血管内皮细胞生长因子基因涂布支架预防门腔静脉分流支架狭窄的实验研究

目的　通过转染人血管内皮细胞生长因子 (phVEGF)基因促使血管内支架处内皮细胞生长以预防支架内再狭窄的发生。方法　将 phVEGF基因局部涂布于由多聚赖氨酸包被的血管内支架上 ,采用介入方法经颈静脉插管至 6只狗的右肝静脉 ,同时以置入裸支架为对照组。结果　支架置入后第 1周 ,在转染 phVEGF基因组局部血管组织内 ,RT PCR法检测到 phVEGF的表达 ;荧光显微镜下观察到部分血管内皮细胞发出黄绿色荧光 ;扫描电镜显示支架腔内皮分化程度较对照组高。置入后第 8周 ,转染 phVEGF基因组 (n =6 )血管造影显示支架通畅 ,而对照组 (n =5 )则均发生再狭窄 ;支架端肝静脉血管平均新生内膜厚度 ,平均新生内膜面积 ,百分狭窄面积均明显小于对照组 [(0 .16 7± 0 .10 3)mm比 (1.96 5± 0 .72 5 )mm ,(2 .5 6 8± 1.5 2 6 )mm2 比 (17.5 96± 7.939)mm2 ,(11.46 2± 5 .42 3) %比 (6 8.5 0 5± 2 4.0 0 3) %,P <0 .0 5 ];免疫组化显示平滑肌细胞增殖程度 (PLI)也显著高于对照组 [(0 .0 30± 0 .0 0 2 )比 (0 .0 42± 0 .0 0 3) ,P <0 .0 5 ) ]。结论　phVEGF基因涂布支架可加速支架内皮化的形成 ,进而抑制血管内支架置入术后血栓形成和内膜增殖引起的再狭窄发生。     

非诺贝特对冠状动脉损伤后血管重构的抑制效果

目的:研究非诺贝特对单核细胞以及外膜血管增生的抑制作用。方法:把仔猪12头的24支冠状动脉制成冠脉气囊损伤支架置入模型,然后分为非诺贝特组和对照组,使用血管内超声、电镜等仪器,并采用病理组织学等方法进行观察。结果:1支架置入后第3d的单核细胞的浸润:非诺贝特组明显少于对照组;2支架置入第28d的冠脉内腔面积,血管面积:非诺贝特组的血管面积明显大于对照组(7.05±0.43∶6.32±0.24,P=0.035),内腔面积也明显大于对照组(5.95±0.76∶4.76±0.37,P=0.040);3血管重构指数,内膜肥厚:非诺贝特组的血管重构指数明显大于对照组(1.13±0.45∶0.75±0.47,P=0.032)。但是内膜肥厚的面积却明显小于对照组(1.10±0.45∶1.95±0.43,P=0.042);4支架置入28d后的外膜新生血管情况:非诺贝特组明显小于对照组(3.20±0.11∶7.01±0.23,P=0.038)。结论:非诺贝特对猪冠状动脉气囊损伤支架置入模型早期的单核细胞以及外膜血管增生具有抑制作用,从而阻止了收缩性血管重组的形成。     

