高氧致新生鼠肾组织病理变化及肿瘤坏死因子α的表达

目的以高氧诱导建立慢性肺部疾病(CLD)的新生大鼠模型为对象,动态观察肺损伤过程中肾组织的病理变化,同时检测细胞因子包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)在肾组织中的变化规律,以探讨高氧对肾脏的损伤及其发生机制。方法 200只新生足月Wistar大鼠,体质量5~7g,分为2组,即高氧组100只,空气组100只。将高氧组采用高氧建立新生鼠CLD模型,在80%±5%氧气条件下持续暴露;空气组新生鼠生后在正常空气中暴露;于第1、3、7、14、21天各处死12只,光学显微镜下观察肾组织形态学改变,免疫组织化学动态检测肾组织中TNF-α的表达部位和强度变化。结果病理组织学表明,与空气组比较,高氧组肾脏呈轻度改变,第3、7天主要为肾小管空泡变性、水肿、扩张,第14、21天可见肾间质血管扩张、充血,偶见肾小管出血、坏死,肾小管再生,未见肾纤维化。免疫组织化学检测结果显示,空气组大鼠肾组织内无或仅有少量TNF-α阳性细胞表达,高氧组各期显示出TNF-α阳性表达的细胞,广泛分布于肾小管上皮细胞。高氧组第3天肾组织TNF-α(0.49±0.02)表达增强(P0.05),第7天TNF-α(0.63±0.14)表达达高峰(P0.01),第14天TNF-α(0.45±0.22)表达减弱,但仍具统计学意义(P0.05),而第21天TNF-α(0.32±0.05)表达减弱,与空气组TNF-α(0.29±0.04)比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论吸入高氧的新生鼠可产生肾脏病理学轻度改变,细胞因子TNF-α在肾脏表达一过性增强,可能参与了肾脏损伤的发生。     

血管内皮生长因子和血管生成素在新生鼠高氧肺损伤中的表达及其对肺发育的影响

目的 研究高浓度氧暴露致新生大鼠急性肺损伤时血管内皮生长因子（VEGF）和血管生成素（Ang）的表达及其对肺发育的影响,为临床防治支气管肺发育不良提供理论依据.方法 生后2～3日龄的新生SD大鼠共48只随机分为正常组、高氧组各24只,分别置于空气及常压高浓度氧气（体积分数95％以上）喂养,采用荧光定量PCR和Western Blot方法检测实验第1天、第3天、第7天时两组鼠肺组织VEGF和Ang的mRNA和蛋白水平的表达,苏木精-伊红染色对照动态观察新生大鼠肺组织形态结构变化.结果 高氧组肺组织VEGF和Ang mRNA表达水平第1天（0.86±0.3）、（0.63±0.3）,第3天（0.54±0.26）、（0.91±0.3）,第7天（0.32±0.20）、（0.42±0.1）,均明显低于正常组第1天（1.00±0.28）、（1.00 ±0.24）,第3天（0.92±0.34）、（1.32±0.18）,第7天（0.61±0.12）、（0.72±0.32）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;高氧组肺组织VEG和Ang蛋白表达水平第1天（0.78±0.3）、（0.65±0.16）,第3天（0.60±0.08）、（0.65±0.16）,第7天（0.34±0.12）、（0.32±0.14）,均明显低于正常组第1天（1.00±0.16）、（1.00±0.37）,第3天（0.85±0.27）、（1.40±0.25）,第7天（0.56±0.18）、（0.65±0.36）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与正常组相比,高氧组肺组织病理形态分析,肺组织显著发育不良,肺泡结构简单化,肺泡数目减少和肺微血管发育受阻.结论 VEGF和Ang对肺发育起着重要作用,且VEGF和Ang在肺发育的过程中可能起着相互协同和制约的作用.     

