一测多评法在玄参药材质量控制中的应用

目的建立玄参药材中哈巴苷、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸5种成分的一测多评法,验证该法在玄参质量评价中的准确性和可行性。方法以哈巴苷为内参物,分别建立肉桂酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷的相对校正因子(f),并计算其含量,实现一测多评。与外标法所得结果进行比较,对一测多评价法的可行性进行验证。结果建立的相对校正因子分别为f_(哈巴苷/肉桂酸)=0.060(RSD=0.81%)、f_(哈巴苷/类叶升麻苷)=0.068(RSD=0.53%)、f_(哈巴苷/安格洛苷C)=0.197(RSD=1.82%)、f_(哈巴苷/哈巴俄苷)=0.142(RSD=1.17%),差异性较小;25批玄参中肉桂酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷含量的实测值与计算值无显著差异。结论一测多评法控制玄参药材的质量是准确、可行的。     

HPLC-UV波长转换法测定玄参药材及饮片中哈巴苷与哈巴俄苷的含量

目的:建立同时测定中药玄参中哈巴苷与哈巴俄苷的HPLC-UV双波长含量测定方法,考察炮制对2种成分含量的影响,提出玄参药材和饮片中哈巴苷和哈巴俄苷的含量限度建议.方法:应用Agilent Technologies ZORBAX SB- C18 (4.6mm× 250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.03％磷酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温为25℃,采用双波长检测13 min前用210 nm,13 min以后用280 nm作为检测波长.结果:哈巴苷和哈巴俄苷能够达到很好的分离.哈巴苷线性范围为0.0549～1.46 μg;哈巴俄苷线性范围为0.022 5 ～0.900 μg.哈巴苷与哈巴俄苷平均回收率分别为98.1％,RSD2.4％(n=9);98.8％,RSD 4.3％ (n =9).10批玄参商品药材中含量哈巴苷为0.277％～0.620％,哈巴俄苷为0.078％～0.362％;10批玄参商品饮片中含量哈巴苷为0.276％～1.059％,哈巴俄苷为0.059％～0.183％;即哈巴苷平均含量玄参饮片(0.567％)高于药材(0.448％),哈巴俄苷平均含量饮片(0.128％)低于药材(0.237％).而同批次玄参药材在自制加工成饮片后哈巴苷含量值升高13.7％～ 96.0％,哈巴俄苷含量值降低11.0％～ 73.9％.结论:所建立的含量方法操作简便,结果准确,可用于玄参质量控制.玄参药材加工成饮片的过程可使哈巴苷含量值升高、哈巴俄苷含量值降低.建议玄参药材及饮片均以其中哈巴苷和哈巴俄苷总含量以干燥品计算应不低于0.45％为质量标准.     

玄参药材等级质量研究

目的建立薄层色谱法、高效液相色谱(HPLC)法对玄参中多种苷类成分进行同时检测,为简便快速评价玄参药材质量提供参考依据。方法建立薄层色谱法对玄参药材的质量进行初步评价;采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)法检测苷类成分含量,WatersSymmetry-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;柱温:25℃;以乙腈(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱;流速1.0 mL·min~(-1);检测波长分别为:哈巴苷、桃叶珊瑚苷和麦角甾苷为206 nm,哈巴俄苷为280 nm,安格洛苷C为320 nm。结果供试品的薄层色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。HPLC法测定的20批次玄参药材中,除麦角甾苷外其他主要苷类成分基本能稳定存在,但含量差异较大;通过对几种苷类成分的总量进行对比分析发现,道地药材浙玄参具有较明显优势,湖南新邵基地的玄参药材中苷类成分总量具有较高的一致性,提示作为玄参生产基地,湖南新邵生产的玄参药材质量较稳定。结论所建立的薄层色谱法和HPLC法能快速对玄参中多种苷类成分进行鉴定和含量测定,可为玄参药材等级标准的制定提供参考。     

HPLC测定中药材玄参中有效成分的含量分析

[目的]建立高效液相色谱法(HLPC)测定中药材玄参中5种有效成分的含量,为玄参药材的质量控制提供依据。[方法]采用高效液相色谱法(HLPC)法,测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C的含量。[结果]不同产地小儿中药材玄参中有效成分的含量不同,以浙江产玄参药材中5种成分的含量较高,而河南、山东产玄参药材有效成分的含量较低。[结论]应用HLPC测定不同产地中药材玄参中有效成分的含量,其方法准确可靠,重现性、专属性均较好,可用于中药材玄参的质量控制。     