缬沙坦涂层支架对支架术后再狭窄中胶原沉积的影响

目的评价缬沙坦涂层支架对支架置入后新生内膜中胶原沉积的影响及其预防支架内再狭窄的可行性。方法18只新西兰大白兔分为裸支架组,载体涂层支架组,缬沙坦涂层支架组3组。采用多层涂布技术制备缬沙坦涂层支架和载体涂层支架。分别将裸支架、载体涂层支架及缬沙坦涂层支架置入兔腹主动脉。术前、术后及支架置入3个月后分别行定量腹主动脉造影(QCA)测量血管直径。3个月后处死实验兔,分别测定3组支架血管段的管腔面积,内外弹力膜围绕面积,新生内膜面积及最大内膜厚度并做比较。将支架血管段进行MASSON染色,观察胶原沉积情况,天狼星红-苦味酸染色进一步观察胶原的类型。结果裸支架组(n=8),载体涂层支架组(n=8),缬沙坦涂层支架组(n=10),QCA测量的术前、术后及3个月后腹主动脉直径相似。缬沙坦组管腔面积最大,新生内膜面积最小,裸支架组、载体涂层支架组、缬沙坦涂层支架组平均管腔面积分别为(4345548±125822)μm2,(4302061±167952)μm2,(5016269±207934)μm2,平均新生内膜面积分别为(1119635±163503)μm2,(1135636±136555)μm2,(441577±74099)μm2,平均最大内膜厚度分别为(240±30)μm,(192±21)μm,(116±12)μm。MASSON染色可见新生内膜中主要是胶原沉积,天狼星红-苦味酸染色发现胶原沉积主要为Ⅲ型胶原,间或有Ⅰ型胶原。结论缬沙坦涂层支架主要是通过抑制胶原沉积抑制支架置入后血管内膜增生发挥其防治支架内再狭窄作用的。     

冠状动脉支架置入后局部内膜增生模式的探讨

目的探讨冠状动脉支架置入局部血管内膜的增生模式。方法建立冠状动脉支架置入的广西种的微型猪模型。分别于支架置入后3,7,28,90和180 d截取支架段血管连同临近的近端正常血管段,进行病理组织学检查和聚合酶链反应检测支架局部血管内膜增生情况。结果正常血管段表达增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA在各个时间段没有显著性差异。支架置入后3 d局部血管壁PCNA mRNA的表达明显增高。并在术后7 d达到高峰。术后90 d PCNA mRNA的表达呈现下降的趋势,但仍显著高于正常血管段,并且差异一直持续到术后180 d。术后7～180 d支架段内膜及中膜面积明显大于正常血管段。结论冠状动脉支架置入后局部内膜呈现了一种持续过度的增生反应。     

冠状动脉内置入国产支架的实验研究

目的　评价金新动脉支架置入小型猪正常冠状动脉内的可行性 ,观察支架置入后各时相支架段血管开通情况及血管内膜反应。方法　将 39枚国产冠状动脉内支架置入 2 0头小型猪冠状动脉内 ,每头小型猪的左前降支及左回旋支各被置入支架 1枚 ,观察置入 2 4h、1周、2周、4周、12周及 6个月血液动力学、肝功能、肾功能变化及冠状动脉造影随访结果 ,并对支架置入段血管进行光镜及电镜检查。结果　①该种冠状动脉内支架置入成功率为 97 5 % ,支架置入对血液动力学、肝功能、肾功能无影响。②冠状动脉造影随访示所有支架置入即刻和动物处死前支架段血管开通率10 0 %。支架X光下清晰可见 ,未经特殊抗血栓治疗 ,支架段血管内无血栓形成。未见与置入支架有关的心脏事件发生。③组织病理学形态分析显示新生内膜由不同排列的纤维组织和平滑肌细胞 (SMCs)组成 ,置入支架 1周开始有内膜覆盖支架丝 ,2周时可检测到光滑的新生内膜 ,置入支架后 1周、2周、4周、12周、2 4周支架小梁处新生内膜厚度分别为(5 6 17± 31 15 ) μm、(10 9 72± 4 1 6 1) μm、(348 2 5±5 6 78) μm、(2 5 6 2 5± 5 5 97) μm、(14 8 6 1± 39 82 ) μm。支架小梁间新生内膜厚度分别为 (37 2 1± 2 7 5 0 ) μm、(6 4 5 6±36 5 7) μm、(1     

