2型糖尿病大鼠主动脉内皮细胞氧化损伤及缬沙坦的保护作用

目的探讨2型糖尿病大鼠氧化应激与主动脉内皮细胞损伤的关系,观察缬沙坦对两者的影响。方法SD大鼠,用长期高能量饮食加小剂量注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制模型。注射STZ12wk末,将大鼠分为3组:正常组、糖尿病组、缬沙坦治疗组(24mg·kg-1·d-1,灌胃给药8wk)。在注射STZ12和20wk末,检测大鼠的内皮依赖性血管舒张反应及主动脉内皮形态,血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,以及主动脉一氧化氮合酶(NOS)基因表达情况。结果①12wk末,糖尿病大鼠主动脉对低浓度乙酰胆碱(ACh)舒张反应减弱,局部内皮隆起,血清SOD、GSH-Px活性增强,MDA和NO含量增加,主动脉iNOS mRNA表达明显上调,eNOS mRNA表达无明显改变。②20wk末,糖尿病大鼠主动脉对各浓度ACh的反应性均减弱,主动脉内皮变性、坏死,血清SOD、GSH-Px活性减弱,MDA含量进一步增加,NO含量下降,主动脉iNOS mRNA表达仍升高,eNOS mRNA表达降低,缬沙坦治疗后能减轻主动脉病变,改善血清SOD、GSH-Px、MDA、NO及主动脉NOS mRNA表达的异常。结论糖尿病大鼠的氧化应激和NO系统的紊乱参与了主动脉病变过程,增强机体抗氧化能力及调节NO生成可能是缬沙坦发挥主动脉保护作用的机制之一。     

氨基胍对糖尿病大鼠心脏功能及心肌超微结构的影响

目的 :探讨非酶糖化抑制剂 氨基胍 (amin oguanidine ,AG)对链尿佐菌素 (streptozotocin ,STZ)糖尿病大鼠心肌的保护作用 ,为糖尿病心肌病的防治提供参考。方法 :建立STZ糖尿病大鼠模型 ,随机分为对照组、糖尿病组和氨基胍治疗组 ,AG剂量为15 0mg·kg-1·d-1。 12周时测定大鼠血清果糖胺含量、心脏重量指数、左室内压最大上升和下降率 (±dp dtmax)值 ,电镜观察心肌超微结构 ,测量心肌毛细血管基底膜厚度。结果 :糖尿病组大鼠血清果糖胺含量、心脏重量指数明显增高 ,±dp dtmax降低 ;超微结构显示心肌肌原纤维排列紊乱 ,线粒体肿胀变性 ,间质胶原增生 ,微血管内皮细胞肿胀、基底膜明显增厚。氨基胍治疗组血清果糖胺含量降低、心脏重量指数明显下降、±dp dtmax 值上升 ,微血管基底膜增厚减轻 ,间质胶原减少 ,心肌细胞超微结构异常减轻。结论 :糖尿病时存在心脏功能异常、心肌肥厚和超微结构的改变 ,早期应用AG在一定程度上可阻抑糖尿病心肌病变的发展。     

糖尿病心肌组织中NOS的改变与糖尿病心肌病关系探讨

目的探讨实验性糖尿病(DM)大鼠模型心肌组织中一氧化氮(NO)浓度和一氧化氮合酶(NOS)活性改变在DM心肌病发生和发展中的作用.方法SD大鼠一次注射链脲佐菌素(STZ)建立DM模型,成模后36只DM大鼠分批每两周检测空腹血糖和NO浓度,2、6、10周时进行心肌组织NOS活性检测.结果(1)DM大鼠血清中NO的浓度与对照组相比显著升高(P＜0.01),并随着血糖浓度的升高及时间的延长而升高.(2)DM组大鼠心肌组织NO浓度和NOS的活性均较对照组明显升高(P＜0.05).结论高血糖状态激活了心肌组织中的NOS,使心肌组织中NO过度增加,加上血液中过度升高的NO,损伤了心肌细胞的结构及其功能,可能是DM心肌病产生的重要机制之一.     

