TGF-β1及其信号蛋白在大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织中的表达及可能作用

目的了解TGFβ1/Smads信号蛋白在高浓度葡萄糖透析液及炎症所致大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织中的表达及在腹膜纤维化发生中的可能作用。方法24只SD雄性大鼠(180～200g)随机分为4组,每组6只。正常对照组,大鼠不做任何处理;LPS组,LPS用生理盐水稀释为0.6mg/100ml,在第1、3、5、7日按0.6mg/kg体重腹腔注射;4.25%透析液组,大鼠给予每日腹腔注射100ml/kg体重高糖透析液;LPS+4.25%透析液组,除每日腹腔注射100ml/kg体重高糖透析液外,LPS用4.25%透析液稀释为0.6mg/100ml,在第1、3、5、7日按0.6mg/kg体重腹腔注射;于实验第28天杀检动物,取壁层和脏层腹膜组织行光镜及电镜检查。用RTPCR及间接免疫荧光、Western杂交的方法检测αSMA、TGFβ1、Smad3、Smad7、pSmad2/3、ColⅠmRNA和蛋白的表达水平。结果Masson染色显示,与正常对照组比较,4W时各组壁层腹膜组织明显增厚,有大量胶原沉积,其中LPS+4.25%透析液组厚度最为显著(vsLPS组:42μm±3μmvs35μm±4μm,P=0.007,vs4.25%透析液组,42μm±3μmvs20μm±4μm,P=0.000);与正常对照组比较,三组αSMA、ColⅠ和TGFβ1、Smad3、pSmad2/3在脏层腹膜组织中的表达水平显著上调,上述变化以LPS+4.25%透析液组改变最为显著,TGFβ1mRNA为正常对照组的2倍,Smad3mRNA为正常对照组的1.8倍;与正常对照组比较,抑制性信号蛋白Smad7mRNA和蛋白表达水平在其他三组也有不同程度的上调,但Western杂交结果显示,pSmad/Smad7蛋白比值仍明显升高;电镜结果显示,除正常对照组外,各组间皮细胞均有损伤,LPS+4.25%透析液组的间皮细胞损伤最为明显,而且胞浆中出现明显的肌丝和密体。结论TGFβ1/Smads信号蛋白的活化是高浓度葡萄糖透析液和LPS导致大鼠腹膜发生纤维化的共同作用途径。高浓度葡萄糖透析液和LPS可能协同作用通过TGFβ1/Smads通路刺激腹膜间皮细胞转分化,介导腹膜纤维化的发生。     

HpLC 法测定中性腹膜透析液（乳酸盐）中葡萄糖的含量

目的：建立高效液相色谱法测定中性腹膜透析液（乳酸盐）中葡萄糖含量的方法。方法采用 Waters Sugar ParkⅠ色谱柱（6.5 mm ＆#215;300 mm,6.5μm）,流动相为水,流速：0.5 mL·min -1,柱温：80℃,示差检测器设置温度：40℃,进样量：20μL。结果葡萄糖在1.13378~6.80268 mg·mL -1范围内呈良好的线性关系（r =1.0000）。含1.5%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为99.1%,RSD =0.4%（n =9）;含2.5%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为100.1%,RSD =0.2%（n =9）;含4.25%葡萄糖的中性腹膜透析液（乳酸盐）平均回收率为100.2%,RSD =0.3%（n =9）。结论本方法简便、快速、准确,可用于中性腹膜透析液（乳酸盐）的质量控制。     

