协同刺激分子在实验性变态反应性神经炎发病中的作用及雷公藤多甙的影响

目的：探讨协同刺激分子在实验性变态反应性神经炎（EAN）发病中的作用及雷公藤多甙的影响。方法：用兔坐骨神经匀浆免疫小鼠建立EAN模型,雷公藤多甙（TWP）灌胃治疗,观察小鼠发病情况和病理改变;通过流式细胞计检测小鼠外周血淋巴细胞CD28,CTLA－4,B7－1,B7－2蛋白的表达,用RT－PCR检测外周血淋巴细胞B7－1和B7－2mRNA和表达。结果：EAN小鼠外周血淋巴细胞上协同刺激分子CD28,CTLA－4,B7－1,B7－2蛋白的表达水平明显增高,B7－1和B7－2 mRNA表达与蛋白的增加相平行,雷公藤多甙治疗组发病率及病变程度均明显降低。同时伴随CD28,B7－1,B7－2蛋白的表达及B7－1,B7－2,mRNA表达的水平降低。结论：协同刺激分子的表达对T细胞活化起重要作用;雷公藤多甙能减轻ENA的病变程度。可能与抑制了B7－1及B7－2的基因转录或转录以上环节和抑制了CD28翻译或翻译上环节有关。     

共刺激分子CD28：CTLA4/B7在实验性自身免疫性重症肌无力中的作用

目的 研究共刺激分子CD28:CTLA4/B7在实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)发病中的作用.方法 将雌性Lewis鼠随机分为EAMC组和对照组;EAMG组采用人工合成的Ra97-116肽段3次法免疫Lewis鼠,对照组同期注入等量的PBS;3次免疫接种后采用流式细胞术检测CD28、B7-2、B7-1、CTLA4在外周血、淋巴细胞、单核细胞中的表达.结果 EAMG组大鼠成模率75%;与对照组比较,外周血CD28、B7-2B7-1、CTLA4的表达明显增加(P<0.05～0.01);EAMG组大鼠外周血CD28、CTLA4主要在淋巴细胞表达及B7-1、B7-2在淋巴细胞、单核细胞表达显著增加(P<0.05～0.01).结论 EAMG大鼠存在共刺激分子CD28:CTLA4/B7表达异常,共刺激分子CD28:CTLA4/B7可能参与了EAMG的发生、发展.     

实验性自身免疫性重症肌无力大鼠CD28/CTLA-4:B7表达水平的研究

目的探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)CD28/CTLA4B7的表达水平。方法健康、雌性Lewis大鼠24只,随机分为正常组、EAMG组、完全福(氏)佐剂(CFA)对照组。EAMG组大鼠分别于足垫、腹部及背部皮下多点注射丁(氏)双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体蛋白乳剂1mL,第4周再次注射上述乳剂免疫大鼠。CFA对照组只接受等量的CFA皮下注射。初次免疫后7周分离PBMC,应用RTPCR和流式细胞术分析方法,分别进行CD28、CTLA4mRNA及B71、B72蛋白表达水平检测。结果(1)正常组大鼠PBMCCD28、CTLA4mRNA表达水平较低,尤其CTLA4mRNA仅有极少量表达;前二者在EAMG组大鼠表达水平均明显增加(P<0001),而正常组和CFA对照组之间表达水平差异无显著性(P>005)。(2)正常大鼠B71、B72在PBMC上仅少量表达而EAMG组表达明显增加(P<0001),正常组与CFA对照组比较差异均无显著性(P>005)。结论EAMG大鼠存在PBMCCD28/CTLA4B7协同刺激分子的表达异常,CD28/CTLA4B7共刺激通路可能参与了机体异常免疫反应的诱导与维持,在重症肌无力(MG)的发生过程中发挥重要作用。     