四味地黄乙醇提取物治疗糖尿病心肌病与氨基胍药效比较

目的:研究四味地黄2种醇提取物对STZ诱导糖尿病大鼠心肌病及血管病变的药效,与AGEs选择性阻断剂氨基胍比较。方法:腹腔一次注射60 mg.kg-1链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,4周后随机分组,5～8周分别灌胃:100 mg.kg-1氨基胍(AMG),10 g.kg-1复方地黄70%乙醇提取物,或10 g.kg-1 95%乙醇提取物。8周后,测定肠系膜动脉内皮依赖性舒张、血流动力学及心脏重量指数,血清中血糖、胆固醇(CHO),心肌组织中过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、羟脯氨酸(HYP)。结果:STZ诱导的糖尿病大鼠血管内皮功能受损,血管内皮依赖性舒张减弱;血流动力学参数反映心功能明显下降,心肌肥大。血清中血糖与CHO含量较正常组显著升高。心肌组织中iNOS及tNOS分别较正常组大鼠升高+59.7%及+50.0%(P<0.01,P<0.01),CAT(U.mg prot-1)而活性降低-14.6%(P<0.05),HYP(μg.mg prot-1)含量显著增高+26.6%(P<0.01)。氨基胍和2种乙醇提取物,均明显改善糖尿病的血管与心脏的并发症,但无明显的降糖作用。...     

降钙素基因相关肽、一氧化氮对糖尿病肾病的意义

目的探讨在2型糖尿病（DM）大鼠早期肾损害过程中血浆中降钙素基因相关肽（CGRP）、一氧化氮（NO）含量的变化规律,为早期防治糖尿病肾病（DN）提供理论依据。方法采用链脲菌素（STZ）造成大鼠糖耐量异常,然后喂以高糖．高脂肪饲料10周,造成2型糖尿病模型,分别测成型前4周、2周、成型时、成型后2周、4周血浆中CGRP、NO含量的变化。结果成型前4周血浆CGRP、NO无明显改变,而成型前2周、成型时、成型后2周、4周血浆中CGRP进行性下降,同时血浆中NO含量明显增加。结论CGRP、NO相互作用共同参与DM肾损害的发生、发展。动态观察CGRP、NO的变化,对于早期发现DN及分析病情有重要意义。     

抗氧化剂ebselen 对SHRsp冠状动脉eNOS蛋白表达的影响

目的 :研究新型抗氧化剂含硒谷胱甘肽过氧化物酶模拟物PZ5 1对卒中易感型自发性高血压大鼠 (SHRsp)高血压发展的慢性过程中冠状动脉内皮型一氧化氮合成酶 (eNOS)表达的影响。方法 :2 2只8周龄SHRsp随机分为PZ5 1组和对照组 ,灌胃治疗6周。测量心脏重量比值、心脏结构 ;采用分光光度计测心肌组织匀浆一氧化氮 (NO)的浓度 ;免疫组化检测冠状动脉eNOS蛋白表达。结果 :PZ5 1组较对照组心肌组织匀浆NO浓度显著升高 (1.18± 0 .2 5vs 0 .72± 0 .18μmol·mg-1prot ,P <0 .0 5 )、冠状动脉内皮eNOS蛋白表达显著增加 (7.4 5± 2 .10vs 2 .77± 2 .0 7,P <0 .0 5 )。结论 :PZ5 1治疗 6周显著增加了SHRsp冠状动脉eNOS蛋白表达及心肌组织NO的水平。     

缬沙坦及苯那普利对慢性肾衰竭大鼠心肌病变的治疗作用

目的观察缬沙坦、苯那普利及缬沙坦和苯那普利联用对慢性肾衰竭大鼠心肌病变的改善作用,探讨其作用机制。方法SD♂大鼠40只,通过5/6肾切除法制备慢性肾衰竭模型,术后2wk随机分为模型组、缬沙坦组、苯那普利组及缬沙坦与苯那普利联合治疗组,并设假手术组作为对照。术后第10周末测定各组大鼠血压及肾功能(Scr、BUN)后处死大鼠,取出心脏进行病理组织学观察;并采用原位杂交方法检测心肌内皮素-1(ET-1)mRNA及一氧化氮合酶3(eNOS-3)mRNA的转录水平。结果模型组术后第10周收缩压、心脏重量、心脏重量指数、左室重量及左室重量指数均明显增加,缬沙坦、苯那普利及联合治疗组能明显降低5/6肾切除大鼠收缩压、心脏重量、心脏重量指数、左室重量及左室重量指数(P<0.01);缬沙坦组、苯那普利组及联合治疗组心肌ET-1mRNA、eNOS-3 mRNA转录水平均较模型组减弱。结论缬沙坦、苯那普利及缬沙坦与苯那普利联合治疗能防治慢性肾衰竭大鼠的左室肥厚,其机制可能是通过下调心肌ET-1 mRNA、eNOS-3 mRNA转录来实现的。     

