红霉素对过氧化氢刺激的支气管上皮细胞表达白介素-8与谷胱甘肽的影响

目的探讨红霉素对过氧化氢(H2O2)诱导的支气管上皮细胞(16-HBE)表达炎症介质白介素-8(IL-8)及抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)的影响和可能的作用机制.方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察过氧化氢及红霉素对细胞生长的影响.将传代后的细胞按24、36、48 h 3个时间段分组,每个组再分为对照组、H2O2组、红霉素+H2O2组.通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清中IL-8的浓度;通过凝胶迁移率阻滞实验(EMSA)来检测转录因子核因子-κB (NF-κB)和激活蛋白-1(AP-1)的活性;通过酶联免疫检测仪检测细胞内GSH、谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的含量;应用免疫印迹实验(Western印迹)检测谷氨酰半胱氨酸合成酶重链亚单位(γ-GCS-HS)蛋白表达.结果红霉素(5 μg/ml)预孵育36、48 h后可以抑制H2O2(0.01 mmol/L)诱导的HBE上清中IL-8的含量;红霉素(5 μg/ml)预孵育36、48 h后可以下调H2O2(0.01 mmol/L)诱导的支气管上皮细胞转录因子NF-kB、AP-1的活性;红霉素(5 μg/ml)预孵育48 h抑制H2O2(0.01 mmol/L)诱导的HBE细胞GSH和γ-GCS的含量(3.46±0.41)以及γ-GCS-HS蛋白表达、γ-GCS-HS 启动子区域AP-1转录活性.结论红霉素通过下调NF-κB、AP-1的活性而抑制H2O2诱导的炎症介质IL-8的释放,进而影响GSH及γ-GCS的合成调控.     

氧化应激对膀胱癌中抑癌基因人runt相关转录因子3的影响

目的研究外源性活性氧过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激对膀胱癌中抑癌基因人runt相关转录因子3(RUNX3)表达和启动子区甲基化状态的影响。方法将膀胱癌HT1197细胞株分为H2O2组、H2O2+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组、H2O2+5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-Aza-dC)组和空白对照组。采用Western印迹法检测H2O2作用下NAC、5-Aza-dC对细胞RUNX3蛋白表达的影响,甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测H2O2作用下NAC、5-Aza-dC对细胞RUNX3启动子甲基化状态的影响,Western印迹法检测H2O2处理对DNA甲基转移酶1(DNMT1)和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)蛋白表达的影响,平板克隆形成实验检测H2O2处理对细胞克隆形成能力的影响。结果 H2O2组处理HT1197细胞株48h后的RUNX3蛋白表达水平显著低于空白对照组(P<0.05);而H2O2+NAC组、H2O2+5-Aza-dC组随着H2O2处理时间的增加RUNX3蛋白表达无明显变化,与空白对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。H2O2组细胞RUNX3基因启动子区域发生甲基化,H2O2+NAC组和H2O2+5-Aza-dC组细胞发生部分甲基化,而空白对照组细胞RUNX3基因启动子区域未发生甲基化。使用H2O2处理膀胱癌细胞株48h后,H2O2组HT1197细胞中HDAC1和DNMT1蛋白表达均显著高于空白对照组(P值均<0.05)。H2O2组细胞形成的克隆体积较大、数量较多,其克隆形成率显著高于空白对照组(P<0.05)。结论外源性活性氧H2O2能促进膀胱癌细胞生长并影响RUNX3启动子区甲基化状态和表达,用抗氧化剂NAC或去甲基化制剂5-Aza-dC能逆转RUNX3启动子区甲基化并恢复其表达。提示外源性活性氧H2O2造成的膀胱癌细胞氧化应激很可能是膀胱癌细胞株中抑癌基因RUNX3启动子区异常甲基化、表达下调的主要原因。     

