改良大鼠左心室插管术及心衰大鼠左心功能指标的测定

目的 完善大鼠左心室插管技术并确定充血性心力衰竭(CHF)大鼠心功能指标参数.方法 将80只成年雄性SD大鼠随机分为2组:假手术组(SH),腹主动脉缩窄模型组(CAA).采用腹主动脉部分缩窄法制作CHF大鼠模型,BL-420E+生物信号采集系统测定心功能参数.观察比较2组大鼠第6周后测定的心功能的各项指标.结果 (1)经进一步完善大鼠左心室插管技术,成功率明显提高.(2)CAA组大鼠心功能明显减低,左室重量指数(LVMI)、左室舒张末压(LVEDP)升高,左心室内压上升、下降的最大变化速率(±dp/dtmax)下降(P＜0.01).结论 改良大鼠左心室插管术提高成功率,心衰大鼠的心功能指标明显改变.     

纤维蛋白原在大鼠肾脏缺血／再灌注损伤中的变化

目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术探讨大鼠肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤后血清中纤维蛋白原的变化.方法 制备大鼠肾脏I/R模型,分为再灌注6,12,24 h组.选取各组血清样本,经SELDI-TOF MS分析检测,并对各组具有差异的多肽指纹图谱鉴定分析并用Proteinchip Software3.1进行校正.使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)进行蛋白质数据库检索以确定其性质,并使用ELISA的方法检测其在各组中的含量.结果 ①血清经SELDI-TOF MS分析后,在m/z为2 081D处,检测得到具有统计学意义的蛋白差异峰;②采用蛋白质数据库检索,鉴定为大鼠纤维蛋白原片段;③ELISA测得纤维蛋白原在各组大鼠血浆中含量的变化与SELDI-TOF MS检测结果基本一致.结论 纤维蛋白原在肾脏缺血/再灌注损伤中可能起重要作用.     

心肌细胞凋亡对老年大鼠心脏功能的影响

目的 观察心肌细胞凋亡在老年大鼠心功能降低中的作用. 方法 将大鼠分为成年组（n=10）、老年组（n=10）以及广谱的caspase抑制剂Z-VAD-FMK组（n=10）.MS2000生物信号记录分析系统记录各组大鼠的心脏功能,用TUNEL和caspase-3活性检测各组大鼠的凋亡情况;并分析老年大鼠凋亡与心功能的关系. 结果 与成年大鼠相比,老年大鼠的心重/体重比显著下降,心肌收缩及舒张功能均明显降低,老年大鼠心肌细胞的凋亡明显增加.并且,caspase-3的水平与心肌收缩指数呈负相关（r=-0.772,P＜0.01）,与左室舒张压呈正相关（r=0.718,P＜0.01）.阻断老年大鼠心肌的凋亡后,心肌的收缩和舒张功能明显改善. 结论 心肌细胞凋亡在老年大鼠心功能下降中发挥着重要作用,提示临床可以通过抗凋亡措施来减少心肌细胞丢失进而延缓心功能的下降.     

运动病时外周血液中Ach及CA递质的变化

本实验采用绕垂直轴交替加速减速旋转刺激诱发大鼠运动病(MS)的模型。通过高效液相色谱——电化学检测技术及分光光度法,测定了大鼠接受旋转刺激前后及旋转刺激后停留半h和lh,其血液中乙酰胆碱(Ach)和儿茶酚胺(CA)递质的含量变化。实验结果表明,大鼠接受lh旋转刺激后,血液中的Ach及CA的含量均明显升高,大鼠脱离旋转刺激后停留半h和lh.以上指标均有恢复趋势。     

失血性休克鼠动物模型复制及心肌力学的测定

本文报道应用大鼠复制失血性休克模型。利用大鼠则来源广泛,价格低廉,并且大鼠对心肌缺氧耐受力强,利于制做和观察心功能指标及心功能损害模型。本实验在闭胸保持心包完整的状态下,测定大鼠失血后心肌力学的变化,结果表明本模型方法可靠。     

