桃红四物汤含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞TNF-α、MCP-1和IL-1β表达的影响

目的:研究桃红四物汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导刺激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·m L-1),每天2次,按10 m L·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清。MTT法检测桃红四物汤含药血清(终浓度为5%、10%和15%)预处理对LPS诱导细胞生存率减少的作用;real-time RT-PCR检测TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达情况;Western Blot方法检测MCP-1和NFκB蛋白表达;检测活性氧(ROS)含量,研究桃红四物汤含药血清对HUVEC抗氧化能力的影响。结果:与空白血清对照组比较,经LPS(1μg·m L-1)刺激后细胞ROS含量明显增高而生存率显著降低,同时细胞炎性因子TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达增高;含药血清组可显著提高HUVECs活力、降低ROS含量和TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达。结论:桃红四物汤含药血清对LPS诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用。     

壮腰通络方含药血清对TNF-α介导的髓核细胞焦亡恶性循环的影响

目的 探讨壮腰通络方延缓腰椎间盘退变的可能机制。方法 利用佛波酯、干扰素γ和脂多糖将THP-1细胞诱导为M1巨噬细胞，与髓核细胞建立Transwell共培养体系。首先以胎牛血清作为对照血清，采用MTT法分析不同体积分数（5%、10%、15%、20%）壮腰通络方大鼠含药血清对M1和髓核细胞活性的影响，筛选后续实验药物浓度。随后建立实验一，分为髓核细胞对照组、M1巨噬细胞对照组、髓核细胞+壮腰方组、髓核细胞+肿瘤坏死因子α (TNF-α)组、髓核细胞+TNF-α+壮腰方组、共培组、共培+壮腰方组，每组3个复孔。利用ELISA法检测各组培养上清白细胞介素1β (IL-1β)和白细胞介素18 (IL-18)含量，实时荧光定量PCR检测髓核细胞中IL-1β和IL-18 mRNA表达，细胞免疫荧光法检测髓核细胞中Gasdermin D(GSDMD)蛋白表达。实验二利用TNF-α过表达质粒或TNF-α空载体质粒干预M1巨噬细胞，并在共培养条件下分为共培组、空载体质粒+共培组、空载体质粒共培+壮腰方组、共培+壮腰方组、过表达质粒共培+壮腰方组、过表达质粒+共培组，每组3个复孔。利用实时荧光定量PCR和...     

身痛逐瘀汤含药血清通过NF-κB通路抑制TNF-α诱导的大鼠髓核细胞退变的作用机制

目的 探讨身痛逐瘀汤含药血清是否可通过介导核因子-κB(NF-κB)通路抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的大鼠髓核细胞退变。方法 将成年雄性SD大鼠随机分为4组制备空白血清和身痛逐瘀汤高、中、低剂量含药血清。取从大鼠尾盘获得并传代到第3代的髓核细胞,分为5组培养：空白组加20%空白大鼠血清,模型组加20%空白大鼠血清和20 ng/mL TNF-α,身痛逐瘀汤高剂量组加20%身痛逐瘀汤高剂量含药血清和20 ng/mL TNF-α,身痛逐瘀汤中剂量组加20%身痛逐瘀汤中剂量含药血清和20 ng/mL TNF-α,身痛逐瘀汤低剂量组加20%身痛逐瘀汤低剂量含药血清和20 ng/mL TNF-α,均培养48 h。采用RT-PCR法检测髓核细胞中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2家族相关x蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达情况,采用Western blot法检测细胞中p-IKKα/β、IKKβ、p-IκBa、IκBa、p-p65、...     