三氧化二砷洗脱支架防治兔血管损伤后再狭窄的实验研究

目的冠状动脉支架内再狭窄主要是由血管损伤后内膜增生引起,研究三氧化二砷(As2O3)多聚左旋乳糖酸(PLLA)涂层的药物洗脱支架在兔的损伤髂动脉内抑制内膜增生防治再狭窄的疗效、机制及As2O3释放的药物代谢动力学。方法45只雄性新西兰白兔,随机分三组,每组15只,分别将裸支架、PLLA涂层支架、As2O3洗脱支架置入兔髂动脉的近端,饲养28d后处死,组织病理学检测内膜厚度,TUNEL法测细胞凋亡。在体药代动力学研究:雄性新西兰白兔48只,按支架置入后饲养时间(2h、1d、3d、7d、14d、28d)分为6组,每组8只,检测血浆中及支架处组织中的As2O3浓度。结果As2O3洗脱支架释放As2O3达28d,第一天支架处组织中的As2O3浓度约是血浆中的55000倍,14d约为22000倍。As2O3洗脱支架较PLLA支架和裸支架分别减少内膜增生51%、31%。As2O3洗脱支架组较PLLA支架组和裸支架组血管平滑肌细胞凋亡面积明显增加(21·0±3·3比6·2±1·9,5·3±2·1)。结论As2O3洗脱支架在局部血管处释放As2O3达28d,在兔的髂动脉可有效抑制由支架和球囊损伤导致的兔血管内膜增生,其机制之一是促进平滑肌细胞凋亡。     

~(103)Pd同位素支架预防支架内再狭窄的实验研究

目的　探讨10 3 Pd同位素支架对支架植入术后再狭窄的预防作用。方法　对雄性新西兰白兔 5 0只进行腹主动脉球囊拉伤后 ,分别置入10 3 Pd同位素支架 (同位素支架组 )和普通支架 (普通支架组 )各 2 5只。两组分别于术后 3d和 1、2、4、8周分批进行血管病理形态学、免疫组织化学测定和血管造影检查。结果　血管拉伤后 8周 ,血管造影显示 ,同位素支架组血管最小内径显著大于普通支架组 (P <0 .0 5 ) ;血管狭窄程度明显减低 (P <0 .0 5 ) ;病理形态学和免疫化学染色分析表明 ,两组血管损伤程度相同。受同位素辐射作用后 ,血管内膜增生受到显著抑制 ,管腔狭窄程度减轻。结论10 3 　Pd同位素支架在动物实验中具有明显预防支架内血管再狭窄的作用。     

Mytrolimus药物洗脱支架预防支架内再狭窄的实验研究

目的评价新型聚烯烃类高分子化合物涂层携载雷帕霉素衍生物-Mytrolimus(CCI-779)洗脱支架在小型猪冠状动脉模型预防再狭窄的疗效。方法小型猪冠状动脉分别置入裸支架、单纯聚烯烃类高分子化合物涂层支架和Mytrolimus洗脱支架(160μg/18mm)。术后4周重复冠状动脉造影后处死动物,测定3组支架血管段的损伤指数、冠状动脉横截面积、管腔面积、支架上平均内膜厚度、支架间平均内膜厚度、新生内膜面积、面积再狭窄百分比,并作比较。结果裸支架组(置入支架数n=10)、单纯聚烯烃类高分子化合物涂层支架组(n=10)和Mytrolimus洗脱支架组(n=8)3组冠状动脉大小和血管损伤程度基本相同,术后4周,单纯聚烯烃类高分子化合物涂层组与裸支架比较多项参数差异均无统计学意义。Mytrolimus药物洗脱支架组和裸支架组的支架上内膜厚度分别为(0.18±0.08)mm和(0.33±0.25)mm(P<0.05);支架间内膜厚度分别为(0.14±0.05)mm和(0.28±0.23)mm(P<0.05);新生内膜面积分别为(1.09±0.24)mm2和(2.44±1.59)mm2(P<0.05)。上述多项参数在Mytroliums洗脱支架组均显著少于裸支架组。Mytrolimus组新生内膜面积比裸支架组少了55.33%,且Mytrolimus组无一例再狭窄。结论Mytrolimus洗脱支架在置入小型猪冠状动脉4周时可有效抑制内膜增生、预防冠状动脉实验性支架内再狭窄。     