氧化应激介导的DNA损伤在大鼠心肌H9C2细胞缺氧/复氧损伤中的作用

目的 探讨氧化应激介导的DNA损伤在大鼠心肌H 9 C2细胞缺氧/复氧损伤中的作用.方法 采用大鼠心肌H9C2细胞制备缺氧/复氧损伤模型.实验分为对照组(Con组)、缺氧/复氧模型组(H/R组)、抗氧化剂NAC组(NAC组)、抗氧化剂+模型组(NAC+H/R组).Western blot检测细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)表达;细胞免疫荧光法检测活性氧(ROS)水平,DNA损伤相关蛋白(p-γH2ax、8-OHdG)、细胞损伤指标[细胞色素c(Cytochrome c)]表达.结果 与Con组比较,H/R组细胞内ROS水平升高,p-γH2ax、8-OHdG、Cytochrome c、Bax/Bcl-2表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组比较,NAC+H/R组ROS水平降低,p-γH2ax、8-OHdG、Cytochrome c、Bax/Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 抑制心肌细胞氧化应激,可明显改善心肌细胞DNA损伤和凋亡.     

异丙酚对H2O2增强肿瘤坏死因子-α诱导血管内皮细胞凋亡效应的抑制作用

目的:探索H2O2对TNF-α诱导血管内皮细胞凋亡的作用及异丙酚(propofol)对细胞凋亡的保护作用和可能的机制。方法:将体外培养的ECV304细胞分为5组:①对照组(Control);②10μmol/L H2O2组(H);③40 nmol/L TNF-α组(T);④TNF-α+H2O2组(T+H);⑤TNF-α+H2O2+propofol组(T+H+P)。观察:①流式细胞仪检测细胞凋亡率;②丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果:10μmol/L的H2O2仅造成少量细胞凋亡,MDA含量变化不显著(P>0.05);与TNF-α共同作用后细胞凋亡率显著增加,且高于二者分别作用之和,细胞内MDA含量也明显增加,SOD和GSH-Px含量明显减少,与TNF-α组相比差异具有显著性(P<0.05);加入异丙酚预处理可使TNF-α和H2O2组凋亡率明显降低,同时伴随细胞内MDA含量降低,SOD和GSH-Px含量增加。结论:H2O2能显著增强TNF-α诱导细胞凋亡的效应,异丙酚通过降低细胞氧化损伤的机制,有效逆转H2O2增强TNF-α诱导细胞凋亡的效应。     

缺氧缺血性脑损伤新生鼠尿8-异前列腺素F_(2a)变化及N-乙酰半胱氨酸的干预效果

目的:探讨实验性缺氧缺血性脑损伤大鼠尿与脑组织8-iso-PGF2a相关性,尿8-iso-PGF2a能否作为监测早期脂质过氧化作用的生化指标及NAC的治疗效果。方法:7d龄SD新生大鼠60只随机分为对照组,缺氧缺血组和NAC组。NAC组给予NAC 0.1mg.g-1.d-1,于缺氧缺血前3d灌胃,共3d,缺氧缺血组给予等体积生理盐水,对照组不做相应处理。应用ELISA法测定各组大鼠尿与脑组织8-iso-PGF2a含量。结果:缺氧缺血组尿和脑组织含量分别为(101.5±22.8)ng.mmol-1.cr-1和(237.2±11.3)ng/g,明显高于对照组(26.5±11.6)ng.mmol-1.cr-1和(90.8±18.7)ng/g(P<0.01),NAC组(40.1±9.9)ng.mmol-1.cr-1和(110.5±12.4)ng/g,明显低于缺血组(P<0.01),尿与脑组织8-iso-PGF2a水平相关(r=0.823,P<0.01)。结论:急性缺氧缺血性脑损伤时尿8-iso-PGF2a含量增加,NAC能有效降低尿8-iso-PGF2a水平,可用于治疗缺氧缺血性脑损伤。     

N-乙酰半胱氨酸抑制对比剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)是否能抑制对比剂诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡及其相关机制.方法:将传代培养的大鼠肾小管上皮细胞随机分为4组:正常组(N组)、正常组+NAC(N+NAC组)、对比剂组(Ult组)、对比剂+NAC治疗组(Ult+NAC组).用化学比色法测定细胞内丙二醛(MDA)含量和超...     

