紫杉醇纳米微粒对人胃癌细胞MGC803增殖和凋亡影响的研究

目的观察不同浓度（紫杉醇）PA纳米微粒在不同时间段对人胃癌MGC803细胞生长和凋亡的影响。方法应用MTF法测定不同浓度的PA纳米微粒、PA和5-FU对MGC803细胞分别在0、6、12、24、48、60、72h的细胞生长抑制率。流式细胞仪分析MGC803细胞周期的改变,细胞免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达,检测端粒酶活性。结果MTT法显示不同浓度的PA纳米微粒可抑制MGC803细胞增殖（16μg／mL作用72h时的抑制率达69％）,并且与浓度和时间均呈正相关,流式细胞仪细胞周期分析提示PA纳米微粒可将MGC803细胞阻滞于G2M期,16μg／mL作用48h明显,细胞免疫组化法显示凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下调,端粒酶活性水平下降。结论PA纳米微粒可诱导人胃癌细胞MGC803发生凋亡且具有控释效应,可延长药物对胃癌细胞的有效作用时间,载药纳米微球没有改变PA成分的生物学活性。     

紫杉醇体外诱导人胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的 研究紫杉醇对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法 0．001－1μmol/L的紫杉醇处理SGC7901细胞后,用MTT法测定胃癌细胞的生长抑制率,通过形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率,半定量TRAP－银染法测定端粒酶活性变化。结果 不同浓度的紫杉醇对胃癌细胞均有明显抑制作用,且呈时间依赖性及剂量依赖性,光镜及流式细胞术分析表明,0．01μmol/L的紫杉醇处理后24h,细胞即出现明显的凋亡形态特征及凋亡峰,对端粒酶活性的同步检测结果显示,紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,且随紫杉醇浓度增大,抑制作用逐渐增强,24h酶活性即显著受抑制,72h变为阴性。结论 紫杉醇对胃癌细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一,端粒酶可作为肿瘤化疗的敏感性指标。     

紫杉醇与白藜芦醇联合应用对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的 研究紫杉醇(PA)联合白藜芦醇(RES)对人胃癌MGC803细胞株的影响.方法 采用MTT法检测两种药物单用和联合应用对细胞的作用,光镜观察细胞结构的变化,联合应用判断两药合用效果,流式细胞仪检测MGC803细胞周期分布,并且检测端粒酶的活性.结果 PA可抑制MGC803细胞的生长,且呈剂量及时间依赖性(P<0.05);光学显微镜下可见经PA和RES培养的胃癌细胞质内存在异常物质;PA对人胚肺成纤维细胞(HPF)生长起促进作用,且呈剂量依赖性(P<0.05);PA与RES联合应用对MGC803细胞生长的抑制具有协同作用(P<0.05);PA对G0/G1期有阻滞作用,RES有明显的S期阻滞作用,两者可从不同环节抑制细胞增殖,同时端粒酶活性受到抑制.结论 PA对胃癌MGC803细胞有抑制作用,相同剂量对正常细胞无抑制作用,PA与RES对胃癌细胞的抑制具有协同作用,与单用RES相比,PA与RES联合应用可减少RES的用药剂量.     

三氧化二砷诱导人胃癌细胞株MGC—803细胞凋亡的研究

为探讨三氧化二砷对胃癌细胞的作用及可能的机制。用不同浓度的Ａｓ２Ｏ３作用于增减的胃癌细胞株ＭＧＣ－８０３细胞。噻唑蓝细胞活力测定显示Ａｓ２Ｏ３能明显抑制ＭＧＣ－８０３细胞生长；     

紫杉醇对人胃癌MGC803细胞形态和增殖的影响

目的 研究紫杉醇对人胃癌MGC803细胞的细胞形态的影响和相关增殖因素的变化.方法 采用MTT法测定药物敏感性;光镜、电镜、MTT法活细胞计数、流式细胞仪等方法观察其生物学特征的改变.结果 0.1mg/mL、0.2mg/mL紫杉醇可以抑制MGC803细胞于S期,紫杉醇能抑制MGC803细胞生长增殖,并且呈浓度依赖性.结论 0.1mg/mL、0.2mg/mL紫杉醇能明显地抑制MGC803细胞的增殖.     

人胃癌MGC803细胞紫杉醇耐药细胞系初步建立的实验研究

目的：探讨胃癌MGC803对紫杉醇的耐药机制,初步建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系,研究耐药过程中的变化。方法：采用逐步递增紫杉醇浓度,间歇作用体外诱导法建立人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,做相关检测;MTT法测定药物敏感性;光学显微镜、电子显微镜、MTT法等方法观察其生物学指标的改变。结果：经过4个月建成人胃癌MGC803紫杉醇耐药细胞系MGC803/PA,2、3、4个月的耐药指数分别为5.12、11.46、15.98,并且与其他多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性,MGC803/PA的细胞形态逐渐发生改变,生长曲线逐渐改变。结论：MGC803/PA细胞具有耐药表型,且耐药性能稳定,MGC803/PA的增殖能力逐渐下降,MTT法及其电镜可以较早地提示MGC803/PA的耐药特征。     