c-myc反义寡核苷酸涂层支架局部植入给药在体分布及对细胞凋亡的影响

目的 :评价c myc反义寡核苷酸 （ASODN）经铂 -铱合金明胶蛋白涂层支架局部应用后 ,药物在组织中的分布及对血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法 :将携带羧基荧光素 （FAM ）标记c mycASODN的国产铂 铱合金明胶蛋白涂层支架 （5 5 0 μg/支架 ）置入兔颈动脉 （n =6 ） ,术后 4 5min、2h、6h分别取材 ,荧光显微镜下观察药物在脏器中的分布。另取家兔 32只 ,对照组 16只置入明胶蛋白涂层支架 ;处理组 16只置入携带c mycASODN明胶蛋白涂层支架。术后 7、14、30、90d（均n =4 ） ,取置入支架血管 ,行组织病理学检查 ,观察新生内膜增殖、细胞凋亡和c myc表达。结果 :给药后镜下观察药物主要分布于靶点血管。处理组平均新生内膜厚度与新生内膜面积均较对照组小（均P <0 .0 1）。术后 30d在新生内膜中观察到明显的细胞凋亡 ,90d时单位面积内凋亡细胞数显著高于 30d ;同时 ,处理组VSMC的凋亡数显著高于对照组。对照组新生内膜中c myc蛋白免疫组化及原位杂交均为阳性 ,处理组术后 7、14d为阴性 ,30、90d为弱阳性。结论 :明胶蛋白涂层支架介导的局部给药简便、可行。c mycASODN在体导入后 ,抑制VSMC增殖 ,诱导VSMC凋亡。     

雌二醇洗脱支架抑制血管内膜增生的实验研究

目的观察雌二醇(E2)洗脱支架植入对高脂喂饲兔腹主动脉内膜增生的影响,并探讨其可能的机制。方法雄兔高脂喂饲后分别于腹主动脉植入裸金属支架、磷酸胆碱(PC)涂层支架和17β-E2洗脱支架,应用HE染色、免疫组化染色及蛋白印迹方法观察17β-E2洗脱支架抑制内膜增生的作用及机制。结果支架植入术后血管壁ERK迅速活化,磷酸化ERK(p-ERK)在术后0.5 h时达峰值。各组支架植入12周时血管内膜均明显增厚。E2洗脱支架组新生内膜面积较裸金属支架组减少36%。支架植入后0.5 h时E2洗脱支架组p-ERK表达明显低于裸金属支架组。2周时E2洗脱支架组内皮化率明显高于裸金属支架组及PC涂层支架组。结论 E2洗脱支架安全、有效,可明显减少实验兔支架植入后的血管内膜增生;与普通裸金属支架对比,E2洗脱支架能够加速支架段血管的再内皮化;丝裂原激活蛋白激酶ERK1/2可能介导了支架植入后血管平滑肌细胞的增殖和内膜增生。     