超声心动图评价心力衰竭大鼠模型心功能改变

目的：用超声心动图检测大鼠心力衰竭模型心功能改变,并探索模型大鼠心功能与血清B型钠尿肽（B-type natriuretic peptide,BNP）的关系。方法：选用体质量200~220 g的2月龄雄性SD大鼠120只,随机分为3组。手术组（80只）：麻醉后行开胸术,打开心包,结扎左冠状动脉前降支。假手术组（20只）：同样开胸,打开心包,但不结扎。正常组（20只）：不予任何处理。术后每日观察大鼠的精神状态、术前1天及术后第6周末测定大鼠的体质量等一般情况的变化。术前及术后第6周末均行超声心动图检查,以评价实验大鼠的心功能改变,并取术后大鼠血清行BNP水平检测。结果：术后存活的手术组大鼠于术后第10天左右出现明显心力衰竭体征。手术组与正常组及假手术组比较：左室内径指数（LV指数）增大,左室后壁指数（LVPW指数）及室间隔厚度指数（IVS指数）减小,左室内径缩短率（FS）及射血分数（EF）均下降,其差异具有统计学意义（P＜0.05）。左房内径指数（LA指数）变化无明显差异（P＞0.05）;BNP水平明显升高,其升高程度与EF,FS呈负相关（分别r=-0.927,r=-0.894,P＜0.05）;与LV指数呈正相关（r=0.409,P＜0.05）。结论：结扎大鼠的左冠状动脉前降支能成功制备大鼠心力衰竭模型。超声心动图能很好地评价心衰大鼠的心功能改变。     

过表达ILK的骨髓间充质干细胞条件培养基移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究

目的:本研究通过探索过表达整合素链接激酶(ILK)的骨髓间充质干细胞(MSCs)的条件培养基(ILK-MSC-CM)移植治疗大鼠急性心肌梗死,旨在探讨其是否能够减缓心肌梗死后心室重构并改善心功能.方法:原代培养大鼠MSCs,利用ILK重组腺病毒转染MSCs.构建大鼠急性心肌梗死模型,分为MSCs条件培养基组(MSC-CM)组、ILK-MSC-CM组、标准培养基及对照组.使用超声心动图观察各组心功能变化.结果:大鼠心肌梗死后3天及4周,ILK-MSC-CM组EF%,%FS和IVSd较MSC-CM组明显增加,而LVEDD和LVESD明显减小,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:ILK-MSC-CM移植治疗大鼠急性心肌梗死,可以改善心功能,抑制心室重构.     

脓毒症大鼠心功能变化特征及血必净注射液对其影响

目的:通过超声心动图观察脓毒症大鼠心功能变化特征及血必净注射液对其影响.方法:将78只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=6)、假手术组(n=24)、盲肠结扎穿孔术(CLP)组(n=24)、血必净治疗(XBJ)组(n=24).假手术组开腹翻动盲肠后关腹,CLP组及XBJ组采用CLP建立脓毒症大鼠模型.假手术组及CLP组于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射生理盐水4 mL/kg,XBJ组于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射血必净注射液4mL/kg.各组于术后6、24、48、72h通过超声心动图观察实验大鼠心功能的变化.结果:与正常对照组及假手术组比较,CLP组左室舒张末内径(LVEDD)增大、心率(HR)明显升高(P＜0.05),室间隔运动幅度及左室后壁运动幅度有降低趋势,左室射血分数(LVEF)、二尖瓣环舒张期早期峰值速度(Ea)与舒张晚期峰值速度(Aa)比值(Ea/Aa)明显降低(P＜0.05).与CLP组比较,应用血必净注射液后,LVEDD及HR无显著变化,LVEF及Ea/Aa显著升高(P＜0.05).结论:脓毒症大鼠存在心功能障碍,血必净注射液对脓毒症大鼠心功能有改善作用.     

腹主动脉狭窄致心功能不全大鼠主动脉Na~ /Ca~(2 )交换功能变化

探讨压力负荷增高致心功能不全大鼠主动脉Na /Ca2 交换功能变化。心功能不全大鼠模型制备采用腹主动脉狭窄术 ,以Langendorff离体心脏灌流装置对大鼠离体心功能进行监测 ,分别用无钠台氏液以及 30、6 0、90、12 0mmol/LNa 浓度的台氏液对大鼠离体主动脉环灌流 ,并进行张力测定。实验结果表明 ,腹主动脉狭窄大鼠各项心功能指标与伪手术组动物相比均降低 (P <0 0 5 ) ;在用不同钠浓度的台氏液灌流离体血管环实验中 ,手术组大鼠血管张力增加均高于伪手术组 (P <0 0 5 )。说明压力负荷增高致大鼠心功能不全的同时 ,主动脉平滑肌Na /Ca2 交换功能增强 ,可能为血管对压力负荷增高作出的一种适应性反应。     

飞行时间质谱技术在肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤研究中的应用

目的 应用MALDI-TOF MS技术检测和探讨肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠血清中蛋白质组学的变化.方法 制备大鼠肾脏I/R模型后,分别于再灌注后6、12、24h选取各组血清样本,经MALDI-TOF MS分析检测,并对各组具有差异的多肽指纹图谱鉴定分析.用SPSS13.0软件对数据进行处理.同时采用 Mascot Search进行蛋白质数据库检索以确定其性质.结果 ①本研究中血清经IMAC-Cu bead 处理后,在m/z为2081Da处,检测得到具有统计学意义的多肽指纹图谱;②采用 Mascot Search,进行了蛋白质数据库检索, 均鉴定为大鼠纤维蛋白原片段.结论 纤维蛋白原在肾脏缺血/再灌注损伤中可能起重要作用.     

