南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响

目的观察南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响,探讨南星骨痛凝胶贴膏治疗兔膝骨关节炎可能的作用机制。方法 18只健康6月龄新西兰兔随机分成3组:空白组(A组)、模型组(B组)、骨痛膏治疗组(C组). BC组用3%木瓜蛋白酶关节腔内注射造模后C组给予南星骨痛凝胶贴膏外敷,给药4周后,用Aloka Latheta LCT-200观察兔膝骨关节影像学改变、用ELISA法检测血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1含量。结果 C组兔膝关节病变程度较B组轻,C组兔血清中IL-1、TNF-α、MMP-13含量较B组降低(P<0. 05),TIMP-1含量较B组升高(P <0. 05)。结论南星骨痛凝胶贴膏能减轻兔膝关节骨关节炎病变程度,对关节软骨有保护作用,其作用机制可能与抑制炎症因子IL-1、TNF-α及MMP-13表达,增加TIMP-1表达有关。     

基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响

目的基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响。方法以改良Hulth法制备兔KOA模型。将36只新西兰兔随机分为正常组、模型组、阳性对照组(扶他林软膏)及散寒化痰方低、中、高剂量组,每组6只,外敷给药6周。HE染色、MASSON染色法及电镜分别观察家兔膝关节软骨组织形态学及软骨细胞超微结构变化;ELISA法测兔血清IL-1β、TNF-α水平;Western blot及RT-PCR检测MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5、CollagenⅡ蛋白及mRNA表达;免疫组化法检测NF-κB p65入核表达。结果与正常组比较,模型组兔膝关节软骨细胞结构破坏严重;血清IL-1β、TNF-α水平上升(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达上调(P0.05,P0.01),CollagenⅡ蛋白及mRNA表达下调(P0.01),NF-κB p65入核表达升高(P0.05)。与模型组比较,散寒化痰方各剂量组兔膝关节软骨细胞结构仅轻度损伤,血清IL-1β、TNF-α水平降低(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达下调(P0.05,P0.01),NF-κB p65入核表达降低(P0.05,P0.01);散寒化痰方低、高剂量组兔膝关节软骨组织中CollagenⅡ蛋白及mRNA表达均上调(P0.05,P0.01)。结论散寒化痰方可能通过抑制膝关节软骨细胞NF-κB p65入核表达,阻止NF-κB信号通路激活,下调MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5及上调CollagenⅡ表达,抑制兔血清IL-1β、TNF-α水平升高,进而保护膝骨关节软组织,延缓KOA发生与发展。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阳和汤对兔膝骨关节炎的影响

目的基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阳和汤对兔膝骨关节炎模型的作用机制。方法将4～6月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、西乐葆组和阳和汤组,每组6只。除空白组外,其余各组膝关节腔内注射木瓜蛋白酶造模。造模成功后,阳和汤组予阳和汤灌胃,西乐葆组予西乐葆灌胃,空白组和模型组予生理盐水灌胃,每日1次,连续给药2周。灌胃前后分别测量4组兔膝关节皮温、周径,进行膝关节Lequesne MG评分。停药1周后采集标本,ELISA法检测关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13含量;光镜下观察关节软骨病理改变并进行Mankin's评分;免疫组化检测软骨组织Wnt4、β-catenin表达情况。结果与空白组比较,模型组膝关节皮温、周径和Lequesne MG评分,关节软骨病理切片Mankin's评分及Wnt4、β-catenin表达,关节液IL-1β、TNF-α、MMP-13含量均明显升高(P0.05);与模型组比较,阳和汤组膝关节周径、Lequesne MG评分,软骨病理切片Mankin's评分及Wnt4、β-catenin表达,关节液IL-1β、TNF-α、MMP-13含量均明显降低(P0.05)。结论阳和汤能抑制骨关节炎炎症反应,修复软骨损伤,其机制可能与降低炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路和改善MMP-13有关。     

