雷公藤多甙对抗Thy1.1抗体肾炎蛋白尿和足细胞裂隙膜相关分子表达的影响

目的 观察雷公藤多甙（multi—glycoside of Tripterygium wilfordii Hook．f．,GTW）对抗Thy1．1抗体肾炎蛋白尿和足细胞裂隙膜相关分子（nephrin、podocin）表达的影响。方法 经尾静脉一次性注射500μg单克隆抗体（monoclonal antibody,mAb）1—22—3建立大鼠抗Thy1．1抗体肾炎模型。14只大鼠随机分为GTW干预组（简称GTW组）和安慰剂干预组（简称造模组）。实验1中,在注射抗体前3天,经灌胃给予GTW[75mg／（kg·d）]或安慰剂,直至造模后第14天,处死大鼠;实验2中,在注射抗体同时,经灌胃给予GTW[100mg／（kg·d）]或安慰剂,直至造模后第7天,处死大鼠。分别观察14天内或7天内模型鼠24h尿蛋白排泄量（urinary protein excretion,Upro）动态变化。在第14天或第7天,处死大鼠后,取出肾脏,分别观察肾小球形态学变化、肾小球内巨噬细胞浸润、肾小球内nephrin、podocin及其核酸表达。结果 实验1中,GTW抑制抗Thy1．1抗体肾炎蛋白尿和系膜损伤,在第14天,对肾小球内nephrin、podocin免疫荧光染色强度无影响;实验2中,GTW改善抗Thy1．1抗体肾炎蛋白尿、系膜损伤、肾小球内巨噬细胞浸润,而且,在第7天,显著增强肾小球内nephrin、podocin及其核酸表达。结论 在抗Thy1．1抗体肾炎中,nephrin、podocin表达的减弱可能会促进系膜损伤和蛋白尿。GTW改善系膜损伤和蛋白尿的作用,很可能是通过增强nephrin、podocin表达来实现的。     

雷公藤多苷对抗Thy1.1抗体肾炎肾小球内炎症细胞浸润的抑制作用

目的:观察雷公藤多苷(multi-glycoside of Tripterygium wilfordii.,GTW)对肾小球内浸润的炎症细胞及其相关细胞因子的影响,进一步阐明GTW在体内的抗炎作用.方法:经尾静脉注射500μg单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)1-22-3建立2种大鼠抗Thy1.1抗体肾炎模型.将模型鼠随机分为GTW干预组(GTW组)和蒸馏水干预组(对照组).实验1中,在注射抗体前3 d,经灌胃给予较大剂量GTW(75.mg·kg~(-1)·d~(-1))或蒸馏水,直至造模后第7天,处死大鼠;实验2中,在第2次注射抗体同时,经灌胃给予中等剂量GTW(50 mg·kg~(-1)·d~(-1))或蒸馏水,直至造模后第42天,处死大鼠.分别观察7 d内或42 d内模型鼠24 h尿蛋白排泄量(urinary protein excretion,Upro)动态变化;在处死大鼠后,取出肾脏,分别观察肾小球内浸润的巨噬细胞(macrophage,MΦ),T淋巴细胞变化和肾组织内白介素(interleukin,IL)-2和干扰素(interferon,IFN)-γ核酸的表达.结果:实验1中,可逆性抗Thy1.1抗体肾炎模型鼠肾小球内浸润的MΦ明显增多,较大剂量的GTW可以减少模型鼠肾小球内MΦ的浸润和肾组织内IL-2核酸表达;实验2中,不可逆性抗Thy1.1抗体肾炎模型鼠肾小球内浸润的活性MΦ,T淋巴细胞明显增多,中等剂量的GTW可以改善模型鼠肾小球内活性MΦ,T淋巴细胞的浸润,以及肾组织内IL-2,IFN-γ核酸表达;对于2种模型,GTW都有减少蛋白尿的作用.结论:不同剂量的GTW在体内对抗Thy1.1抗体肾炎.肾小球内炎症细胞浸润有抑制作用,这些作用与改善肾组织内IL-2和IFN-γ核酸表达有关.     

