来氟米特对糖尿病肾病大鼠炎性因子的影响研究

目的研究免疫抑制剂来氟米特对糖尿病肾病(DN)模型大鼠血清及肾组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法成年健康清洁级SD雄性大鼠45只,随机分为假手术组(15只)、模型组(15只)和来氟米特组(15只)。制作DN大鼠模型成功后,采用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,并采用RT-PCR方法检测3组大鼠肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达。结果 ELISA法检测结果显示,模型组与来氟米特组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P0.05);来氟米特组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平较模型组降低,差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR检测结果表明,与假手术组大鼠比较,模型组和来氟米特组肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达量均显著升高,差异有统计学意义(P0.05),而来氟米特组肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达则明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论来氟米特可以抑制DN大鼠肾组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达,从而延缓DN进展。     

纳洛酮对内毒素血症大鼠血清炎症介质的影响

目的:观察纳洛酮对内毒素损伤大鼠血液炎性介质的影响,探讨该药物治疗内毒素血症的可能机制。方法:经股静脉注射内毒素(5mg/kg)建立实验模型,将60只大鼠随机分为对照组、内毒素损伤组和纳络酮干预组,每组20只,分为4个亚组,分别测定内毒素损伤后1、2、4、6小时血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平。结果:内毒素损伤后大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平发生不同程度的变化,纳洛酮干预对这些变化产生不同程度的影响。结论:纳洛酮可影响血清的炎症介质水平,对内毒素血症大鼠可能有保护作用。     

"神农33号"对多器官功能障碍综合征大鼠细胞因子的影响

目的研究中药"神农33号"注射液对血瘀证多脏器功能障碍综合征(MODS)大鼠细胞因子的影响.方法利用Wister大鼠制备血瘀证MODS动物模型,将大鼠随机分为4组对照组,模型组,低剂量中药组,高剂量中药组.检测各组血清内毒素及TNF-α、IL-1β、IL-6水平,探讨"神农33号"的作用及细胞因子之间的关系.结果模型组TNF-α水平与IL-1β、IL-6呈正相关(P＜0.01),其血清TNF-α、IL-1β、IL-6明显高于正常对照组(P＜0.01);与模型组相比,中药组尤其高剂量中药组的血清TNF-α、IL-6水平明显降低(P＜0.01).结论中药"神农33号"注射液对MODS大鼠的血清TNF-α、IL-6有明显的下调作用,在一定程度上缓解了炎症,有保护组织器官及防治MODS的作用.     

已酮可可碱对内毒素血症大鼠肝损伤的保护作用

目的探讨已酮可可碱（PTX）对内毒素血症大鼠肝损伤的保护作用。方法Wistar大鼠18只随机分成三组：假手术组、内毒素组和PTX治疗组，每组6只。测定各组动物血清TNF—α、IL-1β水平，肝组织ICAM-1蛋白表达。结果内毒素组血清TNF—α和IL-1β水平与假手术组比较明显增强（P〈0．01），肝组织ICAM-1蛋白表达与假手术组比较也明显增强（P〈0．01）。PTX治疗后，血清TNF—α、IL-1β水平和肝组织ICAM-1蛋白表达与内毒素组比较明显减弱（P〈0．01）。结论TNF-α，IL-1β和肝组织ICAM-1在内毒素急性肝损伤发病机制中起重要作用，PTX可以作用于TNF-α、IL-1β和肝ICAM-1，下调其表达，减轻内毒素对肝组织造成的损伤，保护肝组织。     