单纯多发性肌炎的临床、病理和CD28/CTLA-4:B7表达的研究

目的　研究单纯多发性肌炎 (SPM)的临床、病理特征和CD2 8/CTLA 4 :B7表达及其发病机制。方法　回顾性总结 14 1例SPM患者的临床资料 ,收集 6例治疗前症状高峰期PM病人的外周血 ,单色流式细胞术 (FCM)检测外周血淋巴细胞协同刺激分子CD2 8、CTLA 4、B7 1、BB 1和B7 2的表达 ,并与正常健康者对照。结果　本组主要表现肌无力、肌痛或肌捏痛 ,肌酸激酶 (CK)等血清肌酶谱增高 ,肌电图呈肌源性损害。肌肉病理主要表现为肌纤维变性坏死和再生 ,散在萎缩 ,肌内膜炎症细胞浸润。SPM组外周血淋巴细胞CD2 8、CTLA 4、B7 1、B7 2的表达增加 ,FCM显示CTLA 4及B7 1的平均荧光强度各自与对照组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,CD2 8及B7 2也有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,BB 1在SPM组与对照组表达量均极少。结论　肌肉病理检查是诊断SPM的重要依据 ,协同刺激分子CD2 8/CTLA 4 :B7可能是SPM发病的重要环节。     

CD4~+CD28~-T细胞、TNF-α、VCAM-1在急性脑梗死中的意义及其与颈动脉斑块性质的相关性分析

目的探讨急性脑梗死患者外周血中CD4~+CD28~-T淋巴细胞亚群、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在不同类型脑梗死中的含量变化,以及其与颈动脉斑块性质的相关性,进一步分析CD4~+CD28~-T细胞、TNF-α、VCAM-1在脑梗死患者发病中的相关性。方法收集2018年8月～2019年4月于中国医科大学附属盛京医院神经内科住院患者,采用流式细胞仪和ELISA方法将57例急性大动脉粥样硬化型脑梗死患者和43例急性小动脉型脑梗死患者以及40例健康对照患者的外周血CD4~+CD28~-T淋巴细胞、TNF-α以及VCAM-1进行检测,分析CD4~+CD28~-T淋巴细胞、TNF-α及VCAM-1水平在不同组之间的变化。57例急性大动脉粥样硬化型脑梗死患者通过颈动脉彩超得出47例颈内动脉斑块患者,其中19例稳定斑块组和28例不稳定斑块组,分析CD4~+CD28~-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1与大动脉粥样硬化型脑梗死斑块稳定性的关系,并通过散点图判断其在急性脑梗死患者中的相关性。结果急性大动脉粥样硬化型脑梗死患者外周血中CD4~+CD28~-T淋巴细胞和TNF-α水平高于小动脉型肠梗死患者,两组的CD4~+CD28~-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1水平均高于健康对照组,三组两两比较均有统计学差异(P<0.05);其中不稳定斑块组CD4~+CD28~-T淋巴细胞、TNF-α及VCAM-1水平高于稳定斑块组,两组比较有统计学差异(P<0.05);同时所有急性脑梗死患者的CD4~+CD28~-T淋巴细胞与TNF-α以及VCAM-1之间呈线性相关。结论当发生急性脑梗死时,患者外周血中CD4~+CD28~-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1水平在急性期增高,并且CD4~+CD28~-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1主要参与大动脉粥样硬化型不稳定斑块的形成,CD4~+CD28~-T淋巴细胞在急性脑梗死患者中分别与TNF-α、VCAM-1存在相关性,因此在脑梗死发病中起重要作用。     

特发性多发性肌炎外周血淋巴细胞共刺激分子表达的研究

目的观察特发性多发性肌炎患者外周血淋巴细胞共刺激分子CD28、CD152、CD80、CD86表达,进一步分析共刺激分子与疾病的关系。方法研究分三组,即健康对照者（HC,n=5）、特发性多发性肌炎组（IPM,n=8）和肌营养不良组（MD,n=8）,后两组患者均经肌肉活检酶组织化学确诊。三组患者均通过流式细胞术检测外周血淋巴细胞CD4、CD8、CD4＋CD28＋、CD8＋CD28＋、CD152、CD80、CD86表达,并计算出CD4＋CD28-、CD8＋CD28-表达。结果与HC组比较,IPM组CD4＋CD28＋表达降低（31.9±6.6 vs 39.5±6.9,P〈0.05）,其所占CD4＋T细胞的百分率亦明显下降（92.2%±6.2% vs 98.1%±0.7%,P〈0.05）,与之相反的是CD4＋CD28-表达明显升高（2.0±1.8 vs 0.6±0.2,P〈0.05）。IPM组CD4、CD8表达及CD8＋CD28＋/CD8百分比与HC组无明显差异,CD8＋CD28-表达则呈上升趋势。IPM组CD152较HC组明显升高（18.5±13.8 vs 7.1±1.2,P〈0.05）,各组间CD80表达无明显差异,CD86以IPM组最高（6.8±1.9 vs 4.6±1.7,P〈0.05）。结论IPM患者外周血CD4阳性的T细胞表面的CD28表达下降,但CD152和CD86表达升高。     

