转移因子对淋巴细胞转化的影响用~3H—TdR 掺入法比较不同组分的TF—P 及TF—H对正常人淋转的影响

我室已经报告了用~3H—TdR 掺入法比较32例脐血 T 细胞对 TF—h 及 TF—p 的反应性。在此基础上我们又观察了9份脐血与不同浓度的 TF—h 及 TF—p 的共同孵育,探讨不同种属的 TF 制剂对 PHA 及 ConA 诱导淋转的影响,结果进一步说明,TF—p 对 ConA 诱导淋转的抑制作用强于对 PHA。当这种 TF 经过不同浓度的稀释之     

不同浓度的猪转移因子(TF-p)对正常人淋巴细胞转化的影响

转移因子对淋转的刺激效应,各家报道结果差异悬殊、评价意见不一。作者曾报告,TF—h 及 TF—P 制剂既含刺激成分,又含有抑制淋转的成分。在此基础上,本文报道将 TF—P 进行了原液、10~(-2)～10~(-5)稀释等五个浓度,分别与正常人外周血淋巴细胞进行培养。同时将上述浓度的 TF—P 分别加 PHA 与淋巴细胞共同培养。结果发现,TF—P 原液对7份正常人淋巴细胞 PHA 诱导的淋转均起抑制作用(P<0.001),但随着 TF—P 稀释度的加大发表现了淋转的恢复与促进,其最适的刺激淋转的浓度为10~(-3),结果说明了有规律的淋转对 TF—P 的剂量依赖性。作者曾报告用~3H—TdR 掺入法比较32份人脐血对 TF—h 及 TF—P 的反应,并进一步比较了不同浓度的 TF—h 和 TF—P 对 PHA 和 ConA 诱导的脐血淋转的影响。结果说明,脐血 T 细胞对 TF 有着复杂的反应性,而且经不同浓度稀释之后,原先对 PHA 或 ConA 诱导的淋转发生抑制反应的标本,表现淋转的恢复或促进。为了进一步研究 TF—P 对正常人外周血淋巴细胞转化的影响,我们将 TF—P 原液及10~(-2)～10~(-5)的稀释液5种浓度,分别与7份正常人外周血淋巴细胞共同培养,每种浓度均平行地分别加 PHA 进行培养。实验结果具有规律性,说明淋转对 TF—P 的剂量依赖性,说明淋转对 TF—P 的剂量依赖性,其最适浓度为10~(-3)。     

转移因子对淋巴细胞转化的影响——用~3H—TdR掺入法比较不同浓度的TF—h和TF—P对PHA及ConA诱导的淋转的影响

我们已经报告了用~3H—TdR掺入法比较32份人脐血T细胞对TF—P的反应的结果。实验说明,TF—h及TF—P制剂既含有刺激的成分,又含有抑制淋转的成分,而人脐血T细胞对F—h和TF—P具有复杂的个体反应性。在此基础上,我们又进行了用不同浓度的TF—h及TF     

转移因子对淋巴细胞转化的影响 2、用~3H—TdR掺入法比较不同浓度的TF—h和TF—p对PHA及ConA诱导的淋转的影响

我们已经报告了用H-TdR掺入法比较32份人脐血T细胞对TF-h和TF-p的反应的结果。实验说明,TF-h及TF-p制剂既含有刺激的成分,又含有抑制淋转的成分,而人脐血T细胞对F-h和TF-p具有复杂的个体反应。在此基础上,我们又进行了用不同浓度的TF-h及TF-p处理脐血T细胞,并观察TF对PHA及ConA诱导淋转的影响。结果进一步说明,当TF经过不同浓度的稀释之后,原先对PHA或ConA诱导的淋转抑制     

转移因子对淋巴细胞转化的影响 1、用~3H—TdR掺入法比较32份人脐血淋巴细胞对TF—h和TF—p的反应

转移因子,虽然在临床上已应用于免疫缺陷病、感染性疾病、癌症和其他疾患的治疗,但关于TF、对免疫应答的影响问题尚未见较多的报道,为了阐明人脐血在TF和丝裂原作用下的淋巴细胞转化,我们利用~3H—TdR掺入法比较32份脐血标本对TF—h和TF—P的反应,们们试验证明,32份标本中有4份,当分别加入0、1m 1的TF—h或TF—P,培养72小时后,表现了淋转的增加,尽管TF的这种丝裂原样活性相对低些。我们还发现,当加入TF时,13份PHA诱导的淋巴细胞转化受到抑制,但8份标本加TF培养后促进了PHA诱导的淋巴细胞转化。此外,我们观察到有8份脐血既不受TF—h加PHA,也不受TF—P加PHA的影响。我们观察到,在TF—h加PHA组,和PHA组之间,淋巴细胞转化无明显差异(P>0.05)。但是,在TF—P加PHA组,和PHA组诱导淋巴细胞转化作用之间却有统计学意义。前者,即猪的转移因子,抑制了PHA的刺激作用(P<0.01)。这些资料提示,TF—h和TF—P制剂,既含有刺激的成分,又含有抑制淋转的成分。同时说明,人脐血淋巴细胞对TF—h及TF—P具有复杂的个体反应性。     