氯沙坦对两肾一夹型高血压大鼠血管内皮功能的影响

目的　探讨特异性血管紧张素Ⅱ受体 1阻断剂氯沙坦调节高血压血管内皮功能与一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)的关系。 方法　采用两肾一夹型高血压大鼠(two kedney ,one cliphypertensiverat)为动物模型 ,术后第 2、 4、 6wk测血压 ,6wk后处死大鼠测血浆中NO2 -/NO3 -的含量 ,取胸主动脉作离体血管环张力实验 ,免疫印迹方法检测主动脉内皮型一氧化氮合酶 (endothelialNOS ,eNOS)及诱生型一氧化氮合酶 (inducibleNOS ,iNOS)的表达。结果　模型组大鼠相对于假手术对照组血压由 (15 83± 1 4 6 )kPa升高到 (2 3 6 7± 2 2 6 )kPa ,血浆中NO2 -/NO3 -的含量增加 (10 0 8μmol·L-1vs 37 7μmol·L-1,P <0 0 1) ,乙酰胆碱引起的最大舒张百分比下降 (73 5 %vs2 5 % ,P <0 0 1) ,主动脉中eNOS的表达降低 ,iNOS的表达增强 ;氯沙坦治疗后 ,血压、血浆中NO2 -/NO3 -的含量分别下降到 (17 5 6± 1 19)kPa、4 9 1μmol·L-1(P均 <0 0 1) ,乙酰胆碱引起的最大舒张百分比增加到 6 4 2 % ,改善主动脉中eNOS及iNOS的异常表达。结论　氯沙坦可改善两肾一夹型高血压大鼠的血管内皮功能 ,这种作用可能是通过NOS/NO途径调节的     

ADM、NO及ADMR表达在糖尿病肾病中的变化及作用

目的探讨肾上腺髓质素（ADM）、一氧化氮（NO）及肾上腺髓质素受体（ADMR）在大鼠糖尿病肾病（DN）中的变化及作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠动物模型,随机分为对照组、糖尿病2周和4周组;采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测肾皮质的AD-MRmRNA和蛋白的表达;同时检测大鼠的血糖、尿白蛋白排泄率（UAER）、尿量、肾重/体质量,以及肾皮质ADM与NO水平。结果注射STZ诱导糖尿病发生2周、4周后,与同批正常对照组比较,糖尿病组大鼠肾皮质的ADM、NO水平显著升高（P〈0.01）,肾皮质的ADMRmRNA和蛋白表达显著升高（P〈0.05）。结论糖尿病大鼠早期就有ADM、ADMR和NO的异常改变。提示ADM、ADMR以及NO可能参与糖尿病肾病的发生、发展过程。     

大黄游离蒽醌对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用

目的探讨大黄游离蒽醌(free anthraquinone from rhubarb,FAR)对糖尿病大鼠心肌CTGF和collagen表达及间质纤维化的影响。方法健康♂SD大鼠一次性腹腔注射STZ制备糖尿病大鼠模型,2周后随机分为模型对照组(DCM组)和大黄游离蒽醌干预组(FAR组),同时设立正常对照组(CON组);干预8周后检测大鼠空腹血糖;心脏质量指数;Masson染色观察心肌纤维化程度;RT-PCR法检测CTGF、procollagenⅠ和collagenⅢmRNA表达;免疫组化法检测CTGF蛋白含量;ELISA法检测collagenⅠ和collagenⅢ胶原含量。结果与CON组相比,DCM组大鼠空腹血糖、心脏质量指数、心肌纤维化程度以及CTGF、collagen I和collagenⅢ表达均明显升高;与DCM相比,FAR组心脏质量指数、心肌纤维化程度以及CTGF、collagenⅠ和collagenⅢ表达均明显下降。结论大黄游离蒽醌可通过调低糖尿病大鼠心肌组织CTGF的表达,减少心肌间质中collagen I和Ⅲ合成及沉积,从而改善糖尿病心肌病大鼠早期的心肌纤维化     