IGF-I和IGF-IR在高氧致新生鼠慢性肺疾病中的动态表达及其作用

目的研究IGF-I、IGF-IR在高氧致新生鼠慢性肺疾病（CLD）中的表达及作用。方法将足月新生大鼠144只随机分为高氧组和空气组,分别于实验1d,3d,7d,10d,14d,21d应用免疫组化和RT-PCR技术检测IGF-I、IGF-IR的动态表达。结果CLD时IGF-I和IGF-IR呈动态变化,高氧组和空气组比较,在实验3d～10d IGF-I和IGF-IR表达明显降低（P〈0.05）,14d和21d表达明显增强（P〈0.05）。结论IGF-I和IGF-IR是肺泡发育的正向调节因子,与CLD时肺泡分隔受阻、肺泡成熟障碍和肺纤维化有关。     

PCNA在CLD新生鼠肺成纤维细胞中的动态表达及意义

目的探讨增殖细胞核抗原（proliferatingeellnuelearantigen,PCNA）在CLD新生鼠肺成纤维细胞中的动态表达及意义。方法足月新生SD大鼠于生后12h内分别持续吸入85%高氧和空气,于3、7、14、21天随机处死后动物,无菌条件下采集肺组织,进行LF细胞的原代培养,应用MTT法检测细胞增殖活力。免疫组化法检测PCNA蛋白表达;Real-time PCR法检测PCNAmRNA含量。结果 MTT结果显示,高氧使得LF增殖活力增强;生后3d空气组和高氧组PCNA蛋白及mRNA的表达无统计学差异。生后7d时高氧组PCNA蛋白及mRNA的表达较空气组增加（P〈0.05）;14d、21d时增加明显（P〈0.01）。结论体内高氧使LF增殖活力增加,最终导致肺间质纤维化。     

姜提取物通过抑制炎症因子表达减轻高果糖喂养SD大鼠的肾损伤

目的观察姜提取物对高果糖喂养SD大鼠肾损伤的影响,并探讨其潜在的机制。方法 20只雄性SD大鼠随机均分为对照组、果糖组、20 mg/kg姜提取物组、50 mg/kg姜提取物组。观察大鼠的一般情况及肾脏的组织病理学变化;反转录PCR检测肾脏单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达;ELISA检测肾脏组织匀浆上清中MCP-1、TNF-α、IL-6含量变化。结果与对照组相比,果糖组大鼠肾质量和肾指数明显降低,并伴有肾小管损伤;50 mg/kg姜提取物能明显改善果糖组大鼠肾小管损伤,抑制大鼠肾脏MCP-1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达(P0.05);50 mg/kg姜提取物能显著降低果糖组大鼠肾脏组织匀浆上清中MCP-1、TNF-α、IL-6的含量(P0.05)。结论姜提取物能够改善果糖所致肾损伤,可能与抑制炎性细胞因子的表达有关。     

益赛普介导TNF-α调控UUO小鼠肾组织C3在肾间质纤维化中的作用机制

目的探索TNF-α是否通过调控UUO小鼠肾小管上皮细胞补体3(complement 3,C3)水平介导肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)及相关机制,而TNF-α受体拮抗剂益赛普(etanercept)能否拮抗TNF-α作用减轻RIF。方法将野生型(wide type,WT)与C3基因敲除(C3 knock out,C3KO)小鼠分别设置假手术(Sham)组、单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)组;另外,给WT UUO鼠腹腔注射不同浓度etanercept。观察WT UUO鼠及C3KO UUO鼠肾组织中TNF-α、C3的表达及TNF-α与表达C3肾小管的相关性及RIF程度;观察etanercept处理WT UUO鼠后各组肾小管上皮细胞表达TNF-α受体(TNF-αreceptor,TNFR)、NF-κB p65、肾小管C3表达及RIF程度。结果 UUO鼠肾组织几乎所有肾小管上皮细胞均表达TNF-α受体(TNF-αreceptor,TNFR)及UUO后肾组织高表达TNF-α,部分肾小管上皮细胞表达C3,表达C3肾小管周围有强阳性表达TNF-α细胞浸润;C3KO UUO组RIF程度较WT UUO组减轻(P0.01);经etanercept处理WT UUO鼠,肾小管C3和肾组织NF-κB p65表达均明显下降(P0.01),RIF减轻(P0.01)。结论 UUO术后TNF-α、C3均参与RIF,TNF-α可能通过调控肾小管上皮细胞转录因子NF-κB p65的表达介导肾小管上皮细胞C3产生参与RIF,而etanercept可能拮抗TNF-α减轻RIF。     