TGF-β1基因修饰的树突状细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠外周血单个核细胞CD28/CTLA-4:B7表达的影响

目的 探讨TGF-β1基因修饰的树突状细胞(DC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)CD28/CTLA-4:B7表达的影响.方法 近交系8～10周龄健康雌性Lewis大鼠30只,分为正常组、EAMG组、DC对照组、pcDNA3-TGF-β1-DC组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组.除正常组外,其余各组均采用丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体(AChR)蛋白二次免疫的方法复制EAMG大鼠模型.初次免疫后第5天分别皮下注射2×106的DC、pcDNA3-TGF-β1-DC、pcDNA3-DC及等体积的生理盐水,正常组和EAMG组不接受任何治疗.初次免疫后7周分离各组PBMC,应用RT-PCR和流式细胞术方法分别进行CD28、CTLA-4 mRNA及B7-1、B7-2蛋白表达水平的检测.结果 (1)正常组大鼠PBMC CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平较低,尤其CTLA-4 mRNA极少量表达;EAMG组大鼠CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平均明显增加;pcDNA3-TGF-β1-DC组CD28 mRNA的表达较EAMG组明显降低(P<0.01),而CTLA-4 mRNA的表达水平较EAMG组明显增加(P<0.05);EAMG组、DC治疗组、pcDNA3-DC对照组和生理盐水对照组之间CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平无显著性差异(P＞0.05).(2)正常大鼠B7-1、B7-2在PBMC上少量表达;EAMG组B7-1、B7-2两者表达明显增加(P<0.001);pcDNA3-TGF-β1-DC治疗组B7-1、B7-2的表达较EAMG组均明显降低(P<0.01);DC对照组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组与EAMG组比较均无明显差异(P＞0.05).结论 EAMG大鼠存在PBMC CD28/CTLA-4:B7协同刺激分子的表达异常,主动调节机体的共刺激通路可能是TGF-β1基因修饰的DC治疗EAMG的机制之一.     

急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达

背景：大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子CD28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。 目的：观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子CD28 mRNA在中的表达。 方法：急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例。并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组。采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达。 结果与结论：急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的CD28 mRNA表达量低于健康人群 (P < 0.05);急性髓细胞性白血病未缓解组中CD28 mRNA低于健康人群 (P < 0.05),完全治愈组和缓解组中CD28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义。说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在CD28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关。     

大鼠局灶脑缺血病灶周围新血管生成的相关实验研究

目的本研究主要探讨大鼠局灶脑缺血病灶周围新血管形成现象,探讨外周血CD34+细胞和脑组织AC133抗原在新血管形成中的作用。方法将成年SD雄性大鼠随机分为:1.正常组,2.假手术组,3.动物模型组。分别取缺血再灌注1h、3h、6h、12h、24h、48h、3d、4d、7d、14d、28d共11个观察点。取前10个观察点外周血标本,采用流式细胞术检测单个核CD34+细胞平均荧光强度。采用免疫组化染色法检测48h、3d、4d、7d脑组织AC133抗原表达。对28d组进行脑血管荧光分布面积的检测。每个观察点5只大鼠,共65只大鼠,根据神经功能计分纳入实验。结果1.脑缺血再灌注28d梗死半球半暗带区域的血管荧光总面积较非梗死半球相似区域增加24.79%。2.大鼠脑缺血/再灌注3d外周血单个核CD34+细胞平均荧光强度明显降低,直到7d。14d恢复到基线水平。3.AC133抗原在再灌注4d梗死半球半暗带区域的血管内皮细胞表达阳性,3d、7d组无阳性表达。结论本研究证实大鼠脑缺血28天梗死半球半暗带区域的血管面积较非梗死半球增大。研究提示循环CD34+干细胞和AC133+细胞可能参与脑缺血损伤的血管修复和新血管形成。     

