产紫杉醇菌种改良方法的研究

紫杉醇(taxol)是一种具有抗癌活性的四环二萜类化合物,最早从短叶红豆杉中分离得到[1]。紫杉醇能与细胞微管结合而抑制肿瘤细胞的分裂[2],在临床上用于治疗乳腺癌、卵巢癌、绒毛膜癌、子宫癌等多种人体恶性肿瘤。当前紫杉醇全部从红豆杉的树皮提取得到,由于树皮中紫杉醇含量极低(约0.02%),且红豆杉树林分布较少,生长缓慢,造成该药物供不应求,价格昂贵。化学合成步骤繁琐,产物复杂[3]。利用真菌发酵合成紫杉醇是一个颇有发展前景的方法,1993年首次从短叶红豆杉的韧皮部中分离到一种能发酵合成紫杉醇的内生真菌[4],目前已经从红豆杉中分离了至…     

pH对红豆杉愈伤组织生长、PAL活性和紫杉醇含量的影响

目的 研究不同pH值对东北红豆杉和南方红豆杉愈伤组织生长和紫杉醇含量的影响。方法 采用不同pH值的B5培养基培养两种红豆杉愈伤组织,测定生长率、PAL活性和紫杉醇含量。结果 不同红豆衫愈伤组织所需最适pH值不同,而有利于愈伤组织生长的pH值均不利于PAL活性的提高和紫杉醇的积累。即：愈伤组织生长快时,PAL活性将下降,紫杉醇含量也减少。结论 pH值明显影响红豆杉愈伤组织的生长及次级代谢水平,从而影响了紫杉醇的合成与积累。     

紫杉醇与三尖杉宁碱分离方法的改进

紫杉醇对卵巢癌和乳腺癌的治疗效果使之在临床和化学上都受到了极大重视。然而由于它在天然资源中存在量甚少,且与同类物三尖杉宁碱 cephalomannine 密不可分,使得从天然资源中分离紫杉醇的工艺十分复杂。在几种红豆杉属植物中,如短叶红豆杉、东北红豆杉和云南红豆杉,紫杉醇含量为0.001％～0.08％,三尖杉宁碱含量为     

国产红豆杉各部位紫杉醇含量分析

紫杉醇[1～3]目前国内的来源仍主要是从红豆杉树皮中提取,资源十分短缺。本文对云南红豆杉Taxusyannanensis和南方红豆杉T.chinensis的皮、根、叶、嫩枝、木和种子及东北红豆杉T.cuspidata的皮、木、嫩枝和叶中紫杉醇含量进行了分析比较,为合理开发红豆杉,提供了实验数据。1　实验部分1.1　仪器:岛津LC-10A高效液相色谱仪,SPD-6V紫外检测器,大连化学物理所产C18柱(4mm×250mm),CX-250型超声振荡器及80-2型离心机。试剂、试药:紫杉醇为Sigma公司出品,其它试剂均为国产分析纯试剂。1.2　样品采集及制备:所有样品于1997年4月分别采集于云…     

不同种类红豆杉愈伤组织的诱导及紫杉醇含量的差异

研究云南红豆杉、东北红豆杉、红豆杉、南方红豆杉和杂种红豆杉形成愈伤组织的一些因素,比较不同植株来源的愈伤组织系的生长特点和紫杉醇含量。通过考察愈伤组织形成的时间和比率来研究取样时间、当照条件、培养基中２,４－Ｄ浓度和外植体类型对愈伤组织诱导的影响,用高效液相色谱法测定愈伤组织中紫杉醇含量,愈伤组织形成的迟早和比率在不同种类红豆杉之间和同一种类不同植株之间差异较大,在黑暗中,在添加有０．１ｍｇ／ＬＢ     

紫杉醇的提取，分离与检测研究进展

介绍从红豆杉属植物或培养组织中获得紫杉醇的有关提取，分离和检测方法的研究进展，同时探讨了影响紫杉醇含量的因素 和提高产量的途径。     

天然紫杉醇分离难点研究

从红豆杉树皮中提取分离紫杉醇,采用１％柠檬酸渗漉,柱层分析分离,最后用溴加成分离紫杉醇和ｃｅｐｈａｌｏｍａｎｎｉｎ,可容易得到高纯度的紫杉醇。     

一种能产生紫杉醇类化合物内生真菌的分离

目的 从东北红豆杉Taxus Cuspidata Sieb et Zucc树皮中分离能产生紫杉醇类化合物的内生真菌。方法 采用无菌技术分离东北红豆杉树皮中的内生真菌,并采用高效液相色谱（HPLC）等方法对该真菌培养物进行分析。结果 从东北红豆杉树皮中分离得到一种内生真菌。化学分析证明该真菌培养物内含有紫杉醇类化合物。结论 东北红豆杉树皮中含有能产生紫杉醇类化合物的内生真菌。     