雷公藤多甙对实验性系膜增殖性肾炎蛋白尿及系膜损伤的影响

目的 观察雷公藤多甙（multi-glycoside of tripterygium wilfordii Hook．f．,GTW）在体内对实验性系膜增殖性肾炎蛋白尿及系膜损伤的影响。方法 运用单克隆抗体（monoclonal antibody,mAb）1-22-3建立大鼠可逆性抗Thy1．1抗体肾炎（简称“抗Thy1．1肾炎”）模型,以GTW干预,并设立对照组。比较24h尿蛋白排泄量（urinary protein excretion,Upro）、肾功能（serum creatinine,SCr;blood urea nitrogen,BUN）、血浆总蛋白（total plasma protein,TP）以及肾小球形态学变化,并检测肾组织中增殖因子（platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB;transforming growth factor-β,TGF-β）mRNA表达水平。结果 GTW抑制抗Thy1-1肾炎模型Upro和系膜损伤;抗Thy1．1肾炎模型肾组织中增殖因子（PDGF-BB、TGF-β）mRNA表达水平与正常组比较,分别为其2．84倍与1．64倍,GTW使PDGF-BB mRNA过高表达水平下调33．1％,与对照组比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论 GTW可减少系膜增殖性肾炎模型蛋白尿,抑制系膜细胞增殖和细胞外基质沉积;这些作用可能与下调肾组织增殖因子（PDGF-BB）mRNA的表达有关。     

c-myc与Bcl-2在大鼠抗Thy1.1系膜增生性肾炎肾小球内的表达

目的 :探讨 SD大鼠抗 Thy1.1系膜增生性肾炎实验模型肾小球内 c-myc与 Bcl-2的表达在其发病机理中的作用。方法 :用 SD大鼠胸腺细胞免疫新西兰白兔 ,制备兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清 (ATS) ,再将 ATS经尾静脉注射给 SD大鼠 ,诱导其发生系膜增生性肾炎 (Ms PGN)。用 HE和 PASM染色法计算肾小球内细胞数 ,用免疫组化法系膜区 c-m yc及Bcl-2的表达。结果 :实验组和对照组大鼠肾小球内均有 c-myc和 Bcl-2不同程度的表达 ;实验组肾小球内 c-myc和 Bcl-2的表达均明显多于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :在大鼠 Ms PGN实验模型中 ,c-m yc及 Bcl-2的高表达参与了肾小球系膜增生的发病机理。     

六味地黄汤对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响及其机理探讨

肾小球系膜细胞增生是各种增生性肾小球疾病的共同特征,研究表明,不少炎症细胞因子参与肾小球疾病的发病,尤其在增生性肾炎的发生、发展及病理类型转变中起重要作用,因此,探讨抑制系膜细胞增殖及阻断细胞因子参与系膜病变的病理过程是防治肾小球肾炎的重要途径。六味地黄汤治疗增生性肾炎是笔者多年临床经验总结,临床疗效显著。本研究观     

MACC5对大鼠抗Thy1.1系膜增生性肾炎防治作用的研究

目的 :观察中草药有效成分 MACC5对 SD大鼠抗 Thy1.1系膜增生性肾炎实验模型的防治作用 ,探讨其作用机理。方法 :用 SD大鼠胸腺细胞免疫新西兰白兔 ,制备兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清 ( ATS) ,再将 ATS经尾静脉注射给SD大鼠 ,诱导其发生系膜增生性肾炎 ( Ms PGN) ,然后腹腔注射 MACC5 ,观察其尿量、尿蛋白定量改变 ,并用 H E染色法检测系膜增殖程度 ,用免疫组化法 ( LSAB)检测其肾小球内细胞增殖核抗原 ( PCNA)的表达。结果 :MACC5两试验组尿量( 2 4小时 )均多于对照组 ( P<0 .0 1) ;MACC5 3.0 m L试验组尿蛋白定量少于对照组 ( P<0 .0 1) ;MACC5两试验组肾小球细胞数均少于对照组 ( P<0 .0 1) ;MACC5两试验组 PCNA的表达均少于对照组 ( P<0 .0 1)。结论 :MACC5对大鼠 Ms PGN实验模型具有利尿、降低尿蛋白和促进肾小球系膜损伤修复的作用。     