近红外光谱法快速测定玄参中4种成分

目的:建立玄参中哈巴俄苷、肉桂酸、毛蕊花糖苷及安格洛苷C含量快速测定近红外光谱定量的模型。方法:以高效液相色谱法(HPLC)检测值作为参照,采用傅里叶变换近红外漫反射光谱技术采集玄参的近红外光谱,结合偏最小二乘法(PLS)分别建立哈巴俄苷、肉桂酸、毛蕊花糖苷及安格洛苷C含量的快速测定方法。结果:玄参中哈巴俄苷、肉桂酸、毛蕊花糖苷及安格洛苷C的校正模型相关系数(R)、校正均方差(root mean square error of calibration,RMSEC)、预测均方差(root mean square error of prediction,RMSEP)分别为0.967 05、0.0101、0.025 32;0.961 76、0.0141、0.024 43;0.998 53、0.008 89、0.027 32;0.961 34、0.0189、0.021 91。通过外部验证,玄参中四种成分的预测值与真实值相关系数分别达为0.984 2(哈巴俄苷)、0.9960(肉桂酸)、0.9994(毛蕊花糖苷)、0.9939(安格洛苷)。结论:该方法准确、快速、简便,可实现大批量样品的快速分析。     

决明子萘并吡喃酮类对照提取物研究及其在决明子药材质量控制中的应用

建立以决明子萘并吡喃酮类对照提取物为对照的决明子药材质量控制方法,探讨对照提取物在中药质量控制中应用的可行性。采用色谱分离技术制备决明子萘并吡喃酮类对照提取物,以决明子苷B_2、红镰霉素-6-O-β-D-龙胆二糖苷及决明子苷C对照品为对照,对决明子萘并吡喃酮类对照提取物进行标定。以已知含量的对照提取物为对照,建立决明子药材HPLC含量测定方法,并与以对照品为对照的含量测定结果进行比较,结果表明,2种含量测定方法无显著差异。该结果为决明子萘并吡喃酮类对照提取物在决明子药材质量控制中的应用提供科学依据,为中药对照提取物替代单一对照品进行中药质量控制奠定基础,为中药质量控制提供新的研究思路和模式。     

HPLC同时测定玄参中5种成分的含量

目的:建立同时测定玄参药材中哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C含量的高效液相色谱方法.方法:采用Agilent SB-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相乙腈-0.03%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1 mL·min-1;检测波长210,280,330 mm;柱温30℃.结果:哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C的线性范围分别为50～400,1～40,1～20,0.5～4.5,1～60 mg·L-1;哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C的回收率分别为101%(RSD 0.62%),102%(RSD 0.32%),98.8%(RSD 0.48%),99.9%(RSD 1.4%),99.2%(RSD 1.1%).结论:该方法简便快速,分离效果好,灵敏度高,重现性好,可为全面控制玄参质量提供参考.     

不同配方肥对玄参产量及品质的影响研究

采用高效液相色谱法,以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相,在210nm波长条件下,同时测定了不同施肥配方的玄参药材中梓醇、桃叶珊瑚苷、哈巴苷、栀子苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸7种有效成分的含量,玄参中上述7种有效成分均具有较高含量,可作为玄参质量评价指标。田间实验表明,9种配方肥的每公顷产量均高于复合肥处理,显著高于空白处理(P0.05),9种配方肥均可以在生产中推广使用。本研究采用药效成分产量的方法对不同施肥处理对玄参药材质量的影响进行统一评估,配方肥4为最优配方。     

玄参提取物化学成分及其大鼠血浆移行成分的LC-LTQ-Orbitrap分析

运用HPLC-LTQ-Orbitrap技术,分析玄参提取物体外化学成分及给药后大鼠血中移行成分。采用Venusil MP C18色谱柱梯度洗脱进行分离,负离子模式下采集谱图。通过与文献及部分对照品比对,综合分析总离子流色谱图、提取离子流图以及质谱图等信息,对玄参提取物的化学成分及其血中移行成分进行定性研究。共推断出玄参提取物中37个化学成分,其中12个环烯醚萜苷类成分,20个苯丙素类成分,5个未知成分;确定哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C均以原型入血,并推测出其他2个原型成分及2个代谢产物。该研究能够为阐明玄参的药效物质基础提供一定依据,也对进一步研究玄参有重要意义。     

固相萃取高效液相色谱法快速测定玄参有效成分

目的:研究固相萃取-高效液相色谱法分析玄参中的有效成分,为灵敏、快速测定玄参中的有效成分提供新方法。方法:利用固相萃取法对玄参中桃叶瑚珊苷、哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸这5种指标成分进行分离、纯化、富集,用高效液相色谱仪进行含量测定,采用C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相0.01%磷酸水溶液(B)-乙腈(A),检测波长为210 nm,体积流量1.0 mL/min,进样量20μL,柱温25℃。结果:固相萃取法测得桃叶瑚珊苷、哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸各指标性成分质量分数分别为0.37%、2.58%、0.15%、0.12%、0.22%。传统方法下测得各质量分数分别为0.09%、0.29%、0.03%、0.05%、0.02%。结论:固相萃取-高效液相色谱法测定玄参化学成分较传统方法灵敏、快速。     