几丁糖对高糖腹透液刺激大鼠腹膜间皮细胞TGF-β1表达的影响

目的 探讨高糖腹透液(4.25%)对大鼠二代腹膜间皮细胞TGF-β1表达的影响及几丁糖(chitosan)的干预作用.方法 取第2代鼠腹膜间皮细胞(rat peritoneal mesothelial cells, RPMC)(经细胞形态和免疫组化鉴定),随机分为4组(n=4),A组即对照组:DMEM/F12培养基培养;B组:DMEM/F12培养基中加入4.25%葡萄糖透析液;C组:DMEM/F12培养基中加入4.25%葡萄糖透析液+几丁糖1.2 mg/L;D组:DMEM/F12培养基中加入4.25%葡萄糖透析液+几丁糖0.4 mg/L.培养24 h收集细胞提取RNA,48 h收集细胞提取蛋白,RT-PCR检测腹膜间皮细胞TGF-β1 mRNA的表达.Western印迹检测TGF-β1的蛋白表达.结果 ①RPMC经高糖腹透液(4.25%)刺激后,TGF-β1 mRNA和蛋白的表达均上升,与0 h比较,TGF-β1 mRNA和蛋白的表达分别于24、48 h时达到高峰, A、B两组比较差异有统计学意义(P<0.05);②24 h时,几丁糖使TGF-β1 mRNA的表达下降明显(P<0.05),B组分别为A组的2.51倍、C组的2.13倍、D组的1.68倍,D组为C组的1.26倍且抑制程度与几丁糖浓度呈正相关(r=0.948, P<0.01).48 h时,几丁糖使TGF-β1的蛋白水平下降明显,B组分别为A组的1.85倍、C组的1.52倍、D组的1.24倍,D组为C组的1.23倍.C、D两组分别与B组比较差异有统计学意义(P<0.05),且抑制程度与几丁糖浓度呈正相关(r=0.831, P<0.05).结论 ①高糖腹透液可刺激RPMC TGF-β1 mRNA和蛋白表达上调;②几丁糖可抑制腹膜纤维化的中枢性因子TGF-β1表达的活性.     

不同腹膜纤维化大鼠模型之比较

目的:采用几种不同方法构建腹膜透析腹膜纤维化大鼠模型，为腹膜透析腹膜纤维化的防治提供可研究的动物模型。方法:34只SD雄性大鼠(200～250g)，随机分为5组，分别是空白对照组(n=7，未予任何处理)、生理盐水组(n=7，每日腹腔内直接注射0.9%生理盐水20ml)、高糖组(n=7，每日腹腔内直接注射4.25%含糖透析液即PDF 20ml)、高糖＋脂多糖(LPS)组(n=6，每日腹腔内直接注射4.25% PDF 20ml，并在第8,10,12天加入LPS 75μg)、高糖＋红霉素组(n=7,每日腹腔内直接注射4.25% PDF 20ml，并在第7,14,21,28天加入乳糖酸红霉素6.25万U)，观察5周。分别于第0，7，14，21，28，35天清晨，空腹状态时测量大鼠体重。5周后行2h腹膜平衡试验(PET)，处死大鼠，准确测量超滤量，检测腹膜功能；观察腹膜厚度、血管数及其他组织学改变；用免疫组织化学法测定腹膜组织及肠管腹腔侧组织纤维连接蛋白(FN)表达率。结果:高糖组、高糖+脂多糖组和高糖+红霉素组皆可见腹膜间皮细胞脱落，间皮下基质及肠外纵肌层明显增厚，可见大量成纤维样细胞及单核、巨噬细胞浸润，且有纤维素样物质沉积等现象，尤以高糖+红霉素组明显；与空白对照组及生理盐水组分别比较，高糖、高糖+脂多糖及高糖+红霉素组大鼠超滤量及2h透出液葡萄糖浓度/０h透析液葡萄糖浓度(D2/D0)比值均有明显减少(P<0.05)，而透析液尿素浓度/血浆尿素浓度(D/Purea)比值、大鼠腹膜组织及肠管腹腔侧组织FN表达率均有明显增加(P<0.05)；与高糖组比较，高糖+红霉素组D/Purea比值、大鼠腹膜组织及肠管腹腔侧组织FN表达率均有明显增加(P<0.05)；与高糖组比较，高糖+脂多糖组D/Purea比值及肠管腹腔侧组织FN表达率皆明显增加(P<0.05)；而在大鼠每周体重变化、透出液中白细胞计数、超滤量、D2/D0比值等方面，高糖、高糖+红霉素和高糖+脂多糖组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用高糖、高糖+脂多糖和高糖+红霉素刺激均能充分复制腹膜透析腹膜纤维化特征，而以高糖+红霉素效果为最佳。     