对实验性肾脏病动物模型的再认识

肾脏病动物模型一般分为二类,一类是通过施加人为操作而模拟人类肾脏病的模型,这类经典的动物模型包括抗肾小球基底膜抗体肾炎、Heymann肾炎、抗Thy1.1抗体肾炎、BSA肾炎以及嘌呤霉素肾病等;另一类动物模型是“自然发病模型”,也就是让动物自然出现近似人类肾脏病的病理特征,它们包括HIGA小鼠Ig A肾病和NZB/WF1小鼠、MRL/1pr小鼠狼疮性肾炎模型。另外,借助基因敲除、siRNA转染等现代分子生物学技术也可以制作出转基因动物模型。对于肾脏病领域的中药药效学、药理学研究而言,首要的是,正确认识各种肾脏病动物模型的特点,针对实验的具体目的而选择合适的模型;其次的是,需要病证结合动物模型的支撑。因此,建立具有中医证候特征的肾脏病动物模型是今后的发展方向。     

原发性非IgA系膜增生性肾小球肾炎临床分析

目的探讨非IgA系膜增生性肾小球肾炎患者临床表现与病理类型之间的关系,以及不同治疗方案的疗效及其预后。方法对116例非IgA系膜增生性肾小球肾炎患者的临床特点、病理资料进行回顾性分析,并随访患者各种治疗方案的疗效及预后。结果非IgA系膜增生性肾小球肾炎临床表现以血尿合并蛋白尿最为常见,治疗方案主要根据临床表现及肾脏病理改变的特点进行选择,疗效较好,患者预后与临床表现、病理改变程度及药物疗效密切相关。结论非IgA系膜增生性肾小球肾炎总的预后较好,临床表现及病理改变的轻重决定了患者的预后。     

通脉新复方对系膜增殖性肾炎病理学改变的影响

目的:观测通脉新复方对系膜增生性肾炎(MsPGN)病理学改变的影响。方法:采用抗胸腺抗血清(ATS)制备大鼠MsPGN肾炎模型及行疲劳游泳致气虚血瘀证模型,分别ig给药高、中、低剂量(1.2,0.6,0.3g·kg^-1)通脉新复方4周。4周后进行肾组织病理学检查、免疫荧光检测IgG以及免疫组化法测定肾小球内细胞核增殖抗原PCNA的表达。结果:通脉新复方能抑制肾小球系膜增生,降低系膜区基质占毛细血管丛面积的百分比,减少大鼠肾脏系膜区IgG沉积,显著降低肾小球内PCNA阳性细胞数。结论:通脉新复方能改善系膜增生性肾炎大鼠模型肾组织病理损伤。     

解毒活血愈肾汤治疗慢性紫癜性肾炎40例临床观察

慢性紫癜性肾炎肾病综合征是由各种致敏原所致的免疫复合物(IgA免疫球蛋白)沉积于肾脏系膜区引起的系膜增生性肾小球炎,是一组局灶性或弥漫性肾小球系膜细胞增生为主要特征的继发性肾小球疾病,以血尿、蛋白尿或浮肿、高血压、肾功能不全等为临床表现。目前西医仍以糖皮     

Multi-glycoside of Tripterygium wilfordii Hook. f. reduces proteinuria through improving podocyte slit diaphragm dysfunction in anti-Thy1.1 glomerulonephritis

Ethnopharmacological relevance

Multi-glycoside of Tripterygium wilfordii Hook. f. (GTW) has been proved clinically effective in reducing proteinuria in chronic kidney disease in China. However, the mechanisms involved are still unclear. In this study we examined the effects of GTW at the different dosages on proteinuria and podocyte slit diaphragm (SD) dysfunction in anti-Thy1.1 glomerulonephritis (GN).

Materials and methods

Rats with anti-Thy1.1 GN were divided into 2 groups, a GTW group and a vehicle group, and sacrificed at 30 min, on day 7, and on day 14 in Experiments 1, 2 and 3, respectively. The administration of GTW at the moderate and high doses was started 3 days before or at the same time of antibody injection till sacrifice. Proteinuria was determined in Experiments 1, 2, and 3. After sacrifice, the staining intensity of SD-associated key functional molecules including nephrin and podocin, podocyte structure, mesangial change, macrophage infiltration, and blood biochemical parameters were examined, respectively. Protein and mRNA expressions of nephrin and podocin in glomeruli were also investigated. Besides, liver histological characteristics were analyzed.