基于Hippo-YAP信号通路探讨桃红四物汤对BMSCs增殖与成骨分化的影响

目的 分离培养大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）,运用桃红四物汤含药血清和Hippo信号通路抑制剂Verteporfin干预,进而观察BMSCs增殖和成骨分化的能力。方法 采用全骨髓贴壁法体外培养BMSCs,选用10倍等效剂量的桃红四物汤灌服大鼠制备桃红四物汤含药血清,采取0.9%氯化钠注射液灌胃大鼠制取空白组对照血清,将BMSCs分为3组：空白血清组、桃红四物汤含药血清组（THSWT组）以及桃红四物汤含药血清+Verteporfin组（THSWT+V组）,使用CCK-8分析法分析4个时相点0、1、3、7 d细胞增殖活力;干预7 d后,进行ALP测定,观察骨向分化程度;处理21 d后,进行茜素红染色,观察钙积累,Western blotting法检测各组细胞成骨关键因子及Hippo通路关键蛋白表达。结果 THSWT组BMSCs细胞增殖能力明显高于THSWT+V组及空白血清组（P <0.01）;THSWT组BMSCs成骨分化能力及钙盐沉积程度高于THSWT+V组及空白血清组;THSWT组中YAP蛋白表达低于空白血清组、TAZ蛋白表达高于空白血清组（P <0.05）;THSWT...     

桃红四物汤对肺纤维化大鼠血清炎症因子的影响

目的:探讨桃红四物汤对肺纤维化模型大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响,探索其治疗肺纤维化的潜在机理.方法:将50只SPF级雌性大鼠随机分为空白组、模型组、甲泼尼龙组、桃红四物汤低剂量组、桃红四物汤高剂量组,除空白组外,余各组均给予气管内滴注博来霉素的方式...     

绞股蓝总皂苷干预光老化人皮肤角质形成细胞炎症分泌因子的研究

目的:研究绞股蓝总皂苷对光老化人皮肤角质形成细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:选取10只大鼠,随机分为2组,每组5只,分别设为空白血清组、绞股蓝总皂苷含药血清组,分别用以制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。应用UVB人工照射方法制备光老化人皮肤角质形成细胞模型,用含绞股蓝总皂苷的大鼠血清进行干预,12h后采用ELISA方法检测各组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。结果:与空白对照组比较,UV模型组细胞IL-1β、IL-6和TNF-α表达显著上调(P<0.01);与UV模型组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01);与空白血清组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01)。结论:绞股蓝总皂苷可抑制UV辐射人皮肤角质细胞分泌炎症因子,抑制皮肤光老化。     

光老化人真皮微血管内皮细胞模型的建立及桃红四物汤的保护作用

目的:建立人真皮微血管内皮细胞光老化模型,并观察桃红四物汤对其影响。方法:体外培养人真皮微血管内皮细胞,将其接种于96孔板中,分为UVA模型组、空白血清组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组、高剂量含药血清组5组,各组细胞接种后,培养24 h,以5 J/cm2的照射剂量对细胞进行照射,于照射后24 h在倒置光学显微镜下观察细胞损伤的形态学变化,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,评价桃红四物汤含药血清抗HDMEC细胞光老化作用。结果:与空白对照组比较,空白血清组及不同浓度桃红四物汤含药血清组细胞活性显著降低,有统计学差异(P0.01);与空白血清组比较,不同浓度的桃红四物汤含药血清组细胞增值活性均显著升高(P0.01);与低剂量含药血清组比较,中高剂量含药血清组细胞活性显著升高。结论:桃红四物汤对光老化人真皮微血管内皮细胞具有一定的保护作用。     