不同浓度葡萄糖透析液及LPS对腹膜透析大鼠腹膜组织VEGF及血管增生的影响及其意义

目的探讨不同浓度葡萄糖透析液及LPS对大鼠腹膜组织血管内皮生长因子(VEGF)表达及血管增生的影响,揭示其影响腹膜转运功能的机制。方法SD大鼠分成A、B、C、D、E五组,A组为正常对照组,其余各组分别每天腹腔注射1.50%、2.50%、4.25%和4.25%腹膜透析液,E组同时注射脂多糖。分别用RT-PCR、免疫荧光检测VEGF的表达及新生血管的数目,同时检测各组超滤量。结果VEGF的表达随着透析液葡萄糖浓度增加而增加,E组表达最强,RT-PCR结果显示:E组VEGF mRNA表达较A升高约11倍[(65±11.35)vs(5.33±2.3);P<0.001];同时CD31免疫组化也显示腹膜新生血管的数目也逐渐增多,E组较A组升高约8倍[(12.2±2.65)vs(1.33±1);P<0.001]。且随着透析液浓度增加其超滤量逐渐减少。结论腹膜组织可表达VEGF。高糖透析液和LPS均能促进腹膜VEGF表达、促进腹膜新生血管的增生,从而增加腹膜转运的有效滤过面积,减少超滤量。这可能是葡萄糖透析液及LPS影响腹膜转运功能的重要机制之一。     

氟伐他汀在大鼠腹膜透析模型中对腹膜的保护作用

目的:探讨氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)大鼠腹膜组织形态影响的初步研究?方法:通过SD雄性大鼠(体重180~200 g)腹腔注射4.25%浓度的葡萄糖腹透液的方式模拟腹膜透析?随机分为5个组:①正常对照组;②4.25%腹透液组;③单纯Flu组;④生理盐水组;⑤Flu干预的4.25%腹透液组?4周后留取各组大鼠壁层腹膜组织,光镜观察各组大鼠壁层腹膜形态学的变化,同时采用RT-PCR法测定各组大鼠腹膜转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA的表达?结果:光镜下HE染色显示4.25%腹透液组大鼠腹膜较正常对照组显著增厚,Flu干预组的壁层腹膜厚度薄于未干预组,生理盐水组和单纯Flu组大鼠腹膜的形态较正常对照组未见明显改变?4.25%腹透液组大鼠腹膜TGF-β1及FN mRNA的表达量均高于正常对照组(均P < 0.05),Flu干预组两者mRNA的表达量均明显低于未干预组(均P < 0.05),生理盐水组和单纯Flu组大鼠腹膜两者的mRNA表达量较正常组无明显统计学意义?结论:长期使用高糖腹透液会改变腹膜的结构,氟伐他汀在一定程度上对腹膜有保护作用,但具体机制仍需进一步研究?     

硒对高糖诱导的大鼠腹膜透析相关腹膜纤维化的影响

目的 探讨硒对高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞上皮-间质转化（EMT）的影响。方法 将40只清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组（NC组）、高糖组（HG组）、低硒组（HG+L-Se组）、高硒组（HG+H-Se组），每组10只，分别腹腔注射无菌生理盐水、4.25%葡萄糖腹膜透析液、4.25%葡萄糖腹膜透析液和3 mg/kg亚硒酸钠、4.25%葡萄糖腹膜透析液和6 mg/kg亚硒酸钠。腹腔注射28 d后，量取腹腔流出液，计算超滤量。HE染色检测大鼠腹膜组织形态学改变，免疫组织化学染色检测大鼠腹膜组织EMT情况，分光光度法检测大鼠血清丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量和总超氧化物岐化酶（T-SOD）活性。结果 与NC组比较，HG组大鼠腹膜超滤量明显减少，腹膜厚度明显增加（均P <0.05）;E-cadherin蛋白表达明显降低，vimentin蛋白表达明显增加（均P <0.05）；血清MDA含量明显增加，GSH含量、T-SOD活性明显降低（均P <0.05）。与HG组比较，HG+L-Se组和HG+H-Se组大鼠腹膜超滤量增加，腹膜厚度减少；E-cadherin蛋白表达增加，vi...     

辛伐他汀抑制腹膜透析相关性腹膜纤维化的实验研究

目的 研究辛伐他汀对大鼠腹膜透析模型腹膜形态和功能以及腹膜转分化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,初步探讨其对腹膜纤维化的防治作用及可能机制.方法 采用4.25%合糖透析液+脂多糖致腹膜纤维化模型.将大鼠随机分成3组:对照组、模型组、辛伐他汀组,辛伐他汀组在造模同时给予辛伐他汀20mg/(kg·d)灌胃.第30天后,测定各组腹膜功能,取壁层腹膜组织进行Masson染色,测定各组腹膜胶原厚度,RT-PCK方法检测脏层腹膜TGF-β1mRNA的表达,ELISA方法测定腹膜透析液TGF-β1的水平.结果 模型组腹膜较对照组明显增厚(P<0.05),纤维胶原大量沉积,超滤量明显下降(P<0.05);辛伐他汀治疗组腹膜病变较模型组均有不同程度减轻,超滤量增多(P<0.05);模型组腹膜TGF-β1 mRNA的表达及腹膜透析液TGF-β1的水平明显高于对照组(P<0.05),辛伐他汀治疗组较模型组均显著降低(P<0.05).结论 辛伐他汀可下调腹膜TGF-β1 mRNA的表达,延缓腹膜纤维化的进展.     