牛膝总皂苷对兔膝骨关节炎软骨组织形态变化及关节液中IL-1β、TGF-β1含量的影响

目的：观察牛膝总皂苷对兔膝骨关节炎软骨组织形态变化及关节液中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和转化生长因子β1(TGF-β1)含量的影响。方法：将36只新西兰兔,随机分为空白组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组(60 mg?kg-1)、牛膝总皂苷高中低(200,100, 50 mg?kg-1)剂量组。采用改良Hulth法复制兔膝骨关节炎模型。药物干预2个月后,采用ELISA法检测各组兔膝关节液中IL-1β、TGF-β1的水平,分别于光镜及透射电镜下观察各组兔关节软骨的组织形态学变化。结果：与空白组比较,模型组兔膝关节液中IL-1β的含量明显增高(P<0.05),TGF-β1的含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组IL-1β的含量明显降低(P<0.05),TGF-β1的含量显著增高(P<0.05)。光镜下观察关节软骨组织形态变化,结果表明TSA呈剂量依赖的抑制了软骨组织的退变。各组兔KOA软骨组织结构Mankin评分的结果表明,与空白组比较,模型组评分明显增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组评分明显减小(P<0.05)。透射电镜下观察关节软骨细胞形态学变化,结果表明TSA具有呈剂量依赖的保护软骨细胞的作用。结论：TSA能抑制细胞因子IL-1β的表达,提高转化生长因子TGF-β1的表达,具有保护软骨组织缓解软骨退变的作用。     

威灵仙脂质体对兔膝骨关节炎的治疗作用及机制

目的:观察威灵仙脂质体乳膏对免膝骨关节炎关节液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量及关节形态学的影响.方法:将32只白兔随机分为正常组8只和造模组24只,造模组采用关节腔内注射木瓜蛋白酶法建立OA模型,成模后随机分为模型组、威灵仙脂质体乳膏组和扶他林乳膏组,每组8只.采取膝关节处涂抹乳膏的方法治疗8周.治疗结束后收集关节液及关节软骨标本,用放免法检测关节液中TNF-α、IL-1β的含量.观察兔膝骨关节组织病理学变化,并用Colombo评分比较各组差异.结果:威灵仙脂质体组关节液中TNF-α、IL-1含量以及关节软骨Colombo病理学评分显著降低(与模型组比,P＜0.01),光镜下其软骨结构保存基本完整,表面溃疡糜烂较轻微,软骨细胞破坏不严重,电镜下细胞膜及细胞核基本完整,内质网病变较轻.结论:威灵仙脂质体能抑制骨关节炎免关节液中TNF-α、IL-1β的产生,对兔膝OA的损伤软骨具有较好的修复作用.     

益肾方对兔膝骨关节炎模型关节滑液中TNF-α、IL-1β水平的影响

目的：探讨益肾方对膝骨关节炎关节滑液中TNF-α、IL-1β的影响。方法：对兔造模膝骨关节炎，观察益肾方对兔膝骨关节炎模型滑液中TNF-α、IL-1β的影响，并与模型组和空白对照组进行了对比。结果：中药组兔膝关节冲洗液IL-1β、TNF-α浓度明显降低，与模型组相比有显著性差异（P〈o．05），与空白组比较无明显差异；模型组兔膝关节冲洗液IL-1β、TNF-α浓度与空白组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论：表明益肾方对兔膝骨关节炎模型关节滑液TNF-α、IL-1β的水平有下调作用。     

模拟按压手法对兔膝骨关节炎治疗作用的实验研究

目的探讨推拿手法对兔膝骨关节炎的治疗作用及机制。方法将36只健康新西兰大白兔随机分为6组,每组6只,即正常组、模型组和治疗组(根据治疗手法不同再分成4组);除正常组外,其余30只实验兔采用髌韧带缺损术建立膝骨关节炎模型,8周后对治疗组实验免进行治疗,隔天治疗1次,连续治疗6周;对照组不做任何治疗。6周后,检测各组实验兔血清中TNF-α、MMP-13水平,膝关节软骨标本经HE、番红O及甲苯胺蓝染色后光镜下观察病理组织学改变,并用免疫组化检测软骨细胞整合素α1β1的表达。结果①组织形态学:治疗组与模型组比较,软骨细胞簇集和基质失染现象有减轻趋势,但未达到正常组水平;②各治疗组与模型组比较,Mankin评分及血清TNF-α、MMP-13水平差异有统计学意义(P<0.05),治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);③治疗组与模型组整合素α1β1表达无明显差异,但均较正常组表达高。结论软骨组织形态学及血清学检测显示,按压手法通过改变关节内应力环境,调节TNF-α、MMP-13和整合素α1β1的表达来抑制软骨细胞的凋亡,刺激软骨的组织与再生,促进软骨细胞外基质的代谢,从而起到抑制关节软骨退变的作用。     