PD 098059对长春新碱诱导胃癌细胞MGC 803凋亡的调节作用

目的:探讨MAPK/ERK kinase(MEK)抑制剂PD 098059对长春新碱(VCR)诱导胃癌细胞系MGC 803细胞凋亡的影响。方法:用流式细胞术对VCR及PD 098059作用下的细胞进行周期解析,观察细胞周期的变化。结果:通过细胞的周期解析发现VCR和PD 098059共同作用的细胞其凋亡比例为35.61％,显著高于VCR单独作用引起的凋亡(18.41％)(P<0.05)。结论:PD 098059可能通过抑制MAPK的活性、抑制胃癌细胞增殖,对VCR诱导MGC 803细胞的凋亡具有协同作用。     

儿茶素单体EGCG体外诱导胃癌MGC—803细胞凋亡的研究

目的：探讨表没食子儿茶素酸酯（Epigallatechin—3—gallate,EGCG）体外诱导胃癌MGC—803细胞凋亡作用。方法：以不同浓度EGCG分别处理MGC—803细胞,用琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜、MTT法观察MGC—803细胞DNA带型、形态和抑制率的变化。结果：琼脂糖凝胶电泳呈典型的DNA“梯状带”,高浓度EGCG（1×10-3M）作用33小时后DNA呈弥散的“膜状带”。荧光显微镜下可见细胞出现染色质浓缩、胞膜吐泡等凋亡现象。MTT法测定不同浓度EGCG对MGC—803细胞生长有明显抑制。结论：EGCG有明显的诱导胃癌MGC—803细胞凋亡作用,高浓度EGCG直接导致细胞坏死。     

紫杉醇诱导食管癌细胞凋亡

目的：研究紫杉醇对食管细胞生长抑制及诱导凋亡的作用。方法：应用ＭＴＴ分析法，形态学观察，琼脂糖凝胶电泳，流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Ｅｃａ１０９进行了检测和观察。     

姜黄素纳米微粒对体外胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响

目的观察姜黄素纳米微粒对人胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响。方法 MTT法建立细胞剂量效应曲线,光镜和电镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪分析MGC803细胞周期改变,免疫组化法检测凋亡相关Bcl-2蛋白表达。结果 MTT法显示,姜黄素纳米微粒抑制胃癌MGC803细胞增殖,呈现剂量-时间依赖性;光镜观察姜黄素纳米微粒组细胞损伤较轻,电镜下核周隙清晰,突触小泡较多;流式细胞仪法显示,姜黄素纳米微粒使胃癌MGC803细胞阻滞于G2/M期;免疫组织化学法显示,姜黄素纳米微粒使凋亡相关Bcl-2蛋白表达下调。结论姜黄素纳米微粒诱导人胃癌细胞MGC803凋亡并且延长药物对胃癌MGC803细胞作用时间。     

白藜芦醇纳米微粒对体外人胃肿瘤MGC803细胞增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度白藜芦醇（RES）纳米微粒在不同时间段对人胃肿瘤MGC803细胞生长和凋亡的影响。方法应用MTT法测定不同浓度的RES纳米微粒、RES、5-FU对MGC803细胞分别在0、6、12、24、48、60 h的细胞生长抑制率。流式细胞仪分析MGC803细胞周期的改变,细胞免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达,检测端粒酶活性。结果MTT法显示不同浓度的RES纳米微粒可抑制MGC803细胞增殖（60μg/ml作用60h的抑制率达64%）,并且与浓度和时间均呈正相关,流式细胞仪细胞周期分析提示RES纳米微粒可将MGC803细胞阻滞于S期,细胞免疫组化法显示凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下调,端粒酶活性水平下降。结论RES纳米微粒可诱导人胃肿瘤细胞MGC803发生凋亡,延长药物对胃肿瘤细胞的有效作用时间,载药纳米微球没有改变RES成分的生物学活性。     

5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素诱导人胃癌细胞凋亡的体外研究

目的了解5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素分别及联合对人胃癌MGC－803细胞凋亡的诱导作用。方法用一定剂量的5-氟脲嘧啶。丝裂霉素和表阿霉素分别及三药联合与人胃癌细胞株MGC－803共同孵育12h后,应用光镜进行细胞形态学观察。细胞DNA经特异性荧光染色后,用流式细胞仪分析细胞周期变化。结果人胃癌MGC－803细胞经5-氧脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素作用后,出现典型的细胞凋亡形态学改变,定量分析凋亡细胞发生率分别为10．2％、9．1％和9．7％,而三药联合作用后凋亡细胞的发生率为21．4％。结论5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素可诱导人胃癌细胞林凋亡,三药联用可提高凋亡细胞的发生率。     

