扶正抑瘤颗粒含药血清对小鼠肝癌H22细胞 p53和Caspases-3蛋白表达的影响

目的检测扶正抑瘤颗粒(FYK)含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡过程中对其野生型p53和caspases-3蛋白表达的影响.方法选用小鼠肝癌H22细胞作为实验的细胞株,应用血清药理学方法制备FYK低、中、高剂量实验组含药血清和对照组天仙胶囊含药血清,用上述含药血清与H22细胞在体外共同孵育24h、48h、72h后,应用MTT法检测细胞生长抑制率,TUNEL法检测细胞凋亡,用免疫细胞化学技术检测H22细胞野生型p53和caspases-3蛋白表达水平.结果FYK含药血清可诱导H22细胞凋亡,处理48h和72h凋亡率明显高于对照组(P＜0.05),并有大量野生型p53和caspases-3蛋白表达,天仙胶囊含药血清处理后caspases-3蛋白表达上调,而野生型p53蛋白表达水平没有增强.结论FYK含药血清在诱导H22细胞发生凋亡过程中野生型p53和caspases-3蛋白表达水平均增强,这可能是其抗肿瘤作用的分子机制之一,而天仙胶囊含药血清仅上调caspases-3蛋白表达,二者诱导细胞凋亡的机制有所不同.     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22凋亡的影响

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响.方法:扶正抑瘤颗粒含药血清温育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,利用光镜、电镜、流式细胞仪、原位末端标记(TUNEL)等方法观察其诱导小鼠肝癌H22细胞的凋亡作用.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可明显诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡,随着培养时间的延长和用药剂量的增加,细胞凋亡率随之增加,与空白对照组比较P＜0.01或0.05.结论:扶正抑瘤颗粒药物血清可诱导肝癌H22细胞凋亡.     

扶正抑瘤颗粒对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞P53、 BCL-2蛋白表达的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠肿瘤细胞凋亡相关基因P53、BCL-2蛋白表达的影响。方法:将48只小鼠分成FYK大剂量组、FYK小剂量组、天仙胶囊阳性对照组和荷瘤模型组,造模形成实体瘤后分别灌胃FYK、天仙胶囊、生理盐水18天,取瘤组织用流式细胞仪检测P53、BCL-2蛋白表达。结果:FYK组肿瘤细胞P53蛋白表达升高、BCL-2蛋白表达下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:FYK具有促进肿瘤细胞P53表达和抑制BCL-2表达作用。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡及Fas和FasL表达的影响

目的：观察扶正抑瘤颗粒含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡的作用和对细胞Fas、FasL表达的影响．方法：应用血清药理学方法，用不同剂量的含药血清与小氟肝癌细胞在体外共同孵育后，应用相差显微镜，流式细胞仪、电子显微镜对肿瘤细胞的生长和凋亡进行观察，用SABC法检测H22细胞Fas和FasL的表达结果：小鼠肝癌H22细胞经含药血清作用后，发生明显的形态学改变，相差显微镜下可见细胞体积缩小，折光性增强，染色质浓缩，核浆比例增大，密度增高，胞浆出现颗粒样物质。电镜下可见明显的凋亡形态变化，流式细胞仪可测到凋亡峰；SABC法显示，扶正抑瘤含药血清可上调小鼠H22细胞Fas的表达，而对FasL表达的影响不明显结论：扶正抑瘤颗粒能诱导H2：细胞发生凋亡，其机制可能与其上调H22细胞Fas的表达有关，     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞(H22)细胞间通讯的影响

目的：在观察扶正抑瘤颗粒（FYK）抗肿瘤作用的基础上,研究FYK对小鼠肝癌细胞（H22）细胞间通讯的影响。方法：采用激光扫描共聚焦显微镜,荧光漂白后恢复技术（FRAP）,动态观察经FYK治疗后H22细胞缝隙连接介导的细胞间通讯功能,并作定量测定。结果：FYK有一定抗肿瘤作用,并使H22细胞的胞间通讯得到明显恢复。结论：改善小鼠肝癌细胞（H22）细胞间通讯功能是FYK抗肿瘤作用的机制之一。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠移植性肿瘤细胞间通讯的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(红芪、当归、墓头回、莪术)含药血清对荷瘤小鼠H22细胞的凋亡和肿瘤细胞间通讯的影响.方法:Annexin V/PI双染法检测FYK含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用共聚焦激光显微镜检测H22细胞RNA、DNA、[Ca2 ]、细胞间通讯状况.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞RNA、DNA含量降低,[Ca2 ]升高,细胞间通讯状况得到改善.结论:扶正抑瘤颗粒含药血清抑制H22细胞的增殖,并提高肿瘤细胞[Ca2 ],阻止肿瘤细胞分裂.     