川芎嗪药物涂层支架预防猪冠状动脉再狭窄的实验研究

目的 探讨川芎嗪药物涂层支架(TES)预防冠状动脉再狭窄的作用机制及其有效性.方法 TES为金属管状支架经喷涂川芎嗪单体制成(含川芎嗪200μg).采用随机、双盲实验在14只小型猪的冠状动脉左前降支分别置入TES及金属裸支架(BMS)(实验组7只,对照组7只).支架置入前后均行定量冠状动脉造影(QCA)及血管内超声(IVUS)检查.术后第28天随访行QCA及ⅣUS观察支架内膜增殖及血栓形成情况.实验终点处死动物,获取支架置入段血管及支架前后5 cm处组织行病理学及免疫组化检查.结果 14只动物均成功置入支架,4只动物因手术意外死亡未列入统计.5只动物于左前降支置入TES,5只动物置入BMs.术后第28天随访,QCA检查支架段血管直径狭窄百分比两组分别为实验组(10.0±2.1)%和对照组(60.2±23.5)%(P=0.01).IVUS检查显示,两组支架内面积相似,均未见血栓形成.对照组内弹力膜面积较实验组明显减小(P=0.021),而新生内膜面积明显增大(P=0.004).术后处死动物组织形态学检查显示两组血管损伤评分和支架内面积相近(P>0.05),均无明显的炎症反应,但实验组管腔面积[(4.34±0.93)mm2]较对照组[(1.29±1.02)mm2]明显增加(P=0.011),新生内膜面积[(1.51±0.45)mm2]较对照组[(4.60±1.39)mm2]明显减少(P=0.004).组织病理学检查提示所有支架置入节段均完全内皮化,实验组增殖细胞核抗原染色阳性细胞核明显减少,凋亡细胞较对照组增多.结论 川芎嗪药物涂层支架能有效抑制血管内膜增殖及血栓形成,减少支架内再狭窄.     

二烯丙基三硫化物包被支架术后冠状动脉管壁基质金属蛋白酶2及其抑制物表达的变化

目的探讨二烯丙基三硫化物包被支架对犬冠状动脉基质金属蛋白酶2及基质金属蛋白酶组织抑制物2表达的影响。方法利用犬冠状动脉置入过大支架致内膜损伤,建立血管狭窄的动物模型。28个支架平分为基础对照组(单纯蛋白包被支架)和二烯丙基三硫化物治疗组(二烯丙基三硫化物包被支架),分别置入14只杂种犬的冠状动脉前降支或回旋支,未置入支架的另一支冠状动脉作为正常对照组(n=14)。在不同时点(5 h,1、7、14天和28天)处死动物,术后4周的血管标本做病理切片,部分组织抽提总RNA,应用RT-PCR方法测定不同时点冠状动脉壁内基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达。结果与基础对照组相比,4周后二烯丙基三硫化物包被支架组显著抑制新生内膜的形成(P<0.01),面积狭窄率显著降低(P<0.01);与基础对照组相比,在5 h、1、14天和28天二烯丙基三硫化物包被支架显著抑制冠状动脉壁内基质金属蛋白酶2 mRNA的表达(P<0.05)。在5 h、1天和14天3个时点,二烯丙基三硫化物组与基础对照组基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达差异无显著性;在7天和28天,二烯丙基三硫化物组基质金属蛋白酶组织抑制物2的表达明显高于对照...     

缬沙坦涂层支架对实验兔血管局部内膜增生及血管紧张素Ⅱ2型受体表达的影响

目的评价缬沙坦涂层支架对血管新生内膜及其血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)表达的影响,探讨缬沙坦涂层支架防治支架内再狭窄的效果及其可能机制。方法采用多层涂布技术制备缬沙坦涂层支架和载体涂层支架。依据腹主动脉置入支架的类型将15只新西兰大白兔分为裸支架组、载体涂层支架组及缬沙坦涂层支架组,每组5只。术前、术后即刻及支架置入3个月后分别行腹主动脉造影,使用定量冠状动脉造影(QCA)软件测量血管直径及其狭窄百分数。3个月后处死实验兔,将支架血管段切片行HE染色,分别测定并比较三组支架血管段的管腔面积、内外弹力膜围绕面积、新生内膜面积及最大内膜厚度;用免疫组化法检测AT2R蛋白质表达,用RT-PCR方法测定AT2RmRNA表达。结果裸支架组、载体涂层支架组、缬沙坦涂层支架组QCA测量的术前、术后即刻及3个月后支架血管段腹主动脉平均直径差异无统计学意义。裸支架组、载体涂层支架组与缬沙坦涂层支架组的平均管腔面积分别为4345548±125822μm2,4302061±167952μm2和5016269±207934μm2;平均新生内膜面积分别为1119635±163503μm2,1135636±136555μm2和441577±74099μm2;平均最大内膜厚度分别为210±30μm,192±21μm和116±12μm。缬沙坦涂层支架组管腔面积最大,最大内膜厚度、新生内膜面积最小。AT2RmRNA在各组都有表达,在缬沙坦涂层支架组显著高于另外两组。免疫组化可见AT2R蛋白的含量在各组具有相同的趋势。结论缬沙坦洗脱支架通过上调AT2R表达,抑制血管内膜增生,可能具有防治支架术后再狭窄的作用。     