高氧致新生鼠肺VEGF、PECAM-1、HIF-1α mRNA的动态改变

目的研究高氧吸入致新生鼠肺VEGF、HIF—1α，PECAM-1mRNA的动态改变，探讨高氧对发育中鼠肺微血管损伤的调节机制。方法采用新生SD大鼠制作CLD模型，RT—PCR技术检测实验组和对照组在生后1、4、7、14、21天肺组织VEGF、PECAM-1、HIF-1αmRNA表达。结果新生鼠肺VEGF、PECAM-1mRNA表达量随生后日龄增长而增加，高氧导致VEGF、PECAM-1及HIF—1α表达减少。结论高氧导致肺组织VEGF、PECAM—1及HIF-1αmRNA表达减少。推测，高氧可能通过抑制HIF-1-VEGF信号通路或者直接损伤内皮细胞干扰肺血管发育过程。致CLD的病理改变。     

角化生长因子在慢性肺疾病早产大鼠的表达

目的探讨高氧致CLD早产大鼠KGF表达的变化规律.方法 60只新生早产大鼠随机分为2组,每组30只:A组-对照组;B组-高氧组(吸入95%O2).分别采用Western Blotting及RT-PCR检测肺组织KGF及其mRNA表达.结果高氧组肺内KGF及其mRNA表达高于对照组.结论高氧引起新生早产大鼠肺内KGF及其mRNA的表达随时间发生变化.     

雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织TNF-α与MCP-1表达的影响

目的观察雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与单核细胞趋化因子蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法选取50只雄性SD大鼠,随机分为正常组(n=10)、模型组(n=20)及雷公藤甲素组(n=20)。模型组与雷公藤甲素组大鼠给予高糖高脂饮食,并以链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病肾病大鼠模型。8周后处死大鼠,检测相应生化指标并计算肾脏指数,免疫组织化学方法和Western blot方法检测TNF-α与MCP-1的蛋白表达。结果模型组大鼠肾脏指数、血糖、血肌酐和24 h尿蛋白较对照组显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠的各项指数显著降低,P0.05。与对照组比较,模型组大鼠肾脏组织TNF-α与MCP-1的蛋白表达显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠肾脏组织TNF-α与MCP-1的蛋白表达显著降低,P0.05。结论雷公藤甲素能降低糖尿病肾病大鼠肾组织TNF-α与MCP-1的水平,具有一定的肾保护作用。     

单侧输尿管梗阻大鼠模型中p38MAPK表达与细胞凋亡

目的： 探讨p38MAPK在大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾组织中的表达及其在肾小管间质细胞凋亡和纤维化过程中可能发挥的作用。方法: 将25只Wistar大鼠中的18只行左侧输尿管结扎术，另外7只行假手术。分别于术后第3、7和14 d处死各组大鼠，行HE和Masson染色，观察肾脏病理变化；免疫组织化学方法测定增殖细胞核抗原（PCNA）表达；原位末端标记法（TUNEL）与DNA电泳观察肾小管间质细胞凋亡情况；Western blotting检测肾组织半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）和p38丝裂素激活蛋白激酶（p38MAPK）及其磷酸化产物（p-p38MAPK）的表达。结果: 与假手术组比较，UUO模型组肾脏病理改变加重，TUNEL染色及DNA琼脂糖凝胶电泳可见大量的肾小管间质细胞凋亡，肾间质细胞PCNA表达明显增加，肾组织caspase-3的表达也显著增加（P<0.05）。p38MAPK蛋白水平在各组之间比较没有明显差别（P>0.05）。p-p38MAPK蛋白在正常肾脏有低水平表达，UUO模型组随着梗阻时间延长表达逐渐增多；第7 d达高峰，第14 d开始下降（P<0.05）。结论: p38MAPK信号通路可能参与了UUO致肾小管间质细胞凋亡和肾间质纤维化过程。     