荷瘤小鼠扶正抑瘤颗粒含药血清对H22细胞的凋亡、自由基含量和线粒体膜电位的影响

目的观察荷瘤小鼠扶正抑瘤颗粒（FYG）含药血清对H22细胞的凋亡、自由基含量和线粒体膜电位的影响。方法应用流式细胞仪检测FYG含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用激光共聚焦显微镜检测H22细胞DNARNA、自由基含量和线粒体膜电位的变化。结果FYG含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞DNARNA和线粒体膜电位降低,自由基含量升高。结论FYK含药血清引起H22细胞的凋亡可能与其影响H22细胞自由基含量和线粒体膜电位变化有关。     

扶正抑瘤方对H22皮下移植瘤小鼠免疫功能和凋亡的影响研究

目的 探讨扶正抑瘤方(FYG)抗肿瘤作用主要机制.方法 建立H22肝癌ICR小鼠皮下移植瘤模型后连续给药FYG(3.6 g/kg·d-1)5 d,测量肿瘤体积及重量,检测外周血中CD+3、CD+4、CD+8及NK细胞的百分含量并检测血清中IL-2和TNF-α的浓度,TUNEL,检测肿瘤组织中肿瘤细胞的凋亡情况.结果 与...     

扶正抑瘤颗粒含药血清对小鼠肝癌细胞H22凋亡及细胞内Ca2+浓度的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)含药血清诱导小鼠肝癌细胞H22凋亡的作用及其对细胞内钙离子浓度的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法:FYK含药血清孵育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,电子显微镜观察FYK含药血清诱导H22细胞凋亡的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜测细胞内钙离子浓度的变化。结果:FYK含药血清能诱导小鼠肝癌H22细胞发生凋亡,同时使细胞内游离钙离子浓度升高,并与剂量和时间存在依赖性关系,细胞内钙离子浓度与相同时间点凋亡率呈正相关。结论:FYK含药血清可通过改变细胞内钙离子浓度诱导细胞发生凋亡,这可能是其抗肿瘤作用的机制之一。     

消瘤饮的抑瘤作用及其诱导凋亡和bax基因表达的影响

目的：探讨消瘤饮的押瘤作用及其可能作用机制。方法：观察消瘿饮对S180肉瘤小鼠的抑瘤作用，采用流式细胞术对肉瘤组织细胞悬液检测其诱导凋亡作用；计算凋亡率：同时检测凋亡相关基因bax的表达。结果：消瘸对S180肉瘤小鼠抑瘤率达37．16—48．17％；其他促进凋亡率和bax基因的表达。结论：消瘤饮具有明确的抑瘤作用，影响肿瘤细胞凋亡和相二基因bax的表达是其作用可能机制。     

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤小鼠细胞凋亡基因p53表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的抗肿瘤作用并进一步探讨其作用机制。方法:通过实时定量PCR(Real-time PCR)技术观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗肿瘤作用机理。结果:PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53 mRNA表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与凋亡相关基因表达有关。     

扶正抑瘤颗粒对H22瘤细胞bax、bcl-2及 caspase-3蛋白表达的影响

目的观察扶正抑瘤颗粒对H 22瘤细胞bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响.方法采用免疫组织化学方法检测瘤组织切片中bax、bcl-2及caspase-3的蛋白表达.结果扶正抑瘤颗粒各治疗组bax及caspase-3的IOD值均高于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);扶正抑瘤颗粒各治疗组bcl-2的IOD值均低于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论通过促进bax及caspase-3的蛋白表达、抑制bcl-2基因的蛋白表达来诱导H22瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应.     

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞P^53基因表达的影响

目的 研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p53基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制.方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞p53基因表达的影响.结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞p53基因表达水平明显上调.结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与p53基因表达增多有关.     

通心络对大脑中动脉闭塞模型大鼠脑缺血后神经细胞凋亡的影响

目的 探讨通心络胶囊在缺血脑保护方面的作用机制.方法 SD大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、MK-801组、通心络大剂量组（简称TXLL）、通心络小剂量组（简称TXLS）.制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型后,MK-801组腹腔注射MK-801 0.5 mg/（kg·d）,1次/天;TXLL、TXLS组分别给予1.0 g/（kg·d）和0.5 g/（kg·d）通心络原粉灌胃,2次/天.采用流式细胞、Western blot及RT-PCR技术,观察通心络对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡、Caspase-3、p53和HSP70蛋白及mRNA表达的影响.结果 通心络与MK-801均可明显降低模型大鼠缺血后各时间点脑部神经细胞凋亡百分率（P＜0.05,P＜0.01）,以TXLL组效果最显著;模型组Caspase-3、p53蛋白及mRNA表达较假手术组明显增高,通心络和MK-801均可使其表达减低,TXLL组最显著（P＜0.01）;与模型组比较,各治疗组HSP70蛋白及mRNA表达明显增高（P＜0.05,P＜0.01）.结论 通心络通过减少MCAO模型大鼠神经细胞凋亡率进而发挥脑保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡相关因子Caspase-3、p53表达、促进应激保护性HSP70表达有关.     

