ＴＲＡＩＬ联合蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２诱导肺癌Ａ５４９细胞凋亡的实验研究

目的　观察ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞的体外生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨ＴＲＡＩＬ与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２联合用药诱导细胞凋亡的作用及其机制。方法　采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞增殖的影响;应用流式细胞仪技术检测ＴＲＡＩＬ、蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２及其两药联合干预２４ｈ对肺癌Ａ５４９细胞凋亡率的影响;采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测药物干预前后细胞凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８、Ｃａｓｐａｓｅ-９以及核转录因子ＮＦ-κＢ的表达情况。结果　ＭＴＴ结果显示不同浓度ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞的体外抑制作用与剂量效应正相关,２４ｈＩＣ５０为９６.３２２μｇ／ｍｌ,４８ｈＩＣ５０为４３.５９μｇ／ｍｌ;流式细胞术显示ＴＲＡＩＬ与ＭＧ１３２联合用药后肺癌Ａ５４９细胞凋亡率明显增高（平均６７.６５％）,与ＴＲＡＩＬ（平均２３.５５％）、ＭＧ１３２（平均２５.９１％）单药组比较,有显著性差异（Ｐ＝０.０１６）;Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示,与ＴＲＡＩＬ单药组比较,两药联合后细胞凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８、Ｃａｓｐａｓｅ-９表达明显增强（Ｐ＝０.００６）,抑制细胞凋亡因子ＮＦ-κＢ表达则明显减弱（Ｐ＝０.０４）。结论　ＴＲＡＩＬ可抑制Ａ５４９细胞的增殖,呈浓度依赖关系;ＴＲＡＩＬ与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２联合应用可以明显提高细胞凋亡率,可能与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２降低ＮＦ-κＢ的活性,增强细胞对ＴＲＡＩＬ诱导凋亡的敏感性,促进凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８及Ｃａｓｐａｓｅ-９的表达有关。     

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｃａｓｐａｓｅ-３在脑胶质瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｃａｓｐａｓｅ-３在脑胶质瘤中的表达及其意义。方法：采用免疫组化法、原位杂交法分别检测６８例脑胶质瘤和１０例内减压脑组织中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白及其ｍＲＮＡ的表达情况;原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）法检测胶质瘤细胞凋亡情况。结果：Ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白及其ｍＲＮＡ在脑组织与胶质瘤中的阳性表达率有显著差异,两者在脑胶质瘤Ⅲ、Ⅳ级组织中的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ级;Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白及其ｍＲＮＡ在脑组织与胶质瘤中阳性表达率均无显著差异。脑胶质瘤组织中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｃａｓｐａｓｅ-３的表达呈负相关。脑胶质瘤组织细胞的凋亡指数（ＡＩ）范围是７％ ～２９％,平均（１６５９±６１９）％;Ｓｕｒｖｉｖｉｎ阳性组的ＡＩ值明显小于阴性组（Ｐ＜０.０５）;Ｃａｓｐａｓｅ-３阳性组的ＡＩ值明显大于阴性组（Ｐ＜０.０５）。结论：Ｓｕｒｖｉｖｉｎ与凋亡途径的关键因子Ｃａｓｐａｓｅ-３关系密切,若把Ｓｕｒｖｉｖｉｎ作为靶点来阻断抗凋亡途径,促进肿瘤细胞凋亡,将会是很好的抗肿瘤策略。     

宫颈癌术前介入化疗前后组织中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、Ｃａｓｐａｓｅ-３和Ｃａｓｐａｓｅ-７的表达变化及意义

