Wnt/β-Catenin通路:抗癌药物作用的新靶点

晚期恶性肿瘤治疗效果差，是当今医学界面临的一大难题。化疗在晚期恶性肿瘤治疗中占重要地位，大多数化疗药物由于非选择性的细胞毒作用而限制了其使用。因此，急需开发针对新靶点的选择性强的高效低毒抗癌药物。Wnt／β—Catenin信号通路在癌症的发生机制中起着重要作用，尤其对大肠癌的发生发展起决定性作用，作为抗癌药物作用的新靶点，已成为当今肿瘤领域的研究热点。国内、外众多学研究发现，一些抗癌药物以Wnt／β—Catenin信号通路为作用靶点，从不同水平阻断它而发挥抗癌作用。     

Wnt/β-Catenin在骨髓基质干细胞治疗阿尔茨海默病大鼠脑中的表达

目的探讨BMSCs移植对AD模型大鼠的治疗作用。方法将大鼠随机分成5组,正常组、模型组、模型对照组、治疗组、治疗对照组,每组10只。双侧海马区注射Aβ23-35建立AD大鼠模型后,治疗组进行BMSCs的移植治疗。治疗对照组用氢溴酸加兰他敏进行灌胃治疗。结果行为学实验检测各组大鼠平均逃避潜伏期及首次跨越原平台时间,模型组与正常组比较(P<0.01),治疗组与治疗对照组与模型组比较(P<0.01),与正常组比较(P<0.05),均有显著性差异;形态学实验HE染色显示模型组颗粒细胞及锥体细胞有破坏现象,治疗组和治疗对照组明显恢复。免疫组化检测显示正常组和模型对照组可见海马区阳性蛋白表达较多而模型组阳性表达明显减少,治疗组和治疗对照组阳性表达较模型组明显增多。结论 BMSCs移植治疗AD的作用机制可能与通过调节Wnt信号转导通路,影响了学习记忆相关酶及蛋白在海马区的表达而发挥作用有关。     

Wnt/β-catenin信号通路与骨髓基质干细胞分化方向的关系研究

本文旨在对Wnt/β-catenin信号途径对骨髓基质干细胞分化方向的调控作用及该途径中存在的能够促进成骨分化的位点进行综述,探讨Wnt/β-catenin信号途径作为治疗骨质疏松作用靶点的应用前景.     

Wnt信号通路与肿瘤干细胞耐药

肿瘤细胞对化疗药物产生交叉耐药性,是造成肿瘤患者化疗失败的主要原因之一。肿瘤细胞具有异质性,即在同一肿瘤细胞中存在不同基因型或亚型的细胞。在化疗过程中,药物杀死对药物敏感的肿瘤细胞,而有一部分肿瘤细胞则表现出较强的耐药性,不能被化疗药物杀伤。肿瘤干细胞(Cancer stem cells,CSCs)的发现,为肿瘤耐药现象的研究提供了新的思路。CSCs是指肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的细胞,其具有自我更新,多向分化,DNA修复以及耐药等特征。Wnt信号通路是调控肿瘤干细胞自我更新和分化的关键信号途径,该通路的激活在多种肿瘤的发生、发展和耐药过程中发挥重要作用。对Wnt信号通路的研究有助于揭示肿瘤干细胞耐药的机制,并有望成为治疗恶性肿瘤的一个新靶点。该综述重点阐述了Wnt信号通路在肿瘤干细胞介导的耐药过程中的研究进展。     