家兔转移因子(TF—r)对正常人淋巴细胞转化的影响

本文观察了家兔转移因子(TF—r)对健康成人外周血淋巴细胞转化的影响,TF—r×10~(-3)与 TF—r×10~(-4)稀释度对 PHA 诱导的淋转具有明显的促进作用(P<0.05和 P<0.01);但是,TF—r 原液对 PHA 诱导的淋转有显著的抑制作用(P<0.002),TF—r 原液对正常淋转也表现出抑制作用(P<0.05),结果说明,TF—r 对淋转的作用具有剂量依赖性。     

猪胸腺素对正常成人外周血淋巴细胞转化的影响

我们应用~3H—TdR 掺入法淋巴细胞转化试验,观察了不同浓度稀释的猪胸腺素对正常成人外周血淋巴细胞和 PHA 诱导的淋巴细胞转化的影响,实验结果表明10~(-3)和10~(-4)稀释的猪胸腺素是刺激正常人周围血淋巴细胞和 PHA 诱导的淋巴细胞转化的最适浓度,存在着明显的剂量依赖关系,而原液对淋转则未表现出抑制或促进作用。本试验还对作用机制作了初步讨论。     

人胚胸腺激素抑制组分对成人淋巴细胞增殖的影响

在研究人胚胸腺素的基础上,通过对提取工艺的改革、获得了人胚胸腺素抑制组分及促进组分。我们用~3H—TdR 掺入 DNA 法观察了人胚胸腺素抑制组分对成人淋巴细胞增殖的影响,试验结果表明,呈现明显的剂量依赖关系、即40μg 的人胚胸腺素抑制组分对 PHA 诱导的淋巴细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.001),当稀释至2μg 或更低浓度时,淋巴细胞的增殖恢复到正常范围。而正常淋转无论是高浓度或稀释到较低浓度,都未显示出明显的抑制或促进作用。     

转移因子对乙脑病毒感染作用的实验观察

以小鼠为模型,探讨了人转移因子(TF—h)和猪转移因子(TF—p)在乙脑病毒感染过程中的作用。在乙脑病毒攻击前、后,分别给小鼠注射 TF—h 或 TF—p,与对照组相比,没有降低实验动物的死亡数和明显延长其平均生存时间,TF—h 和 TF—p 在乙脑病毒感染过程中未表现出明显保护作用.     

载多烯紫杉醇的转铁蛋白修饰脂质体的制备及其体外抗脑胶质瘤的作用

目的以鼠脑胶质瘤细胞c6和鼠脑内皮细胞bEnd．3为模型,研究载多烯紫杉醇（DOC）的转铁蛋白（TF）修饰脂质体（DOC—TF—LP）的体外抗肿瘤作用。方法采用薄膜分散法制备普通脂质体（LP）,后插入法制备TF修饰LP（TF—LP）。荧光定量实验观察c6细胞和bEnd．3细胞对TF＋LP和LP的摄取。MTT实验检测不同LP对肿瘤细胞的增殖抑制作用。构建c6细胞肿瘤球模型,观察不同LP对肿瘤球的穿透能力以及对肿瘤球体积的增长抑制能力。结果脑胶质瘤c6细胞对TF—LP的摄取效率是LP的3．2倍（P〈0．05）;脑内皮细胞bEnd．3对TF—Lp的摄取效率是LP的2．6倍（P〈0．05）。DOC—TF—LP对肿瘤细胞的增殖抑制作用显著大于DOC—LP和DOC游离溶液（P〈0．05）。载香豆素一6的TF—LP与肿瘤球共孵育4h后,TF—LP的荧光强度强于LP。DOC游离溶液、DOC—LP和DOC—TF—LP分别使肿瘤体积减小到原体积的80％、65％和38％。结论与DOC和DOC—LP相比,DOC—TF—LP能够更加有效地被脑内皮细胞和肿瘤细胞摄取,抑制肿瘤细胞增殖及肿瘤球生长,具有更强的抗肿瘤作用。     