中药玄参薄层色谱鉴别法的建立

目的：建立中药玄参的薄层色谱鉴别法。方法：以玄参的特征性有效成分哈巴俄苷(harpagoside)以及另一主要成分哈巴苷(harpagide)为对照品,采用薄层色谱法。结果：建立了玄参的薄层色谱鉴别法,并通过对不同产地玄参药材以及数种易混淆药材的检测证明了该方法的专属性。结论：该方法操作简便、准确、可靠。     

不同配比苍术-玄参药对中4种成分溶出率的变化规律

目的采用HPLC法研究不同配比苍术-玄参药对中哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、苍术素溶出率的变化规律。方法分析采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长210 nm(哈巴苷)、280 nm(哈巴俄苷、安格洛苷C、苍术素);柱温25℃。结果当药对配伍比例为2∶1时,4种成分的总溶出率最高,而为1∶2时最低。结论哈巴苷和安格洛苷C的溶出率随苍术比例的增加而升高,而哈巴苷的溶出率和哈巴俄苷可能成反比关系。     

基于AHP-熵权法结合D-最优设计响应面法优化玄参蒸制工艺

目的筛选玄参药材最优蒸制工艺参数。方法采用HPLC法同时测定哈巴苷、哈巴俄苷、桃叶珊瑚苷、类叶升麻苷、安格洛苷C、肉桂酸6种成分含量,以AHP-熵权法计算权重系数,多指标综合评分结合D-最优设计考察浸泡时间、蒸制时间、干燥温度对蒸制玄参药材质量的影响,优选玄参蒸制工艺。结果优化所得最佳蒸制工艺参数为浸泡时间15.63min、蒸制时间85min、干燥温度60℃,综合评分为97.20分。考虑实际情况,对浸泡时间进行微调得出玄参最佳蒸制工艺,即浸泡时间为15 min、蒸制时间为85 min、干燥温度为60℃。并通过所得条件平行制备3批样品,计算得综合评分分别为98.53、99.39、98.86,其RSD为0.47%。结论优选的蒸制工艺简单可行,为规范玄参药材的蒸制工艺提供参考,建立测定玄参中6种成分的方法快速可靠,可用于玄参饮片的质量控制。     

一测多评法测定玄参中7种有效成分的含量

以玄参为研究对象,探索同步测定玄参中环烯醚萜类和苯丙素类共7种有效成分的高效液相色谱条件,并在此基础上建立"一测多评"测定方法,验证其准确性。以梓醇为内标物,建立梓醇与桃叶珊瑚苷、哈巴苷、毛蕊花糖苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸的相对校正因子与相对保留值,计算其他6种成分的含量:同时采用外标法测定这7种成分的含量,比较两者的测定结果。结果表明采用"一测多评"法和外标法测定的含量之间无显著差异,实验所得的校正因子可信。该方法作为一种新的质量评价模式,用于玄参多种有效成分的同步质量评价是准确、可行的。     

玄参配方颗粒含量测定和特征图谱测定方法研究

目的:为玄参配方颗粒的质量控制和评价提供参考依据,建立玄参配方颗粒含量测定和特征图谱检测方法.方法:采用UPLC法测定玄参配方颗粒的哈巴苷、哈巴俄苷的总量,并建立玄参配方颗粒特征图谱.结果:玄参配方颗粒哈巴苷、哈巴俄苷含量测定方法的线性范围为15～120 μg/mL(r=0.9999)和5～40μg/mL(r=0.99...     

基于HPLC指纹图谱和多成分定量的玄参质量评价研究

目的 建立玄参Scrophularia ningpoensis的HPLC指纹图谱及多成分定量测定方法。方法 采用HPLC法建立浙江、湖北、四川、安徽等9个省份116批玄参指纹图谱，进行相似度评价，结合聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）对玄参进行化学模式识别分析。同时对8个活性成分（桃叶珊瑚苷、哈巴苷、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷）进行含量测定，分析其与生境因子的相关性。结果 建立了116批玄参的指纹图谱，相似度为0.746～0.997，共标定34个共有峰。聚类分析将116批玄参分为4类，OPLS-DA分析能有效地将3个传统道地产区玄参与非道地产区玄参进行区分（Q2>0.5）。不同产地玄参中化学成分含量存在差异，与海拔、经纬度存在相关性。结论 建立的玄参HPLC指纹图谱及多成分含量分析方法稳定、可靠，结合化学识别模式可为玄参药材的产地判别及质量评价提供参考...     