针刀对膝骨性关节炎兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖相关蛋白表达的影响

目的:观察针刀对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)相关蛋白表达的影响,探讨针刀治疗KOA的相关机制。方法:新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组和电针组,每组10只,以左后肢伸直位固定制动法制备KOA模型。针刀组以膝关节内、外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏横剥法进行针刀松解,每周1次,共治疗3周;电针组电针左后肢"阴陵泉""阳陵泉""内膝眼""外膝眼",每次20min,每周治疗3次,共3周。X线观察膝关节影像学改变,光镜观察关节软骨形态学改变,Western blot法分别检测膝关节整合素β1(Integrinβ1)、Col-Ⅱ、基质金属蛋白酶3(MMP-3)及Aggrecan的蛋白表达水平。结果:X线结果显示,造模后,模型制备成功,关节病损情况属于早中期膝骨关节炎。光镜结果显示,模型组关节软骨层表面粗糙不平,表层软骨细胞稀少,细胞排列紊乱,部分软骨细胞坏死,潮线模糊或扭曲不完整,部分软骨有血管通过或血管翳生成,电针组及针刀组关节软骨组织结构均较模型组明显改善,针刀组较电针组改善更明显。Mankin评分比较,模型组较空白组明显升高(P0.01),针刀组较模型组明显降低(P0.01)。Western blot结果显示,模型组膝关节组织中Integrinβ1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较空白组显著降低(P0.01),MMP-3蛋白表达显著升高(P0.01);针刀组Integrinβ1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较模型组显著升高(P0.01,P0.05),MMP-3蛋白表达较模型组显著降低(P0.01);电针组Integrinβ1蛋白表达较模型组明显升高(P0.05),其它指标与模型组的差异均无统计学意义(P0.05)。结论:针刀可能通过对软骨力学环境的影响,激活整合素力学信号转导通路,促进细胞外基质Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达,下调MMP-3的蛋白表达水平,阻抑软骨细胞外基质的降解,延缓软骨损伤与关节退变程度,达到治疗KOA的目的。     

针灸治疗膝骨性关节炎的分子生物学机制研究概况

膝骨性关节炎（KOA）是一种以膝关节软骨的变性、破坏及为主要特征,并累及骨质、滑膜、关节及关节周围结构的慢性病.目前针灸是防治膝骨性关节炎的一种重要手段,故研究者多将研究方向转向其治疗机制.1 针灸对细胞因子的影响丘德兴[1]通过对膝骨性关节炎白兔分组进行针刺、电针及温针治疗的实验,发现3种疗法均能降低关节腔内白介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量.由此考虑针灸疗法通过降低IL-1β及TNF-α的表达来减少前列腺素E2（PGE2）的合成、降低滑膜炎症、软骨细胞变性和骨的吸收,改善关节软骨生存的微环境,延缓软骨退变.李赛波等[2]发现电针治疗可以降低大鼠关节软骨IL-1β-mRNA的含量,认为电针可以通过抑制关节软骨组织IL-1β在分泌与转录水平的表达而缓解膝关节软骨组织退变,从而有效治疗膝骨性关节炎.吴耀持[3]研究发现电针可下调大鼠转化生长因子β1（TGF-β1）的含量及其受体含量来改善模型鼠的骨关节.吴冬[4]发现艾灸能下调过高的TGF-β1水平以此降低软骨Ⅰ型胶原的合成,延缓骨关节炎关节软骨退变.王玉[5]的研究表明艾灸治疗可下调膝关节OA软骨中过高的TGF-β1.TGF-β3水平,从而减少骨赘的形成.     

蚁龙通痹汤改善兔膝骨关节炎软骨组织骨生物力学的炎症机制

目的:观察蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎病理形态的影响,探讨其治疗骨关节炎可能的作用机制.方法:将40只日本雄性大耳白兔按体重分为4组,即正常组,模型组、蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组,每组10只.除正常组外,其余各组均行右侧膝关节前交叉韧带切断建立骨关节炎病变模型.造模后第2天开始给药(葡立胶囊0.1 g·kg-1,蚁龙通痹汤生药0.6g·kg -,ig每日1次),连续4周.观察各组兔膝关节软骨及滑膜组织病理形态学改变,测定关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β含量以及软骨下骨生物力学检测,并分析软骨.中基质金属蛋自酶(MMP)-1、组织金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)的表达情况.结果:与模型组比较,蚁龙通痹汤组动物关节液IL-1β和.TNF-α含量、软骨MMP-1和TIMP-1表达率、关节外在表现和软骨病理组织学变化,以及软骨最大载荷和弹性模量均出现明显差异改善.结论:蚁龙通痹汤能够减少兔膝骨关节炎关节液IL-1β和TNF-α的分泌,改善MMP-1和TIMP-1在软骨组织细胞中表达的平衡而达到对软骨组织保护的作用.     