人体转移因子对姐妹染色单体互换的影响

转移因子(TF)、胸腺素及干扰素等免疫制剂,长期应用后是否会致突变,一直为人们所关注。1982年Vijayalaxmi 用不同浓度的干扰素对外周血淋巴细胞诱发姐妹染色单体互换(SCE)率的变化,以测定干扰素是否会引起细胞突变;1983年黄权光等用猪胸腺素对人体外周血SCE 及微核率的影响进行了研究。国内常用的免度制剂以TF 居多,TF 是否致突变的研究尚未见报道。本文介绍用我院生产的人体TF 诱导人血淋巴细胞SCE 的研究。     

β—内啡肽在小鼠脾淋巴细胞转化过程中的调节作用

本文采用淋巴细胞转化（淋转）试验法观察到β－内啡肽在浓度为０．３，３，３０ｎｍｏｌ／Ｌ时，可增强亚适量刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）（０．６２５ｍｇ／Ｌ）诱导的小鼠脾淋转反应，而对未经活化的静止淋巴细胞未见致分裂作用。作者又观察到纳洛酮作为阿片受体的拮抗剂，可阻断β－内啡肽对小鼠脾淋转反应的增强作用。另外，发现在ＣｏｎＡ诱导淋转过程中不同时间加入β－内啡肽，其协同效应从培养起始后２４ｈ内最为明显。     

肿瘤患者手术及转移因子治疗前后的免疫学指标测定

采用单向琼脂扩散和淋巴细胞转化试验对50例癌症患者及50例正常人进行血液免疫球蛋白含量及淋转率测定。结果表明肿瘤患者系列免疫指标明显降低,与正常对照组相比有非常显著的差异(P<0.01)。另外,对30例癌症患者术后加用转移因子(TF)治疗后,患者血液Ig及淋转率显著上升,与治疗前相比(P<0.01),差异有高度显著性。     

血清HBVM与P—TF应用的相关分析

本文报导了98例各型乙型肝炎患者应用P—TF后的HBVM变化,经与同期对照组98例患者对比分析后,P—TF对乙肝患者的HBeAg,阴转确有一定疗效,可作为一种控制HBVM的有效药物。     

ADS-J1 对SEVI增强HIV-1初始传播病毒及其慢性控制病毒感染的拮抗作用及机制

目的探讨精液源性病毒增强因子（SEVI）促进HIV-1初始传播（TF）病毒及其慢性控制（CC）病毒感染的情况,及ADS-J1 拮抗SEVI增强病毒感染的作用机制。方法硫磺素T（ThT）实验验证PAP248-286能自组装成SEVI淀粉样纤维;扩增1对TF和CC 感染性克隆病毒,SEVI分别与TF、CC病毒混合后感染TZM-bl细胞,72 h后测定荧光素酶活性,评价SEVI增强病毒感染的倍 数;用不同浓度的ADS-J1处理SEVI,再分别与TF、CC病毒混合后感染TZM-bl细胞,72 h后测定荧光素酶活性,考察ADS-J1对 SEVI 增强TF和CC病毒感染的拮抗作用;接着用ADS-J1 和病毒混合后感染TZM-bl 细胞,72 h 后测定荧光素酶活性,验证 ADS-J1直接的抗病毒作用。最后用不同浓度的ADS-J1 处理SEVI,检测其Zeta电位,初步探索ADS-J1 拮抗SEVI增强TF和 CC病毒感染的作用机制。结果ThT实验结果表明PAP248-286能自组装成SEVI淀粉样纤维;SEVI可显著促进TF和CC 病毒的感 染（P<0.05）,ADS-J1不仅能显著拮抗SEVI增强TF和CC感染（P<0.05）的作用,还能直接抑制TF和CC感染靶细胞（P<0.05）; ADS-J1能浓度依赖性地中和SEVI所带的正电荷。结论SEVI能促进TF和CC病毒的感染,ADS-J1可能通过中和SEVI表面 的正电荷来拮抗SEVI增强TF和CC的感染作用。     