目的：研究宫颈癌术前行动脉介入化疗前后组织中细胞凋亡相关蛋白Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、Ｃａｓｐａｓｅ-３、Ｃａｓｐａｓｅ-７的表达变化及其临床意义。方法：对５４例宫颈癌患者术前行介入化疗前宫颈活检组织和介入化疗后手术切除的标本,免疫组化检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、Ｃａｓｐａｓｅ-３、Ｃａｓｐａｓｅ-７的表达,同时检测３８例正常宫颈组织以及２８例宫颈上皮内瘤变组织作为对照。结果：Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在介入化疗前宫颈癌组织中呈高表达,介入化疗后Ｓｕｒｖｉｖｉｎ呈现不同程度的下降,而凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-3、Ｃａｓｐａｓｅ-７的表达则呈不同程度的上升。相关性分析表明,介入化疗后Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达变化与Ｃａｓｐａｓｅ-３及Ｃａｓｐａｓｅ-７的表达变化呈负相关,介入前后３种蛋白表达变化越大,临床有效率越高。结论：Ｓｕｒｖｉｖｉｎ高表达及Ｃａｓｐａｓｅ-３、Ｃａｓｐａｓｅ-７低表达在宫颈癌的发生发展中有一定作用,宫颈癌患者术前动脉介入化疗可以通过促进肿瘤细胞的凋亡来达到抑制肿瘤生长、缩小肿瘤体积进而抑制其远处转移。     

胰腺癌中Fas和FasL基因的表达

为探讨Ｆａｓ和ＦａｓＬ在胰腺癌组织发生细胞凋亡过程中的表达情况 ,利用胰腺癌标本和培养人胰腺癌细胞系进行了Ｆａｓ和ＦａｓＬ基因表达特征的研究以及Ｆａｓ ＦａｓＬ系统对诱导细胞凋亡的潜在作用研究。选择 14例正常胰腺标本和 16例胰腺癌标本 ,4种人胰腺癌细胞系选择ＡＳＰＣ 1、ＣＡＰＡＮ 1、ＭＩＡ ＰａＣａ 2和ＣＯＬＯ 357。采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、免疫组化法测定Ｆａｓ、ＦａｓＬ基因及其蛋白产物在标本中的表达。培养细胞和组织切片上单个凋亡细胞的识别采用ＡｐｏｐＴａｇ原位细胞凋亡测定药盒完成。测定培养胰腺癌…     

Ａｄ-ＩＮＧ４抑制裸鼠人肝癌移植瘤生长的体内实验研究

目的　研究携带ＩＮＧ４基因的重组腺病毒（Ａｄ-ＩＮＧ４）对人肝癌细胞株ＳＭＭＣ-７７２１移植瘤生长的抑制作用及其潜在的分子机制。方法　将扩增的Ａｄ-ＩＮＧ４感染ＳＭＭＣ-７７２１细胞,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测Ａｄ-ＩＮＧ４在ＳＭＭＣ-７７２１细胞中的转录。用ＳＭＭＣ-７７２１细胞建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,予Ａｄ-ＩＮＧ４（１×１０^９ｐｆｕ／ｍｌ）５０μｌ对移植瘤瘤体注射治疗,观察肿瘤生长变化;３周后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重;免疫组化法检测ｐ２１、ＣＯＸ-２、Ｆａｓ、Ｂｃｌ-２、Ｂａx、Ｃａｓｐａｓｅ-３、ＶＥＧＦ、ＣＤ３４等因子的表达。结果　Ａｄ-ＩＮＧ４在ＳＭＭＣ-７７２１细胞中成功表达;Ａｄ-ＩＮＧ４对裸鼠人肝癌移植瘤有明显的生长抑制作用,Ａｄ-ＩＮＧ４组瘤体显著减小（Ｐ＜０.０１）,抑瘤率达４１.６４％;免疫组化检测显示,Ａｄ-ＩＮＧ４抑癌的分子机制可能与上调ｐ２１、Ｆａｓ、Ｂａｘ和Ｃａｓｐａｓｅ-３的表达及下调ＣＯＸ-２、Ｂｃｌ-２、ＶＥＧＦ和ＣＤ３４的表达有关。结论　Ａｄ-ＩＮＧ４能有效抑制ＳＭＭＣ-７７２１裸鼠人肝癌移植瘤的生长,其机制可能通过抑制肿瘤细胞生长、血管形成和激活细胞凋亡等多个途径共同发挥抑癌效应。     