急性动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD137的表达特点及其临床意义

目的探讨急性动脉粥样硬化性脑梗死(atherosclerotic cerebral infarction,ACI)患者外周血肿瘤坏死因子受体超家族(tumor necrosis factor receptor super family,TNFRSF)成员CD137的表达特点及其临床意义。方法入选发病72h以内住院患者共46例,其中ACI组27例,无症状性颈动脉狭窄(asymptomatic carotid stenosis,ACS)组19例,另选择同期健康体检者20名为正常对照组(normal control,NC)。采用流式细胞术和流式细胞磁珠微阵列法(CBA)检测各组观察对象外周血CD4~+T细胞及其CD4~+CD28-T细胞亚群表面CD137的表达和血浆可溶性CD137水平。结果 ACI组外周血CD4~+CD28-T细胞比例[(14.13±4.42)%]、CD4~+CD28-T细胞CD137的表达[(2.60±2.14)%]、血浆sCD137[(3.43±2.48)pg/mL]水平显著高于ACS组[(9.03±4.60)%、(0.70±0.66)%、(2.07±0.814)pg/mL]和NC组[(8.08±3.30)%、(0.45±0.31)%、(1.26±0.70)pg/mL](P0.01),且ACI组CD4~+T细胞的CD137表达及血浆sCD137水平与NIHSS评分(P0.05)和梗死体积(P0.01)呈正相关。结论 ACI患者发病早期CD4~+CD28-T细胞、CD4~+T细胞及其CD4~+CD28-T细胞表面CD137、血浆sCD137水平升高,且CD4~+T细胞的CD137表达及血浆sCD137水平与NIHSS评分呈正相关,提示其可能作为评估脑梗死临床严重程度的外周生物学标志。     

颅内动脉粥样硬化的分布及炎性因素探讨

目的 探讨人颅内动脉粥样硬化的程度和分布以及炎性因素的作用。方法以33例患者尸检脑血管为研究对象，10％甲醛固定后检测动脉粥样硬化在Willlis环不同部位的分布，组织学和免疫组化法检测管壁结构、CD68阳性的炎细胞和肿瘤坏死因子a的变化。结果 年龄高、高血压病程长者颅内动脉粥样硬化程度重，复合型斑块明显增多。颅内动脉粥样硬化分布依次为基底动脉71％～72％、大脑中动脉67％～70％、椎动脉59％～69％、大脑后动脉40％～54％、大脑前动脉41％～43％。固定后人颅内动脉外径／内径的平均值为基底动脉0．400cm／0．200cm，大脑中动脉0．326cm／0．195cm，椎动脉0．356cm／0．186cm，大脑后动脉0．243cm／0．140cm，大脑前动脉0．226cm／0．120cm。动脉壁最厚处可为0．500cm。粥样硬化斑块可以闭塞管腔，也可以向管壁外增生而管腔无狭窄。动脉粥样硬化多数发生自内膜下，也可以始于肌层和外膜。CD68阳性的炎细胞多数分布在正常管壁与异常管壁交界的部位，也可分布在内膜下或斑块内。肿瘤坏死因子与炎细胞分布不同步：多数分布在整个粥样斑块中，也见于细胞结构正常的动脉内膜下。没有常规危险因素的年轻人有严重的动脉粥样硬化并有大量的炎性因子的表达。巨细胞病毒染色全部阴性。光镜内膜结构正常的管壁上可见血栓形成。结论 人颅内动脉中基底动脉和大脑中动脉的动脉粥样硬化程度最重。炎性因素参与了动脉粥样硬化的形成和加重。     

负性协同刺激分子PD-1在重症肌无力患者外周血中的表达

目的 观察重症肌无力(MG)患者外周血中负性协同刺激分子programmed death-1( PD-1)的表达情况，并探讨其与MG发病的关系。方法 采用免疫荧光标记、流式细胞仪检测45例MG患者和33名健康对照者外周血单个核细胞中PD-1及其配体PD-L1的表达，用ELISA法检测各组血浆中可溶性PD-1的水平。结果 (1)MG患者表达PD-1的CD4+T淋巴细胞比例增加，CD14+PD-L1+的单核细胞比例增加，但在不同性别及眼肌型与全身型间差异无统计学意义；在胸腺异常MG患者中CD4+PD-1+T细胞增加，CD14+ PD-L1+的单核细胞比例减少；早发型MG患者（年龄＜40岁）CD4+PD-1+T淋巴细胞比例明显低于晚发型（年龄≥40岁）。(2)MG患者血浆中sPD-1浓度为(6.92 +0.72) ng/ml，明显高于健康对照组的(3.28±0.42) ng/ml，但在性别、MG眼肌型与全身型不同类型间和有无胸腺异常各组间差异无统计学意义，且sPD-1与发病年龄呈负相关(r=-0.526，P=0.000)。结论 PD-1及PD-L1途径参与了MG的发病，异常升高的sPD-1可能干扰了正常的细胞膜上PD-1与PD-L1的结合，从而促使疾病进展。     