粥样病变血管内置入支架后血管内膜反应的研究

目的研究动脉粥样硬化病变血管置入镍钛合金支架后血管内膜反应及卡托普利对此反应的影响。方法８只小型猪在腹主动脉内膜剥脱后饲以高脂饲料，并随机分入两组（每组４只），组Ⅱ加用卡托普利（３ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），另设对照组４只小型猪腹主动脉球囊剥脱后不予高脂饲料和卡托普利（组Ⅲ）。２周后将１２只螺旋型镍钛形状记忆合金血管内支架分别置入１２只小型猪腹主动脉，６个月末和１０个月末分别处死动物，并对病变血管进行光镜和电镜检查。结果球囊剥脱后支架置入加高脂饲养组（组Ⅰ），腹主动脉支架段血管内膜严重增厚，以平滑肌细胞和结缔组织增生为主，有典型的粥样病变；加用卡托普利组（组Ⅱ）血管内膜厚度明显降低（与组Ⅰ比较，Ｐ＜０．０１），无明显粥样病变；组Ⅲ支架段血管内膜厚度明显低于组Ⅰ（Ｐ＜０．０１），略高于组Ⅱ（无统计学差异），内膜以结缔组织增生为主。结论（１）血管内支架置入后并不能阻止粥样病变的发展；（２）血管紧张素转换酶抑制剂对支架置入后血管内膜的增殖具有抑制作用。     

雷帕霉素支架对小型猪冠状动脉p27kip表达及内膜增殖的影响

目的　观察小型猪冠状动脉置入支架后p2 7kip表达变化及含 10 0 μg雷帕霉素可降解涂层支架释放的雷帕霉素对p2 7kip表达的影响。方法　球囊 血管以 1 3∶1比例置入过大的裸支架 (n =14 )、单高分子可降解多聚羟基丙酸乙酸 (PLGA)涂层支架 (n =16 )或雷帕霉素支架 (n =16 )并形成冠状动脉损伤模型 ,术后第 1、2、4和 12周时间段处死部分猪。测定 12周时 3组支架血管段的内膜厚度和面积。免疫组化法测定支架置入后 4个时段冠状动脉的p2 7kip表达水平及动态变化。结果　在 12周的随访组 ,裸支架、PLGA支架和雷帕霉素支架的新生内膜平均厚度分别为 (0 38± 0 2 0 )mm、(0 96± 0 5 8)mm和 (0 14± 0 12 )mm(P =0 0 0 4 ) ,3组的新生内膜面积分别为 (3 38± 0 31)mm2 、(6 4 6±2 0 1)mm2 和 (2 0 7± 0 82 )mm2 (P =0 0 0 0 )。置入裸支架 1周后 ,冠状动脉p2 7kip表达处于低水平状态 ,但在第 4周达到最高水平 ,在第 12周时 ,其表达水平恢复至第 1周时水平 ;雷帕霉素支架使整个随访期的p2 7kip表达水平无明显变化 ,均处于高水平表达状态。结论　含 10 0 μg雷帕霉素支架在 12周内有抑制小型猪冠状动脉内膜增殖的明显疗效。裸支架置入后 12周内 ,p2 7kip表达水平在第 4周最高 ;涂层支架释放的     