Wnt/β-Catenin信号通路在非酒精性脂肪肝发病中的作用及阿托伐他汀的干预效果

目的探讨大鼠非酒精性脂肪肝的发病机制及阿托伐他汀的干预改善作用。方法将60只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组、非酒精性脂肪肝模型组和阿托伐他汀治疗高、中、低剂量组,各12只。高脂高糖饮食复制非酒精性脂肪肝模型,药物治疗组大鼠第12周开始接受阿托伐他汀灌胃治疗,模型组和正常对照组给予等剂量的溶剂羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。分析各组大鼠血清天门冬酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,并检测基质金属蛋白酶(MMPs)和Wnt/β-Catenin通路蛋白的表达,HE染色分析肝脏组织病理变化。结果与正常对照组相比,高脂饮食模型组大鼠血清TG,TC,AST,ALT水平明显升高,羟脯氨酸含量增高,MMP2,MMP9,Wnt1,Wnt4,β-Caternin表达明显增强;而阿托伐他汀可显著改善上述异常,且具有剂量依赖性。结论阿托伐他汀能通过抑制Wnt/β-Catenin信号通路改善大鼠非酒精性脂肪肝肝脏损伤。     

基于Wnt/β-catenin信号通路的中医药防治骨质疏松症研究进展

目的 为中医药防治骨质疏松症提供参考。方法 以“Wnt/β-catenin信号通路”“骨质疏松症”“中医药”为关键词,检索国内外数据库中相关文献,分别探讨骨质疏松症的发病机制、Wnt/β-catenin信号通路与骨质疏松症的关系及中医药基于Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松症的研究进展。结果 Wnt/β-catenin信号通路与骨质疏松症的发生密切相关。现阶段关于中医药防治骨质疏松症的研究较广泛,组方中应用频次较高的中药包括熟地黄、淫羊藿、黄芪、骨碎补、补骨脂,其中大部分被证实可通过调控Wnt信号通路或下游靶基因表达促进骨形成和骨矿化。结论 以Wnt/β-catenin信号通路为切入点研究骨质疏松症的防治,可为该病的中医药治疗和中药研发提供一定的理论依据。     

Wnt/β-catenin信号通路抑制剂的抗肿瘤研究进展

Wnt信号通路广泛存在于多细胞真核生物中,并且高度保守,在胚胎发育过程中起到重要作用。大量研究表明,Wnt信号通路的异常激活与肿瘤的发生发展密切相关,其在多种恶性肿瘤的增殖、分化、凋亡、迁移、侵袭、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)及肿瘤干细胞特性中发挥重要作用,因此开发靶向Wnt信号通路的抗肿瘤药物具有重要意义。目前,Wnt信号通路抑制剂的研究已取得一定进展。本文主要对近年来Wnt途径中关键成员Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。     

Wnt/β-catenin信号通路在低氧促进hBMSCs体外增殖中的作用

目的 探讨持续低氧环境对入骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)体外增殖的影响,并初步探讨Wnt/β-catenin信号通路在其中的作用.方法 将购自江阴齐氏生物科技有限公司第2代hBMSCs进行传代、纯化,取第4代hBMSCs进行流式细胞仪检测鉴定;根据培养条件不同分为常氧组(20％氧浓度)和低氧组(3％氧浓度);CCK-8法测定各组生长曲线;采用RT-PCR检测Wnt/β-catenin信号通路关键组件β-catenin、cyclinD1 mRNA表达水平;Western blot检测β-catenin、P-β-catenin蛋白表达水平.结果 第4代hBMSCs流式鉴定结果显示:骨髓基质标志CD90表达为98.7％,而造血细胞标志CD19表达为0.3％;与常氧组比较,低氧组增殖速率更快,β-catenin、cyclinD1 mRNA表达升高(P＜0.05),β-catenin蛋白表达升高(P＜0.05),P-β-catenin蛋白表达下降(P＜0.05).结论 持续低氧环境可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路而促进hBMSCs体外增殖.     