丹参酮ⅡA对腹膜透析大鼠模型伴发腹膜纤维化的预防干预作用

目的:探讨丹参酮ⅡA对腹膜透析动物模型发生腹膜纤维化的影响。方法:将40只大鼠随机分为对照组、4.25%腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid,PDF)组、低剂量丹参酮ⅡA(丹参酮ⅡA终浓度为50 mg.L-1)组、高剂量丹参酮ⅡA(丹参酮ⅡA终浓度为100 mg.L-1)组4组(每组各10例)进行干预。8周后处死大鼠,并将其腹膜组织样本收集后进行观察分析。运用免疫组织化学检测转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)在壁层腹膜中的表达。同时通过逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法对大网膜上TGF-β1和CTGF mRNA及蛋白的表达进行检测。结果:丹参酮ⅡA明显抑制了含4.25%葡萄糖的PDF引起的腹膜致密层的增厚和胶原沉积,减少了壁层腹膜和网膜中剂量依赖性的TGF-β1和CTGF的表达。结论:丹参酮ⅡA能减轻腹膜透析大鼠伴发的腹膜纤维化改变。     

己酮可可碱对腹膜纤维化形成的干预作用

目的 探讨己酮可可碱(PTX)对SD大鼠腹膜纤维化病变的影响和可能的机制.方法 将大鼠随机分成3组:对照组,模型组和治疗组(PTX组).用4.25%含糖腹膜透析液 脂多糖腹腔注射制作腹膜纤维化模型,即模型组;PTX组同时每日给予PTX 6 mg/kg腹腔注射.5周后行2 h腹膜平衡试验测定腹膜功能,留取血液及腹膜透析液用ELISA法测定血管内皮生长因子(VEGF)浓度,并留取壁层腹膜组织做苏木精-伊红、Masson染色,RT-PCR检测肠系膜组织VEGF mRNA表达水平.结果 ①模型组及PTX组的壁层腹膜较对照组增厚,而PTX组较模型组明显减轻;②模型组及PTX组大鼠超滤量及2 h透析液葡萄糖浓度/0 h透析液葡萄糖浓度(D2/D0)比值均较对照组减少(均P<0.05),其中模型组较PTX组明显减少;与对照组比较,模型组及PTX组大鼠透析液尿素浓度/血浆尿素浓度(Durea/Purea)比值有明显增加(均P<0.05),其中模型组较PTX组增加明显;③PTX组腹透液及血清中VEGF浓度,肠系膜组织VEGF mRNA表达较模型组明显下降(均P<0.05).结论 己酮可可碱能有效地预防腹膜纤维化,其机制可能与调节VEGF的表达有关.     

舒洛地特对腹膜透析大鼠腹膜结构和功能的作用

目的观察舒洛地特对慢性腹膜透析大鼠腹膜结构和功能的作用。方法 36只SD雄性大鼠随机分为4组:空白对照组(n=6)、模型组(n=10)、低剂量[10 mg/(kg.d)]舒洛地特组(n=10)、高剂量[20 mg/(kg.d)]舒洛地特组(n=10)。透析8周后行1 h腹膜平衡试验(PET);使用全自动生化分析仪测定1 h腹膜平衡试验透出液中尿素氮(Durea)、透出液中总蛋白(Dtp)、初始腹透液葡萄糖浓度(D0)、透出液葡萄糖浓度(D1)、血浆尿素氮(Purea)及血浆总蛋白(Ptp),并计算D/Purea(说明腹膜对尿素氮清除效率)、D/Ptp(评估腹膜透析液中总蛋白丢失情况)、D1/D0(表示腹透超滤的能力)。取壁层腹膜行H-E及Masson染色观察腹膜结构变化,半定量计算腹膜厚度、腹膜单位面积血管及炎症细胞数;计算腹透液中白细胞数;ELISA法检测腹透液MCP-1及TNF-α水平;免疫组化检测壁层腹膜TGF-β1表达情况。结果与对照组相比,长期腹透大鼠腹膜间皮细胞减少,间皮下基质增厚,炎症细胞增多,血管增生明显(P<0.05),腹膜超滤量和D1/D0减少,D/Purea及D/Ptp增加(P<0.05),腹透液中白细胞数、MCP-1及TNF-α水平上调(P<0.05),脏层腹膜TGF-β1表达上调;给予舒洛地特干预后腹膜结构改变减轻,腹膜组织炎症细胞浸润和血管增生减少,腹膜功能改善,腹透液MCP-1及TNF-α水平下调(P<0.05),脏层腹膜TGF-β1表达下调。结论舒洛地特可能通过抑制腹膜慢性炎症来达到抑制腹膜纤维化及改善腹膜功能的作用。     