消定膏对膝骨关节炎IL-1β、TNF-α的影响

目的:探讨消定膏治疗膝骨关节炎的机制。方法:将膝骨关节炎106例分为2组各53例,治疗组给予消定膏治疗,对照组给予奇正消痛贴膏治疗,疗程2周。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测膝关节液标本中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:治疗前以及治疗后2组间IL-1β、TNF-α比较,差异无统计学意义(P0.05)。经治疗,2组关节液IL-1β、TNF-α浓度均下降(P0.05)。结论:消定膏可能是通过降低关节液中IL-1β、TNF-α的含量来发挥对膝骨关节炎的治疗作用。     

灌胃凤凰衣水解物对膝骨关节炎模型大鼠影响的实验研究

目的：观察灌胃凤凰衣水解物对膝骨关节炎大鼠膝关节的影响,进而考察凤凰衣用于防治OA的合理性及可行性。方法：灌胃凤凰衣水解物及奥泰灵胶囊干预膝骨关节炎大鼠,观察软骨形态及软骨中Collagen-Ⅱ、MMP-β及蛋白多糖的指标变化,以及血清和关节液中IL-6,IL—1β,TNF-α的指标变化。结果：1．各用药组对降低膝骨关节炎大鼠血清IL10、IL-6、TNF-a表达,关节液中TNF-a的表达以及软骨中MMP-3表达,升高Collagen-Ⅱ的表达看,两用药组未见明显差异（P〉0．05）,但均优于模型组（P〈0．01）;2．在提高蛋白多糖含量及降低关节液中IL-6的表达方面,灌胃凤凰衣组优于灌胃奥泰灵组（Pd0．01）;3．在降低关节液中IL-1β的表达方面,灌胃奥泰灵组优于灌胃凤凰衣组（P（0．01）。结论：1．灌胃凤凰衣水解物能降低膝骨关节炎大鼠的炎症因子表达,提高关节软骨中蛋白多糖和Collagen-Ⅱ含量;2．凤凰衣中含有丰富的可以合成软骨基质中蛋白多糖的前体物质,是其改善0A指标的机制之一。     

跌打通痹膏对兔膝骨关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响

目的:研究跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响,探讨跌打通痹膏干预软骨基质降解的作用机制。方法:新西兰兔60只随机分成空白组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组12只。空白组不做任何处理,模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组采用改良Hulth造模法,假手术组打开关节腔后不做处理,直接缝合。正常组、假手术组不予处理,模型组、跌打通痹膏组、骨痛贴组分别用胶带、跌打通痹膏、骨痛贴膏贴敷治疗4周。术后第5周各组随机选择1只兔处死验证造模,进行膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察,检测关节软骨中MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达。结果:1)膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察:模型组与空白组有差异,跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较有差异,跌打通痹膏组与骨通贴组比较无差异。2)MMP-1,MMP-3,MMP-13和COL-Ⅱ的mRNA表达检测:模型组与空白组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著提高,差异有统计学意义(P0.01),COL-ⅡmRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01);跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01),COL-ⅡmRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P0.05);跌打通痹膏组与骨通贴组比较,MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:1)跌打通痹膏和骨通贴对KOA均有治疗作用,可延缓KOA的病程,且两者间差异无统计学意义。2)跌打通痹膏通过抑制MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达,减缓COL-Ⅱ降解,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,延缓关节软骨退变。     

补肾活血汤对膝骨关节炎及关节液细胞因子影响的研究

目的：探讨补肾活血汤治疗膝骨关节炎的疗效及其对关节液细胞因子的影响。方法：符合纳入标;住的肾虚血瘀型膝骨关节炎患者80例,随机分为补肾活血汤组和塞来昔布组,每组40例,通过VAS评分、Lysholm评分进行疗效评价;采集补肾活血组关节液,检测IL-1β、TNF-α、TGF-β1水平并进行统计学分析。结果：两组VAS评分无明显差异、Lysholm评分有显著差异;补肾活血组关节液IL-1β、TNF-α、TGF-β1含量前后对比具有显著差异。结论：补肾活血汤治疗膝骨关节炎疗效显著,这可能与其调节关节液IL-1β、TNF-α、TGF-β1的水平相关。     