白藜芦醇通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞生长的研究

目地探讨白藜芦醇抗肿瘤活性的作用机制。方法本研究使用白藜芦醇处理体外培养结肠癌细胞系HCT116后,通过细胞生长实验和MTT增殖实验来探讨其对HCT116细胞生长、增殖的影响;通过免疫印迹实验检测β-catenin的表达水平和Wnt信号通路靶基因c-Myc和cyclinD1的表达,检测白藜芦醇对Wnt信号通路活化的影响。结果白藜芦醇能显著抑制HCT116的生长增殖,降低β-catenin的表达水平,抑制Wnt信号通路靶基因c-Myc和cyclinD1的表达。结论白藜芦醇通过抑制Wnt信号通路从而抑制肿瘤生长,本研究为白藜芦醇抗肿瘤机制提供了新的思路和方向。     

阿托伐他汀对动脉粥样硬化模型兔Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响研究

目的:研究阿托伐他汀对动脉粥样硬化模型兔Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路中调控因子Wnt1、β-catenin、蓬乱蛋白1(dvl-1)的影响,探讨其作用机制。方法:取兔随机分为正常对照组、模型组(高脂饲料)、处理组(高脂饲料+阿托伐他汀2.5mg.kg-1.d-1),每组8只,各组兔给予相应饲料喂养,每日1次,12周后采血并处死,检测各组兔的血脂指标(总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇),观察主动脉硬化斑块的程度,免疫组化法和蛋白质印迹法检测主动脉硬化斑块处Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组和处理组血脂指标明显升高,主动脉硬化斑块的程度明显增强,Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达明显增强(P<0.05);与模型组比较,处理组血脂指标明显降低,主动脉硬化斑块的程度明显减轻,Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达明显降低(P<0.05)。结论:阿托伐他汀可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路中Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达来减轻动脉粥样硬化的程度。     

黄芩苷通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用

目的研究黄芩苷(baicalin)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,r BMSC)成骨分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法采用贴壁筛选法体外培养r BMSC,给予黄芩苷3、5、7 d后,比较药物处理组与对照组之间碱性磷酸酶(ALP)的活性。同时检测给予黄芩苷对碱性磷酸酶阳性克隆和矿化结节形成的影响。提取总mRNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR检测黄芩苷对Wnt10a、GSK-3β、β-catenin以及LEF1 mRNA水平的影响。免疫印迹检测药物处理对β-catenin以及Runx2蛋白表达量的影响。结果黄芩苷明显提高ALP的活性。10μmol·L-1浓度的黄芩苷还可增加碱性磷酸酶克隆数和钙化结节的形成。黄芩苷还可提高Wnt10a、β-catenin、GSK-3β、LEF1以及osteocalcin的mRNA水平,并提高β-catenin和Runx2的蛋白表达量。结论黄芩苷在0.1~50μmol·L-1的给药浓度下可促进rB MSC的成骨分化成熟,Wnt/β-catenin信号可能参与调控rB MSC的成骨分化。     

基于Wnt/β-catenin信号通路的黄芪皂苷治疗膝骨关节炎机制研究现状

黄芪皂苷是黄芪重要的活性成分之一,对退变软骨具有修复、保护作用.Wnt/β-catenin信号通路主要参与细胞分化、凋亡等.笔者通过阅读黄芪皂苷类相关文献,对其调控Wnt/β-catenin信号通路而发挥修复、保护功效的作用靶点进行综述,旨在为黄芪皂苷的临床应用及深入研究提供依据.     

Wnt/β-catenin信号通路在复发性流产的研究现状

复发性流产是育龄期女性的常见疾病,严重影响女性的生活情况及家庭幸福。复发性流产是临床常见病、疑难病,病因至今仍不明确。Wnt/β-catenin信号通路是最经典的Wnt信号通路,参与众多的生命活动与进程,能够影响细胞的增殖、迁移、侵袭等行为,众多研究表明Wnt/β-catenin信号通路参与了复发性流产的发病。本文主要从滋养细胞的增殖、侵袭和侵袭、胎盘的血管生成及子宫内膜的蜕膜化对Wnt/β-catenin信号通路在复发性流产的发病机制进行综述。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨川芎提取物对慢性心力衰竭大鼠的干预作用