NO和iNOS在大鼠糖尿病早期肾脏中的变化

目的:观察糖尿病大鼠早期肾脏中一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide syn-thase,iNOS)活性变化,探讨NO/iNOS在糖尿病早期肾脏损害中的作用机制。方法:取成年健康SD大鼠60只,随机分成糖尿病组(DM组)和正常对照组(NC组),每组30只。DM组大鼠采用一次性腹腔内注射STZ制造糖尿病大鼠模型,成模后和NC组分别于第1、2、4周麻醉取左肾,用硝酸还原酶法和吸光光度法测定肾组织中NO含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和iNOS活性。所有数据用SPSS11.5统计软件进行统计学处理。结果:①DM组大鼠肾组织中NO含量、NOS和iNOS活性分别较同批NC组有显著性差异(P<0.05);②各组大鼠中NO含量与NOS活性、iNOS活性呈正相关。结论:糖尿病大鼠早期肾脏中iNOS活性增强,催化生成的NO在糖尿病早期肾脏损害中发挥重要作用。     

二苯乙烯苷预防性干预大鼠动脉硬化对其一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对动脉粥样硬化(AS)大鼠一氧化氮(NO)含量及主动脉一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法SD大鼠60只,♂,随机分为6组:①正常对照组;②模型组;③TSG低剂量组;④TSG中剂量组;⑤TSG高剂量组;⑥辛伐他汀阳性对照组。造模12wk后,颈动脉取血,检测血清NO含量。取血后分离主动脉,保存于-70℃,检测主动脉组织中NOS含量,RT-PCR检测大鼠主动脉eNOS和iNOS mRNA表达。实验数据采用STATA8.0软件进行统计分析。结果与模型组相比,辛伐他汀组和TSG各剂量组均能增加血清及主动脉组织NO的含量、主动脉组织NOS的水平、主动脉组织eNOS mRNA的表达及降低主动脉组织iNOS mRNA的表达,并呈剂量依赖性。结论TSG能上调AS大鼠动脉壁eNOS mRNA的表达,抑制AS大鼠动脉壁iNOS mRNA的表达,这可能是TSG抗AS的机制之一。     

NF-κB在多柔比星所致大鼠心肌损伤中的作用及褪黑素的治疗作用

目的探讨NF-κB在多柔比星(Dox)心肌病中的作用及褪黑素(MT)的干预作用。方法30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、Dox模型组、Dox+MT组。免疫组织化学法检测NF-κB的活性,分光光密度法检测心肌组织中一氧化氮(NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果与正常对照组相比,NF-κB在Dox模型组显著活化,MT可抑制NF-κB的激活(P<0.05);与正常对照组相比,Dox组NO含量、iNOS活性和心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.05),MT干预后均显著降低。结论NF-κB参与心肌氧化应激损伤,促进心肌细胞凋亡。MT可抑制NF-κB活化,减少自由基的生成,抑制心肌细胞凋亡,对Dox心肌病具有保护作用。     

丹皮酚对高脂血清损伤的人内皮细胞的保护作用(英文)

目的观察丹皮酚对高脂血清损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用,并探讨其作用机制。方法 20%高脂血清作用于HUVECs细胞24 h制备高脂血清损伤模型。丹皮酚组细胞加入20%高脂血清24 h后再分别加入丹皮酚124,247和495μmol.L-1。采用倒置显微镜观察HUVECs形态学变化;MTT法检测细胞存活率;用硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量;用RT-PCR法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达。结果与正常对照组相比,模型组中大部分细胞出现片状分离和脱落,然而丹皮酚干预后细胞形态趋于正常。丹皮酚能够显著提高细胞存活率(P<0.01)。经丹皮酚124,247和495μmol.L-1干预后,细胞存活率从模型组的(53.0±10.1)%依次升高至(68.4±9.1)%,(84.5±6.7)%,(98.1±7.5)%。丹皮酚能够显著提高NO含量和eNOS mRNA水平(P<0.01)。NO含量从模型组的(54±4)μmol.L-1依次升高至79±6,115±5和(136±6)μmol.L-1;eNOS mRNA的表达水平由模型组的0.215±0.060增加至0.451±0.045,0.563±0.013,0.704±0.068。结论丹皮酚可能通过上调高脂血清损伤人脐静脉内皮细胞eNOS的表达促进NO的合成,从而发挥其对高脂血清损伤内皮细胞的保护作用。     