蜂房对H_(22)肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的:观察蜂房对小鼠移植性肝癌H22肿瘤生长的抑制作用。方法:建立H22肝癌移植瘤小鼠模型,随机分为盐水对照组、氟尿嘧啶组、蜂房高剂量组和蜂房低剂量组共4组。治疗期间记录各组小鼠的体重变化并观察小鼠生存状态,用药14天后取瘤称重,计算抑瘤率、肝/体比、肾/体比、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标。结果:蜂房可抑制小鼠体内肿瘤的生长,蜂房高、低剂量组的抑瘤率分别为31.96%、27.84%,与盐水对照组比较差异有统计学意义(P0.01)。经治疗后蜂房各组小鼠体重与盐水对照组及治疗前比较变化不明显(P0.05),蜂房高、低剂量组与氟尿嘧啶组比较,肝/体比、脾脏指数差异有统计学意义(P0.01)。结论:蜂房能够抑制小鼠H22肝癌的生长,同时对小鼠重要器官可能具有一定的保护作用。     

电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡Caspase-3影响的研究

目的：采用大鼠急性脊髓损伤模型,观察电针对脊髓损伤后神经细胞凋亡与其相关基因Caspase-3表达及变化规律。试图从线粒体启动凋亡途径相关主要因素的研究角度进一步揭示电针治疗脊髓损伤作用机制。方法：采用A llen＇s法制备急性脊髓损伤模型。动物分为电针组、药物组（Caspase-3抑制剂组）、模型组、假手术组。应用Tunel法对细胞凋亡进行标记。结果：药物组治疗结果表明,Caspase-3在3天,药物组表达量低于模型组（P〈0.05）;电针组治疗结果表明,Caspase-3在14天,电针组表达量低于模型组（P〈0.05）。结论：大鼠急性脊髓损伤后存在细胞凋亡现象,是脊髓继发性损伤主要病理机制。Caspase-3在大鼠脊髓损伤后神经元中表达量随着时间推移逐渐增加,提示上述相关基因可能促进神经元的凋亡,参与了脊髓继发性损伤。电针通过抑制Caspase-3在大鼠脊髓损伤神经元中表达,抑制神经细胞凋亡,减轻了脊髓继发性损伤,促进神经功能恢复。     

温下方含药血清诱导A549/DDP细胞凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响

目的:研究温下方含药血清诱导人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响。方法:制备温下方含药血清,高效液相色谱法(HPLC)定性检测含药血清中人参皂苷Rb1、大黄素和乌头碱。A549/DDP细胞分为DDP干预组,含药血清+DDP干预组,正常血清+DDP干预组。孵育24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测Bcl-2,Bax及p53蛋白表达。结果:HPLC结果显示含药血清中含有人参皂苷Rb1、大黄素及乌头碱。含药血清作用后,与DDP干预组比较,含药血清+DDP干预组细胞凋亡率增高至(21.82±3.27)%(P<0.05);细胞内Bcl-2蛋白表达降低至2.81±0.02(P<0.05);Bax蛋白表达增高至2.90±0.08(P<0.05);p53蛋白表达增高至3.58±0.09(P<0.05)。结论:温下方含药血清明显诱导A549/DDP细胞凋亡,显著降低Bcl-2蛋白表达,提高Bax,p53蛋白表达,可能从诱导耐药细胞凋亡角度逆转耐药。     

补肾增效液对辐射损伤小鼠脾组织p53 mRNA及Caspase-3蛋白表达的影响

目的:研究以补肾填精为主的补肾增效液对辐射损伤小鼠p53 mRNA及Caspase-3蛋白表达的影响。方法:设正常对照组、模型组、中药高、中、低剂量组和阳性药组,共灌胃8天。灌胃7天后,除正常对照组外,其余各组以~(60)Coγ射线照射小鼠造成辐射损伤。造模1天后取脾检测。p53 mRNA表达的检测采用原位杂交法;Caspase-3蛋白表达检测采用免疫组化法。结果:运用病理图像分析系统分析,各用药组均能上调辐射后小鼠脾组织p53 mRNA的表达,且与模型组比较,差异具有非常统计学意义(P<0.01);各用药组能下调Caspase-3蛋白表达,其中,阳性药组、高剂量组和中剂量组与模型组比较,差异具有非常统计学意义(P<0.01)。结论:补肾增效液通过调控与DNA损伤密切相关的p53基因及相关Caspase-3蛋白的表达而促进辐射损伤的修复。