目的：探讨川芎提取物对慢性心力衰竭大鼠的干预作用,并通过Wnt/β-catenin信号通路探究其作用机制。方法：采用腹主动脉缩窄法结合竭力式游泳建立慢性心力衰竭大鼠动物模型,通过心电图检测大鼠造模前后心电图变化,建模成功后将大鼠分为模型组(n=10)和实验组(n=10),取10只未造模大鼠作为对照组。实验组大鼠给予川芎提取物(100 mg/kg),1日1次,连续干预4周;对照组和模型组大鼠分别给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。实验终点检测各组大鼠心率及呼吸频率,检测大鼠左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS)。采用苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠心脏组织病理状态,采用电子显微镜检测大鼠心脏组织超微结构变化,采用蛋白质印迹法检测大鼠心脏组织Wnt/β-catenin信号通路关键分子去水平段极性蛋白3(Dvl3)、糖原合成酶激酶-3(GSKβ)和β-连环蛋白(β-catenin)表达情况。结果：超声检查结果表明,模型组大鼠的LVIDd、LVIDs显著高于对照组,LVEF、LVFS显著低于对照组;实验组大鼠的LV...     

长链非编码RNA PVT1通过激活Wnt信号通路对肝癌干细胞自我更新能力的调控

摘 要 目的：探讨长链非编码RNA PVT1通过激活Wnt信号通路对肝癌干细胞自我更新能力的调控作用。 方法: 设HEPG2肝癌干细胞组、LNCRNA PVT1 mimics组、LNCRNA PVT1 inhibitor组,培养结束后,检测各组细胞活力、单克隆形成数目、成球率、凋亡率水平、G1期、PVT1 mRNA、WNT、SWI、SNF蛋白表达水平。 结果: LNCRNA PVT1 mimics组OD值、存活率水平、克隆形成数目、成球率、G1期、PVT1 mRNA、WNT、SWI、SNF蛋白表达水平高于HEPG2肝癌干细胞组（P<0.05）,细胞凋亡率低于HEPG2肝癌干细胞组（P<0.05）;LNCRNA PVT1 inhibitor组OD值、存活率、克隆形成数目、成球率、G1期、PVT1 mRNA、WNT、SWI、SNF蛋白表达水平低于HEPG2肝癌干细胞组、LNCRNA PVT1 mimics 组（P<0.05）,细胞凋亡率高于HEPG2肝癌干细胞组、LNCRNA PVT1 mimics 组(P<0.05)。LNCRNA PVT1 mRNA 与克隆形成数目、成球率、G1期、WNT、SWI、SNF正相关关系明显,与凋亡率负相关关系明显（P<0.05）。 结论: LNCRNA PVT1通过激活SWI/SNF复合物进而激活Wnt信号传导来促进肝癌干细胞的自我更新和肿瘤增殖。     

虎杖苷对去卵巢骨质疏松大鼠β-Catenin及GSK-3β蛋白表达的影响

目的：研究虎杖甙(PD)对卵巢摘除骨质疏松大鼠β-Catenin及GSK-3β蛋白表达的影响,探索其对卵巢摘除骨质疏松大鼠的保护作用及可能的作用机制。方法：SPF级雌性大鼠60只,随机分为假手术组(Sham组)、模型组(OVX组)、虎杖甙低(PD-L,5mg.kg_-1d_-1)、中(PD-M,15mg.kg_-1d_-1)、高剂量组(PD-H,45mg.kg_-1d_-1),每组12只,灌胃给药。除假手术组外,其余各组采用摘除大鼠双侧卵巢的方法模拟骨质疏松模型。12w后,用双能X线吸收法测量骨密度(BMD),ELISA法检测E2、ALP、TRAP等生化指标的水平;western blotting法检测β-Catenin和GSK-3β蛋白的表达。结果：与OVX组比较,PD各组BMD显著升高(P <0.05,P <0.01)、血清E2、ALP、TRAP显著升高(P <0.05,P <0.01),β-Catenin蛋白的表达升高,GSK-3β表达降低(P <0.05,P <0.01)。结论：虎杖甙对去卵巢骨质疏松有一定的治疗作用,其机制可能与激活Wnt/β-Catenin信号通路有关。     