肾康注射液对大鼠腹膜透析功能及氧化应激的影响

目的:研究肾康注射液(SKI)对腹膜透析液(peritoneal dialysis solution,PDS)诱导的大鼠腹膜透析功能减退及氧化应激的影响。方法:50只SD大鼠,随机分为正常对照组、4.25%PDS组和SKI低、中、高剂量(SKI组都加入4.25%PDS)组,8周后进行腹膜功能实验,量取透出液体积,腹主动脉取血检测血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,并计算超滤量(UF)、葡萄糖转运量(MTG)及葡萄糖清除率(C)。结果:与PDS组比较,SKI中、高剂量组的UF、C、SOD含量显著增加(P<0.05),SKI各剂量组的MTG、MDA含量显著下降(P<0.05)。结论:腹膜透析液中加入SKI具有改善PDS诱导的腹膜透析功能减退和抑制氧化应激的作用。     

苦参碱对高糖致大鼠腹膜间皮细胞NF-κB p65表达的影响

目的 探讨苦参碱对高糖致大鼠腹膜间皮细胞NF-κB p65表达的影响及其在腹膜炎症发病机制中的作用,为临床防治腹膜硬化提供部分实验依据. 方法 将30只健康雄性SD大鼠随机分成3组:对照组(n=10,NS组):腹腔每天注射生理盐水30 ml;模型组(n=10,HGC组):腹腔每天注射4.25%的葡萄糖腹透液30 ml+每周1次腹腔注射红霉素6.25万单位;治疗组(n=10,HGM组):腹腔每天注射4.25%葡萄糖腹透液+苦参碱溶液30 ml+每周1次腹腔注射红霉素6.25万单位.8周后分别处死每组各10只大鼠,取腹膜组织以链霉亲和素过氧化物酶(SP)免疫组织化学法行NF-κB p65蛋白检测,并取腹膜组织行HE及Masson染色病检.结果 与NS组比较,HGC和HGM组腹膜间皮细胞NF-κB p65表达上调,但HGC组显著高于HGM组(P<0.05).结论 苦参碱能拮抗高糖引起的NF-κB p65表达上调,减轻腹膜慢性炎症,延缓腹膜纤维化的发生.     

腹膜透析液对鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的 探讨含不同浓度葡萄糖的腹膜透析液不同时间作用后对巨噬细胞 (Mφ)功能的影响。方法取经3%硫乙醇酸盐培养基腹腔注射诱生的小鼠腹腔Mφ 在体外培养条件下 ,用含不同浓度 (1.50%、2.50%和4.25% )葡萄糖的腹膜透析液分别作用10、30和60min后 ,检测Mφ 吞噬功能、一氧化氮 (NO)产量和对四甲基偶氮唑盐 (MTT)还原能力。结果 观察组Mφ 吞噬功能、NO产量和MTT还原能力均明显低于对照组 (均P<0.01) ,且葡萄糖浓度越高、作用时间越长 ,各项指标下降越明显。结论 短时间腹膜透析液作用即可损害巨噬细胞活力及其他功能 ,这种影响与腹膜透析液葡萄糖浓度和作用时间长短有关     