Results

In Experiment 1, GTW pretreatment at the medium dose (75 mg/kg body weight) caused no influence on the induction of anti-Thy1.1 GN and the basal nephrin expression. In Experiment 2, the high dosage (100 mg/kg body weight) of GTW ameliorated proteinuria, the distribution of nephrin and podocin, mesangial proliferation, and the activated macrophage accumulation, as compared with vehicle group (P < 0.05). Additionally, it increased mRNA and protein expressions of nephrin and podocin in glomeruli on day 7, but had no influence on podocyte structure. In Experiment 3, the medium dosage (75 mg/kg body weight) of GTW improved proteinuria, the partial matrix expansion, and the distribution of nephrin and podocin on day 14, as compared with anti-Thy1.1 GN rats (P < 0.05). GTW at the high or moderate dose did not affect hepatic function on day 7 and on day 14.

Conclusions

Podocyte SD dysfunction, such as the disordered distribution and down-regulation of nephrin and podocin expression, is critically involved in the pathogenesis of anti-Thy1.1 GN induced by mAb 1-22-3. The restoration of the distribution and expression of nephrin and podocin by GTW could be an important mechanism by which GTW ameliorates proteinuria and podocyte SD dysfunction.     

雷公藤多苷对不可逆性肾小球硬化模型系膜损伤的抑制作用

目的观察雷公藤多苷(GTW)对不可逆性肾小球硬化模型系膜损伤的抑制作用,阐明其在体内延缓肾小球硬化的分子药理机制。方法运用2次注射单克隆抗体(mAb)1223的方法,建立大鼠不可逆性肾小球硬化模型,以经口灌胃GTW(50mg·kg^-1BW)干预42d,并设立对照组。比较24h尿蛋白排泄量(Upro)、肾功能(Scr,BUN)以及肾小球形态学(LM,IF)变化,并检测(RTPCR)模型鼠肾组织中I型胶原(collagentypeI)、转化生长因子(TGFβ)mRNA表达水平。结果GTW抑制肾小球硬化模型鼠Upro和系膜增殖。肾小球总细胞数GTW组(65.67±3.43),对照组(87.02±2.41),P<0.05;细胞外基质积分GTW组(1.20±0.06),对照组(2.77±0.23),P<0.05;α平滑肌肌动蛋白积分GTW组(1.75±0.33),对照组(2.62±0.15),P<0.05;I型胶原积分GTW组(1.68±0.31),对照组(2.06±0.24),P<0.05。GTW使肾小球硬化模型鼠肾组织中collagentypeI,TGFβmRNA表达水平下调53.5%和14.7%,与对照组比较,二者差异均有显著性(P<0.05)。结论GTW抑制肾小球硬化模型鼠Upro和系膜增殖的作用是通过减少细胞因子mRNA的表达来实现的。     

柴苓汤及其有效成分对大鼠实验性肾炎的影响

目的：筛选柴苓汤治疗大鼠肾小球肾炎模型的有效成分。方法：采用注射单克隆抗体1-22-3造成大鼠肾小球肾炎模型,进行5次连续的实验筛选柴苓汤中的有效成分。每次实验选用28只模型大鼠,随机分为4组,每组7只。第1组用PBS作对照,第2、3、4组分别给予柴苓汤及其不同的成分,于造模前5天及造模后持续8天腹腔注射给药,共给药13天。造模后第8天处死全部大鼠,观察不同药物对大鼠蛋白尿、肾脏形态学改变以及血生化指标的影响。结果：柴苓汤组、小柴胡汤组、中药柴胡的不同组合及其成分——柴胡皂甙-d,可以抑制蛋白尿和大鼠。肾小球系膜细胞的增生以及细胞外基质的扩张。结论：柴苓汤和其有效成分对单克隆抗体1-22-3引起的大鼠肾小球肾炎模型有抑制作用,其有效单体成分为柴胡皂甙-d。     

日本汉方药治疗慢性肾脏病研究的进展

慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)已成为世界范围内危害公众健康的疾病。在日本，柴苓汤和温脾汤是治疗CKD的常用汉方药。文章综述了柴苓汤和温脾汤等汉方药对CKD进展过程中各种肾损害的保护作用，包括改善系膜组织损伤，减轻炎症细胞浸润，减少炎症介质表达，清除氧化应激产物，调节醛固酮代谢等作用，并且，在分子水平阐明了这些药物对各种损伤因子的作用机制。柴苓汤和温脾汤都是延缓CKD进展的有效药物。     