大蒜素包膜支架对犬冠状动脉损伤后再狭窄的影响

目的 :评价一种新型包膜支架携带和释放大蒜素的能力 ,并观察大蒜素包膜支架对术后再狭窄的影响。方法 :选取 6只犬 ,将大蒜素包膜支架和对照支架分别置入左回旋支的远端 (大蒜素支架组 ,n =6)和近端 (对照组 ,n =6) ,于支架置入术后 1个月行冠状动脉造影后处死 ,光镜下观察内膜增生情况。另选取 10只犬 ,分别于大蒜素包膜支架置入后 1h、1d、3d、10d和 2 8d处死 ,用高效液相色谱法测血管局部的大蒜素浓度。结果 :大蒜素包膜支架置入体内 1h、1d、3d、10d、2 8d时的血管壁浓度分别为 80 83、67 5 0、11 79、0 3 3、0 2 6ng/mg组织。术后 1个月 ,大蒜素支架组和对照组血管的损伤程度相同 ,大蒜素支架组的血管内膜增生和再狭窄程度明显低于对照组。结论 :血浆包膜支架可有效携带和释放药物 ,大蒜素包膜支架可抑制术后再狭窄发生。     

涂层支架局部导人c-myc反义寡核苷酸的在体分布研究及对细胞凋亡的影响

目的以国产铂-铱合金支架明胶蛋白涂层为载体,吸附c-myc ASODN,观察c-myc A-SODN局部应用后药物在组织中的分布,探讨c-myc ASODN对细胞增殖和凋亡的影响,寻求防治再狭窄的有效途径.方法将携带羧基荧光素(FAM)标记c-myc ASODN的国产铂铱合金明胶蛋白涂层支架(550μg/支架)置入兔颈动脉(n=6),术后45min、2h、6h分别处死2只动物,取靶布.另取32只家兔,对照组置入明胶蛋白涂层支架,处理组置入明胶蛋白涂层支架携带c-myc ASODN(n约=16).术后7、14、30、90d(n约=4),取置入支架血管,行HE、Weigert弹力纤维及Masson三色胶原纤维染色.c-myc蛋白免疫组化染色及原位杂交,采用透射电镜和未端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,计算机图像分析测量平均新生内膜厚度和新生内膜面积,免疫组化和原位杂交平均阳性光密度和阳性表达面积.结果给药后45min、2h、6h镜下观察药物主要分布于靶点血管的中膜,随后弥散至外膜.对照组和处理组术后7d各有一例不完全性血栓形成,所有支架置入血管段均有不同程度新生内膜增生,偶见炎症细胞浸润,无异物巨细胞聚集.随观察时间延长,两组平均新生内膜厚度与新生内膜面积呈持续增加趋势;新生内膜面积均较对照组小,(P均＜0.001).术后7、14d均未观察到VSMC凋亡,术后30d在新生内膜中观察到明显的细胞凋亡,90d时单位面积内凋亡细胞数显著高于30d.30d时透射电镜观察到典型的凋亡细胞.对照组新生内膜中c-myc蛋白免疫组化及原位杂交均为阳性,处理组术后7、14d为阴性,30、90d为弱阳性.结论在短时间的观察中,发现明胶蛋白涂层支架介导的局部给药简便、可行,且药物主要分布于靶点血管壁中.c-myc A-SODN在体导入后,从c-myc mRNA和蛋白水平,均可显著抑制c-myc原癌基因的表达,抑制VSMC增殖,诱导VSMC凋亡,可用于防治支架内再狭窄.     