依普利酮抑制慢性肾脏病妊娠大鼠梗阻对侧肾脏血管新生并减轻肾间质纤维化

目的：探讨依普利酮抑制慢性肾脏病妊娠大鼠梗阻对侧肾脏血管新生的机制及作用途径。方法：未经产雌性Wistar大鼠60只随机分为假手术组、假手术+妊娠组、模型组和依普利酮组,每组15只。模型组和依普利酮组大鼠采用单侧输尿管梗阻(UUO)手术造成肾脏损伤,9周后除假手术组外所有处于动情周期的雌鼠与雄鼠合笼,建立肾损伤妊娠大鼠模型。依普利酮组自UUO术后开始给药,给予依普利酮(100 mg·kg^-1·d^-1)治疗。妊娠第19天处死母鼠,留取血清标本,摘取梗阻对侧肾脏。采用HE、Masson和天狼星红染色观察大鼠肾脏组织病理形态学改变。ELISA法测定血清及肾组织中醛固酮含量,免疫组化、免疫荧光、RT-qPCR和Western blot法检测肾组织中炎症因子、血管新生标志物及低氧诱导因子1α(HIF-1α)/Slit2/Robo1信号通路相关蛋白的表达。结果：肾脏病理切片显示模型组大鼠肾小管扩张明显,有大量胶原纤维沉积及炎症细胞浸润。ELISA结果显示模型组大鼠血清及肾组织中醛固酮含量显著升高(P<0.01)。免疫组化和RT-qPCR结果显示模型...     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对高氧致新生鼠慢性肺疾病Ⅰ型胶原表达的影响

目的研究collagen Ⅰ在高氧致新生鼠慢性肺疾病中的表达、作用及IGF-Ⅰ对collagenⅠ表达的影响。方法将足月新生大鼠144只随机分为高氧组和空气组，分别于实验1d，3d，7d，10d，14d和21d应用免疫组化染色分别检测collagenⅠ和IGF～Ⅰ蛋白表达，并将IGF—Ⅰ和collagenⅠ蛋白表达进行相关分析。结果高氧组在3d～10d IGF—Ⅰ和collagenⅠ蛋白表达与空气组相比较明显降低（P〈0．05）；14d和21d IGF—Ⅰ和collagenⅠ蛋白表达与空气组相比较明显增加（P〈0．05），IGF—Ⅰ和collagenⅠ表达呈正相关。结论collagenⅠ与CLD时肺泡发育受阻和肺纤维化发生有关，IGF—Ⅰ是影响collagenⅠ合成的重要生长因子之一。     

加巴喷丁复合吗啡预防慢性压迫坐骨神经致痛觉敏化的疗效分析

目的观察加巴喷丁复合吗啡预防性镇痛对大鼠慢性压迫坐骨神经（CCI）后导致的机械缩足阈变化以及脊髓背角肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法随机选择重量（180±20）g的成年雄性SD大鼠24只,分为假手术组（S组）、模型组（M组）、预防性镇痛组（P组）和常规镇痛组（N组）。观察不同方式给药的模型组和对照组大鼠的行为学变化。术后10d分离脊髓通过免疫组化检测TNF-α水平的变化。结果术前各组大鼠机械痛阈差异无统计学意义,与M组相比,手术后各时段S、P、N组都存在不同程度的改变,差异均有统计学意义（P〈0.05）;P、N组TNF-α的积分光密度均值（IOD）水平分别为（0.2185±0.01980）、（0.2301±0.01386）,与M组的（0.2902±0.01325）比较明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论加巴喷丁复合吗啡对大鼠采用预防性镇痛有较好的效果,可显著降低CCI后导致的机械痛阈,降低TNF-α在脊髓背角的表达。     