大黄素通过抑制p38 MAPK活化下调H2O2诱导PC12细胞COX-2表达的实验研究

目的探讨大黄素能否通过抑制p38 MAPK活化下调H2O2诱导的PC12细胞COX-2表达。方法将神经元PC12细胞分为3组:对照组(Control组)、大黄素+H2O2组(Emodin+H2O2组)和H2O2组。在300μM的H2O2干预4小时后使用RT-PCR法和western blot法对各组PC 12细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并使用western blot法对PC12细胞p38MAPK磷酸化水平(Phospho-p38MAPK/total p38MAPK比值)进行测量。结果与对照组相比较,在300μM的H2O2干预4小时后PC12细胞COX-2mRNA和蛋白的表达水平以及p38 MAPK磷酸化水平均明显升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);但H2O2组较Emodin+H2O2组COX-2mRNA和蛋白的表达的升高以及p38 MAPK磷酸化水平的增加更加显著,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论大黄素可以有效抑制H2O2诱导的PC12细胞COX-2表达,并与下调p38 MAPK活化水平密切相关。     

二苯乙烯苷对H2O2诱导损伤血管内皮

目的 研究二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢( H2O2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1( MCP-1)表达的影响. 方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,分为空白对照组、H2O2组(200 μmol/L H2O2)、辛伐他汀组(5 μmol/L辛伐他汀+200 μmol/L H2O2)、TSG组(1μmol/L TSG +200 μmol/L H2O2),按分组处理24h细胞后,运用逆转录聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验分别检测MCP-1 mRNA与其蛋白的表达. 结果 200 μmol/L的H2O2作用内皮细胞24h后,MCP-1的mRNA和蛋白水平均较空白对照组显著升高,P＜0.01.TSG预处理细胞后,MCP-1的mRNA和蛋白水平较H2O2组降低,差异有显著性(P＜0.05). 结论 TSG能抑制H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞MCP-1的表达.     

N-乙酰-L-半胱氨酸对H2O2引起的血管内皮细胞损伤的拮抗效应

目的 观察N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC，痰易净)对H2O2引起的血管内皮细胞损伤的影响。方法 通过测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率和脂质过氧化物(LPO)值，MTT法测定细胞增殖活性，流式细胞术测细胞凋亡率，研究体外培养的人脐静脉内皮细胞在不同浓度H2O2作用下的细胞损伤及凋亡，以及NAC对抗细胞损伤及凋亡的效应。结果 随着H2O2浓度增加，细胞凋亡率明显增高，细胞增殖活力降低，细胞脂质过氧化物生成增加，LDH释放率增加，并在一定范围内呈剂量-效应关系。在H2O2中同时加入0．5mmol／L NAC，可使细胞活力增强，凋亡率降低，细胞脂质过氧化物生成显减少，LDH释放率降低。结论 NAC可以对抗H2O2引起的血管内皮细胞损伤。     

与缝隙连接43蛋白相关的星形胶质细胞通过外泌体对神经元保护作用的机制研究

目的:观察缝隙连接43(Cx43)蛋白参与星形胶质细胞来源的外泌体对神经元保护作用的机制.方法:采用C57BL/6胎鼠以原代培养法获取星形胶质细胞及神经元,建立共培养(Co-Culture)模型,给予神经元过氧化氢(H2O2)损伤,星形胶质细胞给予Cx43特异性阻断剂Gap26,分别建立(Co-Culture+H2O2)组及(Co-Culture+H2O2+Gap26)组,同时设单纯神经元损伤(Neuron+H2O2)组,通过蛋白免疫印记(WB)法,测定神经元骨架相关的紧密连接蛋白(ZO-1)、α-肌动蛋白(α-actin)、谷氨酸转运蛋白-1(GLT-1)、外泌体标记蛋白CD63和凋亡相关的Bax/Bcl-2比例的变化,采用高效液相色谱仪(HPLC)观察神经元谷氨酸(Glu),采用ELFA法检测氧化应激因子腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAPDH)氧化酶活性.结果:与(Neuron+H2O2)组相比,(Co-Culture+H2O2)组的神经元ZO-1、α-actin、GLT-1和CD63的表达明显上调,而Bax/Bcl-2比例、NAPDH氧化酶活性则明显降低(P<0.05).在给予Gap26后,可明显抑制以上星形胶质细胞对神经元的此种作用(P<0.05).结论:Cx43蛋白可促进星形胶质细胞的外泌体被神经元吸收,可产生稳定细胞形态结构、加强兴奋性氨基酸转运及降低神经元凋亡和氧化应激损伤等神经保护功能.     