高脂饲养小鼠糖耐量异常的机理研究

目的：研究高脂饲养对小鼠骨骼肌胰岛素信号通路的影响,并对其葡萄糖耐受机制进行初步探讨。方法：C57/B6 J雄性小鼠随机分为正常对照组、高脂饲养组2组,分别进食正常饲料和高脂饲料,6周后检测小鼠空腹血糖、血脂并进行糖耐量试验。应用Western blotting 检测骨骼肌中Akt及其底物TBC1D1信号分子的表达变化。结果：高脂饲养组小鼠血脂升高（P＜0.05）,空腹血糖及腹腔注射葡萄糖后在0.5、1、2 h 3个时间点的血糖也显著上升（P＜0.05）,骨骼肌中Akt 和TBC1D1磷酸化的表达水平均显著下降（P＜0.01）。结论：高脂饲养小鼠存在糖耐量异常,骨骼肌中Akt和TBC1 D1的磷酸化表达下降可能是高脂诱导小鼠糖耐量异常的机制之一。     

高脂饮食对糖尿病大鼠心肌损伤的研究

目的 观察高脂饮食对糖尿病大鼠心肌炎症反应及纤维化的影响.方法 SD大鼠分为对照组（N组）、糖尿病组（D组）和高脂饮食组（H组）,每组20只,后两组用小剂量链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型.H组以高脂饲料喂养,其余两组以普通饲料喂养.12周后测血糖、血脂水平及左室质量指数（LVMI）,光镜下观察心肌结构,免疫组化法检测NF-κB、TNF-α表达,Western blot检测心肌组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）表达情况.结果 光镜下可见N组大鼠心肌细胞排列整齐、致密,结构清晰.D组及H组大鼠心肌细胞排列紊乱、扭曲,间质有炎症细胞聚集.D组大鼠心肌NF-κB、TNF-α表达较对照组明显升高,H组心肌NF-κB、TNF-α表达明显较N组及D组升高,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）.D组及H组心肌MMP-2表达减低,MMP-9、TIMP-I表达均增加,但MMP-9/TIMP-1的比值下降,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 糖尿病大鼠心肌损伤表现为心肌炎症反应和间质纤维化,高脂饮食通过上调NF-κB、TNF-α表达及影响MMP-2、MMP-9及TIMP-1的调节失衡对心肌造成损伤.     

高脂饮食对大鼠肝脏PGC-1α、TRB3、Akt的影响

目的观察高脂饮食对大鼠肝脏PGC-1α、TRB3、Akt蛋白水平及血浆脂联素的影响,探讨其引起胰岛素抵抗的机制。方法将24只雄性Wistar大鼠按照体重随机分为两组,分别给予普通饮食和高脂饮食,22周后处死大鼠,测量体重、体脂重量,取血检测血脂、血糖、胰岛素和脂联素;取肝脏检测PGC-1α、TRB3、Akt蛋白水平。结果与对照组相比,高脂饮食组大鼠空腹血糖、胰岛素和胰岛素抵抗指数分别增加27．1％（P〉0．05）、27.3％（P〈0．05）和68．8％（P〈0．01）,血浆中脂联素含量降低,空腹血清TC、HDL—C、LDL—C及TG水平和正常对照组大鼠无显著性差异;高脂饮食组大鼠肝脏PGC-1α蛋白水平上升（P〈0．05）,TRB3蛋白水平上升（P〈0．05）,Akt蛋白水平下降（P〈0．05）。结论高脂饮食可诱导大鼠产生肥胖和胰岛素抵抗,可能和PGC-1α／TRB3／Akt信号通路有关。     