益气活血方介导促炎因子促进破裂型腰椎间盘突出后重吸收的机制研究

目的:通过比较益气活血方介导对趋化因子5(CCL5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)在破裂及非破裂型髓核细胞中表达的影响,探索益气活血方促进破裂型腰椎间盘突出后重吸收的机制。方法:收集破裂型与非破裂型腰椎间盘突出症患者的髓核组织各6例,采用酶消法分离细胞,放入含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养,定期用倒置相差显微镜观察细胞贴壁及生长情况。用10只3个月龄SD大鼠制备含药(益气活血方)血清及无药(生理盐水)血清,用两种血清分别培养破裂型及非破裂髓核细胞。提取两种血清体外给药后的破裂及非破裂原代髓核细胞RNA。利用实时荧光定量PCR(实时qPCR)技术分别检测体外含药血清给药培养后及非含药血清培养后的破裂及非破裂型髓核细胞中CCL5,TNF-α,IL-1βmRNA的表达,记录统计分析数据。提取含药血清及非含药血清体外给药培养后的破裂及非破裂型原代髓核细胞蛋白,利用免疫蛋白印迹(Western Blotting)技术分别检测两种血清体外给药培养后的破裂及非破裂型原代髓核细胞中CCL5,TNF-α及IL-1β蛋白的表达,记录统计分析数据。结果:CCL5,TNF-α及IL-1β在破裂型髓核中的表达明显高于非破裂型(P0.05),在破裂型含药组髓核细胞中的表达显著高于无药组(P0.05)。结论:益气活血方可提高促炎因子在破裂型髓核细胞中高表达,有利于髓核细胞的炎性反应,加速细胞外基质(ECM)的降解,从而有利于重吸收现象的发生,且破裂型髓核比非破裂型髓核更容易发生重吸收现象。     

桃红四物汤大鼠含药血清对光老化人皮肤模型成纤维细胞增殖影响与维甲酸等效性随机平行对照

[目的]观察桃红四物汤大鼠含药血清对光老化人皮肤模型成纤维细胞增殖影响与维甲酸等效性。[方法]使用随机平行对照方法,将健康雄性清洁级SD大鼠20只(体重200~250g),鼠龄4~5周使用随机数字表分为两组,10只/组;空白血清组、桃红四物汤组。使用长波紫外线照射复制光老化HSF模型。实验细胞分组:空白对照组,正常培养HSF细胞10瓶;长波紫外线照射40瓶随机分为4组,UV模型组、空白血清组、桃红四物汤血清组、维甲酸组,10瓶/组。干预培养,各组均37℃,CO2培养箱培养12h,模型组:新鲜细胞培养液5m L;桃红四物汤组:10%含药血清培养液5m L;维甲酸组:维甲酸乙酯溶液5m L;空白血清组:10%空白大鼠血清培养液5m L。连续给药干预培养12h,观测成纤维细胞增殖活性(MTT法)。[结果]成纤维细胞增殖活性各组均明显低于空白对照组(P0.01);桃红四物汤组、维甲酸组均显著高于模型组(P0.05),空白血清组与模型组无显著性差异(P0.05),桃红四物汤组与维甲酸组无显著性差异(P0.05),桃红四物汤组、维甲酸组均高于空白血清组(P0.05)。[结论]桃红四物汤、维甲酸均可提升UVA辐射体外建立光老化人皮肤模型成纤维细胞(P0.01),桃红四物汤与维甲酸具有等效性(P0.05)。     

桃红四物汤对巨噬细胞TGF-β1和 TNF-α mRNA转录的影响

目的:观察桃红四物汤含药血清对体外模拟骨坏死环境下的巨噬细胞的转化生长因子(TGF-β1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA转录水平的影响。进一步明确巨噬细胞在骨坏死修复中的机制。方法:普通级新西兰兔,雌雄各半,随机分为3组,每日ig 1 g.mL-1的桃红四物汤药液,高剂量组15 g.kg-1、低剂量组7.5 g.kg-1,对照组15 mL.kg-1的生理盐水,每日1次,连续ig 2周。U937经佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)诱导后的巨噬细胞以5×105接种于6孔板中,以坏死骨微粒制备模型组,并予以30%的含药血清干预48 h后收集细胞,RT-PCR检测各组巨噬细胞TGF-β1和TNF-αmRNA转录水平的变化。结果:桃红四物汤低、高剂量含药血清组TGF-β1mRNA的转录水平较空白血清组均趋呈现增高的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为3.366 7,高剂量为4.186 7;TNF-αmRNA的转录水平较空白血清组则呈现减弱的趋势,组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中低剂量为1.603 3,高剂量为1.356 7。结论:桃红四物汤可以提高坏死骨微粒刺激下的巨噬细胞TGF-β1mRNA水平,降低TNF-αmRNA水平,影响巨噬细胞的功能是其促进坏死骨修复的作用机制之一。     