基于Med12/Wnt/β-Catenin信号通路的气血双补方治疗子宫肌瘤的作用机制

目的:基于Med12/Wnt/β-Catenin信号通路探讨气血双补方治疗子宫肌瘤作用机制。方法:通过慢病毒转染构建Med12基因敲低的人子宫肌瘤细胞株;制备气血双补方含药血清,进一步展开Med12基因下游信号通路的Western blot及PCR检测。结果:与对照组比较,含药血清能够显著降低Control-shRNA组细胞中Wnt1、β-catenin、TCF1/TCP7、C-myc、Cyclin D1基因和蛋白的表达水平;与Control-shRNA组比较,Med12-shRNA组细胞中Wnt1、β-catenin、TCF1/TCP7、C-myc、Cyclin D1基因和蛋白的表达同样降低,但无显著影响。结论:气血双补方含药血清可以通过影响Med12/Wnt1/β-catenin信号通路发挥治疗子宫肌瘤作用。     

基于斑马鱼胚胎表型的Wnt/β-catenin信号通路小分子抑制剂的筛选方法

目的利用模式生物斑马鱼,建立1种基于胚胎表型的直观、快速的小分子抑制剂筛选方法,从而高效筛选和评价小分子化合物对体内Wnt/β-catenin信号通路的抑制活性。方法 Wnt/β-catenin信号通路激活剂6-bromoindirubin-3-oxime(BIO)处理受精后6 h斑马鱼胚胎,检测胚胎48 hpf眼睛发育情况;Wnt/β-catenin信号通路抑制剂处理6 hpf斑马鱼胚胎,检测48 hpf胚胎心脏不对称发育情况;小分子化合物与BIO共同处理6 hpf斑马鱼胚胎,检测斑马鱼眼部表型营救情况。结果 Wnt/β-catenin信号通路激活剂BIO处理斑马鱼胚胎,48 hpf胚胎出现"无眼"表型;Wnt/β-catenin信号通路抑制剂i CRT3、PNU-74654处理斑马鱼胚胎,48 hpf胚胎心脏左右不对称发育出现异常;Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV-939、PNU-74654分别与BIO共同处理斑马鱼胚胎,48 hpf能够显著营救由BIO激活所导致斑马鱼的眼部缺失表型。已知Wnt/β-catenin信号通路异常激活与诸多癌症密切相关,实验为筛选具有靶向...     

蛇床子素通过Wnt/β-catenin信号通路促进转染APP基因的神经干细胞分化为更多神经元且减少神经元凋亡

目的通过转染APP基因于神经干细胞,研究蛇床子素对其增殖和分化能力的影响,及对神经元凋亡的影响,并研究其机制。方法体外建立阿尔茨海默病的神经干细胞模型,利用免疫组化染色法,研究蛇床子素对转染APP基因的神经干细胞增殖和分化能力的影响;通过CCK-8法检测神经干细胞存活率;Hoechst 33258法检测神经元凋亡情况;RT-PCR法检测GSK-3β和β-catenin mRNA的表达变化情况;Western blot法检测GSK-3β和β-catenin蛋白的表达变化情况。结果与APP组相比,蛇床子素组的神经干细胞增殖能力提高了10.24%;分化为神经元的能力提高了6.74%。与APP组相比,蛇床子素组神经干细胞的存活率明显提高;神经元凋亡明显减少;RT-PCR和Western blot结果显示,蛇床子素可抑制GSK-3β基因和蛋白的表达,促进β-catenin基因和蛋白的表达。结论蛇床子素可促进转染APP基因的神经干细胞的增殖,可促进其分化为更多的神经元,并减少神经元凋亡,可能与通过激活Wnt/β-catenin信号通路有关系。