不同含糖浓度腹膜透析液对腹膜间皮细胞紧密连接影响的动物实验

目的观察含不同葡萄糖体积分数的商用乳酸盐腹膜透析液对大鼠腹膜功能和腹膜间皮细胞紧密连接的影响。方法正常清洁级SD雄性大鼠36只,随机分为对照组(0.9%氯化钠溶液)、低糖组(葡萄糖体积分数为1.50%)和高糖组(葡萄糖体积分数为4.25%),腹腔内灌液后8周检测腹膜透析超滤量、腹膜对尿素氮、肌酐清除率和蛋白丢失量,苏木精-伊红(H～E)染色光学显微镜下观察腹膜结构,透射电子显微镜观察腹膜紧密连接的形态,采用免疫组织化学法观察大鼠腹膜间皮细胞封闭蛋白-1(ZO-1)表达的阳性细胞数。结果与对照组相比,低糖组、高糖组腹膜透析8周后腹膜透析液超滤量均减少(P值均<0.05);高糖组腹膜透析8周后的尿素氮清除率较对照组明显降低(P<0.05);3组间肌酐清除率的差异无统计学意义(P值均>0.05)。低糖组、高糖组腹膜透析8周后的腹膜引流液蛋白含量均较对照组明湿增加(P值均<0.05)。光学显微镜下,低糖组、高糖组大鼠腹膜组织出现不同程度的问皮细胞损伤、炎性细胞渗出,以高糖组更加明显。电子显微镜下,高糖组腹膜透析8周后紧密连接消失。腹膜透析4周后,3组间ZO-1阳性表达细胞数的差异无统计学意义(P值均>0.05);腹膜透析8周后,高糖组的ZO-1阳性表达细胞数为10.88±0.99,明显低于对照组的12.80±2.10(P<0.05),低糖组与高糖组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论用含葡萄糖的乳酸盐透析液尤其是高糖透析液进行长期的腹膜透析可对腹膜间皮细胞的形态和功能造成损伤,破坏细胞间的紧密连接,抑制ZO-1的表达,导致腹膜透析超滤量减少,尿素氮和肌酐清除率降低,蛋白丢失增加。     

丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及TGF-β1表达的影响

目的：了解丹参酮ⅡA对腹腔注射腹膜透析液（PDS）大鼠腹膜组织学变化以及转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法：50只SD雄性大鼠随机分为5组：对照组,每日用生理盐水腹腔注射20ml;PDS组,每日用4.25%的PDS腹腔注射20ml;丹参酮低、中、高浓度组,每日分别用含丹参酮ⅡA浓度为50、100、200mg&#183;L-1的4.25%的PDS腹腔注射20ml。于实验第30天,取壁层腹膜行光镜检查,并用免疫组织化学的方法检测壁层腹膜TGF-β1的表达情况。结果：HE、Masson染色显示,在PDS干预下腹膜厚度显著增厚,胶原沉积显著增多。与PDS组比较,丹参酮各组有不同程度腹膜厚度减少,胶原沉积减少。腹膜间皮细胞在PDS干预下分泌TGF-β1较对照组显著增加,丹参酮各组TGF-β1分泌与PDS组比较均有显著下降。结论：丹参酮ⅡA具有抑制葡萄糖PDS导致的实验大鼠腹膜纤维化及TGF-β1表达增加的作用。     

醛固酮受体拮抗剂抑制腹膜纤维化及机制

目的探讨醛固酮受体拮抗剂对腹膜透析腹膜纤维化的作用及机制。方法30只Wister大鼠随机分成3组,一组为正常组,其余两组均采用4.25%含糖透析液 脂多糖致腹膜纤维化模型。再分为对照组,安体舒通给药组,30天后处死各组大鼠,留取腹膜组织做HE及Masson染色,留取血液和腹透液做ELISA法测TGF-β,腹透液计数腹水中细胞总数和巨噬细胞数,免疫组织化学法测定腹膜组织MCP-1,C-J。结果安体舒通组的壁层腹膜厚度比模型组薄,腹水细胞总数和巨噬细胞数减少(P<0.01),转化生长因子-β的浓度下降,MCP-1表达下调(P<0.01)。结论醛固酮受体拮抗剂安体舒通可明显抑制腹膜间皮细胞MCP-1表达,降低TGF-β活性,抑制腹膜炎症,从而减轻腹膜纤维化。     