基于LXRs/NF-κB信号通路对A型滑膜细胞的调控探讨壮骨健膝方的作用机制北大核心CSCD

目的观察壮骨健膝方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的兔A型滑膜细胞肝X受体(LXRs)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨壮骨健膝方治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法制备壮骨健膝方含药血清并采用超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC-MS/MS)进行质量控制(龙胆苦苷885 ng/mL、阿魏酸185 ng/mL)。将兔A型滑膜细胞随机分为空白组和LPS组,LPS组经LPS诱导后建立炎症细胞模型,模型鉴定成功后随机分为模型组、壮骨健膝方组、LXRα抑制剂组、核受体辅助抑制因子(N-CoR)抑制剂组,分别予以10%空白血清、10%含药血清、10%含药血清+LXRα抑制剂、10%含药血清+N-CoR抑制剂,空白组予10%空白血清干预。干预24 h后,收集各组细胞及上清液,Western Blot、RT-qPCR检测各组细胞中LXRα、N-CoR、P50、P65蛋白及m RNA的表达,ELISA检测各组上清液中IL-1β、TNF-α、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及MMP-13含量。结果与空白组比较,模型组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均升高(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达下降(P<0.01)。与模型组比较,壮骨健膝方组P50和P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达升高(P<0.01);LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01,P<0.05)。与壮骨健膝方组比较,LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组LXRα、N-CoR蛋白及mRNA表达下降(P<0.01),P50、P65蛋白及mRNA表达升高(P<0.01,P<0.05),两组IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13含量升高(P<0.01,P<0.05)。结论壮骨健膝方可通过上调LXRα和N-CoR蛋白及mRNA表达,下调P50、P65蛋白及mRNA表达,从而抑制LXRs/NF-κB信号通路的传导,减少下游炎症相关指标IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13的分泌,最终达到控制膝骨关节炎滑膜炎症反应的作用。     

芪麝颈康丸对椎间盘细胞肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6mRNA表达的影响

目的:探讨芪麝颈康丸抑制颈椎间盘退变的分子机制。方法:将48只大鼠分成4组,切除其中36只(A、B、C 3组)颈后部浅、中层肌,造成颈椎间盘退变模型,D 组为正常假手术组。分别给予芪麝颈康丸(A)及对照药颈复康(B)等药物治疗,C、D 组不给药。4个月后将动物处死,采用原位杂交方法观察分析肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA 在大鼠颈椎间盘组织中的表达规律及芪麝颈康丸对两者表达的影响,同时观察各组椎问盘退变程度的变化。结果:模型空白(C)组椎间盘退变明显,与 A、D 组比较。差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。TNF-α mRNA 阳性信号各组均在椎间盘终板有较高表达,4组程度相似。除 C 组椎间盘髓核软骨样细胞中有明显表达外,其余各组髓核中未见 TNF-α mRNA 阳性信号表达。IL-6mRNA 阳性信号零散地见于各组椎间盘终板,且数量均很少。结论:TNF-α与颈椎间盘退变关系密切,而 IL-6在椎间盘退变过程中所起作用不大。芪麝颈康丸抑制髓核细胞 TNF-α mRNA 的表达可能是其疗效机制。     

