼠-平滑肌肌动蛋白(-SMA)和小鼠抗大鼠转化生长因子-1(TGF-1)的检测,并进行Gremlin检测。结果梗阻组和梗阻+PNS组大鼠肾组织均出现间质纤维化,但梗阻组的程度比梗阻+PNS组要明显。梗阻组、梗阻+PNS组中细胞角蛋白表达低于正常对照组,波形蛋白、-SMA和TGF-1以及Gremlin的表达显著高于正常对照组;而梗阻组中细胞角蛋白表达低于梗阻+PNS组,波形蛋白、-SMA和TGF-1以及Gremlin的表达则高于梗阻+PNS组,差异均有统计学意义(均<0.05)。结论三七总皂苷可能通过下调TGF-1、Gremlin等的表达,抑制肾小管上皮间充质转化,阻断了肾间质纤维化。     

转化生长因子β1诱导A549细胞上皮-间充质转化的时间相关性

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导A549细胞发生上皮-间充质转化(EMT)的时间相关性。方法:将体外培养的A549细胞分为空白组(加入F-12培养基)、模型组(加入10ng/ml TGF-β1)后继续培养。采用MTT实验检测细胞的增殖能力,光学显微镜下观察细胞形态学改变,实时荧光定量PCR和Western blot法检测E-Cad、Vim、FN mRNA的蛋白表达水平。结果:模型组在48h、72h时与空白组比较,A549细胞显著增殖(均P<0.01)、细胞形态明显改变,72h时几乎所有细胞呈纺锤形;48h、72h时与空白组比较,模型组FN mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01),E-Cad mRNA表达显著下调(P<0.01)。48h时与空白组比较,模型组FN蛋白表达上调(P<0.05),E-Cad蛋白表达显著下调(P<0.01)。在72h时与空白组比较,模型组FN、Vim蛋白表达明显上调(P<0.01),E-Cad mRNA表达显著下调(P<0.01)。结论:A549细胞发生EMT与TGF-β1刺激的时间长短有关。72h和48h为体外实验EMT发生的时间,72h为EMT的最佳时间点。