浒苔多糖对非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢及多器官H2S生成的影响

目的 探讨浒苔多糖(EP)对高脂饲料诱导非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠脂质代谢及多器官内源性硫化氢(H2S)生成的影响.方法 50只成年雌性SD大鼠随机分为5组,每组10只.空白对照组(Normal diet+H2O)、EP对照组[Normal diet+200 mg/(kg·bw·d)EP]、模型组(High-fat diet+ H2O)、EP干预组[High-fat diet+200 mg/(kg·bw·d)EP]、硫氢化钠组[High fat diet+56 μmol/(kg·bw·d)NaHS],持续干预35 d.比较各组大鼠体重、肝脏以及血脂、H2S、CSE、CBS的差异.结果 与模型组比较,EP可显著改善NAFLD大鼠肝细胞脂肪变,降低高脂饲料喂养大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平(P＜0.05),升高血清H2S水平(P＜0.05),增加多个脏器中胱硫醚-β-合成酶(CBS)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性(P＜0.05).Western blot分析显示,与模型组比较,EP干预后,NAFLD大鼠大脑中CBS和CSE蛋白表达水平、脾脏和肝脏中CBS蛋白表达水平、心脏和肾脏中CSE蛋白表达水平增高(P＜0.05).结论 EP可能通过促进大鼠多器官生成内源性H2S,改善脂质代谢.     

Neuregulin-1对过氧化氢诱导的小鼠骨髓间充质干细胞衰老的影响

目的:探讨Neuregulin-1(NRG-1)对过氧化氢(H2O2)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)衰老的影响.方法:用H2O2诱导小鼠BMSCs衰老模型,将BMSCs分为对照组、H2O2组、H2O2+NRG-1组.采用CCK8检测细胞存活率,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光...     

miR-218-5p通过靶向LIN28B调控COPD时气道上皮细胞凋亡和炎症反应

目的 探讨miR-218-5p通过靶向LIN28B调控慢性阻塞性肺疾病(COPD)时气道上皮细胞凋亡和炎症反应的作用及其机制.方法 将人肺支气管上皮细胞BEAS-2B分为正常对照(NC)组、香烟烟雾提取物(CSE)组、miR-NC+CSE组、miR-218-5p+CSE组、si-NC+CSE组、si-LIN28B+CS...     

白藜芦醇对H2O2所致乳鼠心肌细胞损伤的保护机制研究

目的 研究白藜芦醇(Res)在H2O2所致乳鼠心肌细胞损伤中的保护机制.方法 将原代培养的乳鼠心肌细胞分成3组:对照组,H2O2处理组和Res+ H2O2处理组,采用MTF比色法检测细胞活性,应用Real Time-PCR技术检测miR-34a的表达水平.结果 H2O2对乳鼠心肌细胞具有损伤作用,Res可明显缓解H2O2对乳鼠心肌细胞的损伤作用,经过H2O2处理后乳鼠心肌细胞内miR-34a的表达水平显著升高,Res可明显降低乳鼠心肌细胞内miR-34a的表达水平.结论 Res通过下调miR-34a的表达水平来发挥对H2O2所致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用.     