理冲生髓饮有效组分调控炎性因子对卵巢癌侵袭转移影响的研究

目的探究理冲生髓饮有效组分通过调控炎性因子对卵巢癌SKOV3细胞侵袭转移的影响。方法 (1)将32只大鼠随机分为空白组、生髓饮低剂量组、生髓饮中剂量组和生髓饮高剂量组,每组8只。生髓饮低、中、高剂量组分别给予3.76 g/(kg·d)、7.52 g/(kg·d)、11.28 g/(kg·d)理冲生髓饮灌胃,空白组给予同体积蒸馏水灌胃,均2次/d,连续7 d。末次灌胃结束2 h后眼眶取血,获得含药血清。(2)实验分为空白组、生髓饮低剂量含药血清组、生髓饮中剂量含药血清组、生髓饮高剂量含药血清组和贝伐单抗组,应用鸡胚绒毛尿囊膜血管实验观察各组血管生成情况。(3)选取在体外培养至对数生长期的人卵巢癌SKOV3细胞,分为空白组、生髓饮低剂量含药血清组、生髓饮中剂量含药血清组、生髓饮高剂量含药血清组和贝伐单抗组,除空白组外,其余组分别加入相应浓度的理冲生髓饮含药血清及5 mg/L贝伐单抗培养,应用MTT法观察各组细胞增殖情况,用Transwell小室实验以及划痕实验检测细胞的迁移和侵袭能力,应用ELISA法检测卵巢癌相关炎性因子蛋白表达水平。结果生髓饮各含药血清组及贝伐单抗组一级和二级血管数目均明显少于空白组(P均0.05),且生髓饮中剂量含药血清组和贝伐单抗组均明显少于生髓饮低、高剂量含药血清组(P均0.05);与空白组比较,生髓饮各含药血清组及贝伐单抗组SKOV3细胞迁移率和侵袭率均显著降低(P均0.05),且生髓饮中、高剂量含药血清组和贝伐单抗组均显著低于生髓饮低剂量含药血清组(P均0.05)。生髓饮各含药血清组及贝伐单抗组血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及生髓饮高剂量含药血清组、贝伐单抗组白细胞介素-1(IL-1)水平均明显低于空白组(P均0.05);生髓饮高剂量含药血清组和贝伐单抗组VEGF、IL-6、TNF-α水平均明显低于生髓饮中、低剂量含药血清组(P均0.05),各组基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论理冲生髓饮有效组分能够抑制卵巢癌SKOV3细胞的侵袭转移,其作用机制与抑制相关炎性因子的表达、影响肿瘤周围的炎性微环境有关。     

桃红四物汤对糖尿病视网膜病变引起的细胞损伤及HIF-1α表达的影响

目的 探究桃红四物汤对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)的保护作用及潜在的分子机制。方法 (1)取hRMECs,设置5组：空白对照组加5 mmol/L葡萄糖培养,高糖模型组加30 mmol/L葡萄糖培养,桃红四物汤低、中、高剂量组分别加30 mmol/L葡萄糖和相应浓度桃红四物汤含药血清培养,通过Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力,血管生成实验检测细胞的成管能力,ELISA试剂盒检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)水平,Western blot法检测细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达情况。(2)另外设置4组：空白对照组加5 mmol/L葡萄糖培养,高糖模型组加30 mmol/L葡萄糖培养,桃红四物汤组加30 mmol/L葡萄糖和高剂量桃红四物汤含药血清培养,桃红四物汤+HIF-1α过表达组采用HIF-1α过表达的hRMECs细胞加30 mmol/L葡萄糖和高剂量桃红四物汤含药血清培养,考察HIF-1α过表达对桃红四物汤的功能回复作用。结果 (1)与空白对照组比较,高糖模型组细胞侵袭和迁移能力均明显增强(P均<0.05),成管数量明显...     