Ｃａｓｐａｓｅ ３与β-ｃａｔｅｎｉｎ在分化型甲状腺癌中的表达及意义

目的：研究Ｃａｓｐａｓｅ ３和β ｃａｔｅｎｉｎ蛋白在分化型甲状腺癌（ＤＴＣ）中的蛋白表达情况,探讨它们在ＤＴＣ发生发展中的作用及相互关系。方法：采用免疫组织化学ＳＰ法,对５２例ＤＴＣ组织和１０例正常甲状腺组织中的Ｃａｓｐａｓｅ-３和β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达情况进行检测。结果：ＤＴＣ组织中的Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白表达率为５１.９２％（２７／５２）,明显低于正常甲状腺组织的９０.００％（９／１０）,Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白的表达与ＤＴＣ病理分级有关（Ｐ＜０.０５）,但与临床分期及颈淋巴结转移无关;ＤＴＣ组织中的β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达率为６７３１％（３５／５２）,明显高于正常甲状腺组织的２０００％（２／１０）,β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的表达与ＤＴＣ颈淋巴结转移有关（Ｐ＜００５）,但与临床分期及病理分级无关;在ＤＴＣ组织中Ｃａｓｐａｓｅ ３和β ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的表达呈负相关（ｒｓ＝－０.６５９,Ｐ＜０.０１）。结论：Ｃａｓｐａｓｅ-３和β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的异常表达共同参与了分化型甲状腺癌的发生发展,可能成为判断分化型甲状腺癌恶性程度、转移及预后的指标。     

急性白血病患者血清可溶性Fas受体水平及其意义

Ｆａｓ(Ａｐｏ 1 ＣＤ95 )是细胞表面蛋白 ,它属于肿瘤坏死因子及神经生长因子 (ＴＮＦ ＮＧＦ)受体超级家族 ,参与细胞凋亡的调节。除膜型Ｆａｓ(ｍＦａｓ)受体外 ,还存在可溶性Ｆａｓ(ｓＦａｓ) ,同样发挥着调控细胞凋亡的作用[1 ] 。我们检测了 34例急性白血病 (ＡＬ)患者血清可溶性Ｆａｓ受体水平。材料和方法一　研究对象　 34例ＡＬ患者来自白求恩医科大学第二临床医学院血液科 2 4例 ,长春第一汽车制造厂职工医院血液科 1 0例 ,所有病例均经ＦＡＢ分型确诊。其中急性髓系白血病 (ＡＭＬ) 2 2例 (Ｍ1 2例 ,Ｍ2 4例 ,Ｍ38例 ,Ｍ44例 ,…     

非小细胞肺癌细胞MRP基因表达及意义

研究多药耐药性相关蛋白基因－ＭＲＰ基因（ｍｕｌｔｉ－ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅ ,ＭＲＰ ｇｅｎｅ）对非小细胞肺癌（ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）患者预后的影响。方法应用地高辛标记探针原位发子杂交结合免疫组化技术检测４７例ＮＳＣＬＣ患得根治术后石蜡组织标本中癌细胞ＭＲＰ基因ｍＲＮＡ＃牵? ＤＰ ＣＦ ＫＫＨＮＦ     

干扰素及异体骨髓移植对慢性粒细胞白血病细胞β2整合素及L—选择素表达的

目的 探讨慢性粒细胞白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ,ＣＭＬ）细胞黏附分子Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ（ＣＤ６２Ｌ）、Ｍａｃ－１（ＣＤ１１ｂ）、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ）的表达与ＣＭＬ的发生、疗效的关系。方法 采用三色流式细胞仪检测３４例ＣＭＬ骨髓ＣＤ３４＾＋ＣＤ３８＾－－＋细胞表达ＬＦＡ－１、Ｍａｃ－１、Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达。结果 初治的ＣＭＬ３４＾＋ＣＤ３８＾－－＋细胞黏附分子Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＬＦＡ－１明显低于正常造血细胞的表达。Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达与Ｐｈ’阳性细胞数呈负相关（ｒ＝－０．６８）。８例ＣＭＬ经干扰素治疗后,其Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、Ｍａｃ－１、ＬＦＡ－１的表达均正常。结论 ＣＭＬＣＤ３４阳性细胞黏附分子Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＬＦＡ－１的低表达反映了ＣＭＬ细胞     