致炎细胞因子在两次打击大鼠所致多器官功能障碍综合征中的变化

目的通过建立两次打击大鼠所致多器官功能障碍综合征(MODS)的动物模型,探讨致炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)在MODS的发生、发展中的可能作用。方法选择清洁级SD大鼠,随机分为正常对照组(32只,A组)、出血 腹腔注射内毒素组(42只,B组)、出血组(42只,C组)、腹腔注射内毒素组(D组,42只)。在实验的第8小时、24小时、48小时随机抽取每组大鼠各8只,采用放射免疫分析法检测两次打击致伤大鼠在不同时点TNF-α、IL-6的变化,采用免疫组织化学法观察TNF-α阳性细胞在实验大鼠肺组织的表达。结果在本研究中,B组TNF-α、IL-6水平与A组比较明显增高,差异极具统计学意义(P＜0．01),与C、D组比较也有统计学差异(P＜0．05)。TNF-α在实验8 h时升高最为显著,IL-6则在实验24 h时达高峰,各指标变化在48 h逐渐恢复。免疫组化显示B组肺组织内TNF-α组化在实验后8 h呈强阳性表达,而A组呈阴性表达。血清TNF-α、IL-6变化的水平与肺组织病理变化及TNF-α在肺组织内表达相一致。结论TNF-α、IL-6是MODS早期释放的致炎细胞因子,在MODS的发生、发展中起非常重要的作用。动态监测致炎细胞因子TNF-α、IL-6水平的变化,对评价病情的严重程度及提出有效的防治措施有重要意义。     

白细胞介素-10对内毒素诱导急性肺损伤大鼠炎症因子的影响

目的研究白细胞介素-10(IL-10)对内毒素诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织炎症因子mRNA表达的影响,探讨IL-10对急性肺损伤的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为3组:对照组,实验组,治疗组。实验组于尾静脉注射内毒素,治疗组注射内毒素和IL10,对照组注射生理盐水。测定各组肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)mRNA表达和血浆TNF-α、IL-1β和IL-6水平,观察各组大鼠肺组织的病理改变。结果TNF-α、IL-1β和IL6mRNA的表达:实验组、治疗组高于对照组,P<0.01;实验组高于治疗组,P<0.05。血浆TNF-α、IL1-β、IL-6:实验组高于治疗组对照组,P<0.05。肺组织病理改变:治疗组明显轻于实验组。结论IL10能抑制内毒素诱导ALI大鼠肺组织中TNF-α、IL-1β和IL6mRNA的表达,降低血浆炎症因子水平,减轻肺组织的病理损害,能起到治疗ALI的作用。     

补阳还五汤对大鼠脑缺血后白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨补阳还五汤对脑缺血后大鼠脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组,后3组再按给药后1、3和7 d分为亚组,每组5只.采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型;补阳还五汤组于术后2 h起灌服补阳还五汤10 ml/kg(14.2 g/kg)、每日1次.分别于相应时间点处死大鼠后取脑组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定IL-1β和TNF-α的蛋白及mRNA表达.结果 正常对照组和假手术组有低水平的IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达.模型组IL-1β、TNF-α蛋白及mRNA表达于给药后1 d开始升高,IL-1β蛋白及mRNA表达在3 d时达高峰后开始下降,TNF-α蛋白及mRNA表达于7 d达高峰.与模型组比较,补阳还五汤组给药后1、3和7 d脑组织中IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达均明显下降[IL-1β蛋白(ng/L),1 d:90.290±8.693比102.556±13.934,3 d:129.632±11.050比150.117±8.552,7 d:66.185±9.020比91.362±9.901;TNF-α蛋白(ng/L),1 d:210.341±19.247比236.887±20.137,3 d:267.503±21.006比322.659±15.068,7 d:299.637±17.717比386.678±16.297;IL-1β mRNA,1 d:0.54±0.09比0.64±0.11,3 d:0.80±0.06比0.89±0.07,7 d:0.70±0.09比0.78±0.08;TNF-α mRNA,1 d:0.64±0.09比0.73±0.11,3 d:0.74±0.13比0.85±0.07,7 d:0.82±0.07比0.93±0.08],差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 补阳还五汤可能通过下调缺血脑组织IL-1β和TNF-α的蛋白及mRNA表达来调控炎症因子的释放,从而起到脑保护作用.     