针刺治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎的光、电镜观察

目的：观察针刺对系膜增生性肾小球肾炎（Ms PGN）大鼠肾组织的显微结构与超微结构的病理改变,为针刺治疗Ms PGN提供形态学依据。方法：采用综合免疫方法建立Ms PGN大鼠模型,选取命门、双肾俞、关元、中脘等穴位进行针刺治疗,光学显微镜和透射电子显微镜下观察其肾脏病理学改变。结果：与模型组比较,各针刺组肾小球系膜细胞和基质增生减少;系膜区宽度明显下降（P〈0.05,P〈0.01）,系膜区电子致密物消失;足细胞超微结构损伤程度明显减轻。结论：针刺对Ms PGN大鼠具有一定的治疗作用。     

淫羊藿及其拆分组配伍麻黄对急性肾小球肾炎水肿模型大鼠影响

目的通过研究淫羊藿及其拆分组配伍麻黄对冰水浴联合注射牛血清白蛋白所致急性肾小球肾炎水肿模型大鼠的影响,探究淫羊藿配伍麻黄的利水作用及淫羊藿发挥利水作用的物质基础。方法先将SD雄性大鼠置于代谢笼内适应性喂养3 d。随机取10只大鼠作为空白对照组,其余大鼠于实验第1~3天冰水浴至大鼠四肢僵硬先造成大鼠风寒感冒模型;再于实验第4天和第11天早上9∶00按150 mg·kg^-1给大鼠腹腔注射牛血清白蛋白(BSA),空白对照组则注射等量的生理盐水。取造模成功大鼠60只,随机分成6组,每组10只,分别为:模型组,麻黄+生淫羊藿组,麻黄+多糖组,麻黄+非黄酮组,麻黄+大极性黄酮组,麻黄+小极性黄酮组。各组大鼠从实验第15天开始按照10 mL·kg^-1灌胃给予相应试剂,空白组给予等体积蒸馏水,连续灌胃20 d。收集实验大鼠第34天24 h尿液,大鼠处死后,测定尿蛋白、血清肌酐、血清尿素氮、白细胞、中性粒细胞百分比、血小板指标含量。取肾脏组织用于做病理切片并于HE染色。结果麻黄+生淫羊藿组尿蛋白含量由显著性下降(P<0.05),血清肌酐、血清尿素氮、中性粒细胞百分比有极显著性下降(P<0.01);部分肾小球周围有少量的炎性细胞,炎性细胞浸润有所减轻。麻黄+非黄酮组血清肌酐、白细胞数量、中性粒细胞百分比有显著性下降(P<0.05),尿蛋白、血清尿素氮水平有极显著性下降(P<0.01);肾小球肿胀有所减轻,有囊腔变小。麻黄+大极性黄酮组中性粒细胞百分比有极显著性下降(P<0.01);肾小球依旧有肿胀,炎性细胞浸润减少。麻黄+小极性黄酮组血清尿素氮、中性粒细胞百分比有及显著性下降(P<0.01);肾小球肿胀有减轻,肾小球附近的炎性细胞浸润有减少。麻黄+多糖组肾小球依旧充血肿胀,依旧有炎性细胞浸润,有肾小管扩张。结论淫羊藿及其拆分组配伍麻黄对急性肾小球肾炎水肿模型大鼠有较好的治疗作用,且疗效为:麻黄+非黄酮组>麻黄+生淫羊藿组>麻黄+小极性黄酮组>麻黄+非极性黄酮组>麻黄+多糖组,淫羊藿主要利水作用物质基础为非黄酮成分。     

益肾饮联合雷公藤多甙纠正系膜增生性肾炎中脂质代谢紊乱的实验研究

目的探讨益肾饮联合雷公藤多甙对大鼠系膜增生性肾小球肾炎中脂质代谢的影响。方法实验大鼠随机分为空白对照A组、模型B组、雷公藤多甙C组、益肾饮D组、雷公藤多甙和益肾饮合用E组。B、C、D、E组制备大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型,并以相应药物灌胃;采用ELISA法测定各组血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。结果模型制备成功后,大鼠肾脏系膜细胞增生明显,血清TC、TG、LDL-C水平均不同程度升高;C、D、E组肾脏系膜细胞增生均减轻,血清TC、TG、LDL-C水平均较B组下降,且E组更为明显。结论益肾饮联合雷公藤多甙能有效地纠正系膜增生性肾小球肾炎引起的脂质代谢紊乱,减轻系膜细胞的增生。