补肺汤对HMGB1诱导的特发性肺纤维化相关细胞TLR2/NF-κB信号通路的影响

目的?观察补肺汤对高迁移率族蛋白B1（HMGB1）诱导的人非小细胞肺癌细胞（A549）和人肺成纤维细胞（HFL1）形态损伤、炎症反应和Toll样受体2/髓样分化蛋白88/核因子-κB（TLR2/MyD88/NF-κB）信号通路的影响。方法?使用冷冻技术制备补肺汤冻干粉，大鼠补肺汤灌胃4周后取含药血清。将A549细胞和HFL1细胞随机分为空白组、HMGB1组（HMGB1诱导）、补肺汤冻干粉预培养加HMGB1组（冻干粉组，冻干粉浓度分别为0.10%、0.15%、0.20%、0.25%、0.30%）、补肺汤含药血清预培养加HMGB1组（含药血清组，含药血清浓度分别为5%、10%、15%、20%、25%）、阳性药物组（甲泼尼松龙）及空白血清组，按照分组处理细胞。电镜下观察各组细胞形态和超微变化，ELISA法检测细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB含量，Western Blot法检测细胞中TLR2、MyD88、NF-κB蛋白表达。结果?电镜显示HMGB1组细胞形态和超微结构损伤明显，补肺汤冻干粉和含药血清能有效恢复细胞形态和超微结构损伤，且浓度越高，恢复效果越显著。与空白组比较，HMGB1组细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB含量均升高（P<0.01），TLR2、MyD88、NF-κB蛋白表达升高（P<0.01）；与HMGB1组比较，冻干粉组和含药血清组能浓度依赖性地降低细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB含量，且0.25%和0.30%冻干粉组及15%、20%和25%含药血清组含量降低（P<0.05，P<0.01）；浓度依赖性抑制TLR2、MyD88、NF-κB蛋白表达，且0.30%冻干粉组和25%含药血清组抑制作用明显（P<0.01）；补肺汤冻干粉与含药血清各浓度组间各指标比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论?补肺汤冻干粉及含药血清对HMGB1 诱导的A549和HFL1细胞损伤有保护作用，并能减轻炎性因子的释放，机制可能与下调TLR2/MyD88/NF-κB信号通路有关。     

加味桃红四物汤对大鼠心肌梗死后微环境的影响

目的 探讨加味桃红四物汤对大鼠心肌梗死后微环境的影响。方法 通过结扎左冠状动脉前降支构建大鼠心肌梗死模型，经加味桃红四物汤灌胃治疗，通过ELISA检测各组心肌组织和血清中IGF-1、SDF-1、SCF、VCAM-1、IL-1β和TNF-α的含量，免疫荧光染色检测梗死区CD31和α-SMA阳性血管数量，Western blot和qPCR检测了梗死区VEGF及其mRNA的表达情况。结果 与模型组相比，加味桃红四物汤能够明显升高心肌组织中IGF-1、SDF-1和TNF-α的含量，并显著降低IL-1β的表达；在血清中，加味桃红四物汤可明显提高IGF-1、SDF-1和SCF的表达水平；同时，加味桃红四物汤治疗能够增加大鼠心肌梗死区CD31阳性和α-SMA阳性的微血管数目，并显著升高VEGF的表达水平，差异具有统计学意义。结论 加味桃红四物汤能够改善大鼠心肌梗死后的微环境。     

三棱含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用研究

目的 研究三棱含药血清对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）损伤的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和三棱组,制备空白血清及含药血清。建立LPS诱导的HUVEC损伤模型,设置对照组、模型组、5%空白血清组和三棱含药血清（1%、3%、5%）组,采用MTT法检测三棱含药血清对细胞活力的影响;采用荧光显微镜分析各组细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）和活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;采用ELISA法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)活性和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-17、组织因子...     