东亚和北美产红豆杉属七种植物中紫杉醇及短叶醇的含量

应用高效液相色谱分析了东亚产四种红豆杉和北美产三种红豆杉的紫杉醇和短叶醇含量。结果表明，短叶红豆杉树皮中紫杉醇含量最高，其次为中间红豆杉树皮；东亚产四种红豆杉枝叶中，云南红豆杉枝叶中紫杉醇含量较高，东北红豆杉和美丽红豆杉次之；短叶醇含量则以短叶红豆杉针叶最高，东北红豆杉及云南红豆杉次之。     

南方红豆杉愈伤组织培养条件的优化及紫杉醇积累的基因表达效应分析

目的 优化南方红豆杉愈伤组织诱导与继代培养条件,获得含紫杉醇量高的红豆杉愈伤组织,明确紫杉醇合成相关基因的表达模式与紫杉醇量的关系。方法 探讨了适合南方红豆杉的愈伤组织诱导及继代培养的激素组成及浓度。比较了南方红豆杉 (种胚、幼茎、幼芽)、曼地亚红豆杉 (种胚) 和太平洋红豆杉 (种胚) 不同外植体来源的愈伤组织的生长特点和紫杉醇的量,分析了不同愈伤组织紫杉醇合成相关基因的表达差异。结果 添加 3.0 mg/L 2,4-D 的 Murashige & Skoog (MS) 培养基有利于南方红豆杉的诱导,诱导率高于 92%。添加 2.0 mg/L 2,4-D 与 1.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤 (6-BA) 的继代培养基有利于南方红豆杉的紫杉醇积累。同一培养条件下,南方红豆杉种胚来源的愈伤组织紫杉醇量最高,达到干质量的 0.027%。含紫杉醇量高的愈伤组织,其紫杉醇合成途径中的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶 (GGPPS)、紫杉二烯合成酶 (TASY)、紫杉烷-10β-羟化酶 (T10βH)、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-β-O-乙酰转移酶 (DBAT)、苯丙氨酸氨基变位酶基因 (PAM)、去苯甲酰紫杉-N-苯甲酰转移酶 (DBTNBT) 等酶基因的表达水平高。结论 从南方红豆杉的种胚为外植体源获得了含紫杉醇量高的愈伤组织,提高 GGPPS、TASY、T10βH、DBAT、PAM、DBTNBT 的表达水平将促进紫杉醇的合成。     

紫杉醇应用方法及注意事项

紫杉醇,又名泰素、紫素、特素,是至今所知的最好的治疗卵巢癌和乳腺癌的药物,1994年创世界抗癌药物全球销量冠军.紫杉醇主要来源于红豆杉科植物红豆杉的干燥根、枝叶以及树皮.由于红豆杉生长得十分缓慢,数量有限,而且有效成分的含量非常低,最初治疗一个病人需要6棵百年树龄的红豆杉,所以,紫杉醇价格非常昂贵,市场售价为4800美元/克.现在紫杉醇以及它的抗癌同源衍生物可以通过其前体进行化学半合成制得.我国于2002年下发了严禁砍伐野生红豆杉,鼓励人工种植的文件,使紫杉醇保持在一个相对稳定的价位,给更多的患者带去了福音.     

东亚和北美产红豆杉属七种植物中紫杉醇及短叶醇的含量

应用高效液相色谱分析了东亚产四种红豆杉和北美产三种红豆杉的紫杉醇和短叶醇含量。结果表明，短叶红豆杉树皮中紫杉醇含量最高，其次为中间红豆杉树皮；东亚产四种红豆杉枝叶中，云南红豆杉枝叶中紫杉醇含量较高，东北红豆杉和美丽红豆杉次之；短听醇含量则以短叶红豆杉针叶最高，东北红豆杉及云南红豆杉次之。     

紫杉醇药源开发的研究进展

紫杉醇的抗癌作用已为人们所公认,迄今为止,该药主要从红豆杉属植物茎皮中提取,含量很低。自 FDA 批准该药上市以来,需求日益增大。由于红豆杉资源十分缺乏,多途径开发紫杉醇资源是该药能否满足市场需求的关键。本文概要地介绍了获取紫杉醇各种途径的研究进展。     

抗癌药物紫杉醇的作用机理及机制

紫杉醇是一类从红豆杉科红豆杉属的树皮中提取的天然化合物.研究表明,紫杉醇具有一定的微管毒性,在纺锤体装配期发生作用,可以抑制有丝分裂的进行[1].目前,由紫杉醇开发的制剂作为一种化疗辅助药物广泛的应用于多种癌症的治疗,尤其是乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肺癌等发病率较高的癌症.本文从结构及构效关系、提取分离方法、合成路线和抗癌作用机制几个方面阐述紫杉醇的研究成果及研究概况.     