游泳训练对胰岛素抵抗大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响

目的观察游泳训练对胰岛素抵抗大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响,初步探讨游泳训练改善胰岛素抵抗的作用机制。方法 30只8周龄正常雄性大鼠随机分为正常饮食对照组（n=9）和高脂高糖喂养造模组（n=21）。喂养6周后,将造模成功的18只胰岛素抵抗大鼠再随机分为模型组（n=9）：继续予高脂高糖饮食;运动组（n=9）：高脂高糖喂养加游泳训练。造模6周和干预6周后采血清全自动生化分析仪测空腹血糖（FPG）,放射免疫法测各组小鼠空腹胰岛素（FIN）,计算胰岛素敏感指数（ISI）。干预6周后留取肝脏组织RT-PCR法检测抵抗素mRNA表达水平。结果高脂高糖饲养6周后,造模组的FPG（6.65±0.98）、FIN（31.04±6.57）均高于对照组,其ISI低于对照组（P〈0.01）。6周干预后,与模型组比较,运动组肝脏组织抵抗素mRNA表达均降低（P〈0.05）,ISI升高（P〈0.05）。结论游泳训练改善胰岛素抵抗可能与下调抵抗素的表达有关。     

白藜芦醇对胰岛素抵抗大鼠肝脏的影响

目的：研究白藜芦醇对胰岛素抵抗大鼠肝脏的影响。方法：将30只SD雄性大鼠随机分为标准饮食组（NC组）、高脂饮食组（HF组）和白藜芦醇治疗组（HR组）,每组各10只。对照组采用标准饲料饮食,另两组予高脂饮食,白藜芦醇组从第8周开始给予白藜芦醇灌胃。16周后行高胰岛素-正常葡萄糖钳夹试验,结束后将大鼠处死,观察大鼠胰岛素抵抗情况以及白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-a（TNF—α）的表达情况。结果：NC组和HF组大鼠饲养16周后,HF组大鼠的血糖和胰岛素水平较Nc组大鼠明显升高,而葡萄糖输注率（GIR）明显降低（P〈0．05）;3组大鼠血糖、胰岛素含量以及IL-6和TNF—α的免疫组化结果具有明显差异（P〈0．05）,且水平表现出HF组〉HR组〉NC组的特点。结论：白藜芦醇可有效降低胰岛素抵抗大鼠的血糖和胰岛素水平,其机制可能是通过调节其IL-6和TNF—α水平所致。     

ZDF（fa/fa）大鼠的糖脂代谢特点与胰岛素抵抗特性

目的 观察ZDF（fa/fa）大鼠高脂饲喂后的糖脂代谢特点和胰岛素抵抗特性.方法 取ZDF（fa/fa）大鼠6只（ZDF模型组）,每日饲喂高脂饲料,另取ZDF（fa/＋）大鼠6只（ZDF对照组）,饲喂普通饲料,连续饲喂6周;每周称重,隔周检测GLU、TG、CHOL、TC、HDL-C、LDL-C,计算TC/HDL-C和AI,于第6周检测空腹胰岛素,并进行糖耐量与胰岛素耐量试验,计算HOMA-IR和HOMA-β.结果 ZDF（fa/fa）大鼠高脂饲喂后空腹血糖、血脂水平迅速升高（p＜0.01）,TC/HDL-C和AI显著升高（P＜0.01）,饲喂第4周后趋于稳定;第6周的空腹胰岛素和HOMA-IR显著升高（P＜0.01）,而HOMA-β则显著降低（P＜0.01）.结论 ZDF（fa/fa）大鼠饲喂高脂饲料后出现高血糖伴高脂血症、糖耐量异常和高胰岛素血症,同时出现胰岛素耐量增加和胰岛素敏感性降低,较适合于胰岛素抵抗引起的2型糖尿病和代谢综合症的研究.     

吡格列酮对非酒精性脂肪肝病大鼠Kupffer细胞的影响

目的探讨吡格列酮对sD大鼠非酒精性脂肪肝病形成的预防作用及其机制。方法36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、高脂饮食组及吡格列酮干预组,饲养8周;正常对照组喂饲普通饲料,剩余两组喂饲高脂饲料;吡格列酮干预组于实验第4—8周予吡格列酮灌胃,其余两组同期予蒸馏水灌胃;测定空腹血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）水平;计算空腹胰岛素抵抗指数（FIRI）;HE染色分析肝组织切片病理学改变;观察Kupffer细胞形态变化及分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、一氧化氮（NO）的水平。结果高脂饮食组大鼠空腹FIRI、TG、TC均高于正常对照组,差异均有统计学意义（P＜0．05）,肝组织呈以大泡性脂肪变性为主的混合性脂肪变性并出现炎症细胞浸润,肝脏Kupffer细胞发生形态改变,其产生的TNF-α、NO水平与肝组织病理学改变呈正相关（P＜0．05）;吡格列酮干预组大鼠空腹FIRI、TG、TC均低于高脂饮食组,差异均有统计学意义（P＜0．05）,肝组织结构基本正常,肝脏Kupffer细胞形态及功能基本正常。结论吡格列酮可预防高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病发生;其机制可能与改善胰岛素抵抗、降低血脂和调节Kupffer细胞功能有关。     