肝癌组织中人白细胞共同抗原和凋亡相关基因Fas,bcl—2及bax的表达 …

目的：探讨人白细胞抗的（ＨＬＡ－ＤＲ抗原）和凋亡相关基因Ｆａｓ、ｂｃｌ－２及ｂａｘ在肝癌中表达的意义。方法：应用免疫组化方法研究４０例肝癌组织中ＨＬＡ－ＤＲ、Ｆａｓ、ｂｃｌ－２及ｂａｘ的表达。结果：４０例肝细胞癌中１８例ＨＬＡ－ＤＲ阳性，阳性率４５％，癌旁肝细胞阴性。６例癌细胞Ｆａｓ阳性，阳性率为１５％，癌旁细胞２０例阳性，阳性率５０．０％，癌细胞ｂｃｌ－２阳性６例，阳性率为１５％，８例癌旁细胞阳     

TRAIL与TRAIL受体

ＴＲＡＩＬ／ＴＲＡＩＬ－Ｒ是ＴＮＦ超家族的一个新亚群，ＴＲＡＩＬ可引起肿瘤细胞的凋亡，但不引起正常细胞凋亡。目前ＴＲＡＩＬ已发现五种受体：ＤＲ４、ＤＲ５、ＤｃＲ１、ＤｃＲ２、ＯＰＧ，各具有不同的生物活性。本文就ＴＲＡＩＬ及其受体的结构、功能和其机制作一综述。     

子宫颈鳞状细胞癌组织中细胞凋亡及相关调控基因蛋白的表达

目的：通过对细胞凋亡及部分相关蛋白表达进行检测,探讨子宫颈鳞状细胞癌组织中凋亡细胞的调控机制。方法：应用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和双重免疫荧光染色技术对正常子宫颈及不同分化程度的鳞状细胞癌组织中凋亡细胞和Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２、ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白表达进行检测,利用共聚焦显微镜观察结果。结果：ＴＵＮＥＬ法检测发现,每例标本均有不同程度的细胞凋亡,但数量及分布区域不完全相同,低分化鳞状细胞癌凋亡细     

Fast Neutron radiotherapy for osteosarcoma

ＦＡＳＴＮＥＵＴＲＯＮＲＡＤＩＯＴＨＥＲＡＰＹＦＯＲＯＳＴＥＯＳＡＲＣＯＭＡＭａＺｈｏｎｇｔａｉ;ＬｉＨｕａｉｇｕａｎｇ;ＳｈｅｎＷｅｎｊｉａｎｇ马忠泰,栗怀广,申文江（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ,ＦｉｒｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ,Ｂｅ...     

Fas/FasL与肿瘤局部及全身性免疫抑制

Ｆａｓ（ＣＤ９５）及其配体（ＦａｓＬ）属ＴＮＦ和ＮＧＦ受体家族,Ｆａｓ在多种质细胞表面均有表达。Ｆａｓ与ＦａｓＬ结合可引起多种细胞产生凋亡。近年来研究发现ＦａｓＬ在多种种瘤细胞的表面和细胞质中表达,同时已证实肿瘤周围激活的淋巴细胞表面有Ｆａｓ的表达,而这些淋巴细胞的凋亡异常增加,因此推测表达ＦｓａＬ的肿瘤细胞能诱发淋巴细胞的异常凋亡或抑制其功能,肿瘤细胞表面表达的ＦａｓＬ可能在局部免疫抑制中起着重     

TRAIL联合化疗药物诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

肿瘤坏死因子相关凋亡配体 (ＴＮＦｒｅｌａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ ,ＴＲＡＩＬ)是ＴＮＦ家族的成员之一 ,与ＴＮＦ和ＦＡＳＬ不同的是 ,它仅诱导转化细胞、肿瘤细胞和病毒感染细胞发生凋亡 ,对正常细胞则无明显的杀伤作用[1] 。而最近研究发现 ,人重组ＬＺ ＴＲＡＩＬ在体外能诱导人正常肝细胞凋亡[2 ] ,但其明显的肝脏毒性限制了它的肿瘤治疗作用。我们通过观察人重组ＴＲＡＩＬ蛋白及其联合化疗药物阿霉素、丝裂霉素及 5 氟尿嘧啶对肝癌细胞ＳＭＭＣ772 1、ＢＥＬ74 0 2及人正常肝细胞Ｌ0 2的凋亡诱导作…     