电针结合运动康复训练对兔膝关节软骨损伤模型关节液中IL-1β、TNF-α表达的影响

目的:观察电针结合运动康复训练对兔膝关节软骨损伤模型关节液中IL-1β、TNF-α表达的影响。方法:按照随机数字表法将24只雄性新西兰大耳白兔随机分为空白对照组、模型组、运动康复组及电针结合运动康复组,每组6只。空白对照组不予任何处理,模型组进行兔膝关节软骨损伤模型制备,运动康复组在模型制备后给予电动跑台训练,电针结合运动康复组在运动康复组基础上增加电针治疗。治疗4周后,各组兔膝关节软骨进行大体观察及HE染色,并采用Elisa法检测关节液中IL-1β、TNF-α的含量。结果:治疗4周后,与空白对照组比较,模型组兔膝关节软骨损伤明显,存在明显炎性细胞浸润现象,关节液中IL-1β、TNF-α的含量明显升高(P0.05);与模型组比较,运动康复组和电针结合运动康复组兔膝关节软骨损伤得以改善,炎性细胞浸润现象有所缓解,关节液中IL-1β、TNF-α的含量均明显减少(P0.05);与运动康复组比较,电针结合运动康复组兔膝关节软骨损伤程度进一步降低,膝关节液中IL-1β、TNF-α的含量有所下降(P0.05)。结论:4周的电针结合运动康复训练可明显降低兔膝关节软骨损伤模型关节液中IL-1β、TNF-α的含量,改善关节软骨的病理性损伤,疗效优于单纯运动康复训练。     

蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡调控基因表达的影响

目的:观察蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎病理形态及软骨细胞凋亡和凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax的影响,探讨其治疗骨关节炎可能的作用机制.方法:将40只日本雄性大耳白兔按体重分为4组,即正常组,模型组、蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组,每组10只.除正常组外,其余各组均行右侧膝关节前交叉韧带切断建立骨关节炎病变模型.造模后第2天开始给药(葡立胶囊0.1g·kg-1· d-1,蚁龙通痹汤生药0.6 g·kg-1.d-1,溶于10 mL生理盐水中灌胃,每日1次),连续4周.观察各组兔膝关节软骨及滑膜组织病理形态学改变,测定关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β含量,并用TUNEL法检测软骨细胞凋亡,分析软骨中凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax表达情况.结果:与正常组比较,模型组动物关节液IL-1β和TNF-α含量、软骨细胞凋亡率、Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax、关节外在表现和软骨病理组织学均出现明显变化;与模型组比较,蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组各项指标均有明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05).蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:蚁龙通痹汤能够减少兔膝骨关节炎关节液IL-1β和TNF-α的分泌,显著降低软骨细胞凋亡率,提高Bcl-2/Bax而达到对软骨组织保护的作用.     

通络治痹汤对兔膝骨关节炎软骨形态改变和炎症因子IL-1β、TNF-α水平的影响

目的:探析通络治痹汤对关节软骨修复及生理功能恢复的影响。方法:成年新西兰白兔24只,按随机数字表法分为假手术组(A组)、模型组(B组)、藤黄健骨丸组(C组)和通络治痹汤组(D组)。通过改良Hulth法构建兔膝骨关节炎模型,分组喂养及药物灌胃8周后,收集兔血清、关节液及右侧膝关节。采用Lequesne MG膝关节评估级别评测实验兔活动能力,通过大体观察及HE染色观察膝关节软骨形态学改变,ELISA法检测IL-1β、TNF-α水平。结果:与A组对比,B、C、D组Lequesne MG评分、Mankin’s评分及IL-1β、TNF-α水平均显著升高;与B组比较,C组与D组的Lequesne MG评分及Mankin’s评分明显降低,大体观察及HE染色可见软骨表面更加光滑、软骨细胞排列更加有序等,IL-1β、TNF-α水平明显下降。结论:通络治痹汤可促进软骨修复,改善关节生理功能,其作用机制可能与修复软骨、抑制炎症反应有关。     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔膝关节软骨应力变化的影响