消退素D1通过抑制p38 MAPK活化上调H2O2诱导心肌细胞HO-1表达的实验研究

目的探讨消退素D1(RvD1)对H2O2诱导状态下H9C2心肌细胞血红素氧合酶-1(HO-1)的调节作用及相关的分子机制。方法将大鼠心肌H9C2细胞分为对照组、消退素D1+H2O2组(Resolvin D1+H2O2组)和H2O2组3组,在200μM的H2O2干预6小时后使用RT-PCR法和western blot法对各组H9C2心肌细胞HO-1mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并使用western blot法对H9C2心肌细胞p38 MAPK磷酸化水平(Phospho-p38 MAPK/total p38MAPK比值)进行测量。结果与对照组比较,在H2O2干预6小时后H9C2心肌细胞HO-1mRNA和蛋白的表达水平明显降低,而p38 MAPK磷酸化水平均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);但H2O2组较Resolvin D1+H2O2组HO-1mRNA和蛋白表达的降低以及p38 MAPK磷酸化水平的增加更加显著,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论本研究结果表明,在过氧化氢诱导的H9C2心肌细胞氧化应激和损伤过程中消退素D1可能是通过抑制P38 MAPK的活化上调了HO-1的表达,对心肌细胞有保护作用。     

榭皮素对皮层神经元细胞氧化应激的保护作用

目的 探讨榭皮素对皮层神经元细胞氧化应激的保护作用.方法 原代培养皮层神经元细胞,随机分成对照组、H2O2(100 μmol/L)组、榭皮素组(Qu组)、AMPK抑制剂Compound C组(CC组)、H2O2+Qu组、H2O2+Qu+CC组,采用CCK8法检测细胞存活率,活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧,ELISA试剂盒检测βA表达水平,Western blot检测AMPK、p-AMPK及BACE1蛋白表达水平.结果 CCK8结果显示,榭皮素可明显降低H2O2对皮层神经元细胞存活率的抑制作用,并可显著降低H2O2诱导细胞内ROS及βA的表达;进一步研究发现,榭皮素可通过激活AMPK,上调p-AMPK的表达水平来达到抑制BACE1酶的表达.结论 H2O2刺激神经元细胞可上调氧化应激水平,榭皮素可通过促进AMPK的磷酸化,降低βA在细胞中的沉积,进一步下调ROS在细胞中的表达,从而减缓了H2O2对神经元细胞造成的损伤.     

尿酸在氧化应激状态下对人脐静脉内皮细胞的影响

目的 探讨不同浓度尿酸(UA)、作用不同时间及其在氧化应激状态下对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响.方法 体外细胞培养,用不同浓度UA(0 mg/d L、4 mg/d L、8 mg/d L、12 mg/d L)、过氧化氢(H2O2)(0.5 mmol/L)及不同浓度UA+H2O2刺激HUVEC.分别于24 h、48 h后观察HUVEC的细胞形态,采用MTT法检测HUVEC的增殖情况,用ELISA方法检测培养液中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的浓度.结果实验发现4 mg/d L UA组HUVEC 24 h、48 h后活力较对照组差异无统计学意义(P>0.05);8 mg/d L、16mg/d L组24 h后HUVEC活力较对照组差异无统计学意义(P>0.05),48 h后8 mg/d L、16 mg/d L组HUVEC活力较对照组显著降低(P<0.05).H2O2组HUVEC活力较对照组有显著降低(P<0.05);各种浓度UA加H2O2组HUVEC 24 h后较单纯H2O2组活力强,而48 h后8 mg/d L加H2O2、16 mg/d L加H2O2组较单纯H2O2组活力差异无统计学意义(P>0.05).ELISA法检测发现48 h后16 mg/d L UA组较对照组细胞合成NO减少,分泌ET-1增多(P<0.05).8 mg/d L加H2O2、16 mg/d L加H2O2组与单纯H2O2组相比,24 h后细胞合成NO增多,分泌ET-1减少(P<0.05);而48 h后16 mg/d L加H2O2组与单纯H2O2组相比,细胞合成NO减少,分泌ET-1增多(P<0.05).结论 尿酸对HUVEC的作用不仅与浓度有关,与作用时间也有关系.急性升高的尿酸对HUVEC还有保护作用,而高浓度的尿酸长时间对HUVEC有损伤作用,而氧化应激可能加重尿酸对HUVEC的损伤作用.     