组织因子表达影响阿霉素诱导人神经母细胞瘤凋亡的研究

目的 研究组织因子（TF）表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的影响。方法 以Western印迹法检测TF表达，以WST法检测阿霉素的细胞毒性。以Western印迹法检测阿霉素诱导的Caspase-3、PARP的裂解，以Hochest33342染色，倒置荧光显微镜下检测凋亡细胞。结果 人神经母细胞瘤系SH-EP1高表达TF而SK-N-SH细胞系中TF表达水平低。以TF基因表达载体TF-pcDNA3转染SK-N-SH细胞，显著增强其TF表达水平。以不同浓度阿霉素处理48h后，可见转染TF-pcDNA3的SK-N-SH细胞的存活数较对照细胞明显增多。转染TF-pcDNA3的SK-N-SH细胞及转染pcDNA3质粒的对照细胞分别以阿霉素处理4h、8h、24h，可见转染TF基因的细胞与对照细胞相比，Caspase．3、PARP裂解减弱。以Hochest33342染色检测到转染TF-pcDNA3的SK-N-SH细胞经阿霉素处理后的凋亡细胞数为134．33±21．00，与转染pcDNA3的对照组相比（232．33±8．84）显著减少（P〈0．05）。结论TF在人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH中的强制表达，可抑制阿霉素诱导的肿瘤细胞凋亡。肿瘤细胞中TF的异常高表达可能参与阿霉素诱导细胞凋亡的调控，影响肿瘤细胞对化疗药物的耐受性和疾病进展。     

β-榄香烯固体脂质纳米粒zeta电位影响因素检测

目的:探讨稀释介质及处方组成对β-榄香烯圊体脂质纳米粒(SLN)制剂zeta电位测量的影响,确定适宜的稀释条件.方法:将β-榄香烯SLN制剂用不同介质稀释,用Nicomp-380/ZLS动电电位粒径测定仪测定其zeta电位,并将筛选出的稀释条件用于不同处方β-榄香烯SLN制剂的zeta电位测量.结果:在考查范围内,β-榄香烯SLN制剂的zeta电位绝对值随稀释介质中泊洛沙姆188浓度的增加而降低,以重蒸馏水为稀释介质时,其绝对值随稀释度的增加而升高.β-榄香烯SLN的zeta电位绝对值随处方中泊洛沙姆188的增加而降低,当处方中单硬脂酸甘油酯的比例增加时其zeta电位绝对值升高.结论:稀释介质对于β-榄香烯SLN制剂的zeta电位测定有较大影响,β-榄香烯SLN制剂用重蒸馏水稀释8倍后,可以得到较为合理的测量结果.     

FⅦa依赖TF及FX活化PAR2上调SW620细胞IL-8表达

目的探讨凝血FⅦa、Ⅹ、Ⅱa在蛋白酶激活受体2（PAR2）活化及诱导SW620细胞IL-8表达中的作用。方法用PAR2激动剂（PAR2-AP）、FⅦa、Ⅹ、Ⅱa等不同刺激物处理SW620细胞,以ELISA法检测细胞上清IL-8水平,以实时定量PCR检测细胞IL-8mRNA表达。结果血浆浓度的Ⅶa需在FX存在下才能促进细胞IL-8表达;单克隆抗TF及抗PAR2抗体均可抑制FⅦa的作用;FⅡa轻微下调细胞IL-8表达,Hirudin、抗PAR1及抗PAR2抗体均可阻断此作用。结论TF—FⅦa及TF—FⅦa—FXa复合物,而非FⅡa,活化PAR2上调SW620细胞IL-8表达,从而促进细胞增殖及迁移。     

组织因子、组织因子途径抑制物对脓毒症凝血异常的影响

目的探讨脓毒症时组织因子（tissue factor,TF）与组织因子途径抑制剂（tissue factor pathway inhibitor,TFPI）的表达及其平衡对凝血异常的影响。方法昆明小鼠72只采用盲肠结扎穿孔模型（cecal ligation and puncture,CLP）,分为正常组、假手术组和造模组,每组根据不同时间点（2、4、8、12 h）分4个亚组,每个亚组各6只,检测血小板计数和凝血指标,采用ELISA法检测血浆TF和TFPI浓度。结果盲肠结扎穿孔后,造模12 h组PT、TT、APTT和DD显著升高,Fbg和PLT计数显著降低,与正常组及假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。造模2 h组TF与TFPI均显著升高,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）;且TF浓度随时间呈进行性升高,而TFPI未见进一步升高。结论脓毒症时,血小板减少及TF、TFPI表达增加的失衡可能是诱发凝血异常进而参与MODS发生的关键因素。     

猪脾与人脾转移因子临床疗效的对比观察

用简单随机法将38例病人配成19对,以双盲法对猪脾转移因子(TF—PS,P)和人脾转移因子(TF—HS,H)进行了双向开放型序贯试验。连续给药10周,以皮内试验(OT,SK,PHA)、免疫球蛋白IgG、IgA和IgM,补体C_3和E玫瑰花结形成率等为指标。二者均有使皮内试验阳转或增强,总E花环和活性E花环形成率增高的作用。并且两种TF间对比无显著差异(P>0.05);唯独使C_3升高的幅度TF—HS优于TF—PS,此与有效率对比是一致的。结论是两种TF临床效果相同,并且TF—PS有原料来源方便,便于推广应用和解除TF传染乙肝的顾虑。