Fas／FasL系统在肿瘤细胞耐药中的作用

目的：探讨凋亡基因Ｆａｓ／ＦａｓＬ对肿瘤细胞耐药性的影响。方法：多发性骨髓瘤敏感株ＲＰＭＩ８２２６和耐药株和ＲＰＭＩ８２２６／Ｄｏｘ４０分别和Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ、ＣＨ－１１作用，在不同时间和浓度下观察二株细胞的Ｆａｓ／ＦａｓＬ的表达和死亡情况。结果：Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ能上调Ｆａｓ／ＦａｓＬ在敏感株肿瘤细胞表面的表达，从而激发ＰＣＤ，而耐药株则无此作用，结论：耐药细胞通过改变其Ｆａｓ／Ｆａｓ     

FasL在激活骨髓细胞的表达研究

目的 探讨ＦａｓＬ在ＡＢＭ杀伤肿瘤细胞效应中的作用。方法 应用抗ＣＤ３单克隆抗体体外激活骨髓细胞,采用免疫荧光标记、流式细胞仪检测、观察了不同条件下ＡＢＭ细胞表达ＦａｓＬ的表达。结论ＡＢＭ 杀伤肿瘤细胞的机制与Ｆａｓ／ＦａｓＬ介导的肿瘤细胞凋亡有关。     

非小细胞肺癌细胞凋亡与凋亡相关基因Fas、bcl-2表达的关系

细胞凋亡是恶性肿瘤普遍的自发现象 ,实验证明凋亡受到许多相关基因严密的正负调控。Ｆａｓ和ｂｃｌ-2是作用相反的凋亡相关基因 ,已有研究表明两者间的动态平衡对细胞凋亡起重要的调节作用[1] 。我们采用免疫组织化学方法和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (ＴＵＮＥＬ)技术测定非小细胞肺癌及其相应的癌旁组织中Ｆａｓ、ｂｃｌ- 2蛋白的表达和原位凋亡细胞的检测 ,以探讨它们在非小细胞肺癌中的作用 ,有助于为临床抗癌治疗提供新思路。1　材料与方法1 1　材料　 4 5例标本均为本院 1996～ 1998年间外科手术切除标本 ,经病理检查…     

CaSpase与细胞凋亡

细胞凋是细胞生长、发育过程中一个重要的生命现象,而目前发展的一组ｃａｓｐａｓｅ的蛋白酶参与了凋亡的各个时期其中,死亡受体的线普体是对外来有害刺激或死亡信号进行加工处理,并决定是否启动凋亡通路的关键部位。本文就死亡受体和线位体在细胞凋亡中的作用及作用机理等方面的新进展作一综述和介绍。     

国际肿瘤会议(2003年3月～6月)

第８届欧洲姑息治疗联合会大会８ｔｈＣｏｎｇｒｅｓｓｏｆｔｈｅＥｕｒｏｐｅａｎＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｆｏｒＰａｌｌｉａｔｉｖｅＣａｒｅ荷兰海牙２００３年４月２日～５日粘蛋白与健康和疾病 :第７届国际癌症专题讨论会ＭｕｃｉｎｓｉｎＨｅａｌｔｈａｎｄＤｉｓｅａｓｅ：７ｔｈＩｎｔｅｒ ｎａｔｉｏｎａｌＷｏｒｋｓｈｏｐｏｎＣａｒｃｉｎｏｍａ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄＭｕｃｉｎｓ希腊克里特岛２００３年４月２日～６日第９４届美洲癌症研究协会年会９４ｔｈＡｍｅｒｉｃａｎＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｆｏｒＣａｎｃｅｒＲｅ ｓｅ…