HPLC-MS/MS法同时测定玄参中8个成分的含量

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定玄参中梓醇、哈巴苷、栀子苷、类叶升麻苷、安格洛苷C、肉桂酸、哈巴俄苷、5-羟甲基糠醛8个成分的含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,以甲醇-0.05%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速为0.6 m L·min-1,进样量2μL,ESI源,正离子-MRM模式下检测;结果:梓醇、哈巴苷、栀子苷、类叶升麻苷、安格洛苷C、肉桂酸、哈巴俄苷、5-羟甲基糠醛质量浓度分别在0.194 0~7.76(r=0.999 0)、0.173 8~32.85(r=0.999 8)、0.394~23.64(r=0.996 4)、0.279 5~16.77(r=0.997 4)、0.3095~12.38(r=0.999 4)、0.087~5.220(r=0.999 1)、0.264 5~31.74(r=0.999 8)、0.034 3~1.370 0μg·mL~(-1)(r=0.999 2)线性关系良好,检出限(LOD)为5~50 ng·mL~(-1),平均回收率为91.33%~99.78%。样品测定结果显示,玄参中哈巴俄苷、哈巴苷及安格洛苷C含量较高,分别为1.517~9.735、0.289~5.997、0.898~3.568 mg·g-1。不同来源的样品中,8个成分的含量及各个成分之间比例存在较大差异。结论:本实验建立了在22 min内同时测定玄参中8个成分含量的方法,灵敏度高,准确度好,实验结果可为玄参质量提供参考。     

枳实黄酮对照提取物研究及其在枳实药材质量控制中的应用

目的建立枳实黄酮对照提取物制备方法及定量方法,并探索其在枳实药材质量控制中应用的可行性。方法采用溶剂提取法、色谱分离方法制备枳实黄酮对照提取物,以芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷对照品为对照,对枳实黄酮对照提取物含量进行标定。分别以已知含量的枳实黄酮对照提取物和单体成分对照品(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷)为对照,建立枳实药材HPLC含量测定方法,并测定枳实药材中4种成分的含量,采用t检验和相关性分析对含量测定结果进行统计分析。结果以枳实黄酮对照提取物为对照,芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷进样量在各自范围内与峰面积呈良好的线性关系(r0.999 6),平均回收率为100.45%～101.27%。t检验结果显示,2种方法测定的芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷含量P值分别为0.97、0.38、0.69、0.84;相关性分析显示,2种方法测定结果的相关系数均在0.95以上,表明2种方法无明显差异。结论枳实黄酮对照提取物可用于枳实药材的质量控制,本研究为枳实药材的质量控制与评价提供了新方法。     

玄参饮片标准汤剂制备及质量标准研究

中药饮片标准汤剂是衡量中药不同用药形式与临床汤剂是否基本一致的标准参照物,为有效解决中药配方颗粒等现代中药剂型中存在的质量参差不齐等问题提供了新的思路和方法。该研究从"标准汤剂"的角度,制备玄参饮片标准汤剂,并建立评价其质量的系统方法,为玄参配方颗粒等剂型的质量控制提供参考。试验收集不同产地的15批玄参饮片,以水为溶剂,按照标准化工艺制备15批原料的标准汤剂,采用哈巴苷和哈巴俄苷作为定量检测指标,测定其含量,计算转移率,测定出膏率,并使用HPLC建立标准汤剂指纹图谱分析方法。结果表明15批玄参饮片标准汤剂中哈巴苷和哈巴俄苷转移率分别为(70. 84±13. 39)%,(48. 56±6. 40)%;出膏率为(57. 47±5. 89)%;指纹图谱共有峰9个,且15批玄参饮片标准汤剂指纹图谱与对照指纹图谱相似度均高于0. 97。该研究所采用的玄参饮片标准汤剂制备工艺符合传统汤剂制法,15批玄参饮片样品具有一定代表性,建立的指纹图谱方法稳定可行,可为玄参配方颗粒质量标准制定及质量控制提供参考。     

玄参饮片炮制工艺的优选

目的以哈巴苷、哈巴俄苷含量、饮片性状、含水量为指标,优选出玄参饮片最佳炮制工艺。方法采用HPLC法对不同温度软化、不同干燥温度干燥后的玄参药材饮片进行测定,考察软化温度、闷润时间、润透时吸水量、干燥温度、干燥时间等因素对哈巴苷、哈巴俄苷含量、饮片性状、含水量的影响。结果结合生产实际,确定玄参药材软化温度为5～35℃,闷润时间为4～26 h,润透时吸水量为23%～27%;干燥温度为50～60°C,干燥时间为3.5～4.5 h。结论优化了玄参最佳润透、干燥工艺,为玄参最佳炮制工艺的优选提供了实验依据。