人乳腺癌细胞MCF-7/HER2稳转株裸鼠移植瘤模型的建立

<正>HER2受体属于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)家族,在乳腺癌、胃癌与卵巢癌等恶性肿瘤中的过表达往往预示肿瘤易发生转移及预后不良[1]。本实验室在国内较早开展抗HER2治疗性抗体研发工作,相继制备有鼠源性单克隆抗体A21及人源化抗体chA21等[2-4],为了评价这类针对HER2受体的靶向治疗药物的药理作用,本研究采用HER2表达质粒稳定转染人乳腺癌细胞MCF-7,经筛选获得HER2过表达的MCF-7/HER2细胞株,     

2-甲氧基雌二醇联合环磷酰胺对小鼠晚期乳腺癌模型的抑瘤作用

目的：研究2-甲氧基雌二醇（2-ME2）和环磷酰胺（CTX）对小鼠晚期乳腺癌模型的抑瘤作用及两者结合的疗效.方法：将BALB/c 4T1乳腺癌模型小鼠,随机分为生理盐水对照组、2-ME2组、CTX组、2-ME2＋CTX联合组,观察肿瘤生长情况;给药21d后,处死小鼠并分离瘤组织和双肺,计算抑瘤率和肺转移率;免疫组化SP法检测瘤组织中缺氧诱导因子（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达以及微血管密度（MVD）.结果：2-ME2＋CTX联合组的抑瘤率高于2-ME2组、CTX组,差异有统计学意义（P＜0.05）;2-ME2＋CTX联合组小鼠肺脏转移灶数目明显低于2-ME2组及CTX组,差异有统计学意义（P＜0.05）;2-ME2＋CTX联合组移植瘤MVD及HIF-1α、VEGF蛋白表达明显低于2-ME2组和CTX组（P＜0.05）.结论：2-ME2联合CTX应用对小鼠乳腺癌的疗效优于单用CTX或2-ME2;在抑制小鼠乳腺癌移植瘤血管新生方面,2-ME2、CTX具有协同作用.     

转移性乳腺癌治疗药Trastuzumab Emtansine的Ⅲ期临床试验取得进展

美国基因泰克(GENENTECH)公司于2012年8月27日宣布,其在研药物Trastuzumab Emtansine(曾用名:T-DM1)用于人表皮生长因子受体2(HER2)阳性转移性乳腺癌(mBC)的Ⅲ期临床试验取得进展。Trastuzumab Emtansine是一种抗体-药物偶联物(ADC),由抗体药物曲妥珠单抗和化疗药Emtansine组     

纳米雄黄的抗小鼠原位乳腺癌作用及其机制

目的：研究纳米雄黄体内体外对小鼠乳腺癌细胞（4T1）的增殖抑制作用及其机制。方法：以萤火虫荧光素酶（Luciferase,Luc）基因标记小鼠4T1乳腺癌（4T1-Luc）细胞,应用噻唑蓝（MTT）比色法和生物发光法（Bioluminescentmethod,BLM）检测细胞增殖活性;细胞形态学及AnnexinV／PI双标记法观察细胞凋亡。4T1-Luc细胞接种雌性BALB／c小鼠乳腺脂肪垫制作原位乳腺癌模型,纳米雄黄（4和8mg·kg-1·d-1）灌胃治疗20d,小动物活体成像系统连续动态观察小鼠乳腺肿瘤生长变化,治疗末期处死动物、剥离肿瘤块称重,并制片HE染色和CD34标记观测肿瘤组织内细胞核分裂像、新生血管形成及坏死改变。结果：MTT法和BLM法检测显示1．56～50gg／mL纳米雄黄体外显著抑制4T1-Luc细胞的增殖（P〈0．05）;形态学观察和AnnexinV／PI染色显示细胞呈现典型的凋亡改变。体内纳米雄黄呈时间和剂量依赖性地抑制小鼠4T1-Luc原位乳腺癌的生长（P〈0．05）;肿瘤组织制片观察,经纳米雄黄治疗后肿瘤组织内细胞核分裂像和微小血管显著减少（P〈0．01）,肿瘤组织内部呈显著的坏死改变。结论：纳米雄黄体外抑制小鼠乳腺癌4TI细胞增殖和诱导细胞凋亡,并主要通过减低原位肿瘤组织内新生血管的形成而导致肿瘤组织坏死而发挥抗乳腺癌作用。     

Survivin与bcl-2基因反义寡核酸联合对人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

目的：本研究旨在探讨survivin与bcl-2基因反义寡脱氧核苷酸联合对人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法：在BALB／c裸鼠上建立MCF-7乳腺癌细胞株模型．然后随机分成阴性对照组和5个实验组[分别为脂质体survivin正义脱氧寡核苷酸（SODN）组、脂质体bcl-2 SODN组、脂质体survivin反义寡脱氧核苷酸（ASODN）组、脂质体6cl-2 ASODN组、联合反义给药组]。检测裸鼠体重及肿瘤体积变化，计算抑瘤率及肿瘤缩小率。结果：给药后，联合反义给药组的肿瘤体积抑瘤率为78．4％，肿瘤重量抑瘤率为75．3％，肿瘤缩小率为41．6％。在给药后，各组裸鼠体重变化无明显统计学差异（P〉0．05）。结论：survivin与bcl-2基因反义寡核酸联合在体内能明显抑制肿瘤生长。     