雷帕霉素涂层支架对支架内早期再狭窄的预防

目的 :评价乳酸和乙醇酸聚合物携带雷帕霉素并以支架为载体抑制血管新生内膜的作用和预防支架内再狭窄的有效性。方法 :采用随机、双盲试验 ,在 2 0头微型猪的冠状动脉前降支或左旋支分别置入支架 1枚 ,其中金属裸支架 8枚 ;雷帕霉素涂层支架 12枚。涂层材料选用乳酸和乙醇酸聚合物 ,根据两种材料比例将涂层支架分为雷帕霉素缓慢释放涂层支架 (药物剂量 6 5～ 90 μg/支架 ,5枚 )和雷帕霉素快速释放涂层支架 (药物剂量 6 8～ 96 μg/支架 ,7枚 )。2 8d后进行冠状动脉造影 ,术后处死动物 ,取出支架血管 ,进行组织学分析。 结果 :对照组的再狭窄率为 2 5 .0 % (2 /8) ;两组雷帕霉素涂层支架均为 0 %。平均狭窄程度 :对照组为 (31± 2 2 ) % ,雷帕霉素缓慢释放涂层支架组减少了 2 8% (P <0 .0 5 ) ;雷帕霉素快速释放涂层支架组减少了 2 3% (P <0 .0 5 ) ;新生内膜面积 :对照组 (2 .18± 1.0 3)mm2 ;雷帕霉素缓慢释放涂层支架组减少了 1.0 9mm2 (P <0 .0 5 ) ;雷帕霉素快速释放涂层支架组减少了 1.2 4mm2 (P <0 .0 5 )。结论 :乳酸和乙醇酸聚合物携带雷帕霉素涂层支架可以降低支架内的狭窄程度 ,有效地减少血管内新生内膜面积 ,预防支架内的狭窄     

光学相干断层显像评价药物洗脱支架置入后内膜增殖和血栓形成

目的 应用光学干涉断层显像(OCT)技术评价雷帕霉素洗脱支架(SES)置入后3个月和2年后内膜增殖和支架内血栓形成情况.方法 对3个月组进行SES置入后3个月的OCT随访观察,对2年组进行SES置入后2年的随访观察.测量每一个支架支撑杆表面的新生内膜厚度,并评估无内膜覆盖支架支撑杆及支架内血栓形成情况.结果 2年组的内膜厚度显著大于3个月组[(71±93)μm比(29±41)μm,P＜0.01],而2年组中的无内膜覆盖支架支撑杆的比例明显低于3个月组(5%比15%,P＜0.01).2年组与3个月组无内膜覆盖支撑杆患者的比例差异无统计学意义(81%比95%,P＞0.05).两组中均有14%的患者出现无临床症状的支架内血栓形成.结论 SES置入后3个月到2年新生内膜的增生在不断进展,无内膜覆盖支撑杆数明显减少.但是直到支架置入后2年,多数患者体内仍然存在部分无内膜覆盖的支架支撑杆.     

紫杉醇水蛭素复合物微孔载药支架对兔腹主动脉内膜的影响

目的 评价在兔腹主动脉中置入紫杉醇水蛭素复合物微孔载药支架(心衡支架)的可行性、安全性,观察其对血管内膜的影响.方法 选择体重为2～3 kg的新西兰白兔20只,随机分为空白组、金属裸支架组、紫杉醇支架组、心衡支架小剂量组、心衡支架大剂量组共5组(每组4只),术后4周、12周分别进行血管造影并计算支架内晚期丢失.处死动物后剖取覆盖支架的腹主动脉段,光镜下观察血管内皮化状况,进行统计学分析. 结果 所有兔腹主动脉内均成功置入支架,4周时与金属裸支架相比,心衡支架大剂量组的新生内膜厚度显著减少(0.05±0.02比0.13±0.05 mm,P=0.02);12周时与紫杉醇支架相比,心衡支架大剂量组的新生内膜厚度也显著减少(0.07±0.11比0.18±0.21 mm,P=0.17),而心衡支架小剂量组在两个时期内新生内膜厚度均无显著改变(P值分别为0.68、0.92).光镜下可见所有支架表面均有完整的内皮细胞覆盖.结论 大剂量紫杉醇水蛭素复合物支架置入血管后的新生血管内膜较单纯紫杉醇支架更少.