大鼠低温爆震伤对肺组织中IL-1β和TNF-α表达的影响

目的:建立大鼠低温爆震伤致肺损伤模型,研究爆震伤后大鼠血清和肺组织中IL-1β和TNF-α表达的变化。方法:将40只大鼠随机分成空白对照组(10只)、低温对照组(10只)及低温实验组(20只),进行爆震伤造模,实验后对大鼠进行状态观察,行苏木精-伊红染色观察肺脏病理变化,采用ELISA方法检测大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量,采用荧光定量PCR和Western blot方法测定IL-1β和TNF-α基因和蛋白相对表达量变化,并对其结果进行分析。结果:苏木精-伊红染色结果显示,低温对照组大鼠肺脏有少量炎性细胞,低温实验组大鼠肺组织肺泡壁增厚,有大量的血细胞及炎性细胞产生。血清ELISA结果显示,低温对照组和低温实验组大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量高于空白对照组(P0.05)。荧光定量PCR和Western blot结果显示,低温对照组和低温实验组大鼠肺组织中IL-1β和TNF-α基因相对表达量高于空白对照组,且低温实验组大鼠肺组织中IL-1β和TNF-α基因相对表达量高于低温对照组(P0.05);低温对照组和低温实验组肺组织中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量高于空白对照组,且差异有统计学意义(P0.05);与低温对照组比较,低温实验组肺组织中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量较高,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:大鼠低温肺爆震伤导致血清中IL-1β和TNF-α含量升高,肺组织中IL-1β和TNF-α基因和蛋白的相对表达量升高,其损伤机制可能是IL-1β和TNF-α表达量升高导致炎症反应的产生。     

新类固醇药物对阻塞性黄疸大鼠肝脏TNF-α mRNA表达的影响

目的研究21-氨基类固醇(U-74389G)对阻塞性黄疸大鼠发生内毒素血症时的保护作用.方法将大鼠随机分为3组:(1)假手术组;(2)胆总管结扎组;(3)胆总管结扎 生长激素组.每组在两周之后腹腔内注射内毒素0.02mg/kg,第三组在给予内毒素之前30min和之后30min分别静脉注射U-74389G 3mg/kg和1.5mg/kg.在给予内毒素之后1、2、4h分别计数各组大鼠的存活率;检测各组大鼠血清TNF-α水平;取肝组织测定肿瘤坏死因子TNF-α mRNA表达水平.结果阻黄大鼠给予内毒素之后1、2h血清TNF-α水平明显升高,肝脏中TNF-α mRNA表达也显著升高,在2、4h后大鼠存活率降低,给予U-74389G可逆转这些改变.结论 U-74389G可降低肝脏中TNF-αmRNA的表达,在阻黄大鼠发生内毒素血症时起保护作用.     

参附注射液对内毒素所致大鼠全身炎症反应综合征的作用

目的:探讨参附注射液对内毒素所致大鼠全身炎症反应综合征(SIRS)的治疗作用及其机制.方法:静脉注射脂多糖(LPS)建立大鼠SIRS模型.健康雄性Wistar大鼠45只,按随机数字表法分为假手术对照组(C组)、LPS致伤组(L组)和参附注射液治疗组(T组).L、T组动物制模后分为1、2、4和6 h 4个亚组.在4个时间点分别取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测单个核细胞中核转录因子-κB(NF-κB)活性、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,观察肺脏和肝脏的病理学变化,并与C组比较.结果:L组单个核细胞中NF-κB活性明显增高,2 h最明显(0.604±0.020),显著高于对照组(0.112±0.017);血清TNF-α浓度明显升高,2 h最明显[(1 644.8±25.9)ng/L],显著高于对照组[(55.9±19.2)ng/L];血清IL-6浓度随时间推移不断升高,显著高于对照组.病理结果显示,L组肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润;肝脏毛细血管扩张、充血、水肿和炎症细胞浸润.参附注射液可以显著降低NF-κB活性、TNF-α及IL-6水平,减轻肺脏和肝脏病理损伤.结论:参附注射液可通过抑制NF-κB活性对大鼠SIRS起保护作用.     

左卡尼汀对心肺复苏后大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的 通过观察左卡尼汀对复苏后大鼠血清、肾组织中细胞因子的影响,探讨左卡尼汀对复苏后肾脏保护作用的机制.方法 建立心肺复苏大鼠模型,30只Wistar大鼠随机分为手术对照组(S组)、常规复苏组(C组)和左卡尼汀组(L组),每组10只,S组只行手术操作,不致颤;C组造成心搏骤停并行常规复苏;L组在心搏骤停并复苏成功后静脉注射左卡尼汀.动态观察,血清中TNF-α、IL-1β、iNOS、SU、Scr及肾组织中TNF-α、IL-1β、iNOS的变化.结果 与S组比较,C组和L组复苏成功后血清TNF-α、IL-1β、iNOS、SU、Scr及肾组织TNF-α、IL-1β、iNOS有不同程度升高(P＜0.01).L组与同时相C组比较,血清TNF-α、IL-1β、iNOS、SU、Scr及肾组织TNF-α、IL-1β、iN-OS升高程度减轻(P＜0.05).结论 左卡尼汀能减轻炎性细胞因子介导的肾脏损伤,对复苏后肾脏有保护作用.     