血清HER2检测在乳腺肿块中的应用

目的 建立血清HER2水平检测方法,研究乳腺肿瘤患者血清HER2的水平、影响因素及临床意义,为乳腺癌治疗及预后判断提供参考.方法 采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测10例正常人、20例乳腺良性病变、50例早期手术及13例晚期转移性乳腺癌患者血清HER2的水平,并对乳癌手术组患者用免疫组化检测组织HER2/neu的表达情况.结果 健康对照组、乳腺良性病变组及乳癌手术组之间的血清HER2水平及阳性率无明显差异(P＞0.05),晚期转移性乳腺癌组的血清HER2水平及阳性率与前三者之间有显著性差异(P＜0.05);乳癌手术组血清HER2水平与肿瘤大小有相关性(P＜0.05),与组织HER2/neu表达、淋巴结转移无关(P＞0.05).结论 血清HER2的水平与乳腺肿块的肿瘤负荷密切有关,可作为免疫组化的补充,用于监测复发转移性乳腺癌并指导其治疗.     

氨氯地平抑制小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16体内转移的作用及相关机制研究

目的:研究不同剂量氨氯地平抑制小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16转移的作用,并探讨其作用机制。方法:选取64只C57BL/6J小鼠,将黑色素瘤髙转移细胞株B16接种在小鼠腹股沟皮下(2×106个/只)。将接种后的小鼠以随机数字表法分为对照组和氨氯地平高、中、低剂量治疗组,对照组小鼠仅给予0.9%氯化钠注射液;治疗组小鼠给予不同剂量的氨氯地平治疗,分别为1 mg/kg(低剂量组)、3 mg/kg(中剂量组)和10 mg/kg(高剂量组)。观察各组小鼠肿瘤生长情况及身体情况;观察各组小鼠肿瘤肺转移情况,计算肺转移的结节及肿瘤抑瘤率;采用免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中白细胞介素8(IL-8)蛋白表达水平;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组小鼠肿瘤组织中IL-8的信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果:氨氯地平对小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16的自发性肺转移有显著的抑制作用;治疗组小鼠肿瘤组织中IL-8蛋白表达均明显减弱,且随氨氯地平剂量的增加而减弱;治疗组小鼠肿瘤组织中IL-8的mRNA的表达明显低于对照组,且IL-8的mRNA的表达随氨氯地平剂量的增加而减弱。结论:氨氯地平对小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16有一定的抑瘤和抑制肺转移作用,其作用可能与影响IL-8的表达有关。     

抗HER-2嵌合抗体chA21对SKBR3细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的探讨抗HER-2嵌合抗体chA21在体外抑制高表达HER-2的人乳腺癌SKBR3细胞增殖并诱导其凋亡的作用。方法采用MTT比色法、HE染色、透射电镜、流式细胞术(FCM)、原位末端标记技术(TUNEL)等方法观察和检测chA21对人乳腺癌SKBR3细胞增殖的抑制和凋亡的诱导。结果chA21(0.2～5.4mg.L~(-1))可抑制SKBR3细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性。结论chA21在体外可抑制SKBR3细胞的增殖,诱导其凋亡是其主要作用途径之一。     

曲妥珠单抗联合多西他赛治疗HER2阳性的转移性乳腺癌

目的探讨曲妥珠单抗联合多西他赛治疗HER2阳性的转移性乳腺癌的疗效和不良反应。方法采用随机对照实验,治疗组21例,对照组22例,对象均为HER2阳性的转移性乳腺癌患者。对照组仅给予多西他赛化疗,治疗组给予曲妥珠单抗联合多西他赛方案化疗。结果治疗组有效率为71.4%(15/21),对照组为31.8%(7/22),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生情况无明显差异。结论曲妥珠单抗联合多西他赛是转移性乳腺癌的有效安全的治疗方案。     

顺铂联合CD47抗体对食管癌移植瘤小鼠的治疗效果

目的探讨顺铂多次用药对食管癌移植瘤小鼠组织CD47表达的影响,及顺铂联合CD47抗体用药的治疗效果。方法 C57BL/6小鼠皮下接种小鼠食管癌AKR细胞,分为模型和顺铂组,2周后收集瘤组织,用顺铂组的AKR细胞再次皮下接种建立移植瘤模型,重复2次,根据瘤体计算生长曲线和抑瘤率,利用qPCR、Western印迹及免疫组化检测瘤组织CD47 mRNA和蛋白质的表达水平;基于二次用药模型,采用瘤体多点注射CD47抗体,比较单独化疗用药与抗体联合用药对瘤体生长变化的影响。结果与1次用药组的抑瘤率相比,2次和3次顺铂用药组的抑瘤率降低;免疫组化结果显示,CD47的阳性表达率随着用药次数的增多而增加。与模型组相比,1次、2次及3次顺铂用药组CD47mRNA和CD47蛋白相对表达量增多(P<0.05)。顺铂联合用药与单独用药相比,瘤重及肿瘤体积减小。结论移植瘤小鼠多次顺铂化疗后抑瘤率降低,治疗效果降低可能与CD47表达升高有关,顺铂联合CD47抗体用药可以增加抗肿瘤的治疗效果。