高脂喂养大鼠常用胰岛素敏感性测定方法的评估

目的探讨高脂喂养大鼠常用胰岛素敏感性测定方法与正糖高胰岛素钳夹技术的相关性。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组（NC,n=15）和高脂喂养组（HF,n=15）,分别给予基础饲料和高脂饲料喂养,喂养10周后进行正糖高胰岛素钳夹试验、胰岛素耐量试验和葡萄糖耐量试验,进行大鼠胰岛素敏感性相关指标测定及指标间相关性分析。结果HF组大鼠葡萄糖输注率[GIR（0．90±0．15VS4．97±0．68）mg·kg^-1·min^-1,P〈0．01]和胰岛素耐量试验血糖自然对数的下降斜率KITT（24．41±6．77v548．61±4．71,P〈0．01）均显著低于Nc组,且KITT与GIR呈显著相关（r=-0．911,P〈0．01）。结论胰岛素耐量试验与正糖高胰岛素钳夹试验相关性显著。     

黄连温胆汤加减对膳食诱导代谢综合征大鼠内脏脂肪素mRNA表达的影响

目的通过实验研究观察黄连温胆汤加减对代谢综合征（Ms）大鼠内脏脂肪组织中内脏脂肪素（visfatin）mRNA表达及血清visfatin水平;探讨黄连温胆汤加减治疗MS的作用机制。方法采用60只SD大鼠随机分为空白组（n=10）和实验组（n=50）。实验组采用高盐高脂高糖饲料喂养,诱导实验性M8大鼠模型。实验组50只SD大鼠造模成功40只,随机分为模型组（n=10）、黄连温胆汤加减高剂量组（n=10）、黄连温胆汤加减低剂量组加减（n=10）和西药（盐酸二甲双胍）对照组（n=10）,空白组、模型组给予同体积生理盐水,分别灌胃给药四周后,RT-PCR检测内脏脂肪组织visfatin mRNA表达,ELISA法测定血清visfatin水平。结果与空白组比较,模型组大鼠内脏脂肪组织visfatinmRNA表达及血清visfatin显著增高（p〈0.01）;黄连温胆汤加减高剂量组visfatinmRNA表达及血清visfatin水平均明显降低（P〈0.05）。结论黄连温胆汤加减能降低大鼠内脏脂肪组织visfatin mRNA的表达及血清visfatin水平,可能是其治疗代谢综合征的机制之一。     

水甘油通道蛋白7在肥胖易感和肥胖抵抗大鼠脂肪组织的表达

目的：探讨水甘油通道蛋白7与高脂膳食诱导的大鼠肥胖的关系。方法：雄性6周龄sD大鼠随机分为高脂饲料组24只,普通饲料组10只。8周后将高脂饲料组大鼠分为饮食诱导肥胖组（OP）和饮食诱导肥胖抵抗组f0R1大鼠,口服葡萄糖耐量实验检测各组大鼠的胰岛素敏感性。实验结束分离大鼠的肾周和睾周脂肪组织并准确称重,分离血清测定血糖血脂。实时荧光定量PCR技术检测大鼠脂肪组织AQP7的mRNA表达。结果：0P组大鼠体重（556．8±10．6）g、体脂（6．47±0．48）％、TC（1．43±0．14）mmoL／L、TG（0．78±0．13）mmoL／L、Insulin含量（66．09＋8．06）μIU／mL和HOMA—IR（19．63±．3．08）。显著高于OR组的（478．9±8．9）g、（4．53±0．43）％、（1．15±0．10）mmoL／L、（0．62±0．04）mmoL/L、（48．03±8．70）μIU／mL、（14．74±9．61）和对照组（470．5±8．6）g、（3．34＋0．28）％、（1．17±0．15）mmoL／L、（0．51±0．08）mmoL／L、（29．57±6．94）μIU／mL、（8．08＋0．81）。OP组AQP7的mRNA表达（3．80±0．38）与OR组（1．12±0．15）和对照组（1．00±0．00）相比也显著增加,OR组和C组相比差异无统计学意义。结论：脂肪组织中AQP7表达与高脂膳食诱导的肥胖密切相关。