N-乙酰半胱氨酸对博莱霉素致小鼠肺间质纤维化形成及NF-κB、IL-4表达的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对博莱霉素(BLM)致小鼠肺间质纤维化形成及核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-4(IL-4)表达的影响。方法:75只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组:BLM组25只,气管注射BLM5mg/kg制作肺间质纤维化模型;NAC组25只,于注射BLM前5天开始,每天给予NAC250mg/kg直至取材;对照组25只,气管注射生理盐水。第1、3、7、14、28天处死小鼠,取右肺组织行HE染色和Masson染色,左肺组织测羟脯氨酸(HYP)含量;分别采用ELISA法和SP免疫组化染色检测支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量和灌洗细胞中NF-κBp65的表达。结果:第7、14、28天,BLM组肺组织病理可见实变及胶原沉积,而NAC组明显减轻;3组小鼠肺组织HYP含量差异有统计学意义,NAC组HYP含量低于BLM组(P<0.05);第1、3、7天,3组小鼠支气管肺泡灌洗细胞NF-κBp65的表达水平及支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量差异有统计学意义,且NAC组2指标均低于BLM组(P均<0.05)。结论:NAC可能通过抑制NF-κB的活化,减少致纤维化相关细胞因子IL-4的产生,进而减轻BLM所致小鼠肺间质纤维化。     

miR-219a-5p通过下调 KLF4减轻 H2O2 诱导的人心肌细胞氧化损伤

摘要:目的 探究 miR-219a-5p对人心肌细胞(HCM)氧化应激损伤的作用和机制。方法 利用 H2O2建立 HCM 氧 化应激模型,将 HCM 细胞随机分成4组:对照组、H2O2组(200μmol/L H2O2处理6h),H2O2+NCmimic组(H2O2处理 前转染对照 mimic)和 H2O2+miR-219a-5p组(H2O2处理前转染 miR-219a-5pmimic)。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力, 流式细胞术 检 测 细 胞 凋 亡,Real-timePCR 检 测 miR-219a-5p 和 KLF4 mRNA 表 达,Westernblot检 测 Bax、Bcl-2 和 Krüppel样因子4(KLF4)蛋白表达,试剂盒检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。另外,利 用荧光素酶报告基因实验确证 miR-219a-5p与 KLF4的相互作用关系。结果 与对照组相比,H2O2 组中 miR-219a-5p 表达、细胞活力和SOD水平降低,细胞凋亡、Bax/Bcl-2、ROS和 MDA 水平以及 KLF4表达升高(均P<0.05)。与 H2O2 组相比,H2O2+miR-219a-5p组中 miR-219a-5p表达、细胞活力和 SOD 水平升高,细胞凋亡、Bax/Bcl-2、ROS和 MDA 水 平以及 KLF4表达降低(均P<0.05)。H2O2+ NCmimic组与 H2O2组相比上述指标变化均不大,差异均无统计学意义 (均P>0.05)。荧光素酶实验结果显示,miR-219a-5p能够降低 KLF4-野生型质粒的荧光素酶活性(P<0.05)。结论 miR-219a-5p对 H2O2诱导的 HCM 细胞氧化应激损伤具有缓解作用,这种作用可能是通过下调 KLF4的表达发挥的。     

过氧化氢PI3K依赖性促进人支气管上皮细胞血管内皮生长因子表达

目的探讨过氧化氢(H2O2)对人支气管上皮细胞(HBE)VEGF表达的影响及可能的分子调控机制。方法四唑盐(MTT)比色法检测不同H2O2浓度对正常人支气管上皮细胞株HBE135-E6E7活力的影响;实验分4组:正常组,50μmol/L、200μmol/L和600μmol/L,分别处理HBE24h,RT-PCR检测VEGF及β-actin基因表达水平;选择基因表达水平影响较大的50μmol/LH2O2处理细胞24h,双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)选择性抑制剂Ly294002对H2O2诱导VEGF表达的影响。结果在200μmol/L以下H2O2对细胞活力无显著影响。HBE135-E6E7组成性表达VEGF189和VEGF165。VEGF165 mRNA表达在正常组,50、200和600μmol/L分别为0.379±0.044,0.791±0.042,0.585±0.133,0.720±0.0213VEGF189 mRNA表达在4组中分别为:0.193±0.018,0.270±0.012,0.205±0.074,0.302±0.035。相对于对照组,VEGF165、VEG...