髓系细胞触发受体-1对重症急性胰腺炎大鼠肠屏障功能的影响

目的 探讨髓系细胞触发受体-1（triggering receptor-1 on myeloid cells,TREM-1）的表达与重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）肠屏障功能障碍的关系。方法 雄性Wistar大鼠64只,随机（随机数字法）分为假手术组(SO)和SAP组,每组32只,采用逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型,分别于造模后2,6,12,24h时点取血和回肠组织。改良分光光度法检测血浆D-乳酸、二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）和内毒素浓度。逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)方法检测回肠组织TREM-1、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）mRNA的表达水平。对数据进行单因素方差分析和spearman相关性分析,P＜0.05表示差异具有统计学意义。结果SAP组各时点血浆D-乳酸、DAO和内毒素的水平均高于假手术组(P ＜0.01,P＜0.05);SAP组各时点回肠组织TREM-1,IL-1β和TNF-α mRNA的表达水平较假手术组显著增高(P ＜0.01,P＜0.05),TREM-1 mRNA表达水平与IL-1β及TNF-α mRNA表达水平均呈正相关(r=0.956,P =0.044;r =0.986,P=0.015),IL-1β mRNA表达水平与TNF-α mRNA表达水平无明显相关性(P=0.133)。结论 SAP时,大鼠肠组织内TREM-1表达上调,促进炎症介质释放和肠黏膜损伤加重,TREM-1在SAP肠屏障功能障碍的发生发展中起重要作用。     

重症胰腺炎并急性肺损伤大鼠肺组织蛋白激酶C与细胞外信号调节激酶的表达

目的探讨重症胰腺炎并急性肺损伤大鼠肺组织蛋白激酶C（PKC）与细胞外信号调节激酶（ERK）的表达及意义。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为对照组（n=8）与胰腺炎组,胰腺炎组再按6、12、24、48h分（B1、B2、B3、B4）亚组。以大鼠重症胰腺炎所致ALI为模型,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清TNF-α、IL-1β及IE-6,Western blot检测肺组织PKC与ERK的蛋白表达,EMSA检测NF-κB活性变化,观察肺脏含水量、肺脏病理变化。结果内毒素致重症胰腺炎并发急性肺损伤早期即发生肺血管通透性增高,肺脏含水量上升,组织学显示肺脏出现明显的病理损害,血清TNF-α、IL-1β及IL-6增高,肺组织PKC、ERK与NF-κB DNA活性同步增强。结论PKC与ERK的活化参与了重症胰腺炎时ALI的发病,即ERK／NF-κB信号通路的活化。     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠细胞因子的影响

目的:研究中药大黄附子汤对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠细胞因子的影响.方法:采用胆胰管内逆行注入质量分数为1.5%的去氧胆酸钠(1 ml/mg-SAP模型.选用清洁级健康雄性SD大鼠共60只,体质量260～300 g(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-18水平,探讨大黄附子汤与细胞因子释放间的关系.结果:模型组血清淀粉酶与TNF-α、IL-1β及IL-18水平变化呈正相关,血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β及IL-18明显高于假手术对照组(P均<0.01);中药组血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β及IL-18水平与模型组相比均明显降低(P均<0.01).结论:中药大黄附子汤对SAP的防治作用可能在于使大鼠血清TNF-α及IL-1β、IL-18水平下调.     