糖尿病大鼠肾小管间质缺氧诱导因子2α表达变化及氯化钴对其影响

目的:观察缺氧诱导因子2α(HIF-2α)在2型糖尿病(T2DM)大鼠肾小管间质的表达及其降解抑制剂氯化钴(CoCl_2)的干预作用。方法:24只健康Wistar大鼠,留取8只作为对照(CON组),余16只采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建T2DM模型,成模后平分为T2DM组(DM组)和CoCl_2干预组(DM+CoCl_2组)。24周后取大鼠肾脏,常规方法制作石蜡切片。采用免疫组化法检测大鼠肾组织HIF-2α表达水平;PAS染色法检测大鼠肾组织结构病理变化及半定量分析肾小球硬化指数(GSI)和小管间质纤维化指数(IF);TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡率;免疫印迹法检测肾组织促红细胞生成素(EPO)表达水平。结果:DM组和DM+CoCl_2组大鼠肾组织HIF-2α表达高于CON组(P0.01),DM+CoCl_2组HIF-2α表达水平较DM组更高(P0.01);DM大鼠肾小球系膜基质及细胞轻度增生,肾小管间质区域增宽、细胞外基质聚集,其GSI和IF均显著高于CON组(P0.01),与DM组比较,DM+CoCl_2组上述病理改变减轻,GSI和IF降低(P0.01)。DM组肾小管上皮细胞凋亡率高于CON组(P0.01),而DM+CoCl_2组细胞凋亡率较DM组降低(P0.01)。DM组肾组织EPO表达水平低于CON组(P0.05),而DM+CoCl_2组EPO水平高于DM组(P0.05)。结论:上调肾组织HIF-2α表达可减轻T2DM大鼠肾间质损害。     

内皮祖细胞培养上清对高氧暴露新生大鼠肺结构的改善作用

目的:研究内皮祖细胞培养上清(endothelial progenitor cell-conditioned medium,EPC-CM)对高氧暴露新生大鼠肺损伤时肺泡结构的改善作用及其机制。方法:从新生SD大鼠骨髓中获取内皮祖细胞并鉴定,收集第3代细胞的培养上清备用。另取新生SD大鼠40只随机分为4组,即空气组:仔鼠在空气(21%O_2)中喂养21天;高氧组:仔鼠在85% O_2中喂养21天;内皮细胞基础培养基(endothelial cell basal medium,EBM)干预组:仔鼠在85%O_2中喂养至第14天时,经气道给予100μL EBM,然后喂养至第21天;EPC-CM干预组:仔鼠在85% O_2中喂养至第14天,经气道给予100μL EPC-CM,喂养至第21天。第21天处死小鼠,左肺用4%多聚甲醛固定,留作石蜡切片,随后HE染色进行肺组织病理形态学观察,并做辐射状肺泡计数(radical alveolar count,RAC)及肺泡平均线性截距(mean linear intercept,MLI)测量;免疫组织化学方法对血管内皮细胞FVIII染色,计数肺组织微血管密度;右肺留作实时荧光定量PCR检测肺组织KGF、VEGF、SP-A和SP-C的mRNA表达。结果:培养所得细胞具有典型的EPCs形态改变,能结合异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素1并摄取Di I荧光标记的乙酰化低密度脂蛋白。高氧组及EBM干预组的仔鼠体重、RAC、MLI和微血管密度较空气组显著降低(P0.05),EPC-CM干预组的RAC和微血管密度较高氧组和EBM干预组明显增加(P0.05),而体重和MLI的变化无明显差异,但有增高的趋势。高氧组和EBM干预组肺组织KGF、VEGF、SP-A和SP-C的mRNA表达较空气组显著降低(P0.05),EPC-CM干预组的表达显著高于高氧组和EBM干预组(P0.05)。结论:EPC-CM可改善高氧暴露新生大鼠的肺泡化和肺血管发育,可能与促进肺内KGF和VEGF mRNA的表达相关。     