右归丸方含药血清对BMSC增殖、骨向分化的干预作用研究

目的:观察右归丸含药血清对骨髓基质干细胞的骨向分化诱导作用,通过右归丸含药血清对骨髓基质干细胞Akt、mTOR磷酸化水平的影响,探讨右归丸含药血清促骨髓基质干细胞骨向分化的部分作用机制。方法:制备高中低3个剂量的右归丸大鼠含药血清,提取大鼠骨髓基质干细胞,传至第3代,将细胞随机分为5组:空白对照组、空白血清组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组、高剂量含药血清组。分别给予不同浓度血清及PBS干预24 h后,检测各组细胞中碱性磷酸酶活性、骨钙素表达水平及Akt、mTOR磷酸化水平。结果:空白对照组与空白血清组之间比较,ALP、Osteocalcin、p-Akt、p-mTOR表达水平无统计学差异(P>0.05),与空白对照组和空白血清组比较,3个剂量含药血清组细胞中ALP活性及Osteocalcin、p-Akt、p-mTOR表达水平均不同程度提高(P>0.01),但中剂量和高剂量含药血清组ALP活性及Osteocalcin、p-Akt、p-mTOR表达水平均无显著性差异(P>0.05)。结论:右归丸含药血清具有一定的促进骨髓基质干细胞骨向分化的作用,该作用可能是通过提高Akt、mTOR的磷酸化水平而实现的。     

麝香乌龙丸对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞微RNAs及相关炎症细胞因子的影响

目的观察麝香乌龙丸含药血清对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中微RNA(miRNA)-181a、miRNA-16、miRNA-18a表达水平及细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素1β(IL-1β)的影响。方法将6只SPF级SD大鼠按照随机数字表法分为2组,每组3只。麝香乌龙丸组予麝香乌龙丸水溶剂10 mL/kg(浓度200 mg/mL)灌胃,对照组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,每日1次。连续灌胃15 d,腹主动脉取血后离心取血清备用;采集30例首次确诊且未经过抗风湿治疗RA患者的新鲜抗凝血液,每个血液标本均分离出PBMCs,将其分为空白对照组、空白血清组、麝香乌龙丸含药血清组,空白对照组每孔仅加入培养基100μL,空白血清组每孔分别加入空白血清10μL、培养基90μL,麝香乌龙丸含药血清组每孔分别加入麝香乌龙丸含药血清10μL、培养基90μL。相同条件下培养48 h后提取总RNA,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组PBMCs中miRNA-181a、miRNA-16及miRNA-18a的表达水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞培养液中TNF-α、IFN-γ及IL-1β的水平。结果空白血清组与空白对照组细胞培养液中TNF-α、IFN-γ及IL-1β水平比较差异无统计学意义(P0.05);与空白对照组、空白血清组比较,麝香乌龙丸含药血清组细胞培养液中TNF-α、IFN-γ和IL-1β水平均降低(P0.05)。空白血清组与空白对照组PBMCs中miRNA-181a、miRNA-16及miRNA-18a表达比较差异无统计学意义(P0.05);与空白血清组、空白对照组比较,麝香乌龙丸含药血清组miRNA-181a和miRNA-16表达均上调(P0.05),miRNA-18a表达下调(P0.05)。结论麝香乌龙丸治疗RA的机制与其能上调RA患者PBMCs中miRNA-181a和miRNA-16表达,下调miRNA-18a表达,调控细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-1β的分泌有关。     

桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:研究桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·mL-1),每天2次,按10 mL·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清.MTT法考察桃红四物汤含药血清(终浓度为5％,10％,15％)预处理对H2O2诱导细胞活力减少的作用;显微镜观察细胞形态学变化;以丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及AO/EB染色考察桃红四物汤含药血清对HUVECs凋亡及抗氧化能力的影响;Western blot法检测细胞Caspase-3的表达.结果:与空白血清对照组比较,经400 μmol·L-1H2O2刺激后细胞活性显著降低,含药血清组可显著提高SOD活力、降低MDA和LDH含量,并抑制Caspase-3表达.AO/EB染色及相差倒置显微镜也观察到桃红四物汤含药血清能降低H2O2诱导的细胞凋亡.结论:桃红四物汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用.