LDL在内毒素血症大鼠所致MOSF中的保护作用

目的:探讨低密度脂蛋白(LDL)在大鼠内毒素血症所致多器官功能障碍综合征(MOSF)中的作用及相关机制。方法:大鼠尾静脉注射脂多糖制作内毒素血症模型。随机分为正常对照组、内毒素血症组和LDL预处理组。每组依时间点再分为1.5h、6h和12h3个亚组。按时间点处死大鼠,留取肺、肠组织及血标本,测定器官功能指标血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平,肺组织髓过氧化物酶(MPO)、小肠组织二胺氧化酶(DAO)活性以及血清细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)浓度。结果:与正常对照组比较,内毒素血症组大鼠血中细胞因子浓度明显增高,TNF-α(P0.05)、IL-6(P0.01);器官功能指标中,肺组织MPO活性明显升高(P0.01);肝脏AST(P0.01)、ALT(P0.05)明显升高;肾脏BUN(P0.05)明显升高;小肠组织DAO(P0.05)活性显著下降。与内毒素血症组比较,LDL预处理组大鼠血中细胞因子浓度显著降低,TNF-α(P0.01)、IL-6(P0.05);肺组织MPO活性明显下降(P0.05);肝、肾功能指标AST(P0.01)、ALT(P0.05)、BUN(P0.05)明显低于内毒素血症组;小肠组织DAO活性无明显变化(P0.05)。结论:给予外源性LDL能够结合、失活内毒素,降低血中细胞因子TNF-α、IL-6浓度,从而减轻内毒素血症所致多器官功能障碍。     

脑缺血并发多器官功能障碍综合征后脏器组织CD14mRNA的表达

背景急性脑血管病导致的多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)在临床上是常见的,而对其发生的机制研究较少.目的探讨脑缺血模型内毒素受体CD14mRNA在肺、肝、肠和肾组织的表达变化规律及并发MODS的机制.设计随机对照的前瞻性研究.地点和对象在山东大学齐鲁医院实验动物中心将54只Wistar大鼠分为正常对照组、假手术组及缺血后5个亚组(12,24,36,48,72 h组).干预实验人员采用两侧颈总动脉阻断法建立前脑缺血模型.主要观察指标观察术后动物的一般情况,包括意识、精神状态、行动等.检测麻醉后大鼠的肛温和呼吸频率,测定血常规、肝功、肾功.观察缺血后各脏器大体标本的形态变化,检测各脏器组织CD14mRNA的表达.结果大鼠急性前脑缺血后MODS发生率为53%;缺血后12,24,36,48,72 h时相点动物肺、肝、肠和肾组织均有不同程度的损害,以肺脏和小肠改变为著;缺血后12 h各脏器组织CD14mRNA表达升高,24～36 h达高峰,48 h后下降,以肺脏变化最显著(P＜0.001);正常对照组和假手术组中各脏器组织CD14mRNA均有不同程度的表达,其中两组肺脏CD14mRNA的表达有显著性差异(P＜0.01).结论脑缺血后各脏器组织CD14mRNA的异常表达和病理改变为肠道内毒素易位和内毒素血症的发生提供条件,为研究脑缺血后MODS的发生机制提供客观依据.     

肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎致全身炎症反应中的作用

目的 通过肠系膜淋巴管结扎(MLDL)阻断肠淋巴液回流,观察肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)致全身炎症反应中的作用.方法 将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、结扎组和假手术组,每组8只.采用胰胆管逆行注入牛黄胆酸钠溶液制备SAP合并多器官损伤模型;MLDL于制模前进行.术后24 h测定血中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和内毒素水平及胰腺、肺脏、肝脏组织髓过氧化物酶(MPO)活性.处死大鼠取材,光镜下观察小肠组织形态学变化;培养肠系膜淋巴结细菌并计算细菌移位率.结果 与假手术组比较,模型组血中DA0、D-乳酸、TNF-α、IL-6和内毒素水平均显著升高[DAO:(0.64±0.17)kU/L比(0.37±0.07)kU/L,D-乳酸:(8.16±1.79)ng/L比(3.24±1.00)ng/L,TNF-α:(65.21±13.38)ng/L比(22.16±5.04)ng/L,IL-6:(7.95±1.83)ng/L比(4.26±1.23)ng/L,内毒素:(0.068±0.019)kEU/L比(0.033±0.009)kEU/L],肠系膜淋巴结细菌移位率显著提高(75.0%比0),胰腺、肺脏、肝脏MPO活性显著升高[胰腺:(5.14±1.24)U/g比(2.88±0.75)U/g,肺脏:(9.07±2.52)U/g比(4.38±1.29)U/g,肝脏:(6.36±1.63)U/g比(3.19±0.96)U/g,均P<0.01];与模型组比较,结扎组血中DA0((0.50±0.13)kU/L3、D-乳酸[(6.23±1.25)ng/L]、TNF-α[(48.50±13.23)ng/L3、IL-6((6.06±1.64)ng/L]和内毒素[(0.048±0.014)kEU/L]均显著降低,肠系膜淋巴结细菌移位率(12.5%)显著减少,胰腺、肺脏、肝脏MPO活性(胰腺:(4.01±1.05)U/g,肺脏:(6.58±1.96)U/g,肝脏:(4.64±1.34)U/g]显著下降(P<0.05或P<0.01).结论 MLDL可以降低SAP大鼠肠道细菌和内毒素移位,减轻胰腺、肺脏、肝脏组织炎症损伤,保护肠屏障功能.     