一氧化氮在大鼠心肌缺血后处理中的作用

目的:探讨在体条件下,一氧化氮(NO)对缺血后处理心肌保护作用的影响及可能的途径。方法:建立大鼠在体缺血再灌注模型,将24只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组及一氧化氮合酶(NO S)抑制剂NW-L硝-基精氨酸甲酯(L-NAM E)药物干预后处理组(药物干预组)。于再灌注末测定血浆肌钙蛋白I(cT n I),NO,超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(M DA)的含量,测定心肌组织梗死面积,免疫组化方法观察心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNO S)的表达。结果:与缺血再灌注组及药物干预组相比,缺血后处理组心肌梗死面积明显减少,血浆cT n I,M DA含量降低,血浆NO,SOD含量升高,心肌细胞胞浆内eNO S表达增加。结论:缺血后处理通过eNO S/NO信号通路,抑制脂质过氧化反应,减轻心肌缺血/再灌注损伤。     

The furoxan nitric oxide donor,PRG150, evokes dose‐dependent analgesia in a rat model of painful diabetic neuropathy

Painful diabetic neuropathy (PDN) is a type of peripheral neuropathic pain that is often intractable. Elevated nitric oxide (NO) from neuronal and non‐neuronal sources in the somatosensory system is implicated in the pathobiology of peripheral neuropathic pain. However, in diabetes, nitrergic nerve degeneration to deplete NO bioactivity appears causal in the pathogenesis of irreversible autonomic neuropathy, another long term complication of diabetes. Hence, this study hypothesized that progressive NO depletion may underpin the pathobiology of PDN and that NO donors may alleviate PDN. Diabetes was induced in rats with intravenous streptozotocin (STZ) at 70 mg/kg and confirmed if blood glucose levels (BGLs) on day 10 post‐STZ were ≥15 mmol/L. Analgesic efficacy of subcutaneous (s.c.) bolus doses of the furoxan NO donor, PRG150 was assessed in the STZ‐diabetic rat model of PDN at 10‐, 14‐ and 24‐weeks post‐STZ relative to the sydnominine NO donor, SIN‐1 and its prodrug, molsidomine. PRG150 produced dose‐dependent analgesia in STZ‐diabetic rats whereas SIN‐1 and molsidomine evoked neuro‐excitatory side‐effects, but not analgesia. The 1000‐fold larger doses of PRG150 needed to produce analgesia at 14‐ and 24‐weeks (800 pmol/kg) c.f. 10‐weeks (8 fmol/kg) post‐STZ in rats, suggest that progressive NO depletion is also causal in PDN. Importantly, doses of PRG150 up to 10 000 fold higher than the analgesic dose did not produce hypotension in rats. The 50‐fold greater release of NO by SIN‐1 c.f. PRG150 in vitro, may underpin the neuro‐excitatory rather than analgesic effects of SIN‐1/molsidomine. PRG150 is worthy of further investigation as a potential novel analgesic for PDN.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾皮质血管紧张素Ⅱ2型受体及诱生型一氧化氮合酶基因表达的影响

目的 研究氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织血管紧张素系统与一氧化氮系统的影响及其二者之间的关系。方法 SD大鼠随机分成3组：对照组、糖尿病组和氯沙坦（30 mg·kg^-1·d^-1×8周, ig）治疗组。应用RT-PCR技术检测大鼠肾皮质血管紧张素Ⅱ2型受体(AT₂)、Ⅳ型胶原及诱生型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达。并同时检测大鼠肾皮质血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、NO含量及一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 糖尿病组大鼠尿蛋白排泄率、肾皮质AngII含量、Ⅳ型胶原mRNA及iNOS mRNA表达较对照组明显升高；糖尿病大鼠肾皮质NOS活性也较对照组明显增强；然而糖尿病大鼠肾皮质NO含量及AT₂ mRNA水平却较对照组大鼠明显降低；氯沙坦治疗能显著降低糖尿病大鼠尿蛋白排泄率及肾皮质Ⅳ型胶原mRNA表达；并能明显增加肾皮质AT₂及iNOS mRNA表达及总NOS活性及NO含量。结论 AT₂的激活与氯沙坦的肾脏保护作用有关，并可能参与了对肾脏iNOS mRNA表达的上调。