皮肌炎肌组织中浆细胞样树突状细胞的病理学特点

目的 研究皮肌炎肌组织中浆细胞样树突状细胞(pDC)的病理学特点,探讨其病理学意义.方法 收集30例皮肌炎及25例多发性肌炎(PM)患者的肌肉活体组织标本,全部行HE染色、免疫组织化学(抗CD303分子及抗CD68分子)染色.结果 肌活体组织检查病理示,30例皮肌炎中25例可见典型束周萎缩,伴肌束膜明显增宽,5例束周萎缩不典型,但于肌束周边可见小群坏死或再生纤维;14例可见束周凿空样纤维;17例可见肌束膜内血管周围炎,6例于肌内膜可见灶性炎症细胞浸润.免疫组织化学染色示,19例在肌束膜及血管周围可见较多巨噬细胞浸润;20例可见较多pDC浸润,其中,15例此细胞仅位于宽大肌束膜内血管周围的灶性炎细胞区域,3例仅位于肌内膜灶性炎症细胞区域,2例pDC在上述2个部位均存在.25例PM患者的主要病理改变为坏死、再生纤维及炎症细胞浸润,免疫组织化学染色在血管周围灶性炎症细胞区域未发现或偶见少量散在pDC的浸润.结论 在PM患者肌组织中未发现或偶见少量散在pDC的浸润,而在皮肌炎患者肌组织内可见显著pDC的浸润,且其主要在宽大肌束膜内的血管周围分布的特点提示可能与皮肌炎束周萎缩的形成有关.

Abstract：

Objective To study the histological features of plasmacytoid dendritic cells (pDC) in muscle tissue affected by dermatomyositis (DM) and to discuss the pathological significations of pDC.Methods Muscle tissues from 30 cases of DM and 25 cases of polymyositis (PM) were collected.HE stain, immunohistochemistry studies were carried out in all muscle samples.Results Pathological features of DM included: perifascicular atrophy (25/30); punched-out fiber (14/30); perivasculitis (17/30),inflammatory infiltration in the endomysium(6/30).Using immunohistochemistry study, 19 cases from DM were infiltrated by macrophages which are CD68 positive and CD303 negative, 20 cases with DM were infiltrated by pDC which are CD303 positive.The location of pDC were: perivascular of interfascicular septae only (15/20); endomysium only (3/20) and both (2/20).Myopathic damage such as necrotic and regenerating fibers and inflammatory infiltration could be seen in PM.There was few pDC infiltration in PM.Conclusions There is few pDC in muscle tissue affected by PM and many pDC in muscle tissue affected by DM with infiltration mainly in the wide interfascicular septae.pDC may be connected to perifascicular atrophy and play a roll in the pathogenesis of DM.     