聚ADP核糖聚合酶抑制剂对重症急性胰腺炎大鼠肺炎症介质表达和肺损伤的影响

目的 探讨多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤治疗作用的机制.方法 36只Wistar大鼠按随机数字法分为假手术对照组(SO组)、SAP组和3-AB处理组.采用5％牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射法制备SAP模型,3-AB组在SAP造模前、后30 min分别经静脉注射3-AB (10 mg/kg).术后12 h测定血清淀粉酶、肺组织湿/干比、肺髓过氧化物酶(MPO)水平,光镜观察胰腺和肺脏病理变化,逆转录-聚合酶链反应法检测肺组织IL-1β和IL-6 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测肺组织TNF-α和ICAM-1蛋白表达.结果 SAP制模后血清淀粉酶、胰腺和肺损伤评分、肺组织湿/干比和MPO值,肺IL-1β和IL-6 mRNA的表达、TNF-α和ICAM-1蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05).应用3-AB处理后,上述指标较SAP组均明显下降(P＜0.05).结论 PARP抑制剂3-AB可能通过抑制肺组织MPO,下调IL-1β、IL-6、TNF-α和ICAM-1等炎症介质的表达,对SAP肺损伤发挥保护和治疗作用.     

Toll样受体4在四氯化碳致大鼠慢性肝损伤中的作用机制研究

目的:动态观察肝Kupffer细胞(KCs)Toll样受体4(TLR4)mRNA及蛋白在四氯化碳(CCl4)致大鼠慢性肝损伤中的表达及作用.方法:以CCl4诱导慢性肝损伤大鼠模型,于0、4、6、8、10周采集标本,分离肝组织KCs并以逆转录聚合酶链反应检测TLR4mRNA的表达;用基质显色法测定大鼠血清内毒素水平:放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素1-β(IL1-β)水平;TLR4蛋白和核因子kB(NF-kB)蛋白采用免疫组化SP法检测.结果:0周组肝组织TLR4蛋白、KCs,TLR4 mRNA几乎无表达,NF-kB蛋白和炎症积分水平也处于较低水平;4、6、8、10周组肝组织TLR4蛋白、NF-kB蛋白、炎症积分和KCs TLR4 mRNA以及血清内毒素、TNF-α、IL-1β水平明显升高,同0周组比较差异有显著性(P<0.001).NF-kB蛋白、TLR4蛋白、KCs TLR4 mRNA和TNF-α在第10周时较第8周有轻度下降:肝KCs TLR4 mRNA的表达与血浆内毒素水平呈正相关(r=0.845,P<0.001).结论:CCl4诱导的慢性肝损伤中,内毒素可上调KCs TLR4的表达,而TLR4的高表达进一步造成肝脏的损伤.     

脾切除对内毒素诱生肝和肺组织肿瘤坏死因子-α基因表达的影响

目的:观察脾切除大鼠受内毒素攻击后,组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白及基因表达的变化规律,探索脾切除对内毒素诱生TNF-α的影响.方法:Wistar大鼠随机分为无脾组(n=36)和有脾组(n=36),动物静脉注射大肠杆菌脂多糖0.1 mg/kg制作内毒素血症模型.采用酶联免疫吸附法测定肺、肝组织TNF-α含量,并应用逆转录聚合酶链(PCR)技术检测组织TNF-α mRNA表达改变.结果:内毒素注射后0.5小时肝、肺组织TNF-α水平开始升高,1.5小时无脾组显著高于有脾组(P<0.01 和P<0.05).肝、肺组织的TNF-α mRNA表达与TNF-α的水平呈正相关,无脾动物肺组织TNF-α mRNA明显高于有脾动物(P<0.05).结论:脾切除动物受内毒素攻击时,其TNF-α的合成与释放明显高于有脾动物.