HSP47在单侧输尿管梗阻大鼠模型肾脏组织的表达及作用

目的:观察HSP47在单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠模型肾脏组织的表达情况,探讨HSP47在肾小管间质纤维化中的作用.方法:将SD大鼠随机分为模型组(UUO组)和假手术组(Sham组),每组8只.采用单侧(左)输尿管结扎方法,建立梗阻性肾小管间质纤维化大鼠模型.术后第14天处死动物.观察两组间蛋白尿和血肌酐水平, 运用HE和Masson染色观察肾脏组织形态学改变,采用免疫组织化学方法检测HSP47、胶原Ⅳ(Collagen Ⅳ)的表达.结果:与Sham组比较,UUO组大鼠血肌酐水平升高,蛋白尿差异无统计学意义.光镜下UUO组大鼠肾组织出现不同程度的肾小管扩张、间质炎症细胞浸润,间质面积增宽、部分肾小管萎缩、肾小管上皮细胞空泡样变性.Masson染色结果显示UUO组大鼠肾组织胶原在肾小管周围、间质区显著增多.免疫组织化学结果显示UUO组大鼠肾组织HSP47表达显著增加,在肾小管周围、间质区表达增加最明显;Collagen Ⅳ表达显著增加,在肾小管基底膜、间质区表达增加最明显.结论:HSP47在UUO大鼠模型肾脏组织中表达上调,且与胶原表达部位一致,提示HSP47促进肾间质纤维化,且该作用与其促进胶原蛋白的合成有关.     

EMMPRIN在大鼠肾间质纤维化过程中的表达变化

目的 检测细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在大鼠肾间质纤维化模型中的表达变化.方法 64只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)和模型组(UUO组),每组16只.假手术组,仅游离输尿管不结扎,模型组,行单侧输尿管结扎术,分别于术后3、7、14 d处死大鼠并留取肾脏组织.肾脏标本行HE、Masson染色方法检测间质纤维化损伤的程度.应用免疫组织化学方法检测肾组织中EMMPRIN,α-SMA,E-cadherin的表达.结果 HE染色显示:UUO术后肾间质肾小管萎缩、扩张,胞外基质沉积,炎细胞浸润增加.Masson染色显示:UUO术后大鼠肾组织胶原纤维组织增生,出现明显的间质纤维化改变.免疫组织化学结果显示:与假手术组相比,UUO模型3d组的EMMPRIN表达显著增高,同时有α-SMA表达升高和E-cadherin表达显著下降(P＜0.05);随着梗阻时间的延长,模型7d组EMMPRIN的表达逐渐减弱(P＜0.05).结论 EMMPRIN可能参与了UUO大鼠肾间质纤维化的早期上皮间质转分化过程,而随着纤维化程度加重,后期表达逐渐减少.     