CD40-CD40 L在颈动脉粥样硬化斑块稳定性中的作用及与基质金属蛋白酶的相关性

目的 观察CD40、CD40L和基质金属蛋白酶9(MMP9)在人类颈动脉粥样硬化斑块中的表达情况,探讨CD40、CD40L在斑块稳定性中的作用及与MMP9表达的关系.方法 将因颈动脉粥样硬化狭窄(>70%)行颈动脉内膜切除术的37例手术标本分为有临床脑卒中事件组(A组,n=20)和无临床脑卒中事件组(B组,n=17),另设尸检正常颈动脉(C组,n=11)作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组斑块中CD40、CD40L和MMP9 mRNA水平,Western blot检测各组CD40、CD40L和MMP9蛋白表达水平,免疫组织化学检测各组CD40、CD40L和MMP9表达及分布,并对CD40、CD40L与MMP9的转录及表达水平作相关性分析.结果 A、B、C 3组的CD40mRNA的相对表达量分别为:2.41±0.43、1.03±0.38和0.31±0.12;MMP9 mRNA的相对表达量分别为:6.88±1.57、1.90±0.44和0.39±0.12.A组CD40、MMP9的mRNA水平高于B组(FCD40=105.183,FMMP9=160.395,P=0.000),B组高于C组(FCD40=37.307,FMMP9=124.093,P=0.000);CD40与MMP9的mRNA水平有正的直线相关关系(r=0.929,P=0.000),但各组CD40L的mRNA水平差异无统计学意义(FA-B=0.033,P=0.857;FB-C=1.564,P=0.767;FA-C=0.219,P=0.644).A组CD40、CD40L和MMP9的蛋白表达高于B组(FCD40=104.100,P=0.000;FCD40L=129.932,P=0.000;FMMP9=13.565,P=0.021),B组高于C组(FCD40=115.848,P=0.000;FCD40L=30.482,P=0.005;FMMP9=35.557,P=0.004).免疫组织化学示CD40、CD40L和MMP9的阳性表达面积A组大于B组(FCD40=39.451,FCD40L=57.606,FMMP9=30.711,P=0.000),B组大于C组(FCD40=95.066,FCD40L=59.081,FMMP9=145.758,P=0.000);CD40、CD40L与MMP9的阳性表达面积有正相关关系(rCD40L-CD40L=0.963,rCD40-MMP9=0.959,rCD40L-MMP9=0.929,P=0.000),并且CD40、CD40L和MMP9均在斑块肩部表达明显增多.结论 CD40-CD40L在动脉粥样硬化的形成和斑块稳定性中起重要作用;其可能通过上调MMP9导致斑块不稳定;CD40L可能是通过转录后修饰影响CD40L的表达,从而产生生物学效应.     

急性脑梗死患者活化血小板表达血小板内皮细胞黏附分子-1、P-选择素的动态变化

目的观察急性脑梗死患者血小板表达血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)、P-选择素的动态变化。方法采用全血流式细胞术测定35例急性脑梗死患者不同时间血小板PECAM-1、P-选择素的表达水平,并与30名健康对照比较。结果脑梗死患者24h内血小板表达PECAM-1、P-选择素(分别为78.35±10.48,7.75±3.04)明显高于健康对照组(分别为48.89±10.84,2.18±0.83,均P<0.01);P-选择素于24h、PECAM-1于48h达高峰,后缓慢下降,至14d仍高于健康对照组(分别为P<0.05,P<0.01)。48h内血小板PECAM-1与梗死体积大小呈正相关,与NIHSS评分无关;P-选择素与梗死体积大小和NIHSS评分呈正相关。14dNIHSS评分与血小板PECAM-1有负相关,与P-选择素无关。结论血小板表达的PECAM-1、P-选择素参与了脑梗死急性期的不同病理生理过程。     

胶质瘤CD133阳性和阴性U87细胞蛋白质组学分析

目的 通过对人脑胶质瘤U87细胞中CD133+和CD133-细胞进行配对研究,寻找差异性蛋白.方法 通过磁珠选择分离U87中CD133+和CD133-细胞,利用双向凝胶电泳(2D - PAGE)检测上述细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点.通过质谱( MALDI -TOF - MS)对蛋白点进行鉴定,建立两种细胞差异性蛋白文库.结果 CD133+和CD133-细胞配对比较,蛋白质组学检测结果中,差异有统计学意义(P＜0.05)的2D - PAGE蛋白点共有73个,＞1.5倍差异蛋白点有46个,＞2倍差异蛋白点有27个,＞3倍差异蛋白点有8个.在CD133+ U87细胞中,有10个蛋白表达增多(上调),63个蛋白表达下降(下调).共得到44张高质量质谱肽质量指纹图谱(PMF),鉴定了35种蛋白质.结论 CD133+和CD133-细胞是同一细胞株中两种不同的细胞,蛋白方面存在的差异,将成为进一步研究它们相互关系的重要靶点.     