丹参酮IIA对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及CTGF表达的影响

目的:;了解丹参酮IIA对腹腔注射4.25%腹膜透析液（PDS）大鼠腹膜组织学变化以及结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法:;50只SD雄性大鼠随机分为5组:对照组,每日腹腔注射生理盐水20mL;PDS组,每日腹腔注射4.25% PDS 20mL;丹参酮低、中、高浓度组,每日分别腹腔注射含丹参酮IIA浓度为50mg/L、100mg/L、200mg/L的4.25%PDS20mL。于实验第30天,取壁层腹膜行光镜检查,并用免疫组织化学的方法检测壁层腹膜CTGF的表达情况。结果:; HE、Masson染色显示,在PDS干预下,腹膜显著增厚,胶原沉积显著增多(P<0.01)。与PDS组比较,丹参酮组腹膜明显变薄,胶原沉积明显减少(P<0.01)。在PDS干预下腹膜CTGF表达较对照组显著增加(P<0.01),丹参酮组CTGF表达与PDS组比较有显著下降(P<0.01)。结论:;丹参酮II A具有抑制葡萄糖PDS导致的实验大鼠腹膜纤维化及CTGF表达增加的作用。      

全反式维甲酸对腹膜透析相关性腹膜纤维化大鼠转化生长因子β1、结缔组织生长因子、α平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的：探讨全反式维甲酸(ATRA)在腹膜透析中的抗腹膜纤维化作用。方法选择40只雄性SD大鼠,编号后随机分为对照组(腹腔注射生理盐水10 mL/d+与药物等体积的磷酸盐缓冲液稀释的二甲亚砜)、模型组(腹腔注射4.25%的腹透液10 mL/d+与药物等体积的磷酸盐缓冲液稀释的二甲亚砜)、实验1组(腹腔注射4.25%的腹透液10 mL/d+ATRA 2 mg/kg)、实验2组(腹腔注射4.25%的腹透液10 mL/d+ATRA 5 mg/kg),每组各10只;四组大鼠正常喂养4周后检测腹膜功能,并采用免疫组化法检测大鼠腹膜纤维化相关细胞因子的变化情况。结果实验第4周,模型组和实验1组的腹膜功能指标超滤量、透析液尿素浓度/血浆尿素浓度、初始腹透液葡萄糖浓度/透出液葡萄糖浓度测定值较对照组均有不同程度的下降(P<0.05),实验2组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组、实验1组、实验2组的脏层腹膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化检测结果均发生显著的变化(P<0.05),实验1组、实验2组较模型组的表达水平更低(P<0.05)。模型组、实验1组、实验2组肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平较对照组均显著升高(P<0.05);实验1组、实验2组的HGF、BMP-7、IL-6、VEGF表达水平显著低于模型组(P<0.05)。结论 ATRA在腹膜透析中可以通过调节TGF-β1、CTGF、α-SMA等细胞因子的表达达到抗腹膜纤维化的目的。     

丹参注射液减轻腹透液致大鼠腹膜结构和功能损伤

目的：研究丹参注射液对腹透液（peritoneal dialysis solution,PDS）致大鼠腹膜组织结构和功能损伤的影响及与水通道蛋白1（aquaporin-1,AQP-1）和紧密连接相关蛋白1（zonula occluden-1,ZO-1）的关系。方法：56只SD大鼠分为正常对照组、1.5%PDS组、4.25%PDS组、1.5%PDS＋1%丹参组、4.25%PDS＋1%丹参组、1.5%PDS＋2%丹参组和4.25%PDS＋2%丹参组。腹膜透析液大鼠腹腔注射8周后,检测腹膜透析超滤量、腹膜对物质的清除率和腹透液漏出蛋白含量;光镜和电镜下观察腹膜结构变化;免疫印迹法检测腹膜AQP-1蛋白表达,免疫组织化学法检测腹膜间皮细胞ZO-1和AQP-1蛋白表达。结果：与正常对照组比较,1.5%PDS组和4.25%PDS组大鼠腹膜结构和功能发生改变,包括腹膜病理的改变明显,超滤量减少（P〈0.05）,对肌酐和葡萄糖清除能力下降（P〈0.01）,AQP-1蛋白表达增加（P〈0.05）;1.5%PDS＋2%丹参组和4.25%PDS＋2%丹参组大鼠腹膜结构和功能较单纯腹透液组改善,表现为病理改变缓解,腹膜超滤量以及肌酐和葡萄糖清除率提高。与1.5%PDS组比较,1.5%PDS＋2%丹参组腹膜AQP-1蛋白表达量减少（P〈0.05）。结论：丹参注射液可能通过下调AQP-1蛋白表达拮抗腹透液对腹膜组织结构和功能的损伤。