高效液相色谱法测定东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量

目的：建立东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）法，选用C18色谱柱，流动相为乙腈：水（60：40），检测波长227nm，柱温25℃，对东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量进行了测定。结果：紫杉醇在19．5～97．6μg·mL。之间呈良好的线性关系，紫杉醇平均回收率为100．41％，RSD=1．62％（n=6）。结论：该含量测定方法准确可行，可以作为测定东北红豆杉愈伤组织培养中紫杉醇含量的高效液相色谱方法。     

紫杉醇前体化合物10—去乙酰baccatinⅢ和baccatinⅢ在东北红豆杉中的含量

报道了不同生长年限、不同生长形态和不同生长部位的东北红豆杉样品中紫杉醇的前体化合物baccatinⅢ和10-去乙酰baccatinⅢ的含量测定结果。通过相同样品中紫杉醇含量及云南红豆杉中两个化合物含量的比较，对利用价值进行了讨论。     

不同湿度贮藏条件下南方红豆杉紫杉烷类含量动态变化的研究

[目的]研究南方红豆杉枝条在不同湿度贮藏环境下紫杉烷类的含量变化,确定南方红豆杉最佳贮藏湿度环境。[方法]设置65%、75%和85%三个贮藏湿度,通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定不同湿度贮藏环境下南方红豆杉紫杉烷类成分紫杉醇、三尖杉宁碱、7-表-10-去乙酰基紫杉醇、10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ含量变化,确定最佳贮藏湿度。[结果]在3个月贮藏过程中,南方红豆杉紫杉烷类化合物含量基本呈下降趋势,含量变化明显,紫杉烷类化合物总含量75%湿度﹥65%湿度﹥85%湿度。[结论]保持南方红豆杉紫杉烷类成分最佳的贮藏湿度是75%。     

南方红豆杉愈伤组织生长动力学及紫杉醇代谢动力学研究

目的 通过愈伤组织细胞生长及其紫杉醇代谢动力学的研究,筛选确定南方红豆杉愈伤组织培养生产紫杉醇的最佳培养基配方与最佳收获期。方法 以改良MS为基本培养基添加不同质量浓度的IBA、6-BA、GA₃组合诱导培养南方红豆杉愈伤组织,通过测定愈伤组织鲜质量进行生长动力学研究,采用HPLC法检测不同生长阶段愈伤组织中紫杉醇的积累量,进行紫杉醇代谢动力学研究。结果 改良MS＋0.2 mg/L IBA＋0.05 mg/L 6-BA＋0.3 mg/L GA₃、MS＋0.2 mg/L IBA＋0.01 mg/L 6-BA＋0.7 mg/L GA₃及MS＋0.2 mg/L IBA＋0.1 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L GA₃培养条件均较有利于南方红豆杉愈伤组织的诱导培养,且紫杉醇的积累量也较高,最高可达0.037 76%。结论 在添加IBA及6-BA的基础上适当增补GA₃可使南方红豆杉愈伤组织诱导提前启动,缩短出愈时间,促进生长,降低褐变程度,增加愈伤组织中紫杉醇的积累量。愈伤组织的生长曲线呈S型,紫杉醇的积累呈线型增加,是一个逐渐积累的过程,但积累到一定程度就不再增加,且伴随着愈伤组织不断褐变。     

从短叶红豆杉内生真菌中寻找产生紫杉醇的微生物

40多年前,Yabuta 发现高等植物与真菌之间存在着属间基因交换。根据这一原理,Andrea 等从1992年开始进行红豆杉树内生微生物的研究,重点针对此树产生紫杉醇部位的研究,以期寻找产生紫杉醇的新生物资源,解决对紫杉醇日益高涨的需求。两年来,研究者从健康的与患病的红豆杉树皮、针叶和根中分离出300多株真菌试样。首先将试样菌放入纯净的含水琼脂培养基中,待形成菌落后再将其接种到真菌培养基中。第一次的发酵液中加入2%红豆杉针叶汁,作为必需的前体资源贮主或作为紫杉醇生物合成促进剂,而以后的发酵液只加入严格限定的合     

东北红豆杉愈伤组织的诱导、生长及紫杉醇含量测定

东北红豆杉愈伤组织的诱导、生长及紫杉醇含量测定蔡朝晖，高山林，朱丹妮药物生物技术，１９９５，２（３）：１１以东北红豆杉（ＴａｘｕｓｃｕｓｐｉｄａｔａＳｉｅｂｅｔＺｕｃｃ．）幼嫩的茎、叶、芽为外植体的愈伤组织的诱导、生长情况以及愈伤组织中紫杉醇的含量比...