YWHAE表达沉默对胃癌MGC803细胞增殖的影响

目的 探讨沉默YWHAE表达对胃癌细胞增殖的影响.方法 实验分为三组,未转染组,构建YWHAE短发夹RNA(shRNA)表达载体及相应空载载体,慢病毒包装后分别感染胃癌MGC803细胞(干扰组,对照组),应用Western blot、RT-PCR方法检测YWHAE沉默效率;MTT技术观察YWHAE表达沉默前后细胞增殖变化;流式细胞术、细胞克隆实验检测细胞周期、凋亡及克隆形成变化情况.结果 慢病毒包装YWHAE-shRNA后成功感染胃癌MGC803细胞;RT-PCR、Western blot检测结果显示,与对照组比较,干扰组MGC803细胞YWHAE基因表达明显降低,抑制效率为72.7％.MTT结果显示,干扰组细胞增长速率明显低于对照组细胞,72 h增长倍数分别为1.56、2.43,差异有显著统计学意义(P<0.01);细胞克隆实验结果显示,干扰组及对照组克隆形成率分别为6.24％、31.00％,差异有显著统计学意义(P<0.01).流式细胞术检测显示,YWHAE基因表达沉默后,MGC803细胞凋亡率增加,由未消减前的3.23％增加到9.83％,差异有显著统计学意义(P<0.01);相比对照组细胞在G1期的比例(57.88％),干扰组G1期细胞比例明显增加(72.42％),差异有显著统计学意义(P<0.01).结论 沉默YWHAE表达能抑制胃癌MGC803细胞增殖,可能与诱导细胞周期阻滞,促进细胞凋亡有关.     

顺铂与白藜芦醇联合应用对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的研究顺铂（CDDP）联合白藜芦醇（RES）对人胃癌MGC803细胞株的影响。方法采用MTT法检测两种药物单用和联合应用对细胞的作用,联合应用判断两药舍用效果,流式细胞仪检测MGC803细胞周期分布。结果CDDP可抑制MGC803细胞的生长,且呈荆量及时间依赖性（P〈0．05）;CDDP对人胚肺成纤维细胞（HPF）生长起促进作用,且呈剂量依赖性（P〈0．05）;CDDP与RES联合应用对MGC803细胞生长的抑制具有协同作用（P〈0．05）;CDDP对G0／G1期有阻滞作用,RES有明显的S期阻滞作用,两者可从不同环节抑制细胞增殖。结论CDDP对胃癌MGC803细胞有抑制作用,相同剂量对正常细胞无抑制作用。CDDP与RES对胃癌细胞的抑制具有协同作用,与单用RES相比,CDDP与RES联合应用可减少RES的用药剂量。     

大葱提取液抗人胃癌作用的细胞周期特点

目的观察大葱提取液抗胃癌作用的细胞周期特点。方法将大葱提取液作用于体外培养的人胃癌细胞MGC803后,采用电镜观察MGC803细胞超微结构变化;应用流式细胞仪分析MGC803细胞DNA含量及周期分布,检测其分化与凋亡情况。结果(1)透射电镜下观察:大葱作用后的癌细胞细胞膜完整,出现分化和凋亡的形态学变化。(2)流式细胞仪检测:1.25%大葱提取液作用MGC803细胞24h、48h、72h、96h,凋亡率分别为0.6%、1.6%、6.1%、13.5%,二倍体比例分别为0%、0.3%、35.8%、93.9%;1.25%、2.5%、5.0%、10.0%大葱提取液作用24h,凋亡率分别为0.6%、4.1%、6.2%、24.9%,二倍体比例分别为0%、10.6%、34.7%、72.2%。低浓度组以诱导分化作用为主,高浓度组同时可诱导细胞凋亡,呈剂量和时间依赖性。实验组细胞随大葱液浓度和作用时间增加,异倍体细胞比例逐渐减少,细胞凋亡率逐渐增加。DNA含量出现二倍体峰和亚二倍体峰~凋亡峰。大葱提取液抑制胃癌细胞可发生在G0/G1期、S期和G2/M期,无周期特异性。结论大葱提取液能明显抑制体外培养的胃癌细胞生长增殖,既可诱导胃癌细胞分化,又可诱导胃癌细胞凋亡,抗癌作用无周期特异性。     

5-氮-2-脱氧胞苷联合曲古抑菌素A对人胃癌细胞系MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

目的研究人胃癌细胞系MGC-803经DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（TSA）作用后细胞增殖和凋亡变化。方法MTT比色法测定各组细胞的增殖情况,Annexin V染色法检测各组细胞凋亡率。结果单独应用5-Aza-CdR或TSA作用于胃癌细胞系MGC-803后,细胞增殖均受到抑制,生长抑制率分别为68.0%、65.8%;凋亡率分别为（42.31±4.53）%、（39.30±5.37）%,而联合用药组细胞生长抑制率明显增加,达到86.3%,细胞凋亡率为（68.20±7.14）%。结论与单用5-Aza-CdR或TSA相比,联合应用两种药物更能显著的诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖,这可能为胃癌的生物治疗提供一种新的思路。     

二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胃癌MGC803细胞的作用机制。方法采用MTT法和流式细胞仪检测不同浓度的DADS对MGC803细胞的生长抑制作用和细胞周期分布影响。结果随着DADS浓度的增加,MGC803细胞的生长抑制率逐渐上升;细胞的G0/G1期比率下降,G2/M期比率逐渐上升。结论抑制癌细胞生长和诱导癌细胞周期阻滞于G2/M期是DADS的抗肿瘤机制之一。