糖尿病肾病大鼠动物模型建立及INF-α干预机制研究

目的 探讨糖尿病肾病大鼠动物模型建立及TNF-α干预机制。方法 选择 SD大鼠60只作为对象,随机数字法分为对照组和观察组,各30只。对照组大鼠腹腔注射柠檬酸缓冲液,观察组在对照组基础上采用高糖高脂饲料联合5%葡萄糖饮水喂养,诱导胰岛素抵抗,2周后腹腔注射STZ,连续注射3 d,诱发持续高糖血症。采用酶联免疫吸附法在建模前、建模2周、建模4周检测观察组大鼠血糖、尿白蛋白、肌酐水平,同时检测两组大鼠TNF-α水平,分析糖尿病动物模型建立及TNF-α干预机制。结果 ①对照组大鼠全身状态良好,体质量增加,皮毛光滑亮泽,观察组大鼠建模成功后出现多食、多饮、多尿及生长迟缓现象,成模4周后体重低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;②观察组建模2周血糖水平（8.21±0.21）mmol/L,建模4周血糖水平（31.21±1.04）mmol/L,均高于对照组的（6.32±0.19）mmol/L、（6.74±0.24）mmol/L）,差异有统计学意义（P＜0.05）;③观察组建模2周TNF-α水平为（3.03±0.23）mmol/L,建模4周TNF-α水平为（12.10±1.12）mmol/L,均高于对照组的（1.64±0.58）mmol/L、（1.69±0.62）mmol/L,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 高糖高脂饲料联合浓度为5%葡萄糖饮水配合小剂量STZ能建立理想的糖尿病肾病大鼠动物模型,可以明确糖尿病肾病发展伴有TNF-α炎症因子水平升高,进一步为TNF-α干预机制研究奠定了基础。     

番茄红素调节TLR4/NF-κB对糖尿病大鼠肾损伤和内皮功能的保护作用

目的为了研究番茄红素(LP)调节TLR4/NF-κB对糖尿病大鼠(DM)肾脏损伤和内皮功能的保护机制研究。方法通过成年雄性Wistar大鼠(90只)给予高糖高脂喂养,并腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,随机分为对照组、模型组和实验组。实验组给予番茄红素。当模型构建8周之后将大鼠处死,肾称重计算肾体比,HE法检测各组肾脏病理改变;采用ELISA发检测患者血清氧化应激指标(MDA、SOD)、血管内皮功能指标(NO、ET)和炎症因子(TNF-α、IL-6)水平;检测大鼠肾脏组织中和Caspase 3、NF-κB和TLR4蛋白的表达。结果HE染色观察到,番茄红素可以有效缓解肾小管损伤、肾小球系膜和基底膜的增生情况,减轻肾小管上皮水肿。与模型组相比,实验组SOD活性显著升高,MDA水平降低;NO、ET、TNF-α和IL-6含量显著降低(P0.05);实验组大鼠肾脏组织TLR4、NF-κB和Caspase 3蛋白表达显著降低(P0.05)。结论番茄红素能够抑制TLR4/NF-κB信号通路,对糖尿病大鼠的肾脏损伤和内皮功能起到保护作用。     

大鼠肾脏机械损伤早期TNF-α及其受体的表达

探讨外源性ADM对肾脏机械性损伤早期TNF-α及受体表达的影响.选健康成年普通级Wistar大鼠104只.随机分为四组:对照组8只、创伤组32只、创伤前注射ADM组32只、创伤后注射ADM组32只,后三组的动物分别于创伤后1、6、12和24 h各处死8只.采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型.ADM分别于创伤前或创伤后10 min采用腹腔注射法给药.实验动物采用快速心脏采血法处死.取下肾脏标本,10%甲醛固定.观察TNF-α、TNFR在组织中的表达规律.结果表明:单纯创伤组于创伤早期TNF-α表达高于正常对照组,外源性ADM早期(1 h和6 h点)可抑制,TNF-α(P<0.05).单纯创伤组于创伤早期(1 h和6 h点)TNFR表达低于正常对照组,外源性ADM(创伤前给药)早期(1 h和6 h点)可上调节TNFR(P<0.05).说明TNF-α在创伤早期即参与了肾组织炎症的急性期反应并加重损伤.TNFR对TNF-α具有动态调节作用.ADM能降低TNF-α的分泌.ADM在早期肾损伤过程中可以上调TNFR,与其相互协调,共同发挥对损伤器官的保护作用.