目的：观察针刀对膝骨关节炎（KOA）兔膝关节软骨退变、膝关节整体应力、关节软骨应力变化以及肿瘤坏死因子-ɑ（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的影响,探讨其治疗KOA的作用机制。方法：将28只兔随机分为空白组、模型组、电针组、针刀组,每组7只。除空白组均进行6周兔左后肢制动,建立兔KOA模型,电针组、针刀组均干预3周。采用苏木精-伊红（HE）法光镜下观察兔软骨病理改变,并评价软骨退变程度;运用有限元技术模拟KOA模型兔膝关节屈曲60°进行检测,观察膝关节整体应力及关节软骨最大应力变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测滑液中TNF-α、IL-1β表达水平。结果：与空白组比较,模型组Mankin评分升高(P<0.05）,膝关节整体应力、关节软骨最大应力显著降低（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P<0.01）;干预后,与模型组比较,电针组、针刀组Mankin评分均显著降低(P<0.05),膝关节整体应力、关节软骨最大应力均升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β水平均明显降低(P<0.01）;与电针组比较,针刀组Mankin评分降低(P<0.05),膝关节整体应力和关节软骨最大应力较电针组升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β水平较电针组显著降低(P<0.01）。结论：针刀干预能够调节膝关节整体应力及关节软骨的最大应力,进而恢复膝关节应力环境、抑制炎症介质释放,从而改善关节软骨退变,达到治疗KOA的目的。     

鹿角壮骨胶囊联合盐酸氨基葡萄糖片治疗早中期膝骨性关节炎临床观察

目的:探讨鹿角壮骨胶囊联合盐酸氨基葡萄糖片治疗早中期膝骨性关节炎的临床疗效及安全性。方法:100例膝骨性关节炎随机分为对照组及观察组。对照组口服盐酸氨基葡萄糖片,480 mg/d,3次/d。连用8周。观察组在对照组治疗的基础上给予口服鹿角壮骨胶囊,3粒/次,3次/d,连用8周。观察两组治疗前后膝关节疼痛评分、肿胀评分、功能评分、骨关节炎指数评分、膝关节液IL-1β、TNF-α、MMP-3、TIMP-1表达水平,记录不良反应发生情况。结果:治疗后,两组患者膝关节疼痛、肿胀、功能及骨关节炎指数评分、膝关节液IL-1β、TNF-α、MMP-3表达水平均显著低于治疗前,且观察组低于对照组(P0.01);两组患者膝关节液TIMP-1表达水平显著高于治疗前,且观察组高于对照组(P0.01)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:鹿角壮骨胶囊联合盐酸氨基葡萄糖片治疗早中期膝骨性关节炎疗效和安全性均好。可降低膝关节液IL-1β、TNF-α和MMP-3表达水平,提高TIMP-1的表达,有效保护关节组织。     

壮骨健膝方含药血清中药物成分骨碎补柚皮苷对IL-1β诱导兔退变软骨细胞“caveolin-p38MAPK”信号通路的影响

目的观察壮骨健膝方含药血清中药物成分骨碎补柚皮苷(简称柚皮苷)对IL-1β诱导退变软骨细胞中"caveolin-p38MAPK"通路相关信号因子小窝蛋白-1(caveolin-1)、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化核转录因子-2(p-ATF-2)、IL-1β及TNF-α等的影响,进一步探讨该方保护关节软骨的机制。方法 (1)通过高效液相-飞行时间质谱联用(HPLC-TOF/MS)技术分析并获得壮骨健膝方含药血清中的原组方药物成分柚皮苷;(2)取4周龄新西兰兔双侧膝关节软骨,建立兔关节软骨细胞体外培养体系,取第二代软骨细胞用于后续实验。MTT法检测柚皮苷对软骨细胞增殖的影响;免疫组化方法检测柚皮苷对IL-1β诱导后的软骨细胞中Ⅱ型胶原表达的影响;Western blot法检测柚皮苷对IL-1β诱导后软骨细胞中caveolin-1、pp38与p-ATF-2蛋白表达的影响;RT-PCR检测柚皮苷对IL-1β诱导后软骨细胞中IL-1β及TNF-αmRNA表达的影响。结果 (1)柚皮苷标准品溶液及壮骨健膝方含药血清离子流图中柚皮苷的出峰时间均为23.5 min,分子量均在581.0~581.5 m/z之间;(2)柚皮苷能促进软骨细胞的增殖,抑制IL-1β对软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响;(3)与模型组比较,柚皮苷能降低IL-1β诱导后软骨细胞中caveolin-1、p-p38、p-ATF-2等蛋白及IL-1β、TNF-αmRNA的表达(P<0.05),并接近正常组水平。结论壮骨健膝方含药血清中原组方药物成分柚皮苷不仅能够促进软骨细胞的增殖,还可保护软骨细胞的功能,其机制可能与柚皮苷降低诱导退变软骨细胞中caveolin-1、p-p38与p-ATF-2的表达,抑制"caveolin-p38MAPK"通路的活动,进而减少通路下游IL-1β及TNF-αmRNA表达有关。