CD133剪接变体在脑胶质瘤中的表达研究

目的 判断CD133剪接变体的表达与AC133抗原决定簇的关系.方法 对AC133阳性和阴性胶质瘤细胞中剪接变体的表达进行了对比,并进行了AC133阳性胶质瘤干细胞诱导分化下CD133剪接变体的表达研究.以RT - PCR针对性的扩充CD133 mRNA条件外显子集中序列,并通过DNA测序确定其条件外显子,同时以实时荧光定量PCR进行了条件外显子表达的定量分析.结果 AC133阳性和阴性细胞均表达相同的CD133 mRNA剪接变体,剪接变体的表达与CD133蛋白的亚细胞分布无关联.AC133阳性胶质瘤干细胞诱导分化过程中,含3号条件外显子的剪接变体的表达显著上调(P＜0.05).结论 在脑胶质瘤中,未能证实与AC133抗原决定簇表达呈特异关联的剪接变体,含3号条件外显子的剪接变体表达与胶质瘤细胞的分化表型相关联.     

CD4O及基质金属蛋白酶在颈动脉内膜剥脱术斑块中的表达及影响斑块稳定性的研究

目的 研究CD40及基质金属蛋白酶(MMPs)在颈动脉易损斑块及稳定斑块中的表达,探讨CD40与MMPs表达的相关性及影响斑块稳定性的可能机制.方法 收集颈动脉内膜剥脱术(CEA)后的粥样硬化斑块标本32例次,根据术前颈动脉超声、经颅多普勒(TCD)及是否发生急性缺血性脑卒中事件分为易损斑块组及稳定斑块组,采用PCR和Western blot法检测两组标本中CD40及MMPs的mRNA和蛋白表达水平.结果 易损斑块组CD40和MMP-9 mRNA及蛋白表达水平均较稳定斑块组显著增高(P＜0.01);MMP-2蛋白表达水平亦较稳定斑块组明显增高(P ＜0.01);CD40mRNA与MMP-2 mRNA(r=0.43)、CD40 mRNA与MMP-9 mRNA(r=0.90)之间呈正相关(P＜0.05).结论 CD40不但参与动脉粥样硬化斑块的形成,而且可能通过调控MMP-2、MMP-9的表达影响动脉粥样硬化斑块的稳定性.     

Fas和FasL在多发性硬化患者表达的意义

目的　探讨多发性硬化 (MS)患者外周血淋巴细胞Fas和FasL的表达及其与病情严重程度的关系。方法　采用流式细胞术 (FCM)检测 2 2例复发缓解型MS患者外周血淋巴细胞Fas和FasL的表达情况 ,并选择 1 6例同期住院的非免疫相关性疾病患者作为对照。结果　 (1 )复发期MS患者Fas表达 (1 8 2 5 %± 1 0 69% )均高于缓解期MS患者和对照组 (分别为 1 1 43 %± 6 83 % ,9 68%±5 2 4 % ) ;复发期MS患者FasL表达 (2 79%± 2 47% )亦均高于缓解期MS患者和对照组 (分别为1 0 6 %± 0 58% ,0 76 %± 0 61 % )。 (2 )病损程度为重度的MS患者Fas和FasL的表达 (分别为2 1 63 %± 1 2 74% ,3 51 %± 2 0 6 % )均高于中度的MS患者 (分别为 1 2 82 %± 6 1 5 % ,1 94%±1 1 3 % )。 (3)反复发病的MS患者Fas和FasL的表达 (分别为 1 9 56 %± 8 78% ,3 2 8%± 1 82 % )均高于首次发病的MS患者 (分别为 1 3 63 %± 5 36 % ,2 0 6 %± 0 68% )。 (4)MS患者Fas与FasL表达之间呈正相关 (r=0 51 8,P =0 0 0 3)。结论　Fas和FasL与MS的临床复发、复发次数和病情的严重程度有关 ;Fas和FasL可能参与MS的发病机制     

应关注系统性红斑狼疮脑组织损害的发病机制

<正>系统性红斑狼疮(SLE)是一种严重的慢性全身性自身免疫性疾病,以大量自身抗体产生和多脏器损害为主要临床特征。系统性红斑狼疮好发于青年女性,发病高峰年龄为15~40岁,男女发病比例约为1∶9,其中儿童和老年患者男女发病比例约为1∶2,最近的流行病学调查资料显示全球患病率为(20~50)/10万[1],我国患病率约为70/10万[2]。系统性红斑狼疮的发病具有一定家族聚集倾向,单卵双生子发病率为25%~50%,而二卵双生子发病率